1-磷酸鞘氨醇及脂聯(lián)素在支架內(nèi)再狹窄患者中的預(yù)測(cè)價(jià)值*

楊海燕，景小東，熊 焰，王喜春，陳 永△

(1.重慶市第三人民醫(yī)院老年科 400014；2.重慶醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科 400013)

論著·臨床研究

1-磷酸鞘氨醇及脂聯(lián)素在支架內(nèi)再狹窄患者中的預(yù)測(cè)價(jià)值*

楊海燕1，景小東2，熊 焰1，王喜春1，陳 永1△

(1.重慶市第三人民醫(yī)院老年科 400014；2.重慶醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科 400013)

目的 探討1-磷酸鞘氨醇(S1P)及脂聯(lián)素在冠狀動(dòng)脈支架植入術(shù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。方法 選擇經(jīng)復(fù)查冠脈造影后證實(shí)為支架內(nèi)再狹窄患者50例為再狹窄組，選取同時(shí)期支架內(nèi)無再狹窄者50例為對(duì)照組，收集研究對(duì)象的臨床相關(guān)資料,分別檢測(cè)其血清1-磷酸鞘氨醇(S1P)、HDL-S1P、脂聯(lián)素及IL-18水平，分析其與支架內(nèi)再狹窄的相關(guān)性。結(jié)果 與對(duì)照組比較，再狹窄組血清總S1P水平更低[ (96.10±26.33)ng/mLvs. (113.40±32.72)ng/mL，P<0.01]，HDL-S1P水平明顯降低[(32.81±10.02)ng/mLvs. (42.72±11.75)ng/mL，P<0.01]，脂聯(lián)素水平也明顯降低[(7.38±2.11)mg/Lvs. (9.25±3.29)mg/L，P<0.01]，而兩組間IL-18水平則差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(258.15±82.19)ng/Lvs. (224.98±84.15)ng/L，P>0.05]；脂聯(lián)素與S1P(r=0.712,P<0.05)及HDL-S1P(r=0.821,P<0.01)之間均呈正相關(guān)。結(jié)論 S1P及脂聯(lián)素是冠脈支架內(nèi)再狹窄的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，相對(duì)較高的S1P及脂聯(lián)素濃度能降低經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(PCI)術(shù)后患者支架內(nèi)再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)。

磷酸類；鞘氨醇；脂聯(lián)素；支架內(nèi)再狹窄

近年來，冠心病介入治療從球囊導(dǎo)管擴(kuò)張術(shù)發(fā)展到支架的使用，使冠心病病死率減低，但仍有支架內(nèi)再狹窄的可能。1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)在血管內(nèi)皮保護(hù)、抑制平滑肌細(xì)胞遷移、心肌缺血/再灌注損傷的保護(hù)、抑制黏附分子表達(dá)等方面的作用顯著[1-3]。由于S1P的多種生物學(xué)效應(yīng)，其可參與到心肌缺血/再灌注的多個(gè)觸發(fā)環(huán)節(jié)，而冠脈支架植入后再狹窄的機(jī)制與炎癥因子、內(nèi)皮細(xì)胞過度增殖等有關(guān)。有狹窄病變冠脈經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(percutaneous coronary intervention，PCI)后，缺血心肌再灌注，S1P是否能通過阻止炎性因子的過度生成、抑制炎性反應(yīng)而產(chǎn)生血管保護(hù)作用，從而降低PCI術(shù)后患者支架內(nèi)再狹窄率。既往研究已經(jīng)證實(shí)脂聯(lián)素在冠心病的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后方面起到重要的保護(hù)作用，而IL-18水平則是反映冠狀動(dòng)脈粥樣病變炎性反應(yīng)的重要指標(biāo)之一，對(duì)冠心病的診斷、治療和預(yù)后評(píng)估起重要作用。前述指標(biāo)在冠脈支架內(nèi)再狹窄中的價(jià)值研究甚少，本研究旨在了解S1P、脂聯(lián)素及IL-18在支架內(nèi)再狹窄中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇重慶醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院支架內(nèi)再狹窄的患者50例為再狹窄組，并選取同時(shí)期支架內(nèi)無再狹窄者50例為對(duì)照組。兩組患者在性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病史、服用藥物等方面比較均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。入選患者均行冠脈造影復(fù)查明確有無支架內(nèi)再狹窄，均符合以下納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者已行PCI術(shù)，并植入1枚或1枚以上藥物涂層支架(雷帕霉素支架或紫杉醇支架)；(2)PCI術(shù)明顯改善冠脈狹窄(殘余狹窄小于30%，TIMI分級(jí)達(dá)到Ⅲ級(jí))；(3)患者于PCI術(shù)后6個(gè)月至2年復(fù)查冠脈造影明確支架內(nèi)狹窄情況；(4)患者PCI術(shù)后均行常規(guī)雙聯(lián)抗血小板、他汀調(diào)脂治療；(5)合并高血壓、糖尿病及其他基礎(chǔ)疾病者均常規(guī)服用相關(guān)藥物治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)PCI術(shù)后6個(gè)月至2年復(fù)查冠脈造影證實(shí)支架內(nèi)血栓形成者，或冠狀動(dòng)脈原發(fā)病變(除植入支架冠脈節(jié)段外)明顯加重者；(2)既往有冠脈搭橋病史者；(3)患有影響血清S1P濃度的相關(guān)疾病者，如惡性腫瘤、急性炎癥、自身免疫性疾病、甲狀腺功能異常、近期手術(shù)史、嚴(yán)重肝腎功能不全、周圍血管缺血或栓塞性疾病。

1.2 方法

1.2.1 支架內(nèi)再狹窄的影像學(xué)評(píng)價(jià) 經(jīng)股動(dòng)脈或橈動(dòng)脈行冠狀動(dòng)脈造影，再狹窄診斷評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為：支架內(nèi)腔大于或等于50%狹窄標(biāo)記為再狹窄，無或小于50%狹窄標(biāo)記為無再狹窄[4]。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的測(cè)定 入選患者復(fù)查冠脈造影后24 h內(nèi)采集空腹外周靜脈血5 mL，低溫離心(4 ℃，3 000 r/min，15 min)后取上層血清1 mL，采用密度梯度超速離心法提取血清中高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)[5]。將剩余血清標(biāo)本統(tǒng)一編號(hào)后于-80 ℃凍存，待標(biāo)本收齊后同批解凍測(cè)定各指標(biāo)。血清及HDL中S1P的檢測(cè)：取血清樣品50 μL，加入200 μL甲醇漩渦混勻，放置30 min,然后15 000 r/min離心30 min，移取上清液,進(jìn)樣 20 μL，進(jìn)行LC-MS測(cè)定S1P的濃度[6]。血清脂聯(lián)素及IL-18的濃度均采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定(試劑盒采購于上海勁馬公司)。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者S1P、脂聯(lián)素及IL-18比較 與對(duì)照組比較，再狹窄組血清總S1P水平更低(P<0.05)，HDL-S1P水平明顯降低(P<0.01)，脂聯(lián)素水平也明顯降低(P<0.05)，而兩組間IL-18水平則無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),見表1。

表1 兩組間S1P、脂聯(lián)素及IL-18比較

2.2 入選患者S1P、HDL-S1P與脂聯(lián)素相關(guān)性 將入選患者S1P、HDL-S1P與脂聯(lián)素濃度行直線相關(guān)分析，結(jié)果顯示脂聯(lián)素與S1P(r=0.712,P<0.05)及HDL-S1P(r=0.821,P<0.01)之間均呈正相關(guān)。

3 討 論

隨著冠心病二級(jí)預(yù)防中抗血小板、抗缺血、穩(wěn)定斑塊的藥物治療進(jìn)展，特別是近20年介入治療的進(jìn)展，使冠心病病死率減低，但仍有支架內(nèi)再狹窄的可能。支架內(nèi)再狹窄是指經(jīng)造影證實(shí)支架植入段官腔丟失超過50%，目前認(rèn)為再狹窄的發(fā)生與血小板黏附、聚集，血栓形成，血管炎性反應(yīng)，平滑肌細(xì)胞的增殖、遷移及細(xì)胞外基質(zhì)的沉淀有關(guān)。藥物洗脫支架的使用，使冠脈內(nèi)支架再狹窄率降低10%，但仍會(huì)導(dǎo)致患者遲發(fā)性血栓形成，怎樣減少支架內(nèi)再狹窄仍是治療的重點(diǎn)和難點(diǎn)。

S1P在腫瘤發(fā)生、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等方面都有著重要的作用，已成為研究的熱點(diǎn)。S1P是鞘磷脂代謝的中間產(chǎn)物之一,既可作為細(xì)胞內(nèi)第二信使發(fā)揮作用，又可通過與細(xì)胞表面的特定受體(S1 preceptor,S1PR)結(jié)合而發(fā)揮廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。血漿中接近65%的S1P是以與脂蛋白結(jié)合的形式存在的，其中約85%的S1P與HDL相結(jié)合[7]。S1P與S1PR1結(jié)合后能活化內(nèi)皮細(xì)胞氮氧化物合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)，并誘導(dǎo)NO的合成，并能活化Akt和eNOS，從而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的活化。心肌缺血/再灌注損傷是臨床上缺血性心臟病、休克等各種疾病中常見的病理損傷。Theilmeier等[8]觀察到S1P能抑制缺血部位白細(xì)胞聚集和心肌細(xì)胞凋亡，增加NO釋放，并減少梗死面積20%～40%。實(shí)驗(yàn)亦證實(shí)，S1P能通過NO依賴機(jī)制激活eNOS釋放NO，從而舒張血管，實(shí)現(xiàn)增加缺血部位的血流灌注，S1P可通過S1PR1和Gi/MARK信號(hào)通路，抑制神經(jīng)酰胺誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。本研究發(fā)現(xiàn)，PCI術(shù)后再狹窄組患者S1P及HDL-S1P水平較無再狹窄組更低，表明S1P越高，其再狹窄風(fēng)險(xiǎn)越低，S1P在PCI術(shù)后起到了一定保護(hù)作用。

脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞特異性分泌產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，大量研究發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素具有調(diào)節(jié)糖脂代謝、減輕胰島素抵抗、抗炎癥反應(yīng)、抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用[9]。臨床研究證實(shí)，在行支架植入的終末期腎病患者中，支架內(nèi)再狹窄患者血漿脂聯(lián)素水平較未狹窄患者明顯偏低，脂聯(lián)素濃度每上升1 μg/mL，則支架內(nèi)再狹窄相對(duì)危險(xiǎn)度下降35%[10]。此外，脂聯(lián)素是支架內(nèi)狹窄的獨(dú)立保護(hù)因素[11-12]。本研究也證實(shí)PCI術(shù)后對(duì)照組患者脂聯(lián)素水平較再狹窄組更高，表明脂聯(lián)素在支架內(nèi)再狹窄中起到保護(hù)作用，與前述研究一致。IL-18作為炎癥因子的一種，在冠心病進(jìn)展中起到重要作用。IL-18能誘導(dǎo)人冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，誘導(dǎo)心血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡及心肌細(xì)胞肥大，是急性冠狀動(dòng)脈綜合征的獨(dú)立危險(xiǎn)因子之一，在冠心病預(yù)后判定中亦有重要價(jià)值[13]。國內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，在冠心病患者中IL-18水平在穩(wěn)定性心絞痛、不穩(wěn)定性心絞痛及心肌梗死患者中呈逐漸增高趨勢(shì)[14-16]，但I(xiàn)L-18與支架內(nèi)再狹窄關(guān)系研究尚未見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)在冠狀動(dòng)脈支架植入術(shù)后患者中，再狹窄與無再狹窄組患者IL-18差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示炎性反應(yīng)差異可能不大，該結(jié)果考慮可能與患者入選時(shí)未按不同類型心絞痛及心肌梗死分型有關(guān)。

綜上所述，支架內(nèi)再狹窄患者S1P及脂聯(lián)素較對(duì)照組均偏低，提示該兩項(xiàng)指標(biāo)可能為支架內(nèi)再狹窄的保護(hù)因素，對(duì)PCI后患者再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)起到預(yù)測(cè)作用。但本研究入選病例數(shù)相對(duì)較少，有待進(jìn)一步大樣本研究以證實(shí)。

[1]Argraves KM,Gazzolo PJ,Groh EM,et al.High density lippprotein-associated shpingosine 1-phosphate promotes endothelial barrier function[J].J Bio Chem,2008,283(36):25074-25081.

[2]Thilmeier G,Schmidt C,Herrmann J,et al.High-density lipoproteins and their constituent,sphingosine-1-phosphate,directly protect the heart against ischemia/reperfusion injury in vivo via the S1P3 lysophospholipid receptor[J].Circulation,2006,114(13):1403-1409.

[3]Nofer JR,Bot M,Brodde M,et al.FTY720,a sunthetic shpingosine 1 phosphate analogue,inhibits development of atherosclerosis in low-density lipoprotein receptor-deficient mice[J].Circulation,2007,115(4):501-508.

[4]KangSJ,MintzGS,ParkDW,etal.Mechanismsofin-stentrestenosisafterdrug-elutingstentimplantation:intravascularultrasoundanalysis[J].CircCardiovasc,2011,4(1):9-14.

[5]Nofer JR,van der Giet M,Tolle M,et al.HDL induces NO-dependent vasorelaxation via the lysophospholipid receptor S1P3[J].J Clin Invest,2004,113(4):569-581.

[6]Lan T,Bi H,Liu W,et al.Simultaneous determination of sphingosine and sphingosine 1-phosphate in biological samples by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J].J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci,2011,879(7/8):520-525.

[7]Murata N,Sato K,Kon J,et al.Interaction of sphingosine 1-phosphate with plasma components,including lipoproteins,regulates the lipid receptor-mediated actions[J].Biochem J,2000,352(3):809-815.

[8]Theilmeier G,Schmidt C,Hermann J,et al.High-density lipoproteins and their constituent,sphingosine-1-phosphate,directly protect the heart against ischemia/reperfusioninjury in vivo via the S1P3 lysophospholipid receptor[J].Circulation,2006,114(13):1403-1409.

[9]顏玉玲,佘強(qiáng).脂聯(lián)素在冠心病中作用及機(jī)制的研究進(jìn)展[J].心血管病學(xué)進(jìn)展,2013,34(3):447-450.

[10]Nishimura M,Hashimoto T,Kobayashi H,et al.Association of the circulating adiponectin concentration with coronary in-stent restenosis in haemodialysis patients[J].Nephrol Dial Transplant,2006,21(6):1640-1647.

[11]Mito T,Miura S,Iwata A,et al.Determination of the cut-off plasma adiponectin level associated with a lower risk of restenosis in patients with stable angina[J].Coron Artery Dis，2011,22(7):451-457.

[12]Ding M,Xie Y,Wagner RJ,et al.Adiponectin induces vascular smooth muscle cell differentiation via repression of mammalian target of rapamycin complex 1 and FoxO4[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2011,31(6):1403-1410.

[13]柴月陽,毛威.白介素-18與冠心病的相關(guān)性研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2011,30(18):117-118.

[14]焦俊蘋.冠心病患者血清超敏C-反應(yīng)蛋白、白介素-18和尿酸檢測(cè)的臨床意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(7):878-879.

[15]劉鎮(zhèn)平,徐志康,李晶,等.冠心病患者血清胱抑素C及白介素-18檢測(cè)的臨床意義[J].河北醫(yī)學(xué),2012,18(11):1536-1538.

[16]李華.冠心病血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶和白介素-18的改變及臨床意義[J].中國傷殘醫(yī)學(xué),2013，21(9)：297-298.

The predictive values of sphingosine-1-phosphate and adiponectin in patients with in-stent restenosis*

YangHaiyan1,JingXiaodong2,XiongYan1,WangXichun1,ChenYong1△

(1.DepartmentofGeriatrics,theThirdPeople′sHospitalofChongqingCity,Chongqing400014,China;2.DepartmentofCardiology，theSecondAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing400013,China)

Objective To investigate the predictive value of sphingosine-1-phosphate (S1P) and adiponectin after coronary stent implantation.Methods Fifty patients confirmed by coronary angiography with in-stent restenosis were selected as in-stent restenosis group while 50 patients without in-stent restenosis were chose as control group.All cases were detected with the density of their serum S1P,HDL-S1P,adiponectin and IL-18 and analyzed relevance to in-stent restenosis.Results Compared with the control group,serum S1P in in-stent restenosis group were lower [ (96.10±26.33)ng/mLvs.(113.40±32.72)ng/mL，P<0.01],and the levels of HDL-S1P and adiponectin were also significant lower [(32.81±10.02)ng/mLvs.(42.72±11.75)ng/mL，P<0.01;(7.38±2.11)mg/Lvs.(9.25±3.29)mg/L,P<0.01].IL-18 levels between the two groups had no significantly difference [(258.15±82.19)ng/Lvs.(224.98±84.15)ng/L，P>0.05].Adiponectin showed a positive correlation between S1P (r=0.712,P<0.05) and HDL-S1P (r=0.821,P<0.01).Conclusion S1P and adiponectin could be independent predictive factor of coronary stent restenosis,and high concentrations of S1P and adiponectin may reduce risk of in-stent restenosis in patients with stenting percutaneous coronary intervention (PCI).

phosphoric acids;sphingosine;adiponectin;in-stent restenosis

10.3969/j.issn.1671-8348.2015.01.013

重慶市衛(wèi)生局科研基金資助項(xiàng)目(2013-2-090)。 作者簡(jiǎn)介：楊海燕(1979-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事冠心病的發(fā)病機(jī)制研究?！?/p>

,Tel:13368183037;E-mail：2224621@qq.com。

R541.4

A

1671-8348(2015)01-0040-02

2014-08-14

2014-10-16)