頂空氣相色譜測定柴胡口服液中正己醛含量*

樊磊磊，劉乃強，張培毅

(1.河南省食品藥品檢驗所，河南 鄭州 450000； 2.河南天方藥業(yè)中藥有限公司，河南 鄭州 450003)

·藥學(xué)研究·

頂空氣相色譜測定柴胡口服液中正己醛含量*

樊磊磊1，劉乃強1，張培毅2

(1.河南省食品藥品檢驗所，河南 鄭州 450000； 2.河南天方藥業(yè)中藥有限公司，河南 鄭州 450003)

目的∶建立柴胡口服液中正己醛的頂空氣相含量測定方法。方法∶ 采用DB-5MS毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。程序升溫：初始溫度為45℃，保持2 min；以每分鐘3 ℃升溫至70 ℃，保持4 min；以每分鐘10 ℃升溫至210 ℃，保持3 min；以每分鐘20 ℃升溫至260 ℃，保持3 min。載氣為氦氣，流速1.2 mL/min；頂空進樣，頂空瓶平衡溫度85 ℃，平衡時間12 min，進樣體積1 mL；FID檢測器溫度260 ℃。結(jié)果∶正己醛在0.52～33.35 mg/L呈良好的線性關(guān)系(r=0.999 0)，平均加樣回收率為98.65%(n=6)，RSD值為3.87%。結(jié)論∶本方法可用于柴胡口服液中正己醛的含量測定。

柴胡口服液/藥效學(xué)；正己醛；頂空氣相色譜；含量測定;藥學(xué)研究

柴胡口服液為柴胡藥材經(jīng)提取濃縮制成的制劑, 收載于《中國藥典》2010版一部，具有解表退熱的作用，臨床用于外感發(fā)熱，癥見身熱面赤、頭痛身楚、口干而渴[1]。文獻中關(guān)于柴胡口服液分析檢測的報道多為采用HPLC分析測定柴胡口服液中皂苷類成分如柴胡皂苷a、d[2]和柴胡皂苷b2[3]的含量、柴胡口服液工藝藥渣中5種柴胡皂苷的含量測定[4]，以及采用大孔吸附樹脂-比色法[5]和分光光度法[6]測定柴胡口服液中總皂苷的含量, 尚未見對其揮發(fā)性化學(xué)成分進行定量分析檢測的報道。近年來, 快速便捷的頂空分析方法逐漸成為分析化學(xué)工作者研究揮發(fā)性物質(zhì)的重要手段[7-11]。研究表明：頂空分析法樣品消耗量少, 無需溶劑提取，對色譜柱傷害少，是一種便捷的揮發(fā)性成分分析方法，其中靜態(tài)頂空方法最為常用[12]。本實驗嘗試采用頂空氣相色譜方法測定柴胡口服液中揮發(fā)性成分正已醛的含量，為加強本品質(zhì)量控制及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高提供一定依據(jù)。

1 藥品、試劑與儀器

柴胡口服液(批號131101，131102，131103，131201，140201，140202，140203) ，由河南天方藥業(yè)中藥有限公司提供。正己醛(批號S88145，CAS:66-25-1)，SIGMA公司提供；水為超純水；氯化鈉(分析純)，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司產(chǎn)品。Thermo Trace GC氣相色譜儀，Thermo Electron Corporation公司產(chǎn)品；HS 2000頂空進樣器，Thermo Electron Corporation公司產(chǎn)品；Xcalibur工作站，Thermo Electron Corporation公司產(chǎn)品；DB-5MS毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm，)，安捷倫科技股份有限公司產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器條件

采用DB-5MS毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。程序升溫：初始溫度為45℃，保持2 min；以每分鐘3 ℃升溫至70 ℃，保持4 min；以每分鐘10 ℃升溫至210 ℃，保持3 min；以每分鐘20 ℃升溫至260 ℃，保持3 min。載氣為氦氣，流速1.2 mL/min；頂空進樣，頂空瓶平衡溫度85 ℃，平衡時間12 min，進樣體積1 mL；FID檢測器溫度260 ℃。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備

取正己醛適量，精密稱定，置10 mL容量瓶中，加水溶解，制得667 mg/L的儲備液，2～4 ℃冷藏備用。取該儲備液，用水依次稀釋得質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為33.35，16.68，8.34，4.17，2.09，1.04，0.52 mg/L的對照品系列溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備

取同一批柴胡口服液5瓶，將內(nèi)容物混勻后，精密量取2 mL，置20 mL頂空進樣瓶中，加0.4 g NaCl，壓蓋，密封，即得供試品溶液。

2.2.3 陰性對照溶液的制備

按柴胡口服液的制備工藝，取蒸餾水100 mL，加入丙二醇3 mL、蔗糖3 g、香精0.5 g，加熱溶解，混勻，濾過，既得陰性對照樣品。取陰性對照樣品按2.2.2項下方法制備陰性對照品溶液。

2.3 實驗結(jié)果

2.3.1 專屬性考察

取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照樣品溶液進樣，記錄色譜圖，結(jié)果：供試品色譜中，可檢出正己醛色譜峰，陰性對照樣品溶液在正己醛色譜峰位置處無干擾，專屬性強，見圖1 A、B、C。

1.正已醛；A.對照品溶液；B.供試品溶液；C.陰性對照溶液圖1 正己醛含量測定色譜圖

2.3.2 重復(fù)性試驗

取同一批樣品，制備6份供試品溶液(因頂空氣相每一樣品瓶只能進樣一次，不能重復(fù)多次取樣，因此重復(fù)進樣的精密度考察與此相同)，依次進樣，測得供試品溶液中正己醛含量的平均值為2.24 mg/L。結(jié)果RSD值為3.50%。結(jié)果表明：正己醛含量測定重復(fù)性試驗可滿足分析測試要求。

2.3.3 穩(wěn)定性考察

取同時制備的同一批次供試品溶液7份，分別于0，2，4，6，8，12，24 h依次進樣測定，其峰面積RSD值為4.87%(n=6)。結(jié)果表明：供試品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.3.4 線性關(guān)系考察及檢測限

取線性實驗用對照品系列溶液，各精密量取 2 mL，置20 mL頂空進樣瓶中，各加0.4 g NaCl，壓蓋，密封，進樣測定。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得正己醛回歸方程為：Y=1 195 699.552X-202 630.307(r=0.999 0)。結(jié)果表明：正己醛在0.52～33.35 mg/L線性關(guān)系良好。檢測限為0.52 mg/L。

2.3.5 加樣回收率考察

精密吸取6份同一批已知含量的樣品(含正已醛2.24 mg/L)各1 mL，分置20 mL頂空進樣瓶中，分別精密加入2.09 mg/L的正己醛對照品溶液各1 mL，再各加0.4 g NaCl，壓蓋，密封，進樣測定分析，計算正己醛加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果 n=6

2.3.6 樣品含量測定

取7批不同批次柴胡口服液樣品，按供試品溶液制備項下所述方法，制得供試品溶液，分別進樣測定，測定結(jié)果見表2。

表2 含量測定結(jié)果

3 討 論

正己醛屬于揮發(fā)性物質(zhì)，沸點為130 ℃，實驗采用靜態(tài)頂空的氣體萃取技術(shù)具有設(shè)施簡單、操作簡便、專屬性強、對儀器系統(tǒng)的污染小等優(yōu)點。筆者發(fā)現(xiàn):在供試品溶液制備實驗中，在頂空進樣瓶中添加氯化鈉的供試品溶液比不添加氯化鈉的供試品溶液所測得的正己醛峰面積大，這可能是添加氯化鈉后，發(fā)生鹽析作用，利于正己醛揮發(fā)出來的緣故。頂空分析的色譜響應(yīng)受平衡溫度、平衡時間，以及氣液相比例的影響，溫度升高時，頂空區(qū)域的目標(biāo)化合物濃度增大，有利于提高檢測靈敏度，但溫度過高，雜質(zhì)的揮發(fā)量會增加。另外，在靜態(tài)條件下，組分在兩相中分配通常在5～15 min可達到平衡，實驗中通過比較，選用平衡溫度為85 ℃，平衡時間為12 min。

運用頂空氣相色譜法測定柴胡口服液中正己醛的含量，前處理簡單易行，其方法的精密度和準(zhǔn)確度好，能達到所需要的檢測目的，可為更好地控制柴胡口服液的質(zhì)量提供參考依據(jù)。

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(編輯 陶 珠)

1001-6910(2015)09-0076-03

R284.1

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10.3969/j.issn.1001-6910.2015.09.36

劉乃強，主任藥師，4626467@qq.com

河南省科技廳重點科技公關(guān)項目(102102310017)

2015-04-23；

2015-05-06