4種生物藥劑對(duì)藍(lán)莓櫟黃枯葉蛾幼蟲的室內(nèi)毒力研究

[目的]尋找高效、低毒和安全的櫟黃枯葉蛾的生物防治藥劑。[方法]測(cè)定4種生物藥劑對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲的室內(nèi)毒力。[結(jié)果]經(jīng)過4種藥劑的20個(gè)處理后，藥后14 d校正死亡率達(dá)到50%以上的有0.020 00 g/ml球孢白僵菌（78.48%）、0.020 00 g/ml綠僵菌（72.53%）、0.010 00 g/ml球孢白僵菌（60.24%）、0.004 00 g/ml藜蘆堿（58.74%）、0.010 00 g/ml綠僵菌（53.27%）和0.002 00 g/ml藜蘆堿（50.36%）。4種藥劑的毒力效果強(qiáng)弱依次為藜蘆堿、棉鈴蟲核型多角體病毒、綠僵菌、球孢白僵菌。[結(jié)論]試驗(yàn)結(jié)果為櫟黃枯葉蛾的田間防治提供了參考。

關(guān)鍵詞櫟黃枯葉蛾；生物藥劑；毒力測(cè)定

中圖分類號(hào)S433.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A文章編號(hào)0517-6611（2015）05-144-02

基金項(xiàng)目貴州省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目[黔科合NY（2013）3046號(hào)]。

作者簡(jiǎn)介黃勝先（1984- ），男，貴州凱里人，農(nóng)藝師，碩士，從事農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究。*通訊作者，農(nóng)藝師， 從事植物學(xué)研究。

收稿日期2014-12-29

2001年在南京植物研究所的技術(shù)支持下，貴州省黔東南州麻江縣利用獨(dú)特的氣候資源，發(fā)展山區(qū)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)，改善荒山生態(tài)環(huán)境，在該地區(qū)建立了8 hm2土眼藍(lán)莓基地[1]。目前，黔東南州藍(lán)莓栽培已有14年，并成為貴州省藍(lán)莓主要產(chǎn)區(qū)，其中麻江縣種植區(qū)域已被認(rèn)證為有機(jī)藍(lán)莓種植基地。隨著黔東南州藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，于2013年先后在藍(lán)莓種植地發(fā)現(xiàn)櫟黃枯葉蛾（Trabala viahnou gigantina Yang）的幼蟲為害藍(lán)莓，櫟黃枯葉蛾又名栗黃枯葉蛾、蓖麻黃枯葉蛾，屬于鱗翅目枯葉蛾科[2-3]，其幼蟲取食藍(lán)莓葉片的葉肉，殘留表皮，造成葉片缺刻或孔洞，殘留葉柄，造成樹勢(shì)下降，嚴(yán)重影響藍(lán)莓生產(chǎn)種植。有機(jī)藍(lán)莓是在“有機(jī)農(nóng)業(yè)”規(guī)定下生產(chǎn)，拒絕任何人工合成的農(nóng)藥，生物防治自然承擔(dān)了藍(lán)莓有機(jī)生產(chǎn)過程中病蟲害防治主要任務(wù)。為尋找高效、低毒和安全的櫟黃枯葉蛾的生物防治藥劑，筆者研究了4種生物藥劑對(duì)其室內(nèi)毒力，以期為田間防治提供參考。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試害蟲。櫟黃枯葉蛾幼蟲通過人工采集方式采集于麻江縣藍(lán)莓種植園，飼養(yǎng)于規(guī)格為39 cm×32 cm×14 cm的整理盒內(nèi)，蓋上紗網(wǎng)以防試蟲逃逸。在整理盒中放入新鮮的藍(lán)莓樹葉，飼養(yǎng)7 d后進(jìn)行試驗(yàn)。

1.1.2供試藥劑。球孢白僵菌（200億cfu/g，江蘇省鹽城市神微生物菌種科技有限公司）、綠僵菌（200億cfu/g，江蘇省鹽城市神微生物菌種科技有限公司）、藜蘆堿（0.5% SL，河北馥稷生物科技有限公司）、棉鈴蟲核型多角體病毒（20億PIB/ml，河南省禹州市百靈生物藥業(yè)有限責(zé)任公司）。

1.2試驗(yàn)方法

參考市場(chǎng)藥劑有效成分的配比度， 將4種供試藥劑用適量清水溶解，分別配成系列濃度梯度藥液。參考李飛廣等的試驗(yàn)方法[4-5]選用櫟黃枯葉蛾2～3齡幼蟲，每處理藥液量取50 ml放入200 ml燒杯中；選擇直徑為6.5 cm的玻璃飼養(yǎng)瓶，瓶底覆蓋2層定性濾紙，底用油性記號(hào)筆在瓶底標(biāo)記試驗(yàn)代號(hào)，用滴管加1 ml純凈水于濾紙上，以保持皿內(nèi)的濕度；將鮮藍(lán)莓嫩葉片用清潔醫(yī)用紗布輕輕去除葉片表面的蠟質(zhì)，置于裝有處理藥劑燒杯中內(nèi)充分浸潤(rùn)5 s，每個(gè)燒杯內(nèi)放入20片經(jīng)處理后的嫩葉片。然后用鑷子將葉片取出放回培養(yǎng)皿，在通風(fēng)陰涼處放置2～3 h后，最后把葉片放入到玻璃飼養(yǎng)瓶中，并用毛筆每皿接30頭健康櫟黃枯葉蛾幼蟲，在瓶口上蓋罩1層紗網(wǎng)以防幼蟲逃逸。先處理空白對(duì)照，然后按試驗(yàn)設(shè)計(jì)濃度從低到高的順序重復(fù)上述操作，每處理3次重復(fù)。調(diào)查期間，及時(shí)給濾紙加水，保持濕度，并更換新鮮的嫩葉。處理后每隔5 d調(diào)查一次，分別記載各處理的死蟲數(shù)，活蟲與死蟲的鑒別以觸動(dòng)蟲體能否正常爬行為準(zhǔn)，非正常的即爬行不自然、半死、全死等個(gè)體均算為死亡個(gè)體。計(jì)算櫟黃枯葉蛾幼蟲死亡率、校正死亡率，并通過DPS數(shù)據(jù)分析軟件計(jì)算毒力回歸方程、LC50。

死亡率=死亡蟲數(shù)/供試蟲數(shù)×100%

校正死亡率=（處理組死亡率-對(duì)照組死亡率）/（100-對(duì)照組死亡率）×100%

2結(jié)果與分析

2.1幾種藥劑對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲感染癥狀

櫟黃枯葉蛾幼蟲被球孢白僵菌和綠僵菌感染后，幼蟲取食減少，蟲體反應(yīng)遲鈍，蟲體逐漸縮小，出現(xiàn)僵化現(xiàn)象，特色變褐色，幼蟲開始死亡，經(jīng)25 ℃保濕培養(yǎng)4～7 d后，蟲體長(zhǎng)出白色菌絲，繼續(xù)保濕培養(yǎng)，蟲體長(zhǎng)出白色菌絲，最后蟲體分別被白色和綠色分生孢子覆蓋，分生孢子最后均變成黑褐色；櫟黃枯葉蛾幼蟲被取食經(jīng)藜蘆堿處理的葉片后，幼蟲取食量減少，幼蟲身體來回翻滾扭曲，反應(yīng)興奮，最后出現(xiàn)僵化死亡現(xiàn)象；幼蟲被棉鈴蟲核型多角體病毒感染后，蟲體全身僵化而亡。

2.2幾種藥劑對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲校正死亡率的影響

從表1可知，球孢白僵菌、綠僵菌、藜蘆堿和棉鈴蟲核型多角體病毒4種生物藥劑對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲均有一定的殺蟲活性。通過DPS數(shù)據(jù)庫Duncan新復(fù)極差法分析，藥后2 d，0.004 00 g/ml藜蘆堿、0.020 00 g/ml綠僵菌和0.004 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒處理對(duì)幼蟲的校正死亡率最高，分別為7.12%、7.11%和6.74%，3個(gè)處理與其他處理呈極顯著差異；藥后8 d，校正死亡率達(dá)到50%以上的僅有0.020 00 g/ml球孢白僵菌，為51.11%，該處理與其他處理呈極顯著差異；藥后14 d，校正死亡率達(dá)到50%以上的有0.020 00 g/ml球孢白僵菌、0.020 00 g/ml綠僵菌、0.010 00 g/ml球孢白僵菌、0.004 00 g/ml藜蘆堿、0.010 00 g/ml綠僵菌和0.002 00 g/ml藜蘆堿，其校正死亡率分別為78.48%、72.53%、60.24%、58.74%、53.27%和50.36%。20個(gè)處理生物制劑對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲的毒力大小為：0.020 00 g/ml球孢白僵菌>0.02 000 g/ml綠僵菌>0.010 00 g/ml球孢白僵菌>0.004 00 g/ml藜蘆堿>0.010 00 g/ml綠僵菌>0.002 00 g/ml藜蘆堿>0.004 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.005 00 g/ml綠僵菌>0.002 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.001 00 g/ml藜蘆堿>0.001 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.002 50 g/ml綠僵菌>0.005 00 g/ml球孢白僵菌>0.000 50 g/ml藜蘆堿>0.000 50 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.001 25 g/ml綠僵菌>0.002 50 g/ml球孢白僵菌>0.000 25 g/ml藜蘆堿>0.000 25 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.001 25 g/ml球孢白僵菌。

表2表明，4種藥劑的LD50值表現(xiàn)為藜蘆堿（0.002 60 g/ml）﹤棉鈴蟲核型多角體病毒（0.004 60 g/ml） ﹤綠僵菌（0.008 30 g/ml） ﹤球孢白僵菌（0.008 50 g/ml）。其中，球孢白僵菌的LD50值是藜蘆堿的3.3倍。在所選試藥劑中，藜蘆堿對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲的毒力最高，球孢白僵菌和綠僵菌最低。

3結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過20個(gè)藥劑處理，生物藥劑對(duì)櫟黃枯葉蛾幼蟲作用緩慢，但作用時(shí)間長(zhǎng)。藥后14 d的校正死亡率達(dá)到50%以上的只有0.020 00 g/ml球孢白僵菌、0.020 00 g/ml綠僵菌、0.010 00 g/ml球孢白僵菌、0.004 00 g/ml藜蘆堿、0.010 00 g/ml綠僵菌和0.002 00 g/ml藜蘆堿，其中最高為0.020 00 g/ml球孢白僵菌（78.48%）和0.020 00 g/ml綠僵菌（72.53%），在藥后2～6 d內(nèi)0.004 00 g/ml藜蘆堿和0.004 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒校正死亡率與其他處理呈顯著差異。可見，藜蘆堿和棉鈴蟲核型多角體病毒在短時(shí)間內(nèi)就可以產(chǎn)生一定的毒力，而球孢白僵菌和綠僵菌可以長(zhǎng)時(shí)間對(duì)害蟲作用。而且同種藥劑不同處理的櫟黃枯葉蛾幼蟲校正死亡率基本隨著藥劑使用量的升高而上升，隨著處理時(shí)間的增加，其校正死亡率也上升。

LD50值的大小反映昆蟲對(duì)藥劑的敏感程度，LD50值越小，說明昆蟲對(duì)藥劑越敏感，即藥劑的毒力越大[5]。該研究表明，4種藥劑的毒力大小表現(xiàn)為藜蘆堿>棉鈴蟲核型多角體病毒>綠僵菌>球孢白僵菌。通過換算，球孢白僵菌、綠僵菌、棉鈴蟲核型多角體病毒和藜蘆堿的LD50值分別為1.7×108cfu/ml、1.66×108cfu/ml、9.2×106 PIB/ml和1.3×10-5 g/ml。由于外界生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，與室內(nèi)生態(tài)系統(tǒng)存在顯著差異，因而探索適合櫟黃枯葉蛾幼蟲防治的生物藥劑仍需進(jìn)一步田間防效研究，根據(jù)室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果，選擇4種生物藥劑均進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。在進(jìn)行田間噴藥時(shí)要注意噴灑均勻才能起到良好效果，宜在害蟲低齡幼蟲期使用，使用時(shí)要隨配隨用，配好的農(nóng)藥要一次用完，而且不能和殺菌劑混用，貯藏的地點(diǎn)要求陰涼、干燥，避免受潮[6-7]。

參考文獻(xiàn)

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責(zé)任編輯喬利利責(zé)任校對(duì)李巖