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    氣相色譜-質(zhì)譜法結(jié)合保留指數(shù)分析鴨兒芹不同部位揮發(fā)油成分

    2015-08-05 04:50:38胡思一包箐箐韓安榜林崇良溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院浙江溫州35035溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院浙江溫州35035
    藥學(xué)實(shí)踐雜志 2015年3期
    關(guān)鍵詞:單萜倍半萜類化合物

    胡思一,包箐箐,韓安榜,向 錚,林崇良(.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院,浙江 溫州 35035;.溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,浙江 溫州 35035)

    鴨兒芹(Cryptotaenia japonica Hassk)為傘形 科植物,主要分布于河北、甘肅、浙江、廣西、云南等16個(gè)省區(qū),夏、秋間采收。有關(guān)鴨兒芹入藥多見于地方中草藥手冊,《中藥大辭典》則將其莖葉、根、果實(shí)分別以鴨兒芹、鴨兒芹根、鴨兒芹果分列,2010年版《中華人民共和國藥典》未曾收載,屬于民間習(xí)用尚無標(biāo)準(zhǔn)的草藥。鴨兒芹具有消炎、解毒、活血、消腫的功效,主治肺炎、肺膿腫、淋病、疝氣、風(fēng)火牙痛、癰疽疔腫、帶狀皰疹、皮膚瘙癢;鴨兒芹根發(fā)表散寒、止咳化痰,治風(fēng)寒感冒、水嗆咳嗽、跌打損傷。鴨兒芹果實(shí)消積順氣,治食積[1];全草有特殊香氣,含揮發(fā)油。瞿萬云等[2]對湖北恩施鴨兒芹根、莖、葉,李娟等[3]對廣西鴨兒芹根、莖、葉揮發(fā)油成分進(jìn)行分析,但均未見利用GC-MS并結(jié)合Kovats保留指數(shù)對鴨兒芹根、莖、葉及果實(shí)的揮發(fā)油成分分析的報(bào)道。為了深入了解鴨兒芹不同部位所含揮發(fā)油化學(xué)成分,本研究采用水蒸氣蒸餾法分別提取鴨兒芹根、莖、葉、果實(shí)揮發(fā)油成分,利用GC-MS并結(jié)合Kovats保留指數(shù)對其主要成分進(jìn)行分析。

    1 實(shí)驗(yàn)

    1.1 儀器與材料 揮發(fā)油提取裝置,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀BUCH1-CH-0230(瑞士 BUCHI公司),美國 Agilent6890N型氣相色譜與Agilent5975B質(zhì)譜儀聯(lián)用及工作站。樣品2011年8月4日采自浙江省文成縣銅鈴山國家森林公園,經(jīng)溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院林崇良副主任中藥師鑒定為傘形科植物鴨兒芹全草;無水硫酸鈉(AR);正構(gòu)烷烴混合對照品C8~C40(美國Accu Standard公司)。

    1.2 揮發(fā)油的提取 將鮮鴨兒芹全草分為根、莖、葉、果實(shí)4部分,分別洗凈剪碎,各取200g置于1 000ml的圓底燒瓶中,加入適量沸石和800ml蒸餾水,連續(xù)緩慢蒸餾提取5h。取上層精油,經(jīng)無水硫酸鈉干燥過濾,所得精油用乙酸乙酯稀釋后進(jìn)樣。

    1.3 GC-MS分析 將提取的鴨兒芹各部位揮發(fā)油用GC-MS儀分析,色譜條件:色譜柱為 HP-5MS 5%Phenyl Methyl Siloxane (30m×0.25mm,0.25μm);載氣為高純He,載氣流速為1.0ml/min,分流比20∶1;升溫程序?yàn)椋褐鹗紲囟?5℃,保持2min,以5℃/min升溫到300℃,保持2min;進(jìn)樣口溫度為250℃,進(jìn)樣量1μl。質(zhì)譜條件:離子源EI源,電子能量70eV,離子源溫度為280℃,四級(jí)桿溫度為150℃,溶劑延遲為5.0min,掃描質(zhì)量范圍50~550amu,掃描方式:全掃描。GC-MS定性基于NIST05質(zhì)譜庫。

    1.4 Kovats保留指數(shù)(KI值)計(jì)算 采用文獻(xiàn)介紹保留指數(shù)法進(jìn)行揮發(fā)性成分定性分析是可靠的方法,它是將正構(gòu)烷烴的保留指數(shù)定為它的碳數(shù)乘以100,待測物的保留指數(shù)則用適當(dāng)?shù)恼龢?gòu)烷烴的保留值來表示,通常測定某組分X的保留指數(shù)時(shí),選取兩個(gè)相鄰的正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)物,其中一個(gè)碳數(shù)為Z,另一個(gè)為(Z+1),其凈保留時(shí)間為tR(Z),tR(Z+1),待測物的調(diào)整保留時(shí)間為tR(x),其恰處于兩者之間,即:tR(Z)≤tR(X)≤tR(Z+1)。取正構(gòu)烷烴混合對照品按“1.3”項(xiàng)下條件進(jìn)樣1μl分析,用于揮發(fā)油中各組分的KI值計(jì)算;記錄不同條件下各正構(gòu)烷烴保留時(shí)間,采用線性升溫公式計(jì)算各組分的KI值,由下式可計(jì)算組分的保留指數(shù):

    2 結(jié)果與討論

    2.1 定性分析結(jié)果 按“1.3”項(xiàng)下分析條件,分別對鴨兒芹根、莖、葉、果實(shí)的揮發(fā)性成分進(jìn)行GC-MS分析。鴨兒芹揮發(fā)油總離子流圖見圖1。對總離子流圖中各峰的質(zhì)譜圖進(jìn)行NIST05質(zhì)譜庫檢索,選取質(zhì)譜匹配度高的前10個(gè)可能物質(zhì),計(jì)算其 KI值,并與NIST05質(zhì)譜庫KI值檢索結(jié)果相比較,以質(zhì)譜和KI值匹配度最高的化學(xué)結(jié)構(gòu)為最佳鑒定結(jié)果。從鴨兒芹根鑒定出28個(gè)化合物,占總離子峰的86.66%;從鴨兒芹莖鑒定出27個(gè)化合物,占總離子峰的88.01%;從鴨兒芹葉鑒定出27個(gè)化合物,占總離子峰的94.03%;從鴨兒芹果實(shí)鑒定出26個(gè)化合物,占總離子峰的88.32%。

    圖1 鴨兒芹不同部位GC-MS總離子流圖

    2.2 化學(xué)成分的百分比含量分析 通過HP MSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),按離子流色譜峰面積歸一化法,求得揮發(fā)油中各化學(xué)成分的相對百分含量列于表1。

    3 討論

    3.1 本次實(shí)驗(yàn)從鴨兒芹各部位共分析出35種揮發(fā)性化合物,其中22種化合物是各部位共有,化合物19、23只存在鴨兒芹根揮發(fā)油,香樹烯、化合物25、紅沒藥醇只存在鴨兒芹果實(shí)揮發(fā)油,各部位所含化合物種類及相同化合物的含量有一定差異。鴨兒芹根倍半萜類化合物占總揮發(fā)油的81.53%,單萜類化合物占總揮發(fā)油的5.14%;鴨兒芹莖倍半萜類化合物占總揮發(fā)油的81.71%,單萜類化合物占總揮發(fā)油的6.30%;鴨兒芹葉倍半萜類化合物占總揮發(fā)油的86.91%,單萜類化合物占總揮發(fā)油的5.575%;鴨兒芹果實(shí)倍半萜類化合物占總揮發(fā)油的80.90%,單萜類化合物占總揮發(fā)油的7.429%。

    表1 鴨兒芹各部位揮發(fā)油的化學(xué)成分

    3.2 本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,鴨兒芹揮發(fā)油含有多種生理活性物質(zhì),單萜類成分β-蒎烯、α-蒎烯、β-月桂烯有鎮(zhèn)咳祛痰、抗真菌作用;D-檸檬烯有抗癌作用且能抑制膽固醇合成[4];倍半萜類成分β-欖香烯有抗腫瘤作用[5];石竹素具抗腫瘤、解痙、抗瘧疾、抗菌等作用;α-石竹烯、α-細(xì)辛腦具有平喘作用,后者又能止咳、祛痰、鎮(zhèn)靜、解痙、抗驚厥、抗癲癇[6];單環(huán)不飽和倍半萜醇類紅沒藥醇具有消炎作用。鴨兒芹具特殊香氣,其諾卡酮、β-石竹烯、β-蒎烯、α-蒎烯、β-月桂烯、金合歡烯、反式-橙花叔醇等是其主要香氣成分,常作為香料和香料中間體。

    3.3 將本實(shí)驗(yàn)研究用鴨兒芹與廣西產(chǎn)鴨兒芹及湖北恩施產(chǎn)鴨兒芹的揮發(fā)性成分進(jìn)行比較[2,3],發(fā)現(xiàn)3個(gè)產(chǎn)地鴨兒芹揮發(fā)油成分種類及含量有較大差異,如瞿萬云等對湖北恩施鴨兒芹根、莖、葉揮發(fā)性化學(xué)成分的研究鑒定出17種化合物,李娟等對廣西鴨兒芹根、莖、葉揮發(fā)油的化學(xué)成分分析鑒定出根11種、莖25種、葉18種化合物,根、葉主要成分為倍半萜,單萜含量很低,莖中主要成分為單萜。分析可能有以下原因:首先,采收季節(jié)不同;其次產(chǎn)地不同,生長環(huán)境差異。

    [1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(下冊)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1986:1842-1843.

    [2]瞿萬云,楊春海,余愛農(nóng),等.鴨兒芹揮發(fā)性化學(xué)成分的研究[J].精細(xì)化工,2003,20(7):416-418.

    [3]李 娟,蔣小華,謝運(yùn)昌,等.鴨兒芹根、莖、葉揮發(fā)油的化學(xué)成分[J].廣西植物,2011,31(6):853-856.

    [4]徐耀庭,李勁松,顧 煒,等.D-檸檬烯誘導(dǎo)人膀胱癌細(xì)胞周期阻滯及凋亡的研究[J].中國醫(yī)學(xué)工程,2010,18(3):6-9.

    [5]項(xiàng) 峰.欖香烯乳藥理作用及臨床應(yīng)用[J].張家口醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1998,15(3):104-107.

    [6]韓 琳,湯道權(quán).α-細(xì)辛腦的抗驚厥、抗癲 作用研究[J].井岡山醫(yī)專學(xué)報(bào),2009,16(6):9-10.

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