山羊初生羔羊骨軟癥血清指標(biāo)分析

王 文，王忠權(quán)，寸金全，李慶龍，文亦芾，姚新榮

（1.云南省種羊繁育推廣中心，云南 尋甸 655200；2.云南省尋甸縣功山鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)科，云南 尋甸 655208；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，云南 昆明 650000）

骨軟癥和佝僂病是幼畜鈣磷代謝破壞，骨組織形成破壞，骨骼變形為特征的慢性疾病，是羔羊常發(fā)病之一[1]，本場(chǎng)2012-2014年曾連續(xù)3年發(fā)生該病，對(duì)生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)造成一定損失。通過(guò)對(duì)初生羔羊骨質(zhì)鈣磷代謝疾病進(jìn)行血清檢測(cè)，結(jié)合臨床癥狀和治療效果，研究分析血清酶、蛋白質(zhì)和離子的活性及含量，為提高山羊繁殖效率和生產(chǎn)效益提供理論和實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與方法

血樣采自出生后3～6 d患病羔羊，臨床癥狀：精神委糜，食欲減退，嚴(yán)重者食欲廢絕，體溫39.0℃～39.7℃，喜臥，四肢無(wú)力，關(guān)節(jié)腫大、變形，行走蹣跚、步態(tài)不穩(wěn)，容易摔跤，個(gè)別前后肢呈O型或X型彎曲，嚴(yán)重者站立時(shí)四肢分開(kāi)、拱腰或無(wú)法站立。部分伴隨呼吸急促、喘氣、肌肉抽搐、異食、腹瀉等癥狀。絕大多數(shù)為同胞所產(chǎn)羔羊全部發(fā)病，且癥狀完全相同，后期病羔無(wú)力吃奶，昏迷臥地，衰竭而亡。血樣采自5個(gè)飼養(yǎng)組。

發(fā)病羔羊血樣送云南農(nóng)業(yè)大學(xué)疫病檢測(cè)中心檢測(cè)，治療后血樣送昆明某醫(yī)療檢測(cè)中心檢測(cè)。

肝腎功能檢測(cè)項(xiàng)目：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、堿性磷酸酶（ALP）、г-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽紅素（T-BIL）、直接膽紅素（D-BIL）。

血清離子檢測(cè)項(xiàng)目：鎂（Mg）、磷（P）、鈣（Ca）。

2 結(jié)果

2.1 患病羔羊血清檢測(cè) 轉(zhuǎn)氨酶存在于高等動(dòng)物肝細(xì)胞中，主要種類(lèi)為GPT和GOT，其活性在臨床上作為判斷肝功能正常與否的重要指標(biāo)[2]。與健康山羊參數(shù)值及其變異范圍相比較（表1），GPT和GOT均在正常異動(dòng)范圍之內(nèi)，且二者之比值在0.062～0.163之間，表明患病羔羊肝功能正常。

ALP在臨床醫(yī)學(xué)上主要用于骨骼、肝膽系統(tǒng)疾病的診斷，尤其是黃疸的鑒別診斷[3]。表1顯示，患病羔羊ALP活性為健康山羊的2～8倍，顯著高于正常水平。文獻(xiàn)報(bào)道，ALP活性升高有兩種情況：一為生理性增高，即動(dòng)物在生理性的骨骼發(fā)育期（兒童或幼畜期），ALP活力比成年高1～2倍；二為病理性升高，因患有骨骼疾病如佝僂病、軟骨癥，或肝膽疾病如肝外膽道阻塞、黃疸性肝炎等[2-4]。檢測(cè)結(jié)果表明，僅第4組ALP活性比正常值高出1倍，其他4組均高出正常值的3倍以上，因此，ALP活力升高可能屬于病理反應(yīng)。總膽紅素（T-BIL）是動(dòng)物膽汁中的主要色素，臨床上常作為判定黃疸的重要依據(jù)，也是肝功能的重要指標(biāo)[4-5]。檢測(cè)結(jié)果顯示，T-BIL均為0.00，表明肝臟無(wú)炎癥病變[6]。因此，可認(rèn)為ALP活性的升高則與骨骼代謝疾病有關(guān)。

γ-GT是動(dòng)物體內(nèi)谷胱甘肽代謝的一種相關(guān)酶，是肝膽疾病的診斷指標(biāo)之一。健康人的γ-GT活性為50 U/L左右，健康山羊的血清γ-GT參數(shù)無(wú)從查證，但據(jù)資料報(bào)道，阻塞性黃疸、原發(fā)性肝癌等疾病可使γ-GT活性大幅升高，表1γ-GT活性數(shù)據(jù)分析，應(yīng)屬正常變異范圍[6]。

表1 發(fā)病羔羊血清酶、蛋白質(zhì)和離子檢測(cè)結(jié)果

Mg是動(dòng)物體內(nèi)的重要陽(yáng)離子，其中約70%存在于骨骼和牙齒之中，25%存在于軟組織的細(xì)胞中[7]，缺Mg癥狀主要表現(xiàn)在初期食欲下降、行動(dòng)遲緩、嗜睡,隨之走步僵硬、步態(tài)搖晃、緊張易怒、肌肉顫抖，嚴(yán)重的造成癱瘓和痙攣，以至死亡[8]。表1顯示，血清中Mg的含量為0.03～0.09 mmol/L，約為健康山羊的1/20，顯著低于正常水平。

Ca和P是羊體內(nèi)含量最多的礦物質(zhì)，占礦物質(zhì)總量60%～70%，主要存在于骨骼和牙齒中。羊日糧中Ca和P適宜比為1.5∶1～2∶1[9]，Ca含量不足，相對(duì)較高的P會(huì)抑制Ca吸收，從而加劇家畜缺Ca[10]。高P可直接降低血Ca濃度并抑制甲狀旁腺素（PTH）介導(dǎo)的血Ca升高，引起甲狀旁腺功能亢進(jìn)及高轉(zhuǎn)運(yùn)型骨病，阻滯PTH及維生素D3在骨中的協(xié)同作用而導(dǎo)致Ca、P代謝失常，加重骨病[11]。表1顯示，發(fā)病羔羊血清中P含量為3.98～14.38 mmol/L，Ca含量為2.08～2.53 mmol/L，Ca∶P=1∶1.55到1∶5.89。血清Ca含量正常，但P含量顯著高于正常水平，Ca、P比例嚴(yán)重失調(diào)，代謝紊亂。

2.2 治療后羔羊血清檢測(cè) 按照骨軟癥和佝僂病進(jìn)行治療，補(bǔ)Ca、Mg、維生素A、D、E，硒（Se）以及對(duì)癥治療之后，羔羊血清檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。ALP活性雖然全部高于健康山羊參數(shù)上限，由于羔羊骨組織代謝旺盛，血清ALP活性在一定范圍內(nèi)升高屬正常現(xiàn)象。Ca、Mg離子含量正常，但由于設(shè)備原因不能檢出血清P含量，治療前后無(wú)法對(duì)比，深為遺憾。

3 討論

通過(guò)發(fā)病羔羊臨床癥狀、剖檢結(jié)果和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，綜合分析認(rèn)為：發(fā)病羔羊?yàn)槟阁w懷孕中后期補(bǔ)飼單一，營(yíng)養(yǎng)不平衡，導(dǎo)致母體和羔羊維生素、Mg等微量元素缺乏，Ca、P代謝障礙所引發(fā)的羔羊骨軟癥。以骨軟癥確定治療方案，治療原則：補(bǔ)Ca、Mg、維生素A、D、E，Se等。用藥：靜脈注射葡萄糖酸鈣、維生素C等，肌肉注射硫酸鎂、維生素A、D、E，亞硒酸鈉維生素E，對(duì)癥使用其他藥物。治療后癥狀消失，效果明顯，特別是早期發(fā)現(xiàn)，治愈率達(dá)95%以上。因此，就ATP、Ca、P、Mg 4項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行討論。

表2 按骨軟癥治療后羔羊血清酶、蛋白質(zhì)和離子檢測(cè)結(jié)果

3.1 血清ALP活性 ALP活性反映成骨細(xì)胞活性、骨生成狀況和Ca、P代謝等生化指標(biāo)。在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究中，血清ALP活性常作為重要的生化檢測(cè)指標(biāo)協(xié)助評(píng)定日糧Ca、P水平的適宜程度[4]。動(dòng)物疾病診斷上，國(guó)內(nèi)外研究一致認(rèn)為骨型ALP是反映骨質(zhì)改變?nèi)^(guò)程最正確的指標(biāo)，其特異性、靈敏度及準(zhǔn)確性?xún)?yōu)于其他檢測(cè)[4]。血清ALP活性升高成為診斷骨質(zhì)疾病的重要臨床病理學(xué)依據(jù)[1]。在骨代謝旺盛時(shí)期，成骨細(xì)胞活躍，ALP分泌量增加，血清ALP活性上升，因此，未成熟動(dòng)物的血清ALP活性高于成年動(dòng)物，動(dòng)物年齡越小，骨骼生長(zhǎng)越旺盛，血清ALP活性越高。

血清ALP活性升高與日糧中維生素K、維生素D水平有關(guān)，其缺乏會(huì)導(dǎo)致血清ALP活性升高[12]；日糧Ca、P水平對(duì)血清ALP活性有顯著影響。病理狀態(tài)下，骨骼代謝障礙，ALP活性增加。綜合上述，除肝臟疾病外，凡導(dǎo)致血清ALP上升的因素均可引起骨軟癥和佝僂病的發(fā)生。

山羊羔羊正常ALP活性參數(shù)無(wú)從查證，資料報(bào)道，初生幼畜血清ALP活性是成年家畜的2～3倍[2]。據(jù)此分析，4組羔羊ALP活性為成年山羊的3倍以上，所以，初步認(rèn)為羔羊ALP活性高出其正常生理范圍，此即為骨軟癥的病理依據(jù)。

3.2 血清離子含量 動(dòng)物血清Ca、P比為2∶1[10]，如飼料Ca、P比例失調(diào)，導(dǎo)致Ca、P代謝障礙，是骨軟癥的重要誘因之一。精飼料富含P，粗飼料富含Ca，偏飼即會(huì)引起某種成分不足或過(guò)多，母羊妊娠后期、哺乳期或初生羔羊，機(jī)體對(duì)Ca、P的需求量增大，若日糧供應(yīng)不足，最易引起骨軟癥[7]。母乳維生素D不足，可造成羔羊后天性骨骼發(fā)育不全[12]。

低血Mg可引起病畜抽搐，治療不及時(shí)會(huì)導(dǎo)致死亡[7]，乳汁中Mg不足，導(dǎo)致發(fā)病羔羊血清Mg含量低，推斷其骨組織Mg含量顯著低于正常水平。

發(fā)病羔羊出現(xiàn)嚴(yán)重骨質(zhì)軟化和關(guān)節(jié)變形，而血清Ca仍然正常，可能與血液Ca的代謝和調(diào)節(jié)機(jī)制有關(guān)。當(dāng)動(dòng)物由飼料中吸收的Ca、P不能滿足其代謝需要時(shí)，只要調(diào)節(jié)機(jī)能正常，血清中的Ca離子濃度仍能維持在正常范圍內(nèi)，因?yàn)榇藭r(shí)機(jī)體動(dòng)員骨Ca來(lái)維持血Ca濃度的正常[7]。所以，有時(shí)血清Ca、P正常，而骨組織Ca、P的動(dòng)用和溶骨作用，會(huì)導(dǎo)致骨質(zhì)疏松軟化、關(guān)節(jié)腫大變形，發(fā)生骨軟癥。因此，骨軟癥的發(fā)生，多種因素交互作用，相互影響，互為因果，必須通過(guò)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和治療效果綜合判斷，全面分析。

3.3 發(fā)生規(guī)律 山羊繁殖為兩年3胎，平均每胎2只羔羊，成年母羊幾乎全年處于懷孕或哺乳期，營(yíng)養(yǎng)消耗極大，盡管日糧營(yíng)養(yǎng)較高，但養(yǎng)分不平衡卻難以避免。大多數(shù)同胞羔羊同時(shí)發(fā)病，證明了羔羊與母體營(yíng)養(yǎng)之間的聯(lián)系。此外，發(fā)病均在青綠飼料貧乏季節(jié)，人工補(bǔ)飼存在種類(lèi)單一、營(yíng)養(yǎng)不平衡或礦物質(zhì)維生素不足，母體營(yíng)養(yǎng)不平衡導(dǎo)致乳汁營(yíng)養(yǎng)不全，母乳作為初生羔羊攝取營(yíng)養(yǎng)的惟一來(lái)源，影響羔羊血液成分的變化和Ca、P代謝。

4 結(jié)論

羔羊骨軟癥血清檢測(cè)的主要特征為：ALP活性顯著升高；Ca、P比例失調(diào)；Mg離子含量下降?？莶菁竟?jié)補(bǔ)飼種類(lèi)單一、營(yíng)養(yǎng)不平衡、維生素添加劑效價(jià)低等是導(dǎo)致羔羊骨軟癥的主要原因。

[1]俞乃勝.山羊疾病學(xué)[M].昆明：云南人民出版社，2007.

[2]盧宗藩.家畜及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理生化指標(biāo)[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，1983：11.

[3]王秋穎.堿性磷酸酶特性及其應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2011，38（1）：157-160.

[4]王石瑩，閆素梅.堿性磷酸酶在動(dòng)物骨骼代謝中的研究進(jìn)展[J].飼料博覽，2009，2：14-17.

[5] 陳杰.家畜生理學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2003：6.

[6]李麗，劉文亮，張彩寧，等.54例病理性黃疸患兒γ-谷氨酰氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（15）：1900-1901.

[7] 周順伍.動(dòng)物生物化學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2008：4.

[8]楊冬梅，薛立群，李俊年，等.鎂的生物功能和草食動(dòng)物鎂缺癥綜述[J].吉首大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，29（6）：101-103.

[9]岳文斌.羊場(chǎng)畜牧師手冊(cè)[M].北京：金盾出版社，2008.

[10]李莉，俞紅賢，沈明華.不同發(fā)育期牦牛血清鈣、無(wú)機(jī)磷和堿性磷酸酶的測(cè)定及分析[J].青海大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，25（1）：70-72.

[11]郭虹，余開(kāi)惠，王柏青，等.血清骨鈣素在高轉(zhuǎn)運(yùn)型骨病診斷中的意義[J].臨床軍醫(yī)雜志，2007，30（5）：647-649.

[12]王松艷，黎海芪，楊錫強(qiáng)，等.維生素D和鈣缺乏對(duì)中雞骨骼發(fā)育的影響[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，24（2）：141-145.