正交實驗法優(yōu)選理氣復胃口服液的煎煮工藝

帥小翠，鄒 靜，李晉奇(四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院藥學部，四川 成都 610072)

正交實驗法優(yōu)選理氣復胃口服液的煎煮工藝

帥小翠，鄒 靜，李晉奇
(四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院藥學部，四川 成都 610072)

目的 探討理氣復胃口服液的最佳煎煮工藝。方法 以大黃總蒽醌含量和干膏率為指標，考察加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)對煎煮工藝的影響，應用正交實驗設計優(yōu)選出理氣復胃口服液的最佳煎煮工藝條件。結果 煎煮次數(shù)對工藝的影響程度最大，加水量次之，煎煮時間最小。結論 優(yōu)選出的最佳工藝為：加10倍水，煎煮2次，每次1小時。經驗證該工藝穩(wěn)定可行。

理氣復胃口服液；正交；煎煮工藝

理氣復胃口服液為我院自制制劑，由木香、熟大黃、枳實、陳皮等7味藥組成，具有行氣導滯，除濕消痞的功效，用于運動障礙型功能性消化不良，在我院臨床應用多年，療效顯著。本研究以煎出液中大黃總蒽醌(以大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚、蘆薈大黃素計)含量以及干膏率為指標，采用正交實驗法，探討該口服液的最佳煎煮工藝。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 電子天平(JJ500型，d=0.01 g)、高效液相色譜儀(waters 2690 seporation module)；檢測器(waters 996 photodiode Array Detector)，電磁爐、BP211D電子天平(d=0.01 mg，德國Sartorius公司)、蒸發(fā)皿、水浴鍋、電烘箱等。木香、熟大黃、枳實、陳皮等7味藥，購于四川省中藥飲片有限責任公司，經檢驗，符合《中國藥典》2010版標準。對照品：大黃酸(中國藥品生物制品檢定所，批號：110757～200206)，大黃素(中國藥品生物制品檢定所，批號：110756～200210)，大黃酚(中國藥品生物制品檢定所，批號：110796～200208)，大黃素甲醚(中國藥品生物制品檢定所，批號：110758～200611)，蘆薈大黃素(中國藥品生物制品檢定所，批號：110795～200806)。

1.2 方法

以煎出液中大黃總蒽醌含量、干膏率兩個指標綜合考慮，優(yōu)選理氣復胃口服液煎煮工藝。經預實驗，藥材浸泡30 min合適。影響煎煮工藝的因素主要為：加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)[1]，每因素設三個水平(見表1)，以L9(34)正交表安排實驗。

表1 煎煮因素水平表

1.2.1 樣品制備 按1/5處方比例稱取藥材，按照正交設計的安排表(表2)煎煮組方藥材，藥液過濾，濃縮，定容250 ml，作為干膏率測定和含量測定的供試藥液。

1.2.2 干膏率測定 精密量取20 ml藥液，置干燥恒重的蒸發(fā)皿中，于105 ℃電熱恒溫干燥箱中干燥3 h，取出放入干燥器中冷卻至室溫，迅速稱重，計算干膏率(干膏率=20 ml提取液的干膏質量×12.5/7味藥材質量×100%)。

1.2.3 含量測定 采用高效液相色譜法(HPLC)測定藥液中大黃總蒽醌含量，①色譜條件：分析柱Phenomenex Gemini C18 (250 mm× 4.6 mm，5 μm，110A)，保護柱SecurityGuard Cartridges Gemini C18 (4 mm×3.0 mm)，柱溫35 ℃；流動相為甲醇-乙腈-0.01 mol/L NaH2PO4(pH1.5)(2∶5∶3.5)，流速1 ml/min，紫外檢測波長435 nm。②對照品溶液配制：精密稱取各對照品，配制成每1 ml約含大黃素、大黃酚、大黃酸、蘆薈大黃素各4 μg，大黃素甲醚2 μg的對照品溶液，置4 ℃冰箱避光儲存?zhèn)溆?。③供試品溶液制備：精密量取混勻的供試藥? ml，置25 ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。精密量取稀釋液5 ml，置圓底燒瓶中，加入8%鹽酸10 ml，混勻，再加入三氯甲烷10 ml，混勻。置沸水浴上回流1 h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌燒瓶，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷液液提取3次，每次10 ml，合并三氯甲烷提取液，置37 ℃水浴上氮氣揮干，殘渣加甲醇使溶解，轉移至10 ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，混勻，備用。

1.2.4 測定方法 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μl進樣測定，以外標峰面積法計算含量，得大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、蘆薈大黃素含量，計算總蒽醌含量。

1.3 統(tǒng)計學方法 數(shù)據經SPSS 13.0軟件分析處理。采用方差分析。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各因素對煎煮的影響 煎煮工藝正交實驗安排及結果見表2、表3。以干膏率為指標，各因素對煎煮的影響程度C>A>B，最佳組合為A3B3C3；以大黃總蒽醌含量為指標，各因素對煎煮的影響程度C>A>B，最佳組合為A3B2C3。因素A、因素B、因素C對干膏率有顯著影響，見表4。因素A、因素C對大黃總蒽醌含量有顯著影響，見表5?？紤]到方中木香、枳實等需經揮發(fā)油提取后再煎煮，整個提取工藝時間較長，結合生產實際，擬定煎煮工藝為A3B2C2：即加10倍水，煎煮2次，每次1小時。

表2 煎煮工藝正交實驗安排表和結果

2.2 煎煮工藝驗證 按1/5處方比例稱取藥材，共3個批次，加10倍水，煎煮2次，每次1小時，藥液過濾，濃縮，定容250 ml，測定干膏率和大黃總蒽醌含量(方法同1.2.3)，結果見表6，計算得大黃總蒽醌含量均值為103.24 mg(RSD為2.41%)；干膏率均值為15.58%(RSD為1.47%)。

表3 不同因素下正交實驗結果分析

表4 煎煮工藝干膏率方差分析

表5 煎煮工藝大黃總蒽醌含量方差分析

表6 煎煮工藝驗證實驗

3 討論

根據正交結果，煎煮次數(shù)為3次時，大黃總蒽醌含量和干膏率均高于2次。考慮到理氣復胃口服液工藝的第一部分是收集揮發(fā)性成分，藥渣再與余藥共煎煮，整個工藝的耗時較長，且煎煮次數(shù)增多，無效成分的煎出量也會增多，給口服液除雜工序增加難度；從驗證實驗可知，煎煮2次時，大黃總蒽醌含量和干膏率接近正交結果最高值，結合生產實際，將理氣復胃口服液煎煮次數(shù)定為2次。

[1] 劉光斌，謝六生，隆旭紅，等.大黃通氣口服液的提取純化工藝優(yōu)選[J].中國實驗方劑學雜志，2012，18(12)：67-70.

Selection of optimal decoction process of Liqifuwei oral liquid by orthogonal test

SHUAIXiao-cui，ZOUJing，LIJin-qi
(DepartmentofPharmacy，SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople’sHospital，Chengdu610072，China)

Objective To investigate the optimal decoction process of Liqifuwei oral liquid.Methods By using orthogonal test with indexes of content of rhubarb total anthraquinone and dry paste rate，the effect of adding water，decocting time and decocting times on the decoction were observed.Results The optimal process was 10 times water of medicinal material，decocting 2 times，and 1 hour each time.Conclusion The process is stable and feasible，and the operation is simple and suitable for production.

Liqifuwei oral liquid；Orthogonal experiment；Decoction process

R932

A

1672-6170(2015)06-0094-02

2015-07-01；

2015-08-29)