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    貴州省2 個不同產(chǎn)地半夏鎮(zhèn)咳作用的實驗研究

    2015-04-20 07:48:08熊鳳蘭楊靖紅
    中獸醫(yī)學(xué)雜志 2015年9期
    關(guān)鍵詞:鐘罩小白鼠銅仁

    熊鳳蘭 楊靖紅

    (貴州省銅仁市碧江區(qū)畜牧水產(chǎn)中心 貴州 銅仁554300)

    半夏為天南星科植物半夏的干燥塊莖?!侗静菥V目》記述:“五月半夏生,蓋當(dāng)夏之半也,故名”。其味辛,性溫,有毒,歸脾、胃、肺經(jīng)。具有降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散結(jié)的功效。主治痰多咳喘、風(fēng)痰眩暈、痰飲眩悸、痰厥頭痛、嘔吐反胃、胸骯痞悶、梅核氣癥等。

    半夏為多年生草本,喜溫暖濕潤氣候、耐陰蔽,多生于肥沃砂質(zhì)壤土的溪、溝旁,坡地及旱地中。除內(nèi)蒙古、吉林、黑龍江青海、新疆、西藏外,其他各省區(qū)均有分布,以四川、貴州、云南、甘肅、湖北、山東、安徽資源較多。由于旱地改水田的面積增加、使用化學(xué)農(nóng)藥、精耕細(xì)作等原因,在旱地生長的半夏逐年減少,野生半夏也因大量采挖而近于枯竭,不能滿足藥用需求。為了緩解供需之問的矛盾,為市場提供高質(zhì)量的半夏,現(xiàn)對我省不同產(chǎn)地半夏的質(zhì)量差異進(jìn)行比較研究,在半夏質(zhì)量較好的地區(qū)擴大生產(chǎn)種植。本研究通過小白鼠氨水致咳實驗和小白鼠血常規(guī)實驗來比較銅仁、興仁2個不同產(chǎn)地的半夏在止咳功效上的差異,為篩選半夏優(yōu)良品種提供理論依據(jù)。

    1 實驗材料與方法

    1.1 實驗材料

    1.1.1 半夏

    取銅仁、興仁2個不同產(chǎn)地的半夏,用電子天平稱取7.5g干半夏,切碎后,獲得碎沫再加人400ml蒸餾水放入煎鍋中,煎煮半小時,冷卻后用分子漏過濾,獲得過濾液體,過濾液體放入燒杯中備用。再把分子漏中剩余的殘渣再加入400ml蒸餾水繼續(xù)煎煮半小時,用分子漏過濾(分子漏已經(jīng)用蒸餾水完全清洗),獲得過濾液體,把2次過濾的液體放入同一燒杯中備用。

    表1 2 個不同產(chǎn)地半夏提取液的濃度Table 1 The concent ration of extract P.ternate in 4dif ferent population

    1.1.2 試劑

    生理鹽水、氨水、酒精、普魯卡因、蒸餾水

    1.1.3 實驗儀器

    電子天平、電子恒溫水浴鍋、天平、循環(huán)水真空泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、冰箱、鼠籠、注射器、1ML灌胃針頭、玻璃鐘罩、抗凝劑采血管、血液生化自動分析儀

    1.1.4 實驗動物

    小白鼠54只,雌雄各半,體重18g-22,購于貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。

    一段時間很多企業(yè)不斷提高生產(chǎn)能力,擴大生產(chǎn)規(guī)模,還有一些企業(yè)躍躍欲試擬進(jìn)入塑料管道行業(yè)。因此提醒行業(yè)企業(yè)不應(yīng)有短視行為,要有前瞻性,不應(yīng)過熱發(fā)展,盲目擴大產(chǎn)能。建議企業(yè)要根據(jù)自身資源優(yōu)勢科學(xué)發(fā)展,找對屬于自己的產(chǎn)品方向和市場。針對目前塑料管道行業(yè)不大但企業(yè)眾多、一些中小企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量不易保證的現(xiàn)狀,鼓勵行業(yè)企業(yè)合理兼并,逐步形成合理的產(chǎn)業(yè)集群,發(fā)揮規(guī)?;?jīng)營的優(yōu)勢,提高綜合競爭能力。適時推進(jìn)發(fā)布行業(yè)準(zhǔn)入條件,制定相應(yīng)的行業(yè)建議準(zhǔn)入門檻,促進(jìn)行業(yè)規(guī)模建設(shè)和健康有序發(fā)展。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 引咳、模型制作

    模型制作方法:取鐘罩一個,先在鐘罩中放入一小團(tuán)棉花(氨水注入時用),然后放小白鼠3只(1.2.3號)進(jìn)入鐘罩中,用5ML注射器抽取2ML氨水注入棉花團(tuán)中,然后迅速把鐘罩正放于桌面上使小白鼠處于平均壓強、呼吸氨水濃度平均的狀態(tài)中。同時開始計時,計時20秒,20秒以后拿開鐘罩并觀察小白鼠從拿開鐘罩到開始咳嗽的時間(咳嗽潛伏時間),記錄潛伏時間,備用。

    1.2.2 在小白鼠模型制作成功后,開始進(jìn)行咳嗽治療。首先要進(jìn)行灌注分組。《不同產(chǎn)地半夏的初步藥效學(xué)評價實驗研究》做為參考,再按照半夏種類對小白鼠進(jìn)行分組,每種藥分組為小白鼠公母各6只,共12只,公母6只中再分成高低劑量2組,一組3只,分別灌注高低劑量。

    1.2.3 血液指標(biāo)測定

    測定指標(biāo)包括:WBC、LYM、MON、GRA、LYM%、MON%、GRA%、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW。各血液指標(biāo)均是頸動脈采血,EDTA抗凝,經(jīng)CA-500全自動血液分析儀檢測。檢測血樣的收集、處理、檢測均按照操作規(guī)程和試劑盒說明書由專人進(jìn)行。

    2 結(jié)果

    不同產(chǎn)地高、低劑量組半夏水提取物對氨水致小鼠咳嗽的鎮(zhèn)咳效果,見表2。

    表2 2 個不同產(chǎn)地半夏對氨水致小白鼠咳嗽的影響Table2 Antitussive ef fects of P.ternata in 4dif ferent population on mice's cough

    由表2可知,隨著給藥次數(shù)的增加,不同地區(qū)高、低劑量半夏對小鼠咳嗽均有抑制作用。銅仁低劑量組在第9次給藥1h后已無咳嗽癥狀,銅仁高劑量組在第10次給藥1h后已無咳嗽癥狀,其余各組雖然還有咳嗽癥狀,但咳嗽次數(shù)已很少(均<2次·min-1)。

    表3 給藥次數(shù)與小鼠平均咳嗽次數(shù)的關(guān)系Table3 The relation between medication frequency and average cough frequency of mice

    表4 各地區(qū)半夏高、 低劑量水提取物對小白鼠咳嗽的鎮(zhèn)咳效果Table4 P.ternata regions of high and low doses of water extract of mice of the antitussive ef fect of cough

    如表所示,總體來看,各地區(qū)半夏水提取物對小白鼠的鎮(zhèn)咳效果較為一致,高、低劑量水提取物的給藥次數(shù)均是10次左右,才能達(dá)到較好的鎮(zhèn)咳效果。但是,各地區(qū)半夏高劑量水提取物的鎮(zhèn)咳效果皆比低劑量水提取物的鎮(zhèn)咳效果好。各居群高劑量半夏水提取物中,鎮(zhèn)咳效果最好是銅仁(9.56次),興仁的給藥次數(shù)分別為9.97次。

    氨水引咳實驗表明:4個不同產(chǎn)地的半夏對氨水誘發(fā)的小白鼠咳嗽均有一定程度的抑制作用,其中興仁、銅仁、大方、榕江的半夏均能明顯抑制氨水誘發(fā)小白鼠的咳嗽次數(shù),大方半夏的抑制作用最明顯。其中咳嗽抑制上興仁、銅仁、榕江、大方都表現(xiàn)出一定的量效關(guān)系,表現(xiàn)為正相關(guān)關(guān)系,各地區(qū)半夏高劑量水提取物的鎮(zhèn)咳效果皆比低劑量水提取物的鎮(zhèn)咳效果好。

    3.2 血常規(guī)實驗

    表5 各試驗組小白鼠血液指標(biāo)測定Table 5 the experimental group of mice blood statistical indicators

    0.01)。WBC:白細(xì)胞;LYM#:淋巴細(xì)胞絕對值;MON#:單核細(xì)胞絕對值;GRA#:中性粒細(xì)胞絕對值;LYM%:淋巴細(xì)胞百分比;MON%:單核細(xì)胞百分比;GRA%:中性粒細(xì)胞百分比;RBC:紅細(xì)胞計數(shù);HGB:血紅蛋白;HCT:紅細(xì)胞壓積;MCV:平均紅細(xì)胞體積;MCH:平均紅細(xì)胞血紅蛋白;MCHC:平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度;RDW:平均紅細(xì)胞體積分布寬度變異數(shù);PLT:血小板計數(shù);PCT:血小板壓積;MPV:平均血小板體積;PDW:血小板體積分布寬度。

    從表5可見,銅仁組WBC(5.25±1.41)、LYM(3.23±0.34)、MON(0.85±0.77)較對照組WBC(3.33±0.67)、LYM(2.26±0.63)、MON(0.51±0.25)顯著升高(P<0.05);試驗組LYM%、MON%、GRA%、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW較對照組變化不顯著,且各地區(qū)半夏組間指標(biāo)亦無明顯差異(P>0.05)。

    3 討論

    2個不同產(chǎn)地的半夏均有一定程度的咳嗽作用與模型組比較,均能明顯減少氨水誘發(fā)的咳嗽次數(shù)。各產(chǎn)地半夏隨著劑量的增加,咳嗽次數(shù)隨著減少。據(jù)有關(guān)資料表明,半夏生品、新老法制品粉末混懸液灌胃,對小鼠氨熏所致的咳嗽有不同程度的抑制作用。半夏醇提液能使氨水引起的小鼠咳嗽次數(shù)減少和枸櫞酸致豚鼠咳嗽的潛伏期延長。

    不同產(chǎn)地的半夏的鎮(zhèn)咳作用表現(xiàn)為一定的地方差異性。各產(chǎn)地半夏鎮(zhèn)咳作用的差異性,可能與各產(chǎn)地半夏化學(xué)成分有關(guān)。據(jù)有關(guān)資料證明,其主要成分為氨基酸、膽堿、β-2谷甾醇、β-2谷甾醇-D-葡萄糖苷、高龍膽酸、無機鹽、麻黃堿、半夏蛋白(凝集素PTL)、亞油酸、琥珀酸、棕櫚酸、鳥苷等。在半夏的已知成分中能起鎮(zhèn)咳作用的有天門冬氨酸、β-2谷甾醇、麻黃堿及琥珀酸?;瘜W(xué)成分與所處的地理環(huán)境有關(guān),還有待于進(jìn)一步的研究。

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