爵床煎劑對小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用初探

劉 兵，鄭麗娟，梁生林

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爵床煎劑對小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用初探

劉 兵，鄭麗娟，*梁生林

(井岡山大學醫(yī)學院，江西，吉安343009)

目的 探討爵床的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。方法 采用熱板法、扭體法致痛，觀察高、中、低劑量爵床水煎劑的鎮(zhèn)痛作用；采用耳腫法、足腫法致炎，觀察高、中、低劑量爵床水煎劑的抗炎作用。結(jié)果 爵床水煎劑高、中、低劑量對熱板法所致小鼠痛閾值有明顯的提高，與生理鹽水對照組比較差異極顯著(< 0.01)；爵床水煎劑高、中劑量給藥后與自身給藥前比較，差異顯著(< 0.01)，爵床水煎劑低劑量給藥后15、30、60 min與給藥前比較差異顯著 (< 0.01)；爵床水煎劑高、中、低劑量對醋酸所致扭體反應(yīng)數(shù)均有明顯抑制作用，與生理鹽水對照組比較差異顯著(< 0.01)。爵床水煎劑高、中、低劑量對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹均有明顯抑制作用，與生理鹽水對照組比較差異顯著(< 0.01，< 0.05)；爵床水煎劑高、中、低劑量對蛋清所致小鼠足跖腫脹均有明顯抑制作用，與生理鹽水對照組比較差異極顯著(< 0.01)。結(jié)論 爵床水煎劑具有一定鎮(zhèn)痛、抗炎作用。

爵床；水煎劑；鎮(zhèn)痛；抗炎

爵床為爵床科植物爵床[(Liun.) Nees]的干燥全草，收載于中國藥典(一部)[1]，具清熱解毒、利尿消腫、消疳的功效，民間及臨床用于治療感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、小兒疳積、痢疾、腸炎、肝炎等，外用治療癰瘡癤腫、跌打損傷等[2-4]。現(xiàn)代藥理研究表明，爵床具有抗病毒[5]、抗腫瘤[6-8,9-10]、抗血小板凝集[11]等作用，但有關(guān)爵床的鎮(zhèn)痛抗炎作用研究未見報道。本研究采用熱板法、扭體法疼痛模型和耳腫法、足腫法炎癥模型，初步探討了爵床水煎劑的鎮(zhèn)痛、抗炎作用，旨在為爵床進一步研究和臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料

1. 1 實驗動物

昆明種小鼠，清潔級，體質(zhì)量18~22 g，雌雄兼有，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，許可證號：SCXK(湘)2011-0003。

1. 2 藥品與試劑

爵床(2011年8月采于江西吉安，經(jīng)井岡山大學醫(yī)學院藥學系彭才圣副教授鑒定為爵床科植物爵床[(Liun.) Nees)]；嗎啡注射液(沈陽第一制藥廠，規(guī)格：1 mL:10 mg，批號：080701-2)；注射用賴氨匹林(揚州一洋制藥有限公司，規(guī)格：每瓶0.9 g ，批號：080807)；二甲苯(中國上海試劑一廠，批號：20060201)；36%醋酸(上海松江佘山化工廠)。

1. 3 主要儀器

HSS-1B型恒溫浴槽 (成都儀器廠生產(chǎn))；JA2003N 電子天平(上海精密科學儀器有限公司)；YLQ-Q4 耳腫打耳器 (山東省醫(yī)學科學院設(shè)備站)。

2 方法

2. 1 藥物配制

2. 1. 1 爵床水煎劑制備

取切段成2~4 cm的干燥爵床75 g，用蒸餾水浸泡0.5 h，加10倍量蒸餾水(第一次多加2倍量)，用文火煎煮3次，每次0.5 h，合并3次煎出液，靜置過濾去渣，濃縮為100 mL，即濃度為0.75 g/mL備用，以此作為高劑量組的給藥濃度，再用蒸餾水配制中劑量組的給藥濃度0.5 g/mL)和低劑量組的給藥濃度0.375 g/mL)。

2. 1. 2 嗎啡溶液

用蒸餾水配成0.002 g/mL濃度。

2. 1. 3 賴氨匹林溶液

用蒸餾水配成0.072 g/mL濃度。

2. 2 爵床水煎劑的鎮(zhèn)痛實驗

2. 2. 1 熱板法[12-13]

水溫(55 ± 0.1) ℃，記錄小鼠從放入金屬盒至出現(xiàn)舔后足反應(yīng)所需時間(s)，小于5 s或大于30 s或跳躍的都棄之不用。取篩選合格的雌性小鼠60只，按體質(zhì)量隨機分為5組，每組12只，即生理鹽水對照組，嗎啡溶液(0.002 g/kg)組，爵床水煎劑高、中、低(7.5、5.0、3.75 g/kg)劑量組。將每只小鼠正常痛閾值各測2次，每次間隔5 min，取其平均值為給藥前正常痛閾值。小鼠均腹腔注射給藥，給藥量均為10 mL/kg。用藥后15、30、60、90 min各測小鼠痛閾值，如果用藥后放入鎮(zhèn)痛槽內(nèi)60 s仍無反應(yīng)，即將小鼠取出，以免時間太長把腳燙傷，其痛閾值按60 s計算。

2. 2. 2 醋酸扭體法[14]

昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機分為5組，每組12只，組別及給藥同“2. 2. 1”項。給藥0.5 h后，各鼠均腹腔注射0.6%醋酸10 mL/kg(醋酸溶液臨用前配制)。觀察并記錄20 min內(nèi)各組出現(xiàn)的扭體反應(yīng)(腹部內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高)次數(shù)，并計算抑制率。抑制率(%) = (對照組扭體反應(yīng)數(shù)－給藥組扭體反應(yīng)數(shù)) / 對照組扭體反應(yīng)數(shù)×100%。

2. 3 爵床水煎劑的抗炎實驗

2. 3. 1 耳腫法[15-16]

昆明種雄性小鼠60只，按體質(zhì)量隨機分為5組：生理鹽水對照組，賴氨匹林溶液(0.72 g/kg)組，爵床水煎劑高、中、低(7.5、5.0、3.75 g/kg)劑量組，每組12只。小鼠均腹腔注射給藥，給藥容量均為10 mL/kg。給藥0.5 h后每只小鼠左耳廓兩面均勻涂抹0.05 mL二甲苯致炎，以右耳作對照。30 min后脫頸椎處死小鼠，沿耳廓基線剪下雙耳，用直徑8 mm打孔器分別在左右耳同一部位打下圓形耳片，精密稱質(zhì)量，計算耳腫脹度和腫脹抑制率。耳腫脹度＝左耳片質(zhì)量－右耳片質(zhì)量。腫脹抑制率(%) = (對照組腫脹度－給藥組腫脹度)/對照組腫脹度×100%。

2. 3. 2 足腫法[14]

小鼠分組及給藥同“2. 3. 1”項。給藥0.5 h后每只小鼠左后足跖皮下注射10%蛋清生理鹽水溶液(臨用時新鮮配制)0.05 mL致炎，用容積法分別測定各鼠致炎前及致炎后0.5、1、2、3 h的足跖容積，記錄結(jié)果，并計算腫脹率(%)。腫脹率(%) = (致炎后足跖容積－致炎前足跖容積) / 致炎前足跖容積×100%。

2. 4 統(tǒng)計學分析

采用統(tǒng)計學軟件SPSS10.0對各組所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，其結(jié)果以均數(shù)±標準差()表示，組間比較采用單因素方差分析。

3 結(jié)果

3. 1 爵床水煎劑對熱板法所致小鼠痛閾值的影響

與生理鹽水對照組比較，給藥前各組痛閾值比較差異無統(tǒng)計學意義(> 0.05)；爵床水煎劑高、中、低(7.5、5.0、3.75 g/kg)劑量組和嗎啡溶液(0.02 g/kg)組，給藥后15、30、60、90 min與生理鹽水對照組比較差異極顯著(< 0.01)。

與自身給藥前比較，生理鹽水對照組差異無統(tǒng)計學意義(> 0.05)；爵床水煎劑高、中(7.5、5.0 g/kg)劑量組和嗎啡溶液(0.02 g/kg)組，給藥后15、30、60、90 min與給藥前比較差異均顯著(< 0.01)；爵床水煎劑低(0.375 g/kg)劑量組，給藥后15、30、60 min與給藥前比較差異顯著(< 0.01)。結(jié)果見表1。

表1 爵床水煎劑對熱板法所致小鼠痛閾值的影響(, n = 12)

Table 1　Effects of Rostellularia Procumbens extract on the threshold of mice in Hot plate

表1 爵床水煎劑對熱板法所致小鼠痛閾值的影響(, n = 12)

組 別劑量(g/kg)給藥前痛閾值(s)給藥后痛閾值(s) 15 min30 min60 min90 min 生理鹽水對照組－15.33 ± 4.1915.24 ± 3.8315.03 ± 5.0314.78 ± 4.0513.86 ± 3.82 嗎啡溶液組0.0213.53 ± 2.8160.00 ± 0.00ab54.13 ± 6.62ab49.40 ± 8.45ab35.34 ± 5.86ab 爵床水煎劑高劑量組7.515.49 ± 2.9730.26 ± 6.16ab36.71 ± 5.62ab31.66 ± 7.19ab31.26 ± 7.47ab 爵床水煎劑中劑量組5.015.73 ± 3.2924.68 ± 5.81ab29.27 ± 8.52ab26.29 ± 6.40ab23.21 ± 5.81ab 爵床水煎劑低劑量組3.7516.85 ± 4.6424.44 ± 6.61ab29.16 ± 7.47ab26.19 ± 6.25ab20.80 ± 6.42a

注：與生理鹽水對照組比較，a< 0.01；與自身藥前痛閾比較，b< 0.01

3.2 爵床水煎劑對醋酸扭體法所致小鼠疼痛的影響

爵床水煎劑各劑量組、嗎啡溶液組與生理鹽水對照組比較差異均顯著(< 0.01)。結(jié)果見表2。

表2 爵床水煎劑對醋酸刺激所致小鼠疼痛的影響(, n = 12)

Table 2 Inhibition of Rostellularia Procumbens extract on acetic acid writhing of mice

表2 爵床水煎劑對醋酸刺激所致小鼠疼痛的影響(, n = 12)

組 別劑量(g/kg)扭體次數(shù)抑制率(%) 生理鹽水對照組－63.25 ± 10.44– 鹽酸嗎啡溶液組0.022.08 ± 2.31a96.71 爵床水煎劑高劑量組7.52.83 ± 2.12a95.53 爵床水煎劑中劑量組5.06.50 ± 2.96 a89.72 爵床水煎劑低劑量組3.7511.58 ± 3.57a81.69

注：與生理鹽水組比較，a< 0.01

3.3 爵床水煎劑對二甲苯致小鼠耳腫脹度的影響

與生理鹽水對照組比較，爵床水煎劑高、中、低(7.5、5.0、3.75 g/kg)劑量組給藥后對二甲苯所致小鼠耳腫脹均有明顯抑制作用(< 0.01，< 0.05)；賴氨匹林溶液(0.72 g/kg)組給藥后對二甲苯所致小鼠耳腫脹也具明顯抑制作用(< 0.01)。結(jié)果見表3。

表3 爵床水煎劑對小鼠耳腫脹抑制的影響(, n = 12)

Table 3 Effects of Rostellularia Procumbens extract on ear edema induced by xylene in mice

表3 爵床水煎劑對小鼠耳腫脹抑制的影響(, n = 12)

組 別劑量(g/kg)腫脹度(mg)腫脹抑制率(%) 生理鹽水對照組－15.86 ± 4.11－ 賴氨匹林溶液組0.72 3.46 ± 1.95a78.18 爵床水煎劑高劑量組7.5 9.92 ± 2.17a37.45 爵床水煎劑中劑量組5.010.90 ± 2.51a31.27 爵床水煎劑低劑量組3.7512.70 ± 2.82b19.92

注：與生理鹽水對照組，a< 0.01，b< 0.05

3. 4 爵床水煎劑對蛋清致小鼠足跖腫脹的影響

與生理鹽水對照組比較，爵床水煎劑高、中、低(7.5、5.0、3.75 g/kg)劑量組和賴氨匹林溶液(0.72 g/kg)組給藥后對蛋清所致小鼠足跖腫脹均有明顯抑制作用(< 0.01)。爵床水煎劑高、中(7.5、5.0 g/kg)劑量組給藥后0.5、1、2、3 h和低(0.375 g/kg)劑量組給藥后3 h與賴氨匹林溶液組比較，差異無統(tǒng)計學意義(> 0.05)。結(jié)果見表4。

表4 爵床水煎劑對蛋清致小鼠足跖腫脹的影響(, n = 12)

Table 4 Effects of Rostellularia Procumbens extract on paw edema induced by egg white in mice

表4 爵床水煎劑對蛋清致小鼠足跖腫脹的影響(, n = 12)

組 別劑量(g/kg)致炎后不同時間足腫脹率(%) 0. 5 h1 h2 h3 h 生理鹽水對照組–51.63 ± 8.4347.17 ± 6.6551.44 ± 7.8145.28 ± 8.17 賴氨匹林溶液組0.7221.83 ± 6.31a22.87 ± 6.28a18.49 ± 4.26a10.37 ± 3.36a 爵床水煎劑高劑量組7.522.83 ± 5.03ab24.79 ± 4.40ab16.21 ± 2.99ab10.28 ± 2.54ab 爵床水煎劑中劑量組5.023.80 ± 5.37ab24.76 ± 3.00ab20.29 ± 6.51a10.48 ± 3.60ab 爵床水煎劑低劑量組3.7529.88 ± 4.35a32.25 ± 4.52a24.69 ± 4.05a12.65 ± 2.71ab

注：與生理鹽水對照組比較，a< 0.01；與賴氨匹林組比較，b0.05、

4 討論

爵床具有清熱解毒、利尿消腫、消疳等功效，現(xiàn)代藥理研究表明爵床具有抗腫瘤、抗病毒、抗血小板凝集等作用。為探討爵床是否具有鎮(zhèn)痛抗炎作用，本實驗采用熱板法、扭體法疼痛模型和耳腫法、足腫法炎癥模型對爵床水煎劑進行了鎮(zhèn)痛抗炎作用的初步研究。

爵床水煎劑各劑量組能明顯提高熱板法所致小鼠的痛閾值，這表明爵床對溫度等物理因素導致的疼痛有鎮(zhèn)痛作用，熱板反應(yīng)有高位中樞參與[15]，這說明爵床有一定中樞性鎮(zhèn)痛作用。爵床水煎劑各劑量組明顯減少醋酸刺激所致小鼠扭體反應(yīng)數(shù)，醋酸扭體反應(yīng)是通過醋酸刺激臟層和壁層腹膜引起深部較大面積較長時間的炎性疼痛[15]，這說明爵床有抗炎性疼痛的藥理活性。

用二甲苯致小鼠耳廓腫脹及蛋清致小鼠足跖腫脹是以水腫和滲出為主的急性炎癥反應(yīng)[17]。實驗結(jié)果顯示爵床水煎劑各劑量組明顯減輕二甲苯所致小鼠耳廓的腫脹和蛋清所致小鼠足跖的腫脹，表明爵床水煎劑可減輕局部血管擴張和毛細血管通透性增加，抑制滲出和水腫，對非特異性炎癥的早期反應(yīng)具有顯著抑制作用。

綜上所述，爵床水煎劑對物理性和炎性疼痛具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，對急性炎癥具有良好的抑制作用，為其進一步研究提供了初步的實驗依據(jù)。其鎮(zhèn)痛抗炎的活性成份及作用機制等有待進一步研究。

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PRELIMINARY STUDY ON THE ANALGESIC AND ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OFDECOCTION IN MICE

LIU Bing, ZHENG Li-juan,*LIANG Sheng-lin

(School of Medicine, Jinggangshan University, Ji’an, Jiangxi 343009, China)

Objective: To investigate the analgesic and anti-inflammatory effects ofin mice. Methods: Byusing the hot-plate and acetic acid writhing method to induce pain in mice, and observe the analgesic effect of different doses ofdecoction. Byusing the ear tumefaction, foot swelling to induce inflammation in mice, and observe the anti-inflammatory effect of different decoction doses. Results:Different doses ofdecoction could significantly elevate the pain threshold with hot plate method (< 0.01), comparing with the saline control group. High, medium decoction dosesandlow-dose for 15, 30, 60 min could significantly elevate the pain threshold with hot plate method (< 0.01), comparing with the self-administration earlier. Compared with the saline control group, the decoction could significantly reduce the number with acetic acid writhing method, restrain mouse ear tumefaction caused by xylene and mouse foot swelling caused by egg white (< 0.01).Conclusion: The results showsdecoction has theanalgesic effects and anti-inflammatory.

; decoction; analgesia; anti-inflammation

1674-8085(2015)04-0070-05

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674-8085.2015.04.013

2014-10-16；修改日期：2015-05-05

國家科技支撐計劃項目子課題項目(2012BAC11B02-6)；吉安市科技支撐計劃項目(吉市科計字[2014]4號)

劉 兵(1966-)，女，江西永新人，主管藥師，主要從事藥學教學與實驗(E-mail: 1277544374@qq.com);

鄭麗娟(1980-)，女，江西新干人，助理實驗師，碩士，主要從事藥物化學教學與實驗(E-mail: 690109174@qq.com);

*梁生林(1962-)，男，江西吉安人，教授，主要從事中草藥藥理及毒理研究(E-mail: slliang1962@163.com).