枇杷香氣成分固相微萃取條件的正交試驗(yàn)優(yōu)化

陳薇薇，孫海艷*，蔣 赟，郝晨星，李曉林，郭啟高，何 橋，向素瓊，梁國(guó)魯*（西南大學(xué)園藝園林學(xué)院，重慶　400716）

枇杷香氣成分固相微萃取條件的正交試驗(yàn)優(yōu)化

陳薇薇，孫海艷*，蔣 赟，郝晨星，李曉林，郭啟高，何 橋，向素瓊，梁國(guó)魯*
（西南大學(xué)園藝園林學(xué)院，重慶400716）

探討頂空固相微萃取采集枇杷香氣的最優(yōu)條件，以紅肉枇杷“金華1號(hào)”為材料，采用正交試驗(yàn)研究萃取溫度、萃取時(shí)間、樣品量和萃取頭類(lèi)型4 個(gè)因素對(duì)枇杷香氣檢出峰數(shù)量和總峰面積的影響。以總峰面積為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，萃取條件最優(yōu)組合為萃取溫度50 ℃、萃取時(shí)間40 min、樣品量6 g和萃取頭類(lèi)型85 μm PA，但檢出峰數(shù)偏低。以檢出峰數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，在保證檢出峰數(shù)差異不顯著的前提條件下，選取總峰面積大的萃取條件作為最優(yōu)組合，即萃取條件的最優(yōu)組合為萃取頭類(lèi)型50/30 μm DVB/CAR/PDMS、萃取時(shí)間20 min、萃取溫度50 ℃、樣品量5 g。本研究共檢測(cè)到8 類(lèi)91 種香氣成分，其中醇類(lèi)物質(zhì)占17.6%；醛類(lèi)物質(zhì)占13.2%；酯類(lèi)物質(zhì)占24.2%；烷烴類(lèi)物質(zhì)占14.3% ；酮類(lèi)占9.9%；烯烴類(lèi)物質(zhì)占10.9%；酸類(lèi)物質(zhì)占6.6%；其他類(lèi)物質(zhì)3 種，占3.3%。

枇杷；固相微萃??；優(yōu)化；香氣

枇杷為薔薇科（Rosaceae）蘋(píng)果亞科（Maloideae）枇杷屬（Eriobotry japonica）植物，主要分布在東亞、東南亞等熱帶亞熱帶地區(qū)［1］，是世界上重要的常綠果樹(shù)之一。我國(guó)主要分布在長(zhǎng)江以南的浙江、安徽、江蘇和福建等省。枇杷成熟于初夏，果實(shí)甜酸適度，風(fēng)味獨(dú)特，肉質(zhì)細(xì)嫩，風(fēng)味鮮美，堪稱(chēng)果中珍品，深受人們喜愛(ài)。隨著市場(chǎng)對(duì)果品品質(zhì)的要求越來(lái)越高，人們也越來(lái)越關(guān)注果實(shí)風(fēng)味。而枇杷果實(shí)中香氣物質(zhì)的種類(lèi)和含量是構(gòu)成并影響其風(fēng)味品質(zhì)的重要因素之一。因此，香氣成分分析已成為枇杷果實(shí)成熟期品質(zhì)鑒別的重要研究?jī)?nèi)容之一。樣品中香氣成分的提取是進(jìn)行分析的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，已有研究提取揮發(fā)性成分多采用蒸汽蒸餾法［2-3］、有機(jī)溶劑萃取法［3-4］和動(dòng)態(tài)頂空法［4-5］等。固相微萃?。╯olid phase micro-extraction，SPME）法與傳統(tǒng)技術(shù)相比，適合萃取小分子質(zhì)量的揮發(fā)、半揮發(fā)性物質(zhì)，具有無(wú)需有機(jī)溶劑、所需樣品量少、靈敏度高、方便快捷等優(yōu)點(diǎn)［5-7］，并可以與氣相色譜（gas chromatography，GC）和高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）［8］等技術(shù)聯(lián)用進(jìn)行分離檢測(cè)，其中SPME-GC是研究最早、也是發(fā)展最成熟的一種聯(lián)用技術(shù)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于揮發(fā)性物質(zhì)研究領(lǐng)域［8-10］。如在油桃、杏、百香果、草莓、葡萄、楊梅等果實(shí)香氣物質(zhì)成分分析中已經(jīng)廣泛運(yùn)用［2，11-15］。SPME是采用針頭涂敷的吸附劑，對(duì)達(dá)到氣-液平衡的氣體化學(xué)成分進(jìn)行吸附，在GC高溫進(jìn)樣口解吸，通過(guò)質(zhì)譜（mass spectrometry，MS）分析即可定性和定量。但在萃取過(guò)程中，萃取量、萃取頭類(lèi)型、萃取溫度、萃取時(shí)間、加入的電解質(zhì)和pH值、試樣混合速率等都是影響萃取效果的重要因素［16-17］。然而，有關(guān)枇杷果實(shí)香氣固相微萃取條件的優(yōu)化鮮見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。因此，本研究采用多因素正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，綜合評(píng)價(jià)固相微萃取過(guò)程中的溫度、時(shí)間、樣品量和萃取頭類(lèi)型4 個(gè)因素對(duì)枇杷果肉香氣成分的檢出峰數(shù)和總峰面積的影響，篩選出最優(yōu)的萃取條件，為枇杷果實(shí)香氣組分的檢測(cè)及進(jìn)一步分析提供參考。

1　材料與方法

1.1材料

以西南大學(xué)選育的2014年通過(guò)重慶市農(nóng)作物新品種鑒定的紅肉枇杷“金華1號(hào)”的成熟果實(shí)為材料。

1.2儀器與設(shè)備

QP2010型GC-MS聯(lián)用儀、AOC-5000自動(dòng)進(jìn)樣裝置日本島津公司；3 種類(lèi)型萃取頭（85 μm聚丙烯酸酯（polyacrylate，PA）、65 μm聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯（polydimethylsiloxane/divinylbenzene，PDMS/ DVB）、50/30 μm二乙烯基苯/碳分子篩/聚二甲基硅氧烷（divinylbenzene/carboxen/polydimethylsiloxane，DVB/CAR/PDMS））美國(guó)Supelco公司；頂空進(jìn)樣瓶（20 mL）中國(guó)安普公司。

1.3方法

1.3.1樣品處理

將保存的樣品用液氮研磨至粉末狀，取適量樣品于20 mL頂空萃取瓶，加入5 mL飽和氯化鈉溶液，置于自動(dòng)萃取裝置的萃取盤(pán)，準(zhǔn)備進(jìn)樣。

1.3.2GC-MS操作條件

GC條件：色譜柱：Rtx-5MS（30 m×0.25 μm，0.25 mm）；升溫程序：初始溫度40 ℃，保持2 min，以3 ℃/min的速率升至150 ℃，保持1 min，再以10 ℃/min的速率升至220 ℃，保持1 min，最后以5 ℃/min的速率升至240 ℃保持2 min；載氣為氦氣，流速1 mL/min，恒線速率，進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣。

MS條件：離子源為電子電離（electron ionization， EI）源，離子源溫度230 ℃，接口溫度240 ℃，電子能量70 eV，掃描范圍m/z 35～350。

1.3.3正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取萃取過(guò)程中所涉及的4 個(gè)關(guān)鍵因素，包括萃取溫度、萃取時(shí)間、樣品量和萃取頭類(lèi)型。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)及前人單因素試驗(yàn)確定因素范圍［16-18］，并在每個(gè)因素內(nèi)設(shè)置3 個(gè)水平，以探尋最佳水平。試驗(yàn)共9 個(gè)處理，重復(fù)2 次，以檢出峰數(shù)和總峰面積為評(píng)價(jià)指標(biāo)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1　正交試驗(yàn)因素及水平Taabbllee 11 　FFaaccttoorrss aanndd lleevveellss uusseedd iinn oorrtthhooggoonnaall aarrrraayy eexxppeerriimmeennttss

1.3.4定性與定量分析

SPME采用自動(dòng)進(jìn)樣裝置，枇杷香氣成分分析采用GC-MS聯(lián)用儀。數(shù)據(jù)分析運(yùn)用計(jì)算機(jī)檢索并與圖譜庫(kù)（NIST 08）的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖對(duì)照，結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)，確認(rèn)香氣物質(zhì)的化學(xué)成分，按峰面積歸一化法算出樣品各個(gè)組分的相對(duì)含量。

1.4數(shù)據(jù)處理

對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果按有重復(fù)無(wú)交互作用資料做方差分析，檢驗(yàn)各因素對(duì)檢出峰數(shù)和檢出峰面積的影響。所有計(jì)算通過(guò)DPS數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)9.50完成。

2.1正交試驗(yàn)結(jié)果

2　結(jié)果與分析

表2　正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Taabbllee 22 　RReessuullttss aanndd aannaallyyssiiss ooff oorrtthhooggoonnaall aarrrraayy eexxppeerriimmeennttss

表3　色譜峰總峰面積方差分析Taabbllee 33 　AAnnaallyyssiiss ooff vvaarriiaannccee （AANNOOVVAA） ooff tthhee ttoottaall aarreeaass ooff GGCC ppeeaakkss

表 4　不同類(lèi)型萃取頭對(duì)總峰面積的多重比較TTaabbllee 44 　MMuullttiippllee ccoommppaarriissoonn ooff ppeeaakk aarreeaa aammoonngg ddiiffffeerreenntt ttyyppeess ooff extraction fi bbeerr

如表2所示，比較總峰面積極差（R）值得知，因素效應(yīng)順序?yàn)椋狠腿☆^類(lèi)型＞萃取溫度＞萃取時(shí)間＞樣品量，其中，85 μm PA檢出峰總峰面積高于其他2種萃取頭。對(duì)表2作方差分析，由表3可知，4 個(gè)因素中除不同萃取頭類(lèi)型間差異達(dá)極顯著外，萃取溫度、萃取時(shí)間和樣品量間差異均不顯著。不同萃取頭類(lèi)型的多重比較結(jié)果（表4）表明，85 μm PA和50/30 μm DVB/CAR/PDMS間差異顯著，但兩者與65 μm PDMS/DVB間差異達(dá)極顯著。不同處理間總峰面積的比較結(jié)果顯示（表2），3號(hào)處理總峰面積最大，除與1號(hào)處理間差異不顯著外，與其他7個(gè)處理均差異顯著。使用65 μm PDMS/DVB萃取頭的4、5、6號(hào)處理總峰面積普遍偏低，與另外2種萃取頭類(lèi)型的處理間差異顯著。由此可得檢出峰總峰面積的最優(yōu)萃取條件組合為萃取溫度50 ℃、萃取時(shí)間40 min、樣品量6 g、萃取頭類(lèi)型85 μm PA，即試驗(yàn)中的3號(hào)處理，2個(gè)重復(fù)峰面積總和為7.571×108。

表5　色譜檢出峰數(shù)方差分析Taabbllee 55 　AAnnaallyyssiiss ooff vvaarriiaannccee （AANNOOVVAA） ooff tthhee ttoottaall nnuummbbeerr ooff GGCC ppeeaakkss

表6　不同類(lèi)型萃取頭對(duì)檢出峰數(shù)的多重比較TTaabbllee 66 　MMuullttiippllee ccoommppaarriissoonn ooff ppeeaakk nnuummbbeerr aammoonngg ddiiffffeerreenntt ttyyppeess ooff extraction fi bbeerr

對(duì)檢出峰數(shù)影響最大的因素仍為萃取頭類(lèi)型，且遠(yuǎn)高于萃取溫度、萃取時(shí)間和樣品量。各處理檢出峰數(shù)的方差分析結(jié)果（表5）表明，萃取頭類(lèi)型對(duì)檢出峰數(shù)有極顯著影響（P＜0.01），而萃取時(shí)間、萃取溫度和樣品量影響不顯著。對(duì)萃取頭類(lèi)型進(jìn)一步多重比較，結(jié)果（表

6和表2）表明，采用65 μm PDMS/DVB和50/30 μm DVB/ CAR/PDMS萃取頭的處理出峰數(shù)差異不顯著，但都顯著高于使用85 μm PA萃取頭的處理組合。

2.2 枇杷香氣成分分析

表7　9 種正交試驗(yàn)組合枇杷香氣成分及其相對(duì)含量TTaabbllee 77 　AArroommaa ccoommppoonneennttss aanndd rreellaattiivvee ccoonntteennttss iinn llooqquuaatt ffrroomm nniinnee orthogonal array ruunnss

續(xù)表7

續(xù)表7

由表7可知，9種處理檢測(cè)出匹配度大于85%的香氣成分共8 類(lèi)91 種，其中醇類(lèi)物質(zhì)16 種，占17.6%；醛類(lèi)物質(zhì)12 種，占13.2%；酯類(lèi)物質(zhì)22 種，占24.2%；烷烴類(lèi)物質(zhì)13 種，占14.3%；酮類(lèi)9 種，占9.9%；烯烴類(lèi)物質(zhì)10 種，占10.9%；酸類(lèi)物質(zhì)6 種，占6.6%；其他類(lèi)物質(zhì)3 種，占3.3%。本研究中相對(duì)含量較高的為醛類(lèi)和酯類(lèi)類(lèi)物質(zhì)，醛類(lèi)主要為C6～C15的醛類(lèi)物質(zhì)，其中C8～C13的中級(jí)醛具有果香味，C6醛則是具有“青香型”的香氣物質(zhì)［19］；同時(shí)，酯類(lèi)物質(zhì)一般也具有使人愉快的水果香氣［20］。9 種處理香氣成分，僅有兩種共有成分癸醛和（E）-壬烯醛，處理4和處理5兩者的相對(duì)含量均在1%以上。

3　討論與結(jié)論

與單因素試驗(yàn)相比，正交試驗(yàn)具有工作量小、數(shù)據(jù)分析簡(jiǎn)便直觀、獲得信息豐富等特點(diǎn)，在化學(xué)分析條件的優(yōu)化中應(yīng)用價(jià)值很高［21］。本研究從3 個(gè)不同水平上系統(tǒng)比較了萃取溫度、萃取時(shí)間、樣品量和萃取頭類(lèi)型4 個(gè)因素對(duì)枇杷香氣成分分析中總峰面積和檢出峰數(shù)量的影響，對(duì)SPME條件進(jìn)行了優(yōu)化。綜合本研究的分析結(jié)果，萃取頭類(lèi)型對(duì)總峰面積和檢出峰數(shù)有極顯著的影響。以總峰面積為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，最優(yōu)萃取條件組合（3號(hào)處理）的總峰數(shù)則偏低。以檢出峰數(shù)為指標(biāo)評(píng)價(jià)時(shí)，由表2可知，處理4～9號(hào)的出峰總數(shù)較高，但差異不顯著，在保證檢出峰數(shù)差異不顯著的前提下，選取總峰面積大的萃取條件（7號(hào)處理）作為最優(yōu)萃取條件組合，即萃取頭類(lèi)型50/30 μm DVB/CAR/PDMS、萃取時(shí)間20 min、萃取溫度50 ℃、樣品量5 g。

本研究香氣成分分析結(jié)果共有8 類(lèi)91 種，其中醇類(lèi)物質(zhì)16 種，占17.6%；醛類(lèi)物質(zhì)12種，占13.2%；酯類(lèi)物質(zhì)22 種，占24.2%；烷烴類(lèi)物質(zhì)13 種，占14.3%；酮類(lèi)9 種，占9.9%；烯烴類(lèi)物質(zhì)10 種，占10.9%；酸類(lèi)物質(zhì)6 種，占6.6%；其他類(lèi)物質(zhì)3種，占3.3%。在所檢測(cè)到的91種物質(zhì)中，相對(duì)含量較高的的為酯類(lèi)和醛類(lèi)物質(zhì)，同時(shí)酯類(lèi)物質(zhì)和醛類(lèi)物質(zhì)的閾值很低，低達(dá)10－9級(jí)別［22］，由此可見(jiàn)，酯類(lèi)和醛類(lèi)物質(zhì)為枇杷的主要香氣成分。此外，盡管醇類(lèi)物質(zhì)的相對(duì)含量較低，但其閾值通常較高為10－6級(jí)別［22］，因此，醇類(lèi)物質(zhì)是否為枇杷的主要香氣成分有待進(jìn)一步驗(yàn)證。本研究中酮類(lèi)和烯烴類(lèi)物質(zhì)的相對(duì)含量較低，但其閾值也較低，大部分為10－9級(jí)別［23-27］，比如具有紫羅蘭花香的β-紫羅蘭酮香氣閾值為7 μg/L［28］，α-蒎烯香氣閾值為4.6 μg/L［23］，因此，酮類(lèi)和烯烴類(lèi)也為枇杷主要的香氣成分。與其他枇杷香氣成分研究相比，付婷婷［29］對(duì)大五星枇杷的香氣成分分析研究中共檢測(cè)到6 類(lèi)116 種香氣成分，含量最高的的為酯類(lèi)物質(zhì)，其次為醚類(lèi)和醇類(lèi)物質(zhì)，而本研究中，僅檢測(cè)到1 種醚類(lèi)物質(zhì)，且相對(duì)含量在0.525%～0.97%之間；在付婷婷的研究中還檢測(cè)到烷烴類(lèi)物質(zhì)的種類(lèi)和含量也很高，但該研究認(rèn)為烷烴類(lèi)物質(zhì)不構(gòu)成果實(shí)的香氣成分，未在文中列出。蔣際謀等［30］對(duì)香鐘枇杷和解放鐘枇杷及兩者雜交子代優(yōu)系果實(shí)的香氣成分分析研究中共檢測(cè)到了11 類(lèi)91 種香氣成分，含量最高的為萜類(lèi)物質(zhì)中的D-檸檬烯（62.59%～68.32%），其次為醛類(lèi)物質(zhì)；而本研究中萜類(lèi)物質(zhì)的含量則較低（0.5%～5.65%）。此外，Chen Faxing等［31］的研究報(bào)道了酮、酸、酸、烷類(lèi)為“早鐘6號(hào)”中含量最高的香氣成分。本研究與其他研究的差異可能與選用的品種、栽培條件等有關(guān)，同時(shí)也表明了枇杷果肉具有豐富的香氣成分。

［1］鄭永華， 席玙芳， 應(yīng)鐵進(jìn)， 等. 枇杷果實(shí)采后生理與貯藏研究［J］. 浙江林學(xué)院學(xué)報(bào)， 1993， 10（3）: 276-281.

［2］陳美霞， 陳學(xué)森， 馮寶春. 兩個(gè)杏品種果實(shí)香氣成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析［J］. 園藝學(xué)報(bào)， 2004， 31（5）: 663-665.

［3］陳美霞， 陳學(xué)森， 程傳格. 杏果實(shí)香氣成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析［J］.色譜， 2004， 22（6）: 665.

［4］涂正順， 李華， 李嘉瑞， 等. 獼猴桃品種間果香成分的GC-MS分析［J］.西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版， 2002， 30（2）: 96-100.

［5］MEJIAS R C， MARIN R N， MORENO M V G， et al. Optimisation of headspace solid-phase microextraction for analysis of aromatic compounds in vinegar［J］. Journal of Chromatography A， 2002， 953（1）: 7-15.

［6］王錫昌， 陳俊卿. 固相微萃取技術(shù)及其應(yīng)用［J］. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005， 13（4）: 348-352.

［7］牛麗影， 吳繼紅， 廖小軍， 等. 不同類(lèi)型橙汁揮發(fā)性風(fēng)昧成分的測(cè)定與比較［J］. 中國(guó)食品學(xué)報(bào)， 2008， 8（1）: 119-124.

［8］DU Liping， WANG Chao， LI Jianxun， et al. Optimization of headspace solid-phase microextraction coupled with gas chromatography-mass spectrometry for detecting methoxyphenolic compounds in Pu-erh tea［J］. Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2013， 61（3）: 561-568.

［9］PONTES M， MARQUES J C， CAMARA J S. Screening of volatile composition from Portuguese multifloral honeys using headspace solid-phase microextraction-gas chromatography-quadrupole mass spectrometry［J］. Talanta， 2007， 74（1）: 91-103.

［10］ 魏好程， 王貴禧， 梁麗松， 等. HS-SPME 在桃果實(shí)揮發(fā)性芳香物質(zhì)分析中應(yīng)用研究［J］. 食品科學(xué)， 2007， 28（7）: 347-351.

［11］ 韓素芳， 丁明， 劉亞群， 等. 頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定百香果香氣條件的優(yōu)化［J］. 中國(guó)食品學(xué)報(bào)， 2010， 10（4）: 278-284.

［12］ 胡玲， 王友升， 李麗萍. 油桃果實(shí)揮發(fā)性物質(zhì)的固相微萃取條件優(yōu)化研究［J］. 食品工業(yè)科技， 2010， 31（4）: 220-222.

［13］ VANDENDRIESSCHE T， NICOLAI B M， HERTOG M. Optimization of HS-SPME fast GC-MS for high-throughput analysis of strawberry aroma［J］. Food Analytical Methods， 2013， 6（2）: 512-520.

［14］ WANG Dong， CAI Jian， ZHU Baoqing， et al. Study of free and glycosidically bound volatile compounds in air-dried raisins from three seedless grape varieties using HS-SPME with GC-MS［J］. Food Chemistry， 2015， 177: 346-353.

［15］CHENG Huan， CHEN Jianle， LI Xin， et al. Differentiation of the volatile profi les of Chinese bayberry cultivars during storage by HSSPME-GC/MS combined with principal component analysis［J］. Postharvest Biology and Technology， 2015， 100: 59-72.

［16］ 楊大進(jìn)， 方從容， 王竹天. 固相微萃取技術(shù)及其在分析中的應(yīng)用［J］.中國(guó)食品衛(wèi)生雜志， 1999， 11（3）: 36-39.

［17］ 劉春紅. 固相微萃取技術(shù)及其在國(guó)內(nèi)食品領(lǐng)域中的應(yīng)用［J］. 生命科學(xué)儀器， 2007， 5（9）: 3-8.

［18］ 李國(guó)鵬. 中國(guó)梨果實(shí)揮發(fā)性物質(zhì)鑒定及酯類(lèi)物質(zhì)生物合成相關(guān)基因表達(dá)的研究［D］. 杭州: 浙江大學(xué)， 2012.

［19］ 席萬(wàn)鵬， 郁松林， 周志欽. 桃果實(shí)香氣物質(zhì)生物合成研究進(jìn)展［J］. 園藝學(xué)報(bào)， 2013， 40（9）: 1679-1690.

［20］ 盧靜茹， 林向陽(yáng)， 張如， 等. HS-SPME-GC-MS聯(lián)用分析美國(guó)巴旦木香氣成分［J］. 食品科學(xué)， 2015， 36（2）: 120-125. doi: 10.7506/ spkx1002-6630-201502023.

［21］ 李為爭(zhēng)， 柴曉樂(lè)， 付國(guó)需， 等. 肉桂揮發(fā)物頂空固相微萃取條件的正交優(yōu)化［J］. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011， 40（2） : 131-134.

［22］ ALVAREZ S， RIERA F A， ALVAREZ R， et al. A new integrated membrane process for producing clarifi ed apple juice and apple juice aroma concentrate［J］. Journal of Food Engineering， 2000， 46（17）: 109-125.

［23］ CZERNY M， CHRISTLBAUER M， FISCHER A， et al. Reinvestigation on odour thresholds of key food aroma compounds and development of an aroma language based on odour qualities of defined aqueous odorant solutions［J］. European Food Research and Technology， 2008， 228（2）: 265-273.

［24］ KARAGUL Y， VLAHOVICH K N， DRAKE M， et al. Characteristic aroma components of rennet casein［J］. Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2003， 51（23）: 6797-6801.

［25］ SEMMELROCH P， GROSCH W. Studies on character impact odorants of coffee brews［J］. Journal of Agricultural and Food Chemistry， 1996， 44（2）: 537-543.

［26］ 范剛， 喬宇， 姚曉琳， 等. 柑橘加工制品中香氣物質(zhì)的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009， 42（12）: 4324-4332.

［27］ BUTTERY R G， LING L C. Volatile flavor components of corn tortillas and related products［J］. Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2002， 43（7）: 1878-1882.

［28］ KANANI D M， NINHADE B P， BALAKRISHNAN P， et al. Recovery of valuable tea aroma components by pervaporation［J］. Industrial and Engineering Chemistry Research， 2003， 42（26）: 6924-6932.

［29］ 付婷婷. “大五星”枇杷采后低溫冷害及變溫處理效果的研究［D］.成都: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2011.

［30］ 蔣際謀， 胡文舜， 許奇志， 等. 枇杷品種香甜和解放鐘及兩者雜交子代優(yōu)系果實(shí)香氣成分分析［J］. 植物遺傳資源學(xué)報(bào)， 2014，15（4）: 894-900.

［31］ CHEN Faxing， LIU Xinghun， CHEN Lisong， et al. The determination of volatile constituents of loquat fruit and leaf by gas chromatographymass spectrometry coupled with solid-phase microextraction［C］//ⅢInternational Symposium on Loquat， Antakya， Hatay， Turkey. Leuven Belgium: J. Janick， A. Aytekin Polat， 2011: 369-372.

Orthogonal Array Optimization of Solid Phase Micro-Extraction Conditions for Loquat Aroma Compounds

CHEN Weiwei， SUN Haiyan*， JIANG Yun， HAO Chenxing， LI Xiaolin， GUO Qigao， HE Qiao， XIANG Suqiong， LIANG Guolu* （College of Horticulture and Landscape Architecture， Southwest University， Chongqing400716， China）

This study aimed to explore the optimal conditions of head space solid phase micro-extraction （HS-SPME） for the analysis of aroma compounds in “Jinhua 1” red-fl eshed loquats. An orthogonal array design was applied to establish the optimum conditions of extraction temperature， extraction time， sample weight and fi ber. The results showed that based on peak area， the optimal conditions were determined as follows: 6 g of sample was extracted at 50 ℃ for 40 min using an 85 μm PA fi ber， under which， however， a smaller number of peaks were separated， while those determined based on the total number of peaks without producing signifi cant differences in this parameter were determined as follows: 5 g of sample was extracted at 50 ℃ for 20 min using a 50/30 μm DVB/CAR/PDMS fi ber. A total of 91 aroma components were identifi ed in loquat， which belonged to eight chemical classes including alcohols （17.6%）， aldehyde （13.2%）， esters （24.2%）， alkane （14.3%）， ketone （9.9%）， olefi ns （10.9%）， acids （6.6%） and three other substances （3.3%）.

loquat； headspa ce-solid-phase micro extraction （HS-SPME）； optimization； aroma

S667.3

A

1002-6630（2015）24-0035-05

10.7506/spkx1002-6630-201524006

2015-05-26

“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2013BAD02B02）；中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)（XDJK2014D046；XDJK2015C054）；西南大學(xué)本科生創(chuàng)新基金項(xiàng)目（1319001）

陳薇薇（1990—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)楣麡?shù)遺傳育種與生物技術(shù)。E-mail：253482217@qq.com

孫海艷（1975—），女，助理研究員，博士研究生，研究方向?yàn)楣麡?shù)遺傳育種與生物技術(shù)。

E-mail：sunhaiyan1975@126.com

梁國(guó)魯（1960—），男，研究員，博士，研究方向?yàn)楣麡?shù)遺傳育種與生物技術(shù)。E-mail：lianggl@swu.edu.cn