復(fù)方熊膽茵陳顆粒的利尿作用

鄭海音，徐 偉，黃鳴清，李 煌，洪振豐，闕金花

（1．福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院，福州350122；2．福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福州350122）

復(fù)方熊膽茵陳顆粒的利尿作用

鄭海音1，徐 偉2，黃鳴清2，李 煌2，洪振豐1，闕金花2

（1．福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院，福州350122；2．福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福州350122）

目的 研究復(fù)方熊膽茵陳顆粒的利尿作用。方法 通過給予正常大鼠及水負(fù)荷模型大鼠不同劑量復(fù)方熊膽茵陳顆粒，1.8、3.6、7.2 g／（kg?d），觀察排尿量及其中Na＋、K＋、Cl-的濃度，以證明該復(fù)方的利尿作用。結(jié)果 與陰性對照組尿量（7.8±1.2）mL比較，中、高劑量復(fù)方熊膽茵陳顆?？梢悦黠@增加正常大鼠24 h尿量（P＜0.05，P＜0.01），分別達(dá)到（10.8±4.4）、（11.8±3.9）mL；與陰性對照組（5.7±1.5）mL比較，中、高劑量復(fù)方熊膽茵陳顆?？梢蕴岣咚?fù)荷大鼠6 h尿量（7.5±1.3）、（7.6±2.1）mL，P＜0.05；高劑量可提高正常大鼠尿液中Na＋含量，正常組為（0.04±0.02）mmoI／L，高劑量組為（0.16±0.13）mmoI／L，P＜0.01，各劑量均能明顯通過水負(fù)荷大鼠尿液中Na＋含量，正常組為（0.81±0.28）mmoI／L，低劑量組為（2.10±0.59）mmol／L，中劑量組為（2.26±0.50）mmol／L，高劑量組為（2.86±0.98）mmol／L，P＜0.05。結(jié)論 復(fù)方熊膽茵陳顆粒具有利尿作用，且呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系。

復(fù)方熊膽茵陳顆粒；利尿作用；水負(fù)荷

復(fù)方熊膽茵陳顆粒是福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院院內(nèi)制劑（批準(zhǔn)文號：閩藥制Z20110007），并獲得國家知識產(chǎn)權(quán)局授權(quán)專利（ZL201210516947.9）。該方由熊膽粉、茵陳、山楂、澤瀉、白術(shù)、柴胡、甘草等7味中藥組成，具有清肝利濕、化痰祛瘀、疏肝健脾之功效。研究［1］前期對復(fù)方熊膽茵陳顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，但對于其藥效學(xué)研究還未見報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)就該方利尿功效進(jìn)行初步藥效學(xué)研究，以進(jìn)一步探討該方的作用機(jī)制。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 SPF級SD大鼠，雄性，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SYXK（粵）2008-0002。動物飼養(yǎng)在廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心SPF級動物房，動物飼養(yǎng)條件：5只大鼠／大箱，飼養(yǎng)溫度與濕度：20～26℃，40%～70% ，采用10 h∶14 h晝夜間斷照明，自由進(jìn)食和飲水，飼料和飲用水均由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。對購入大鼠檢疫3～7 d。期間每日檢查動物1次，未發(fā)現(xiàn)不健康的大鼠，全部健康鼠均納入實(shí)驗(yàn)。

1.2 試藥 復(fù)方熊膽茵陳顆粒（批號：20121101，福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院）；氫氯噻嗪片（批號：20111102，廣東三才石岐制藥有限公司）。

1.3 儀器 BS-3000A系列電子天平（上海友聲衡器有限公司），BS224S電子天平（德國Sartorius），AC9000系列電解質(zhì)分析儀（江蘇奧康醫(yī)學(xué)科技有限公司）。

2 方法

2.1 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠的排尿影響 取SD大鼠，50只，體質(zhì)量（300±10）g，隨機(jī)分為5組，每組10只，即陰性對照組、陽性對照組（氫氯噻嗪片，25 mg／mL）、復(fù)方熊膽茵陳顆粒低、中、高劑量組（1.8、3.6、7.2 g／（kg?d）。實(shí)驗(yàn)前，各組動物禁食不禁水24 h后，按照10 mL／kg體質(zhì)量灌服相應(yīng)的藥物，陰性對照組給予等量的純凈水。給藥后輕壓大鼠下腹部使膀胱內(nèi)余尿排盡，后立即置代謝籠內(nèi)，收集0～1、1～2、2～3、3～24 h尿液量，并用AC9000系列電解質(zhì)分析儀檢測0～3 h尿液的Na＋、K＋、Cl-濃度。

2.2 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對水負(fù)荷大鼠的排尿影響［2］取SD大鼠，雄性，80只，體質(zhì)量（180±10）g。80只動物先進(jìn)行水負(fù)荷尿量篩選。試驗(yàn)前禁食不禁水24 h，將各鼠按22 mL／kg灌服去離子水，收集2 h尿液，選用尿量達(dá)灌服量的40%以上水負(fù)荷者為合格動物（水負(fù)荷模型動物），選取其中50只動物，按篩選尿量隨機(jī)分為5組，即模型對照組、陽性對照組（氫氯噻嗪）、復(fù)方熊膽茵陳顆粒低、中、高劑量組（1.8、3.6、7.2 g／（kg?d）。各組動物禁食不禁水24 h后，模型對照組按50 mL／kg給予1%氯化鈉溶液，其余各組按50 mL／kg灌注相應(yīng)藥物的1%氯化鈉溶液，給藥后輕壓大鼠下腹部使膀胱內(nèi)余尿排盡，置代謝籠內(nèi)，收集0～6 h的尿液作比較，并用AC9000系列電解質(zhì)分析儀檢測Na＋、K＋、Cl-濃度。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；所有計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示；組間比較采用 t檢驗(yàn)，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠的利尿作用

3.1.1 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠尿量的影響見表1。

表1 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠尿量的影響（±s，n＝10）

表1 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠尿量的影響（±s，n＝10）

注 ：與陰性對照組比較 ，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01（0～1 h、1～2 h、2～3 h、3～24 h采用重復(fù)測量資料模塊進(jìn)行分析，0～24 h、離子含量采用秩和檢驗(yàn)分析）

尿量／mL組 別 劑量／g／（kg?d）0～1 h 1～2 h 2～3 h 3～24 h 0～24h陰性對照組 — 0．5±0．5 1．0±0．5 1．0±0．4 5．4±1.1 7．8±1.2氫氯噻嗪組 0．25 1．5±0．8＃ 2.3±0．5＃＃ 1．9±0．8＃＃ 11．4±4．0＃ 17.2±5.3＃＃低劑量組 1．8 1.2±1.2 0．7±0．6 0．8±0．4 6．6±2．5 9.2±3．5中劑量組 3．6 0．8±0．6 1.1±0．6 0．9±0．4 8.1±3．7 10．8±4．4＃高劑量組 7.2 0．9±0．5 1.3±0．5 1．0±0.3 8．7±3.3 11．8±3．9＃＃

3.1.2 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠尿液中Na＋、K＋、Cl-濃度的影響 見表2。

表2 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠尿液中Na＋、K＋、Cl-濃度的影響（±s，n＝10）

表2 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對正常大鼠尿液中Na＋、K＋、Cl-濃度的影響（±s，n＝10）

注：與陰性對照組比較 ，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01

組 別 劑量／g／（kg?d）0～3 h尿液離子含量／（mmol／L）K＋ Na＋ Cl-陰性對照組 — 0．69±0．52 0．04±0．02 0．47±0．16氫氯噻嗪組 0．25 1．84±1．01＃＃ 0．90±0．32＃＃ 2．51±0．79＃＃低劑量組 1．8 0．70±0．42 0．05±0．04 0．74±0．40中劑量組 3．6 0．69±0．47 0．04±0．03 0．66±0．26高劑量組 7.2 0．71±0．35 0．16±0．13＃＃ 0．61±0．15

3.2 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對水負(fù)荷大鼠的利尿作用

3.2.1 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對水負(fù)荷大鼠尿量的影響見表3。

3.2.2 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對水負(fù)荷大鼠尿液中Na＋、K＋、Cl-濃度的影響 見表3。

表3 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對水負(fù)荷大鼠的利尿作用（±s，n ＝10）

表3 復(fù)方熊膽茵陳顆粒對水負(fù)荷大鼠的利尿作用（±s，n ＝10）

注：與模型對照組比較 ，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01（各指標(biāo)均采用方差分析）

組 別 劑量／g／（kg?d）0～6 h尿量／mL 0～6 h尿液離子含量／（mmol／L）K＋ Na＋ Cl-模型對照組 — 5．7±1．5 1．34±0．60 0．81±0．28 1．01±0．30氫氯噻嗪組 1．8 10．6±1．5＃＃ 1．92±0．44 4．05±0．59＃＃ 2．96±0．43＃＃低劑量組 3．6 5.1±1.2 0．97±0．24 2．10±0．59＃＃ 1．52±0．36＃中劑量組 7.2 7．5±1.3＃ 1．60±0．23 2．26±0．50＃＃ 1．92±0．37＃＃高劑量組 1．8 7．6±2.1＃ 1．64±0．36 2．86±0．98＃＃ 2．08±0．50＃＃

結(jié)論：復(fù)方熊膽茵陳浸膏高劑量可以增加正常大鼠的排尿量及排Na＋量；復(fù)方熊膽茵陳浸膏中、高劑量可以增加水負(fù)荷大鼠的排尿量及排Na＋、Cl-量，可以說明復(fù)方熊膽茵陳浸膏具有一定的利尿功能。

4 討論

中藥利尿藥利尿持續(xù)時(shí)間長、且具有腎臟保護(hù)作用等特點(diǎn)［3］。中藥利尿藥的作用較西藥緩和，作用持久，較為安全 ，是尋找更好利尿藥的重要探索方向［4］。復(fù)方熊膽茵陳顆粒由熊膽粉、茵陳、山楂、澤瀉、白術(shù)、柴胡、甘草等7味中藥組成。研究［5-11］表明，澤瀉有明顯的利尿作用；白術(shù)的利尿作用顯著，能促進(jìn)電解質(zhì)尤其是鈉的排出，能有效抑制Na＋-K＋-ATP酶的磷酸化反應(yīng)。

通過表1和表2可以看出，復(fù)方熊膽茵陳顆粒高劑量可以增加正常大鼠的排尿量及排Na＋量；復(fù)方熊膽茵陳顆粒中、高劑量可以增加水負(fù)荷大鼠的排尿量及排Na＋、Cl-量。復(fù)方熊膽茵陳顆粒低劑量在增加尿中Na＋、Cl-濃度同時(shí)，降低尿中K＋濃度，利尿同時(shí)，不易引起低血鉀。表明復(fù)方熊膽茵陳顆粒具有一定的利尿功能。本研究結(jié)果表明復(fù)方熊膽茵陳顆粒具有利尿滲濕作用，是臨床應(yīng)用的藥理基礎(chǔ)之一。

［1］李煌，徐偉，鄭海音 ，等．復(fù)方熊膽茵陳顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］．中國中醫(yī)藥信息雜志 ，2013，20（9）：52-54．

［2］魏偉，吳希美，李元建 ．藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］．4版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2010．

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Diuretic effect of Fufang-xiongdan-yinchen granule

ZHENG Haiyin1，XU Wei2，HUANG Mingqing2，LI Huang2，HONG Zhenfeng1，QUE Jinhua2
（1．School of Integrated Traditional Chinese Medicine and Western Medicine，F(xiàn)ujian University of Traditional Chinese Medicine，F(xiàn)uzhou 350122，China；2．Department of Pharmacy，F(xiàn)ujian University of Traditional Chinese Medicine，F(xiàn)uzhou 350122，China）

Objective To study the diuretic effect of fufang-xiongdan-yinchen granule．Methods By giving different doses of the fufang-xiongdan-yinchen granule（1．8，3．6，7.2 g／kg?d）to normal rats and water load rats，observe urinary output and the concentration of Na＋，K＋，Cl-，to prove the diuresis effect of it．Results Compared with the negative control group（7．8±1.2）mL，high and middle dosage of fufang-xiongdan-yinchen granule can significantly increase the rine output of the normal rats in 24 h（P＜0．05，P＜0．01），（10．8±4．4）mL，（11．8±3．9）mL；and compared with the negative control group（5．7±1．5）mL，high and middle dosage of fufang-xiongdan-yinchen granule can significantly increase the rine output of the normal rats in 6 h（P＜0．05），（7．5±1.3）mL，（7．6±2.1）mL；high dosage can increase the concentration of Na＋in normal rats（P＜0．01），the normal group is（0．04±0．02）mmoL，the high dose group is（0．16±0．13）mmoL，and each dosage can increase the concentration of Na＋in water load rats（P＜0．05），the normal group is（0．81±0．28）mmoL the low dose group is（2．10±0．59）mmoL，the middle dose group is（2．26±0．50）mmoL and the high dose group is（2．86±0．98）mmoL．Conclusion Fufangxiongdanyinchen granule has the diuretic effect，and presents dependent doseeffect relationships．

fufang-xiongdan-yinchen granule；diuretic effect；water load

R285.5

A

2095-6258（2015）05-0914-03

10．13463／j．cnki．cczyy．2015．05．011

2015-03-11）

福建省科技重大專項(xiàng)（2010YZ0001-1）。

鄭海音（1977-），女，博士，副教授，主要從事病理學(xué)與病理生理學(xué)研究。