倪興維,猶銀俊,王家明,謝愛紅,鄧 猛,蒙炳超,董保豫
(1.貴州省畜牧獸醫(yī)學(xué)校,貴州 貴陽 550018;2.黔南州動物疫病預(yù)防控制中心,貴州 都勻 558000;3.貴州省荔波縣動物疫病預(yù)防控制中心,貴州 荔波 558400)
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS),是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種急性接觸性傳染病。
2013年2月,本自治州某養(yǎng)豬場發(fā)生疑似PRRS病例,現(xiàn)將其診斷情況介紹如下。
1.1 病料 采自貴州省黔南州某養(yǎng)豬場發(fā)病豬扁桃體樣本共11份。
1.2 試劑 豬繁殖與呼吸綜合征和豬瘟RT-PCR檢測試劑盒,購自北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司(豬繁殖與呼吸綜合征RT-PCR檢測試劑盒:生產(chǎn)批號HPRRS20120531P,有效期20130513;豬瘟RTPCR檢測試劑盒:生產(chǎn)批號CSF20121130P,有效期20131130)。
2.1 流行病學(xué)調(diào)查 對該養(yǎng)豬場的疫苗免疫情況、發(fā)病情況、臨床癥狀及藥物治療等進行了解,記錄結(jié)果。
2.2 病理剖檢 選擇部分病死和臨床癥狀明顯的豬進行剖檢觀察,記錄結(jié)果。
2.3 RT-PCR方法 將采集的病豬扁桃體樣本按照說明書提取病毒RNA,并進行RT-PCR擴增,產(chǎn)物經(jīng)1.2%瓊脂糖凝膠電泳后于凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。
3.1 發(fā)病情況 該豬場現(xiàn)存欄數(shù)3000多頭,保育舍存欄斷奶仔豬530頭(發(fā)病欄),發(fā)病時仔豬已接種豬瘟、口蹄疫疫苗,但未接種豬繁殖與呼吸綜合征疫苗,于2013年2月1日-15日之間,全群相繼發(fā)病,發(fā)病率為100%,其中死亡398頭,死亡率為75.10%。曾對發(fā)病豬用抗原蟲類藥物、抗菌類藥物、抗病毒類藥物進行治療,均無療效。
3.2 臨床癥狀 發(fā)病豬體溫升高達41℃~42℃,眼結(jié)膜潮紅,眼瞼水腫,眼角處有褐色黏液,雙耳、腹部及全身呈現(xiàn)藍紫色斑塊,呼吸困難,寒顫發(fā)抖,運動失調(diào)、輕癱,食欲減退,有部分腹瀉、部分便秘。
3.3 病理變化 對5頭病死豬進行剖檢,病變主要為全身淋巴結(jié)不同程度腫大、出血,呈深淺不一的暗紅色;肺臟呈間質(zhì)性肺炎;心包積液,心肌表面有出血點;腎臟呈土黃色,有針尖狀點狀出血;胃、腸淋巴結(jié)腫大,胃腸道有出血點,腸系膜淋巴結(jié)呈條索狀,腫大、出血。
3.4 RT-PCR檢測
3.4.1 PRRS病原核酸RT-PCR檢測結(jié)果 結(jié)果如圖1,表明從病豬中可擴增出與陽性對照大小一致的條帶,初步證實存在豬繁殖與呼吸綜合征病毒的感染。
圖1 豬繁殖與呼吸綜合征病原RT-PCR擴增后電泳結(jié)果
3.4.2 豬瘟病原核酸RT-PCR檢測結(jié)果 結(jié)果如圖2,表明從病豬中可擴增出與陽性對照大小一致的條帶,初步證實存在豬瘟病毒的感染。
圖2 豬瘟病原RT-PCR擴增后電泳結(jié)果
4.1 我國于1995年底首次發(fā)現(xiàn)在華北地區(qū)發(fā)現(xiàn)豬繁殖與呼吸綜合征病例[1],隨后大部分地區(qū)都有發(fā)生和流行,成為威脅養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要疫病之一。本發(fā)病豬場感染率幾乎100%,出現(xiàn)全群感染現(xiàn)象,死亡率75%左右,給養(yǎng)殖戶造成了嚴重的經(jīng)濟損失。
4.2 有關(guān)研究表明,豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染宿主后,可攻擊并破壞巨噬細胞,侵害機體的免疫系統(tǒng),導(dǎo)致機體免疫機制受到嚴重抑制,免疫抵抗力降低,從而易繼發(fā)其他疫病的感染[2]。我們對該豬場病豬進行實驗室檢驗可見,共檢測扁桃體樣本11份,其中有3份同時檢測出PRRS和豬瘟核酸陽性,表明該病豬群存在PRRSV和豬瘟病毒的混合感染。從流行病學(xué)調(diào)查情況可見,該豬場豬群未曾進行豬繁殖與呼吸綜合征疫苗免疫,這與該豬場豬群發(fā)病存在直接的聯(lián)系。而該豬場的發(fā)病時間在豬瘟疫苗免疫后第32天,此時豬體內(nèi)存在有一定的豬瘟病毒抗體,其原發(fā)性感染豬瘟病毒可能性較低。此外,此時疫苗不會在豬體內(nèi)存在持續(xù)性感染,所檢測到的豬瘟抗原為感染病毒抗原,而不是疫苗產(chǎn)生的。結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查、病理剖檢和RT-PCR分子生物學(xué)檢測的結(jié)果,初步確診該病豬群為原發(fā)性PRRSV的感染,導(dǎo)致機體免疫力抵抗力降低,從而繼發(fā)性感染豬瘟病毒。因此,在規(guī)模養(yǎng)殖過程中,必須合理制定各種疫苗的免疫程序,減少疫病的發(fā)生和流行,減少所帶來的經(jīng)濟損失。
4.3 在PRRS感染的診斷中,以分子生物學(xué)檢測方法為載體的多種PCR檢測方法具有方便、省時、高特異性和敏感性等優(yōu)點而被廣泛應(yīng)用。本文中以PRRS和豬瘟病毒核酸RT-PCR方法為依據(jù),結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查和病理剖檢等方法對感染豬群進行最后診斷。
4.4 豬傳染病和流行過程中必須具備有傳染源、傳播途徑和易感動物(不同生豬發(fā)育階段的豬)3個基本條件,因此在制定相應(yīng)防治措施時必須要以控制傳染源、切斷傳播途徑和增強易感動物抵抗力為原則,在飼養(yǎng)過程中遵循“養(yǎng)重于防、防重于治、養(yǎng)防共舉”的綜合防制措施。
[1]郭寶清,陳章水,劉文興,等.從疑似PRRS流產(chǎn)胎兒分離PRRSV的研究[J].中國畜禽傳染病,1996,2:1-5.
[2]陳繼明.重大動物疫病監(jiān)測指南[M].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社,2008.