微波輔助乙醇提取葛根素技術(shù)研究

王 輝，劉長(zhǎng)路

(四川文理學(xué)院“特色植物開發(fā)研究”四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川達(dá)州635000)

1 引言

葛根素是一種異黃酮化合物［1］，主要來源為豆科植物野葛或甘葛藤的根部提取。目前已經(jīng)被證明具有促進(jìn)血液循環(huán)，提高免疫，增強(qiáng)心肌收縮力，保護(hù)心肌細(xì)胞，降低血壓，抗血小板聚集等作用［2－3］。因此，從葛根中提取葛根素的研究已有較多的研究報(bào)道［4－6］。而粉葛作為日常一種保健功能的中藥材，其中葛根素的含量直接決定其的保健及藥用功效。采用微波輔助乙醇提取粉葛中的葛根素的方法，通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)比選擇提取葛根素的最佳提取工藝條件，不但可以確立一種微波提取葛根素的工藝，還可以為粉葛中的葛根素含量檢測(cè)提供理論基礎(chǔ)。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

儀器:紫外分光光度計(jì)(日本島津，UV2550)，微波催化合成/萃取儀(上海新儀，MAS－II)。試劑:葛根(粉葛，采購于達(dá)州市博愛大藥房)，葛根素分析標(biāo)準(zhǔn)品(阿拉丁試劑)，其余試劑均為分析純。

2.2 葛根素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取稱取葛根素5.9 mg定容于100 mL，取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 25 mL 容量瓶中，95% 乙醇定容搖勻。用紫外－可見分光光度計(jì)以95%乙醇試劑作為空白參比，在250 nm處測(cè)吸光度。通過回歸方程分析得到葛根素質(zhì)量濃度和吸光度的關(guān)系式:y=0.0758x+0.0059，R2=0.9999。如圖1所示，表明葛根素質(zhì)量濃度在5～25 mg/L范圍內(nèi)線性良好。

2.3 超聲波輔助乙醇提取工藝考察

2.3.1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

真空干燥后的葛根經(jīng)中藥粉碎機(jī)粉碎后準(zhǔn)確稱取2.00 g分別按照正交實(shí)驗(yàn)L9(34)因素條件(表1)進(jìn)行提取，提取后進(jìn)行抽濾除去濾渣，然后將濾液使用95%乙醇定容于100 mL容量瓶中，然后精密量取2.0 mL所以95%乙醇定容于25 mL容量瓶中，搖勻后在250 nm處測(cè)其吸光度。

圖1 葛根素標(biāo)準(zhǔn)曲線

表1 正交實(shí)驗(yàn)的因素與水平(設(shè)定提取溫度:80℃)

2.3.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

按照表一中正交實(shí)驗(yàn)的因子與水平，設(shè)計(jì)并進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，根據(jù)吸光度計(jì)算提取含量所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從表2分析可見，4個(gè)正交實(shí)驗(yàn)因素對(duì)白藜蘆醇的提取影響可以看出其中R－D為最大值，說明提取時(shí)的料液比是影響提取的關(guān)鍵因素;R－B為最小值，說明提取微波功率影響葛根素提取效果最小。綜合以上各因素的影響，粉葛中提取葛根素的4個(gè)提取因素含量影響大小的順序?yàn)镈＞C＞A＞B。并可以確定超聲波提取白藜蘆醇最佳工藝為50% 乙醇、500 W超聲波功率、25 min提取時(shí)間以及1∶30的料液比。

3 結(jié)果討論

正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以直接看出，微波輔助乙醇提取粉葛中的葛根素的幾個(gè)因素都存在著不同大小的影響，其中料液比影響較大，可以認(rèn)為是由于粉葛中的淀粉較多，隨著加熱的進(jìn)行，大量淀粉溶出致使葛根素提取受到影響。根據(jù)正交試驗(yàn)優(yōu)化后的提取條件對(duì)葛根素進(jìn)行提取，在50% 乙醇、500 W超聲波功率、25 min提取時(shí)間以及1∶30的料液比的條件下葛根素提取率為0.837%。

［1］張尊聽，王小玲，劉謙光，等.秦嶺太白野葛根異黃酮成分的研究［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，1999，34(5):301 ～302.

［2］朱應(yīng)磊，呂欣然.葛根素的藥理學(xué)和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.中草藥，1997，28(11):693 ～696.

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［4］韓 劍，曹 偉，尹 華，等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選葛根素提取工藝［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2007，27(3):332 ～333.

［5］邱 遠(yuǎn)，芮 昕，謝翌冬，等.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲提取葛根素工藝［J］.食品科學(xué)，2014，35(6):1 ～3.

［6］孫向陽，張永玲，張振巍，等.星點(diǎn)設(shè)計(jì)－效應(yīng)面法優(yōu)化葛根素提取工藝［J］.中藥材，2012，35(6):980 ～983.