牛黃清感膠囊包衣粉末質(zhì)量控制研究

遆鐵軍 莊書蓓

（黑龍江省澳利達(dá)藥業(yè)股份有限公司）

黑龍江澳利達(dá)奈德制藥有限公司生產(chǎn)的牛黃清感膠囊具有疏風(fēng)解表，清熱解毒等功效，用于流感，上呼吸道感染，及風(fēng)熱感冒發(fā)熱，咳嗽，咽喉腫痛等癥，處方具有科學(xué)性合理性。牛黃清感膠囊被列入H1N1 甲型流感診療方案[1]，2013年又進(jìn)入了最新一批治療流感的國家基本藥物。由于長江以南地區(qū)氣候潮濕，經(jīng)常引起牛黃清感膠囊內(nèi)容物受潮結(jié)塊，影響產(chǎn)品質(zhì)量。根據(jù)牛黃清感膠囊標(biāo)準(zhǔn)，黃芩苷為定量控制指標(biāo)，本研究利用高效液相色譜法對(duì)經(jīng)粉末包衣工藝后牛黃清感膠囊定量分析方法[2]進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證[3]，以證明設(shè)定方法的可行性。

1 試驗(yàn)儀器與材料

1.1 儀器

美國TSP 高效液相色譜儀，美國 UV1000 紫外檢測器，CLASS-LC-10A 色譜工作站，BP-211D 電子天平，KQ-250DE 數(shù)控超聲波儀。

1.2 材料

黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)100150-201128），購自中國食品藥品檢定研究院。牛黃清感膠囊（批號(hào)130401、130402、130403，內(nèi)容物經(jīng)粉末包衣）由黑龍江澳利達(dá)奈德制藥有限公司提供，甲醇為色譜純，磷酸等試劑為分析優(yōu)質(zhì)純。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 試驗(yàn)條件的選擇

2.1.1 檢測波長的選擇 取黃芩苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶解，配成每1ml 中約含20μg 的溶液，于200~400nm 波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果表明在274nm±2 波長處有最大吸收。對(duì)三批樣品同法在200~400nm 波長范圍內(nèi)掃描，均在274nm±2 波長處有最大吸收，故以274nm 為本品測定波長。

2.1.2 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇：水：磷酸（40：60：0.2）為流動(dòng)相；檢測波長為274nm，流速0.8ml/min,進(jìn)樣量10μl。取黃芩苷的對(duì)照品，加40%甲醇溶液溶解后，配制配成每1ml 中約含20μg 的溶液，進(jìn)樣10μl 記錄色譜圖。黃芩苷保留時(shí)間為RT=10.443min，且主峰與各其它成分可獲得基線分離。

2.2 專屬性試驗(yàn)

按處方藥味的比例，配不含黃芩藥材的群藥，按工藝制成空白制劑，取空白制劑適量，制成本品陰性溶液，取本品陰性溶液，照液相色譜法含量測定項(xiàng)下配制一定的濃度，進(jìn)樣10ul，記錄色譜圖，結(jié)果表明，陰性溶液在于黃芩苷對(duì)照品相同保留時(shí)間處未顯色譜峰，故認(rèn)為無干擾。

2.3 線性關(guān)系試驗(yàn)

精密稱取黃芩苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶液在水浴上溶解后，放置室溫，用40%甲醇溶液稀釋成每1ml 含黃芩苷46.88μg，70.32μg，92.76μg，117.2μg，140.6μg的系列濃度溶液，分別精密吸取10μl 注入高效液相色譜儀，記錄峰面積。以黃芩苷峰面積（A）為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，（見表1）計(jì)算回歸方程為A=34874.1X-20978.6 ，r=0.9998。結(jié)果表明本品在濃度46.88μg/ml 至140.6μg/ml 范圍內(nèi)，黃芩苷峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。黃芩苷峰面積與濃度表

表一

2.4 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收法。精密稱取已知含量的同一批號(hào)的樣品（批號(hào)為130401，含量為22.44mg/粒）約0.3g，分別精密加入黃芩苷對(duì)照品溶液（2.367mg/ml）各10ml，測定含量并計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。

表二 加樣回收率結(jié)果

加入黃芩苷的量（mg） 24.67 24.67 24.67 24.67 24.67測得總量(mg) 47.38 47.32 48.87 48.10 46.92回收率(%) 97.30 98.86 98.14 97.89 100.2平均回收率(%) 98.90 RSD(%) 1.3

2.5 樣品測定結(jié)果

精密稱取黃芩苷對(duì)照品 (60℃減壓干燥恒重) 10mg，置100ml 量瓶中，加40%甲醇適量，置水浴中振搖，使溶解，放置至室溫，并稀釋至刻度，搖勻，得到對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本品約0.5g，研磨，精密稱定，置50ml 量瓶中，加適量的40%甲醇溶液，超聲處理20 分鐘，放置室溫后用40%甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置10 ml 量瓶中，加40%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，按外標(biāo)法計(jì)算出三批供試品中黃芩苷的含量。含量測定數(shù)據(jù)見表3。

表三 三批供試品黃芩苷含量

3 結(jié)論與討論

本研究利用中國藥典一部中的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則，對(duì)牛黃清感膠囊的包衣粉末進(jìn)行定量控制方法學(xué)初步研究，從試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以得出，用此方法控制包衣粉的質(zhì)量，操作簡便、方法可靠，有良好重現(xiàn)性。

根據(jù)方解，牛黃清感膠囊處方中人工牛黃為君藥，按照中藥制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)確定原則，應(yīng)制定含量指標(biāo)來控制制劑的質(zhì)量，比如測定膽酸或膽紅素的含量測定，這也會(huì)更直接的控制本制劑質(zhì)量。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部 關(guān)于印發(fā)《甲型H1N1 流感診療方案（2010 版）》的通知 衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)[2010]79 號(hào)

[2] 國家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)WS-10752（ZD-0752）-2002-2012Z-2013 牛黃清感膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理局 藥物穩(wěn)定性研究指導(dǎo)原則 中國藥典一部2010年版