胰島素抑制Ⅰ型糖尿病模型大鼠腦斜角帶核細(xì)胞凋亡及學(xué)習(xí)記憶障礙

王 薇郭 靈朱秀玲

（1皖南醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室，蕪湖 241002；2廣西醫(yī)科大學(xué)解剖學(xué)教研室，南寧 530021）

胰島素抑制Ⅰ型糖尿病模型大鼠腦斜角帶核細(xì)胞凋亡及學(xué)習(xí)記憶障礙

王 薇1郭 靈2*朱秀玲1

（1皖南醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室，蕪湖 241002；2廣西醫(yī)科大學(xué)解剖學(xué)教研室，南寧 530021）

目的 探索在胰島素替代治療下，Ⅰ型糖尿病模型大鼠基底前腦的斜角帶核垂直支（VDB）、斜角帶核水平支（HDB）凋亡基因 Bax與抗凋亡基因 Bcl-2表達(dá)、細(xì)胞凋亡、學(xué)習(xí)記憶的變化及其相互聯(lián)系。方法 雄性 Wistar大鼠隨機(jī)分成正常組、糖尿病組、胰島素組、溶劑組。腹腔注射鏈脲佐菌素來建立Ⅰ型糖尿病模型；以 Morris水迷宮檢測大鼠的空間記憶能力；免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測 Bax與Bcl-2的表達(dá)；TUNEL染色檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果 糖尿病模型大鼠空間記憶能力顯著低于正常大鼠；VDB和 HDB的Bax蛋白表達(dá)顯著增加，而Bcl-2蛋白表達(dá)顯著減少，細(xì)胞凋亡數(shù)明顯增多；而胰島素處理能顯著改善糖尿病模型大鼠的空間記憶能力，翻轉(zhuǎn)VDB和 HDB的 Bax蛋白及Bcl-2蛋白的異常表達(dá)，減少細(xì)胞凋亡。結(jié)論 胰島素抑制Ⅰ型糖尿病模型大鼠模型大鼠腦斜角帶核細(xì)胞凋亡并改善學(xué)習(xí)記憶障礙。

Ⅰ型糖尿??；胰島素；糖尿病腦?。恍苯菐Ш?；細(xì)胞凋亡；學(xué)習(xí)記憶

在糖尿病的發(fā)生或進(jìn)展中，可影響到腦的某些正常結(jié)構(gòu)與功能進(jìn)而演變成為糖尿病腦?。╠iabetic encephalopathy）［1，2］。已有研究表明，與認(rèn)知功能密切相關(guān)的膽堿能基底前腦是易受到該病累及的一個(gè)腦區(qū)，而且膽堿能神經(jīng)元數(shù)量及其合成神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的潛能也受損，導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙［3，4］。然而，有關(guān)這些病變的發(fā)生機(jī)制仍未十分清楚，細(xì)胞凋亡是否作為一種負(fù)性因素參與到其中迄今也仍未明確。為探索這方面的問題，本研究先建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型并用胰島素干預(yù)，測試學(xué)習(xí)記憶能力、檢測基底前腦的斜角帶核垂直支（vertical limb of diagonal band of Broca，VDB）和斜角帶核水平支（horizontal limb of diagonal band of Broca，HDB）中凋亡因子Bax和抗凋亡因子 Bcl-2的蛋白表達(dá)水平，揭示胰島素對其凋亡程度的影響，為糖尿病腦病發(fā)生機(jī)制的研究提供新線索。

材料和方法

1.材料

1.1 主要試劑和儀器

鏈脲佐菌素（STZ，Streptozotocin，美國Sigma公司）；兔抗大鼠 Bax和 Bcl-2多克隆抗體、SP免疫組化試劑盒、原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（TUNEL）及DAB顯色液（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；魚精蛋白長效鋅胰島素（江西萬邦制藥公司）；One touchⅡ血糖檢測儀（美國強(qiáng)生公司）；Morris水迷宮（型號DMS-2，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所）；江灣I型C大鼠腦立體定位儀（上海川沙花木農(nóng)機(jī)廠）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物與分組

將成年健康雄性Wistar大鼠（廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，體重180～220g，合格證號：SCXK桂2009-0002）32只隨機(jī)分成4組，每組8只：糖尿病組、胰島素組、溶劑組、正常組。

2.方法

2.1 動物模型的建立

按已報(bào)道的方法，先將STZ溶解于1ml pH4.4的檸檬酸緩沖液中，再將剛配制的STZ溶液按55mg／kg腹腔注射禁食24h后的大鼠，5d后尾靜脈抽血測定空腹血糖，以血糖＞16.6mmol／L者作為成功的Ⅰ型糖尿病大鼠模型［5］。在相同條件下，對 8只溶劑組大鼠僅腹腔注射等量（1ml）的檸檬酸緩沖液。

2.2 干預(yù)措施

當(dāng)確定成功建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型后，將成模大鼠隨機(jī)分成兩組：胰島素組和糖尿病組。胰島素組干預(yù)措施：將魚精蛋白長效鋅胰島素3 IU溶于0.5ml生理鹽水中，每日定時(shí)（上午 9：00）對該組大鼠皮下注射胰島素一次，使大鼠空腹血糖低于8.0mmol／L，連續(xù)注射60d；溶劑組干預(yù)措施：在相同時(shí)間和地點(diǎn)，對溶劑組大鼠每日皮下注射 0.5ml的生理鹽水一次，連續(xù)注射60d；對正常組和糖尿病組大鼠不進(jìn)行任何處理。

2.3 Morris水迷宮行為測試

按已報(bào)道的方法［5］，所有實(shí)驗(yàn)大鼠均在干預(yù)后第45d進(jìn)行Morris水迷宮行為測試，分別測定逃避潛伏期和游泳距離。該實(shí)驗(yàn)歷時(shí)5d，每天分上午、下午2個(gè)時(shí)間段，共10個(gè)時(shí)間段。前4.5d（前 9個(gè)時(shí)間段）測試逃避潛伏期，所有大鼠在每個(gè)時(shí)間段共被測試4次，測定在 2min內(nèi)各組大鼠的逃避潛伏期（s），并以此作為判斷大鼠空間學(xué)習(xí)能力的指標(biāo)。在第5d下午（第10個(gè)時(shí)間段）撤走平臺，測定大鼠入水后在2min內(nèi)的全部游泳軌跡距離（cm），并以此作為判斷大鼠空間記憶能力的指標(biāo)。

2.4 免疫組織化學(xué)染色

按已報(bào)道的方法［5］，1%戊巴比妥鈉（40mg／kg）腹腔麻醉大鼠，再經(jīng)左心室-升主動脈先灌注生理鹽水再灌注4%多聚甲醛溶液，開顱后將大鼠頭部安置于腦立體定位儀上，參照大鼠腦立體定位圖譜［6］，切取出含有全部斜角帶核的腦組織塊，后固定、脫水、透明、石蠟包埋。連續(xù)切片，片厚 5μm，常規(guī)脫蠟至水，分別進(jìn)行 Bax、Bcl-2免疫組織化學(xué)染色反應(yīng)及TUNEL染色反應(yīng)。反應(yīng)程序和顯色步驟均按相關(guān)試劑的說明書進(jìn)行；用磷酸緩沖鹽溶液（pH7.4）代替一抗來進(jìn)行陰性對照反應(yīng)。常規(guī)脫水、透明、中性樹膠封片，光鏡下觀察結(jié)果。

2.5 細(xì)胞計(jì)數(shù)

參照大鼠腦立體定位圖譜［6］，以前囟前 0.48mm和前囟前0.20mm的腦冠狀斷面作為選擇切片的坐標(biāo)，對于每只大鼠的每一個(gè)指標(biāo)，用光鏡（10×40倍）觀察以上每個(gè)斷面的3張切片，并計(jì)數(shù)在 VDB或HDB境界內(nèi)的4個(gè)視野（背側(cè)、腹側(cè)、內(nèi)側(cè)、外側(cè)）的三類陽性細(xì)胞。大鼠基底前腦各核團(tuán)冠狀切面定位在光鏡下的劃分方法［7］是：經(jīng)兩側(cè)前連合（ac）上緣及視神經(jīng)（2n）背側(cè)的腦腹側(cè)溝頂端各作一條水平橫線，在腹側(cè)橫線下方的區(qū)域?yàn)?HDB，在背側(cè)、腹側(cè)兩條橫線之間的地帶則為VDB（圖1）。

圖1 大鼠基底前腦各核團(tuán)冠狀切面定位示意圖Fig.1 Diagram showing localization of nuclei in the coronal plane of rat basal forebrain

2.6 統(tǒng)計(jì)分析

原始數(shù)據(jù)用 SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析（one-way analysis of variance，one-way ANO-VA）進(jìn)行分析，結(jié)果用（±s）表示；組間兩兩比較用 q檢驗(yàn)。當(dāng) P＜0.05時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1.大鼠血糖水平的變化

與溶劑組比較，糖尿病組大鼠的血糖水平升高了241.03%，組間比較的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與胰島素組比較，糖尿病組大鼠的血糖水平升高了216.99%，組間比較的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；但溶劑組、胰島素組、正常組的血糖水平彼此接近，三組之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。

表1 各組大鼠空腹血糖水平的比較（（±s），n＝8）Table 1 Comparison of the fasting blood glucose levels of rats in each group（（±s），n＝8）

表1 各組大鼠空腹血糖水平的比較（（±s），n＝8）Table 1 Comparison of the fasting blood glucose levels of rats in each group（（±s），n＝8）

a與胰島素組比較，P＜0.01；b與溶劑組比較，P＜0.01；c與正常組比較，P＜0.01acompared with insulin groups，P＜0.01；bcompared with vehicle groups，P＜0.01；ccompared with normal groups，P＜0.01

組別（Group）血糖水平（mmol／L）（the fasting blood glucose levels）糖尿病組（diabetes group） 19.78±2.83abc胰島素組（insulin group） 6.24±2.26溶劑組（vehicle group）正常組（normal group）5.80±1.01 5.94±1.25

2.2 水迷宮行為測試

與溶劑組比較，糖尿病組的逃避潛伏期和游泳距離分別升高了99.03%和37.39%，組間比較的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與糖尿病組比較，胰島素組的逃避潛伏期和游泳距離卻分別下降了84.62%和29.76%，組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。此外，胰島素組的逃避潛伏期和游泳距離與溶劑組或正常組的結(jié)果十分接近，這三組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表2）。

表2 各組大鼠在水迷宮中的測試結(jié)果（（±s），n＝8）Table 2 Test results of water maze in each group rats（（±s），n＝8）

表2 各組大鼠在水迷宮中的測試結(jié)果（（±s），n＝8）Table 2 Test results of water maze in each group rats（（±s），n＝8）

a與胰島素組比較，P＜0.01；b與溶劑組比較，P＜0.01；c與正常組比較，P＜0.01acompared with insulin groups，P＜0.01；bcompared with vehicle groups，P＜0.01；ccompared with normal groups，P＜0.01

組別（Groups）逃避潛伏期（s）（escape latency）游泳距離（cm）（swimming distance）糖尿病組（diabetes groups） 51.25±5.91abc 760.27±67.90abc胰島素組（insulin groups） 27.76±4.89 585.91±55.97溶劑組（vehicle groups）正常組（normal groups）25.75±4.61 25.39±5.74 553.36±70.26 560.02±60.84

3.細(xì)胞凋亡的檢測

在 VDB或 HDB中的 Bax、Bcl-2陽性細(xì)胞漿及TUNEL陽性細(xì)胞核均被染成棕黃色，但各組大鼠的這三類陽性細(xì)胞的形態(tài)均不發(fā)生明顯變化；陰性對照反應(yīng)的切片也不顯色，呈陰性反應(yīng)。（圖4、圖8）。

與溶劑組相比較，糖尿病組 VDB的Bax、TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)分別比其升高了 153.89%和 68.15%，組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；而且糖尿病組HDB的Bax、TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)也分別比其升高了90.58%和67.07%，組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），但糖尿病組的VDB、HDB的Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)則分別比溶劑組下降了39.95%和 43.31%，組間比較的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與糖尿病組相比較，胰島素組 VDB及 HDB的Bax、TUNEL和 Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)則發(fā)生了完全相反的顯著變化，組間比較的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而且胰島素組 VDB及 HDB的這三項(xiàng)指標(biāo)與溶劑組的相近似，也可達(dá)到正常組的水平，組間比較的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，圖1-圖3，圖5-圖7）。

圖1 各組大鼠斜角帶核垂直支Bax陽性細(xì)胞（免疫組織化學(xué)染色，400×）。a.糖尿病組；b.胰島素組；c.溶劑組；d.正常組Fig.1 Bax immunoreactive cells in the vertical limb of diagonal band in each group of rats（ImmunohistoChemical staining，400×）.a.diabetes groups；b.insulin groups；c.vehicle groups；d.normal groups

圖2 各組大鼠斜角帶核垂直支Bcl-2陽性細(xì)胞（免疫組織化學(xué)染色400×）。a.糖尿病組；b.胰島素組；c.溶劑組；d.正常組Fig.2 Bcl-2 immunoreactive cells in the vertical limb of diagonal band in each group of rats（ImmunohistoChemical staining 400×）. a.diabetes groups；b.insulin groups；c.vehicle groups；d.normal groups

圖3 各組大鼠斜角帶核垂直支 TUNEL陽性細(xì)胞（免疫組織化學(xué)染色400×）。a.糖尿病組；b.胰島素組；c.溶劑組；d.正常組Fig.3 TUNEL immunoreactive cells in the vertical limb of diagonal band in each group of rats（ImmunohistoChemical staining 400×）. a.diabetes groups；b.insulin groups；c.vehicle groups；d.normal groups

圖4 各組大鼠VDB的Bax、Bcl-2和TUNEL細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果比較。a與胰島素組比較，P＜0.01；b與溶劑組比較，P＜0.01；c與正常組比較，P＜0.01Fig.4 The comparison of Bax、Bcl-2 and TUNEL apoptosis detection results in the vertical limb of diagonal band in each group of rats.acompared with insulin groups，P＜0.01；bcompared with vehicle groups，P＜0.01；ccompared with normal groups，P＜0.01

圖5 各組大鼠斜角帶核水平支Bax陽性細(xì)胞（免疫組織化學(xué)染色400×）。a.糖尿病組；b.胰島素組；c.溶劑組；d.正常組Fig.5 Bax immunoreactive cells in the horizontal limb of diagonal band in each group of rats（ImmunohistoChemical staining 400×）. a.diabetes groups；b.insulin groups；c.vehicle groups；d.normal groups

圖6 各組大鼠斜角帶核水平支 Bcl-2陽性細(xì)胞（免疫組織化學(xué)染色400×）。a.糖尿病組；b.胰島素組；c.溶劑組；d.正常組Fig.6 Bcl-2 immunoreactive cells in the horizontal limb of diagonal band in each group of rats（ImmunohistoChemical staining 400×）.a. diabetes groups；b.insulin groups；c.vehicle groups；d.normal groups

圖7 各組大鼠斜角帶核水平支TUNEL陽性細(xì)胞（免疫組織化學(xué)染色400×）。a.糖尿病組；b.胰島素組；c.溶劑組；d.正常組Fig.7 TUNEL immunoreactive cells in the horizontal limb of diagonal band in each group of rats（ImmunohistoChemical staining 400 ×）.a.diabetes groups；b.insulin groups；c.vehicle groups；d.normal groups

圖8 各組大鼠HDB的Bax、Bcl-2和TUNEL細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果比較。a與胰島素組比較，P＜0.01；b與溶劑組比較，P＜0.01；c與正常組比較，P＜0.01Fig.8 The comparison of Bax、Bcl-2 and TUNEL apoptosis detection results in the horizontal limb of diagonal band in each group of rats.acompared with insulin groups，P＜0.01；bcompared with vehicle groups，P＜0.01；ccompared with normal groups，P＜0.01

討 論

基底前腦的斜角帶核內(nèi)含有大量的膽堿能神經(jīng)元，并可分為 VDB和HDB。VDB的膽堿能神經(jīng)元發(fā)出纖維投射到海馬，組成 VDB-海馬通路，參與空間學(xué)習(xí)和記憶過程［3］；而 HDB的膽堿能神經(jīng)元發(fā)出的纖維投射終止于嗅球，構(gòu)成 HDB-嗅球通路，參與嗅覺學(xué)習(xí)記憶過程［4］。研究證實(shí)，糖尿病可引起基底前腦的膽堿能神經(jīng)元數(shù)量減少及乙酰膽堿合成酶表達(dá)水平明顯下降，且引發(fā)學(xué)習(xí)記憶障礙［3，4］，但目前仍未完全清楚發(fā)生這些異常變化的緣由。

Bax與 Bcl-2分別是 Bcl-2基因家族中作用相互對立的重要凋亡調(diào)控基因，前者為促凋亡基因，后者為抗凋亡基因，這兩個(gè)基因表達(dá)產(chǎn)物水平的比值變化，將決定著病變部位的細(xì)胞是否進(jìn)入凋亡門坎及發(fā)生凋亡事件，因此通過檢測 Bax與 Bcl-2的表達(dá)產(chǎn)物可評判某部位發(fā)生細(xì)胞凋亡的趨勢；而在判定已發(fā)生細(xì)胞凋亡事件的結(jié)局方面，則用TUNEL方法來檢測［8，9］。此外，細(xì)胞凋亡已成為一種公認(rèn)的機(jī)制在多種腦病變的發(fā)生和歸轉(zhuǎn)中施加相應(yīng)的影響［10］，我們推測，促凋亡基因 Bax和抗凋亡基因 Bcl-2的蛋白表達(dá)變化及出現(xiàn)細(xì)胞凋亡事件，可能參與了上述病理過程。為證實(shí)這一假說，本研究先用鏈脲佐菌素建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型，并以空腹大鼠尾靜脈的血糖水平作為依據(jù)判定成功建模的前提下，觀察上述各項(xiàng)指標(biāo)的變化，所得結(jié)果顯示：與溶劑組或正常組大鼠相比較，糖尿病組大鼠VDB及HDB的Bax、TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)均明顯升高，而 Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)和學(xué)習(xí)記憶能力則明顯下降；胰島素組大鼠 VDB及 HDB的 Bax、Bcl-2、TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)及學(xué)習(xí)記憶能力與糖尿病組大鼠相比較，卻發(fā)生了完全相反的顯著變化，但這四項(xiàng)指標(biāo)值均可恢復(fù)到正常水平。本研究的這些結(jié)果與 其他 學(xué) 者 所 報(bào) 道 的基 本 一致［11，12］，說 明Ⅰ型糖尿病能促進(jìn)細(xì)胞凋亡的發(fā)生，胰島素則有遏制細(xì)胞凋亡的功效。

我們的結(jié)果提示：Ⅰ型糖尿病的低胰島素或高血糖誘因促進(jìn)細(xì)胞啟開了凋亡程序，使VDB及HDB的 Bax蛋白表達(dá)上調(diào)，而 Bcl-2蛋白表達(dá)則下調(diào)，造成這兩種蛋白原來正常比例的產(chǎn)物量發(fā)生了變化，這將驅(qū)使細(xì)胞接受指令而自動進(jìn)入到凋亡狀態(tài)，故VDB及 HDB的膽堿能神經(jīng)元在總體上發(fā)生了過度凋亡，使神經(jīng)元數(shù)量減少、神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的合成酶的表達(dá)水平下降，不能合成及釋放足夠量的乙酰膽堿，導(dǎo)致神經(jīng)沖動在由 VDB或 HDB朝向靶區(qū)傳導(dǎo)的通路中發(fā)生故障，最終引起學(xué)習(xí)記憶能力下降［13］；在胰島素替代治療后，可消除上述細(xì)胞凋亡程序的誘因，糾正基底前腦 Bax與 Bcl-2蛋白異常表達(dá)，將瀕臨凋亡的神經(jīng)元拯救回來，恢復(fù)了膽堿能神經(jīng)元的數(shù)量以及神經(jīng)遞質(zhì)的正常代謝和應(yīng)有效應(yīng)，進(jìn)而消除學(xué)習(xí)記憶障礙。

雖然本研究揭示了胰島素干預(yù)前后糖尿病大鼠基底前腦Bax蛋白、Bcl-2蛋白、TUNEL陽性細(xì)胞（凋亡的細(xì)胞）、學(xué)習(xí)記憶四個(gè)指標(biāo)變化的相互關(guān)系，并初步得出以下結(jié)論：基底前腦發(fā)生過度細(xì)胞凋亡，可能是膽堿能神經(jīng)元遭受損害易患糖尿病腦病的一個(gè)負(fù)性因素，但在患Ⅰ型糖尿病的狀態(tài)下，有關(guān) Bax蛋白與 Bcl-2蛋白相互作用的具體模式，Bax或 Bcl-2上游、下游的相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑或分子仍未清楚，尚需進(jìn)一步研究來澄清。

綜上所述，糖尿病可能通過細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑累及膽堿能基底前腦，導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙，誘發(fā)糖尿病腦?。欢葝u素則可通過抗細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑保護(hù)膽堿能基底前腦，矯正學(xué)習(xí)記憶障礙，避免糖尿病腦病的發(fā)生。由此也提示，在臨床上應(yīng)盡早診斷Ⅰ型糖尿病，及時(shí)用胰島素來針對性治療，才能有效防止Ⅰ型糖尿病腦病的發(fā)生。

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InsulinInhibits Cell Apoptosis in the Diagonal Band of Broca and Cognitive Impairment of Streptozotocin-induced Type 1 Diabetes Rats

Wang Wei1，Guo Ling2*，Zhu Xiuling1
（1Department of Anatomy，Wannan Medical College，Wuhu 241002；2Department of Anatomy，Guangxi Medical University，Nanning 530021，China）

Objective To explore the effects of insulin therapy on impairments of learning and memory，on cell apoptosis，and on Bax or Bcl-2 protein expression in the diagonal band of Broca（vertical limb of diagonal band，VDB；horizontal limb of diagonal band，HDB）of rats with type 1 diabetes.Methods Male Wistar rats were randomly divided into four groups：normal，diabetes，insulin，and vehicle.Type 1 diabetes rat model was established by a dosage of intraperitoneal injection of streptozotocin.Morris water maze was used to investigate spatial memory ability.Immunohistochemistry was used to investigate protein expression of Bax and Bcl-2.Terminal-deoxynucleotidy-transferase-mediated-dUTP nick and labeling（TUNEL）was used to investigate cell apoptosis.Results The spatial memory abilities of rats in the type 1 diabetes group was significantly worse than that of normal rats.The protein expression of Bax in VDB or HDB was significantly increased；while the protein expression of Bcl-2 significantly decreased.However，insulin treatment significantly improved the spatial memory abilities of diabetic rats，reversed the abnormal protein expression of Bax and Bcl-2 in VDB and HDB，and reduced cell apoptosis.Conclusion Insulin can inhibit cell apoptosis in the diagonal band of Broca and cognitive impairment of streptozotocin-induced type 1 diabetes.

Type 1 diabetes；Insulin；Diabetic Encephalopathy；Diagonal band of Broca；Cell apoptosis；Cognitive ability

Q427；Q255

A

10.16705／j.cnki.1004-1850.2015.05.011

2015-04-20

2015-08-13

皖南醫(yī)學(xué)院中青年科研基金資助（WK201108）；廣西高校自然科學(xué)基金資助（201012MS035）；重大教學(xué)改革研究項(xiàng)目（2014zdjy078）；安徽省高等學(xué)校優(yōu)秀人才基金項(xiàng)目（2012SQRL120ZD）

王薇，女（1985年），漢族，助教

*通訊作者（To whom correspondence should be addressed）drguolinggx＠aliyun.com