不同草蓯蓉提取物中化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展

馬茜茜　元海丹　葉利等

摘要草蓯蓉（Boschniakia rossica）為列當(dāng)科植物，具有抗腫瘤、抗肝損傷、增強免疫力、抗炎、抗疲勞等多種生物活性。在此主要對不同草蓯蓉提取物中化學(xué)成分及其藥理作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以便為草蓯蓉的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞草蓯蓉；提取物；化學(xué)成分；藥理作用；研究進(jìn)展

中圖分類號S567文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2015）07-011-04

草蓯蓉 Boschniakia rossica （ Fedtsch et Flerov） 為列當(dāng)科草蓯蓉屬寄生肉質(zhì)草本植物[1]，主要分布在我國黑龍江、吉林和內(nèi)蒙古地區(qū)，在朝鮮、日本和蘇聯(lián)的西伯利亞地區(qū)也有分布。草蓯蓉是傳統(tǒng)的中藥材，其化學(xué)成分比較復(fù)雜，通過不同的溶劑提取能夠得到不同的組分。為了合理有效地利用中藥資源，需要掌握其有效成分及相關(guān)的藥理作用，從而選擇合適的提取溶劑和提取方法。筆者在此主要對國內(nèi)外有關(guān)草蓯蓉不同溶劑提取物的化學(xué)成分和藥理作用等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1草蓯蓉水提取物的化學(xué)成分及藥理作用

Shyr等從草蓯蓉的水溶液中分離得到草蓯蓉苷A （Rossicaside A）、草蓯蓉苷B （Rossicaside B）、草蓯蓉苷E （Rossicaside E）、草蓯蓉苷F （Rossicaside F）、rossicasin A、rossicasin B、trans-p-coumaryl alcohol-O-β-D-glucopyranosyl （1→4）-α-L-rhamnopyranosyl （1→3）-β-D-glucopyranoside和β-D-glucopyranosyl（1→4）-α-L-rhamnopyranosyl-（1→3）-D- （4-O-caffeoyl）-glucopyranose等8種化學(xué)成分[2]。李樹殿等用水從草蓯蓉的根莖葉中提取的還原糖和總糖的含量平均值分別為9.52%和40.60%[3]。

Zhao等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉水溶性組分能夠降低由于四氯化碳引起的小鼠急性肝損傷的肝臟氧化應(yīng)激壓力，且顯著降低血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）的活性，并減少肝臟丙二醛（MDA）在肝線粒體中的含量；增加超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）、肝臟中谷胱甘肽的含量，增強Na+-k+轉(zhuǎn)換酶和Ca2+-Mg2+轉(zhuǎn)化酶在肝線粒體中的活性，從而顯示出它對由于四氯化碳引起的小鼠急性肝損傷起到了保護(hù)作用[4]。于慶海等分析發(fā)現(xiàn)草蓯蓉水煎服劑能抑制大鼠肝勻漿過氧化脂質(zhì)的生成，延長小鼠抓棒時間，抑制角叉柴膠導(dǎo)致的大鼠足腫脹，增強小鼠的耐缺氧能力，達(dá)到抗脂質(zhì)過氧化、抗炎、抗疲勞的作用[5]。

付艾妮等研究了草蓯蓉水提取物對AD大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響機制，在此試驗中，模型組的小膠質(zhì)細(xì)胞胞體增大， 突起縮短，染色增強，與正常組和假手術(shù)組的相比差異顯著；經(jīng)過草蓯蓉提取物治療后胞體變小，染色強度減弱，數(shù)量較模型組顯著減少，且以高劑量組最佳；由此推斷，草蓯蓉水提取物對 AD 模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改善可能通過阻抑腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞的活化來實現(xiàn)[6]。

Wang等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉的水提取物通過高效凝膠滲透色譜柱（HPGEC）純化得到的多糖和5-氟尿嘧啶表現(xiàn)出了抗癌的協(xié)同作用，它能有效抑制S-180荷癌小鼠的生長，呈劑量依賴性地增長脾臟指標(biāo)；同時，用草蓯蓉和5-氟尿嘧啶一起處理過的荷癌小鼠能提高各種免疫作用，如促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，提高NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，增強免疫血清中IL-2和TNF-γ的分泌[7]。Quan等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉的水提取多糖部分對半乳糖胺和脂多糖誘導(dǎo)的急性肝衰竭起到了保護(hù)作用；試驗發(fā)現(xiàn)，預(yù)先處理過的小鼠的肝壞死程度、血清標(biāo)記酶、腫瘤壞死因子（factor-α）和白細(xì)胞介素- 6水平均顯著降低，從而使半乳糖胺/脂多糖造成的肝損傷通過增強抗氧化防御系統(tǒng)，抑制炎癥反應(yīng)，減少凋亡信號，使肝損傷得到緩解[8]。

2草蓯蓉乙醇提取物的化學(xué)成分及藥理作用

吳春華等用75%乙醇分離出的苯丙素苷類物質(zhì)中除了有草蓯蓉苷A （Rossicaside A）、草蓯蓉苷B （Rossicaside B）、草蓯蓉苷C（Rossicaside C）、草蓯蓉苷D（Rossicaside D）、草蓯蓉苷E（Rossicaside E），還提取得到了草蓯蓉苷G（Rossicaside G）、草蓯蓉苷H（Rossicaside H）、草蓯蓉苷I（Rossicaside I）、草蓯蓉苷J(rèn)（Rossicaside J）、草蓯蓉苷K（RossicasideK）、trans-p-coimarylalcohol1-O-β-glucopyranosy（1→4）-α-rhamnopyranosyl（1→3）-β-glucopyranside[9-10]。Wu等通過試驗分離得到了紅景天苷I （salidroside I）、紅景天苷（salidroside）、類葉升麻苷（acetoside）、trans-p-coimaryl-（2'-O-β-D-glucopyranosyl）-β-D-glucopyranside[11]；吳春華等從草蓯蓉75%乙醇提取物中分離得到了β-D-glucopyranose 1-（3，7-dimethyl）-2-trans-6-octa-dienoate和6，7-dihydrofoliamenthoic acid diglucoside 2種單萜苷類化合物[12]。Yim等也先后分離出7-methyl-octahy-drocyclopenta[c] pyran-4-carboxylic acid、（1R）-1-O-methyl-8-epideoxyloganic acid aglycone、（1S）-1-O-methyl-8-epideoxyloganic acid aglycone、1，10-bisdeoxy-7， 8-dihydrogenipin、3α-乙?；R墩果（3-epiacetyloleanolic acid）、齊墩果酸（oleanolic acid）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、boschnaloside、胡蘿卜苷（daucosterin）等萜類物質(zhì)[13-15]。

Lin等用95%乙醇分離出萜類物質(zhì)boschnaloside、7-deoxy-8-epiloganic acid[14]；易以軍等分離出4， 5， 6-三羥基噢酮（4， 5， 6-trihydroxy-aurone）、咖啡酸（caffeic acid）、肉桂酸（cinnamic acid）、沒食子酸（gallic acid）4種酚酸[16]。

近些年的研究表明，草蓯蓉乙醇提取物的保肝作用顯著。草蓯蓉乙醇提取物能抑制大鼠肝星狀細(xì)胞株（HSC-T6）細(xì)胞增殖，抑制HSC-T6細(xì)胞培養(yǎng)液中HA及Ⅳ型膠原的產(chǎn)生并表現(xiàn)出濃度、時間依賴性關(guān)系[17-19]。觀察發(fā)現(xiàn)草蓯蓉乙醇提取物作用于HSC-T6細(xì)胞后呈現(xiàn)出典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)改變，檢測細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡率的變化后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)草蓯蓉乙醇提取物處理后的大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）被阻滯于G0/G1期，細(xì)胞凋亡率上升，并隨藥物濃度的升高呈增高趨勢，因此了解到草蓯蓉乙醇提取物通過此機制治療肝纖維化[17-19]。張煒煜等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉乙醇提取物能下調(diào)肝組織細(xì)胞色素P4502E1（CYP 2E1）表達(dá)和血清腫瘤壞死因子（TNF-α）；對大鼠NAFLD肝組織α-平滑肌激動蛋白（α-SMA）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）及組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）的表達(dá)有抑制作用，說明草蓯蓉乙醇提取物有抗非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）纖維化的作用[20]。Quan等在2009年對草蓯蓉90%乙醇提取物得到的Rossicaside B進(jìn)行了研究，在2011年對草蓯蓉90%乙醇提取物（其富含苯丙素苷和環(huán)烯醚萜葡萄糖苷）進(jìn)行了更深入的研究，從而發(fā)現(xiàn)這些成分通過減少氧化應(yīng)激、抑制炎癥反應(yīng)和誘導(dǎo)HO-1蛋白表達(dá)結(jié)合，并改進(jìn)肝CYP2E1水平和功能對氯仿（CCl4）引起的肝損傷起到預(yù)防保護(hù)作用[21-22]。

草蓯蓉乙醇提取物有抗脂質(zhì)過氧化的活性，而脂質(zhì)過氧化與許多慢性疾病有關(guān)，如動脈粥樣硬化、癌變和衰老，從而說明了草蓯蓉的乙醇提取物在這些方面有潛在的藥用價值。李勇用高養(yǎng)法建立兔高血脂癥的模型，飼喂草蓯蓉乙醇提取液后發(fā)現(xiàn)，高脂血癥兔血脂水平和血漿脂蛋白脂質(zhì)過氧化程度降低，LDL抗氧化修飾能力增強，這些均對防治動脈粥樣硬化癥起到積極作用[23]。全吉淑等利用家兔分離出紅細(xì)胞，用比色法測定過氧化脂質(zhì)（LOOH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）以及對羥基自由基的清除能力和紅細(xì)胞溶血度，結(jié)果表明，草蓯蓉的乙醇提取物具有抑制紅細(xì)胞脂質(zhì)過氧化作用，提高紅細(xì)胞 SOD 和 GSH-Px 活性，減少紅細(xì)胞溶血程度[24]。

草蓯蓉乙醇提取物對VX2移植瘤具有明顯的抑制作用，且對長春瑞濱化療（NVB）有明顯增強作用，其作用可能與其抑制細(xì)胞增殖和增高機體抗氧化能力有關(guān)；草蓯蓉乙醇提取物（BRE）和NVB單獨或聯(lián)合治療均可明顯抑制VX2移植瘤生長和抑制腫瘤細(xì)胞增殖，與 NVB單獨用藥相比，BRE+NVB組腫瘤生長抑制率最高、增殖指數(shù)最小[25]。尹學(xué)哲等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉乙醇提取物和用90%乙醇從草蓯蓉中得到的苯丙素（PGBR）提取物對A549細(xì)胞均有抑制作用，通過檢測周期分布和細(xì)胞凋亡情況發(fā)現(xiàn)，BRE能夠改變肺癌細(xì)胞周期分布，使多數(shù)細(xì)胞阻滯于G0/G1期，同時Fas、Bax的表達(dá)明顯增加，Bc1-2表達(dá)降低，但不改變P53表達(dá)以及sFas蛋白水平，分析得到草蓯蓉乙醇提取物可以通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡來抑制A549肺癌細(xì)胞的增殖，且PGBR可呈時間和濃度依賴性地抑制肺癌細(xì)胞增殖[26-27]。金愛花等研究發(fā)現(xiàn)用90%乙醇從草蓯蓉提取得到的環(huán)烯醚萜苷對小鼠H22移植瘤也有生長抑制作用，從而能顯著減輕移植瘤的瘤質(zhì)量，高、中、低劑量組的抑瘤率分別為38.05%、34.98%、26.95%；荷瘤小鼠的脾臟指數(shù)明顯升高，升高血清IL-2水平和降低TNF-α水平，升高血清T-AOC和降低MDA水平，說明草蓯蓉環(huán)烯醚萜苷對H22移植瘤具有明顯的抑制作用，其作用機制可能與調(diào)節(jié)IL-2和TNF-α等細(xì)胞因子的表達(dá)以及增強荷瘤小鼠抗氧化能力有關(guān)[28]。

草蓯蓉乙醇提取物可明顯增強肝枯否氏細(xì)胞的吞噬功能，從而增強枯否損傷枯否細(xì)胞的免疫活性；正常組的枯否細(xì)胞與損傷組的枯否細(xì)胞相比，損傷組結(jié)合的SRbC明顯減少，通過吞噬試驗可知，試驗組和正常組的吞噬細(xì)胞表面呈滿飽食SRbC狀態(tài)，損傷組吞噬的SRbC減少[29]。

草蓯蓉乙醇提取物可以提高大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。周麗莎等分析發(fā)現(xiàn)阿爾茨海默病（AD）患者的Meynert基底神經(jīng)核的大型神經(jīng)元明顯減少，大腦皮質(zhì)乙酰膽堿含量降低；采用腦立體定位儀雙側(cè)Meynert核注射β淀粉樣蛋白建立AD模型，中藥組予以草蓯蓉提取物并按高、中、低3種劑量對大鼠模型進(jìn)行灌胃治療，治療后分別檢測各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力及海馬、皮質(zhì)部分乙酰膽堿的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，中藥組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力及乙酰膽堿含量明顯提高（P<0.01）[30]。

3草蓯蓉甲醇提取物的化學(xué)成分及藥理作用

Murai等用甲醇從草蓯蓉中提取分離出了草蓯蓉酮（boschnialactone）、草蓯蓉堿（boschniakine）、草蓯蓉酸（boschnialinic acid）3種單萜物質(zhì)[31]，Yin等分離出 boschnaloside、boschnaro、boschnarol methylether、7-deoxy 8-epiloganic acid[32]，Konishi等先后分離出對香豆酸（p-coumaric acid）、對香豆酸甲酯（methyl p-coumarate）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、草蓯蓉苷 B（rossicaside B）、草蓯蓉苷 C（rossicaside C）、草蓯蓉苷 D（rossicaside D）、3α-齊墩果酸（3-epioleanolic acid）和齊墩果酸（oleanolic acid）[33]。

草蓯蓉甲醇提取物對二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)的大鼠肝臟化學(xué)致癌過程有抑制作用，對癌前病變大鼠給予草蓯蓉提取物后，其SOD、GSH-Px活性顯著提高，MDA的生成得到抑制，使得曾被受到抑制的抗氧化系統(tǒng)各成分又重新相互協(xié)調(diào)、依賴，以清除體內(nèi)產(chǎn)生的過多的自由基，減輕組織細(xì)胞的損傷[34-35]。由此可見，草蓯蓉提取物具有抗氧化作用。SOD、GSH-Px具有抗癌活性，可以保護(hù)正常細(xì)胞，有利于腫瘤的防治，試驗中所用的草蓯蓉提取物顯著提高了肝臟癌前病變大鼠血清的SOD、GSH-Px活性，從而表明草蓯蓉提取物有可能用于腫瘤的治療；同時草蓯蓉甲醇提取物經(jīng)進(jìn)一步分離水層所得的成分可顯著增高肝臟癌前病變大鼠血清腫瘤壞死因子α的含量，可激活巨噬細(xì)胞，誘導(dǎo)產(chǎn)生腫瘤壞死因子，也可達(dá)到腫瘤免疫和腫瘤治療的目的[34-35]。

另有研究發(fā)現(xiàn)，草蓯蓉用80%甲醇提取得到的環(huán)烯醚萜類（IGBR）化學(xué)成分對家兔的VX2移植瘤有生長抑制作用；IGBR能夠顯著延長VX2荷瘤兔生存時間，提高其生命延長度；顯著減小移植瘤瘤重，提高抑瘤率[36]。IGBR可明顯升高血清SOD、CAT和GSH-PX活性，降低MDA水平，所以其作用可能與其增高機體抗氧化能力有關(guān)[36]。

4其他化學(xué)成分及藥理作用

除了上述方法提取得到化學(xué)成分外，Konishi等用丁醇從草蓯蓉中分離得到boschnaloside、boschnaside、草蓯蓉苷A （Rossicaside A）、（+）-pinoresinol-β-D-glucopyranoside、β-D-glucopyranosyl （1→4）-α-L-rhamnopyranosyl-（1→3）-D-（4-O-caffeoyl）-glucopyranose[37]。孫倉等通過堿提取多糖發(fā)現(xiàn)，它的化學(xué)成分組成主要為巖藻糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖，巖藻糖與葡萄糖以 1→2 糖苷鍵相連[38]。桂明玉等用乙醚回流提取出亞油酸、棕櫚酸、10- 甲基珠光脂酸、十氫萘甲酸、3，5- 二甲氧基苯甲酸，其中亞油酸和棕櫚酸含量均超過30%[39]。李樹殿等用NH4Cl水解分離出草蓯蓉中的氨基酸有 17 種以上，總含量為4.356 5%，其中人體必需的氨基酸有7種以上，其含量為1.221 3%；同時，草蓯蓉中含有大量的鐵、磷、鉀、鈉、鎂、鈣、錳、鈷、鍶、鉻、鑭、鈦、鎳、鉬、釔、釩等多種無機成分[40]。

Wang等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉通過高效分子篩層析法篩出的同多糖（僅由一種類型單糖單元組成的多糖）呈時間和劑量依賴性地抑制喉癌鱗狀細(xì)胞Hep2的增殖；200 μg/ml的BPR可以抑制Hep2的G0/G1周期，且用100～400 μg/ml的BPR處理24 h的細(xì)胞與未被處理過的細(xì)胞相比，對Hep2細(xì)胞的抑制作用顯著提高[41]。Liu等研究發(fā)現(xiàn)草蓯蓉多糖經(jīng)二乙氨基乙基纖維素提取分離凈化得到BRR-W1、BRR-WA1和BRR-WA2等3種多糖，對巨噬細(xì)胞的吞噬、NO的產(chǎn)生和TNF-α分泌起到重要作用，并與其物理化學(xué)性質(zhì)有密切的關(guān)系[42]。金愛華等研究表明草蓯蓉多糖可有效清除·OH，抑制紅細(xì)胞脂質(zhì)過氧化作用的發(fā)生，保護(hù)紅細(xì)胞膜免受損傷，保護(hù)紅細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)和功能，抑制紅細(xì)胞發(fā)生溶血，具有良好的紅細(xì)胞保護(hù)作用[43]。

5小結(jié)與展望

從提取的角度看，每種有機溶劑中均可以提取分離出多種化學(xué)成分，部分化學(xué)成分在多種有機溶劑中均能被提取出來，如草蓯蓉苷A （Rossicaside A）、草蓯蓉苷B （Rossicaside B）、草蓯蓉苷E （Rossicaside E）在水和75%乙醇均被提取出來；草蓯蓉苷 B（rossicaside B）、草蓯蓉苷 C（rossicaside C）、草蓯蓉苷 D（rossicaside D）和boschnaloside在甲醇和乙醇中被提取出來。因此，可以根據(jù)總提取物的藥理作用，對特定化學(xué)成分的藥理作用進(jìn)行研究，從而為今后臨床與生活中的開發(fā)利用提供可靠的試驗資料。

草蓯蓉是一種傳統(tǒng)中藥。 多年來的試驗研究表明，草蓯蓉有重要的藥用價值和經(jīng)濟(jì)價值，尤其在抗腫瘤、抗氧化、抗肝損傷方面。然而在臨床開發(fā)應(yīng)用方面就顯得“不受重視”，回顧多年來草蓯蓉的實際應(yīng)用可知，解放軍208醫(yī)院研制的“健身不老酒”（草蓯蓉+酒）為屈指可數(shù)的一個典型代表。草蓯蓉與肉蓯蓉同為列當(dāng)科植物，均具有補腎壯陽、保護(hù)肝臟等藥理作用，但近年來從臨床結(jié)果來看，肉蓯蓉有“蓯蓉總苷膠囊”、“紅蕓口服液”、“杞蕓口服液”、“蓯蓉四倍丸”[44]等諸多臨床應(yīng)用，因此草蓯蓉可以借鑒肉蓯蓉的開發(fā)經(jīng)驗。從溶劑總提取物和單獨的有效成分等方面，開發(fā)利用草從蓉具有廣泛的應(yīng)用前景。亦可以通過一定的微生物技術(shù)，采用誘變育種、基因工程進(jìn)行改造來實現(xiàn)草蓯蓉有效成分的工業(yè)化生產(chǎn)，滿足實際需要，解決資源破壞和浪費問題。

43卷7期

馬茜茜等不同草蓯蓉提取物中化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展

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