表皮生長因子受體與肺癌化療的臨床研究

張丹

肺癌作為威脅人類身體健康的主要惡性腫瘤疾病之一，也稱為支氣管肺癌，發(fā)病率和死亡率較高，其中非小細(xì)胞以80%的比例成為了全部肺癌患者的主要人群。表皮生長因子（EGF）及其受體（EGFR）會在不同的細(xì)胞類型的肺癌當(dāng)中表達(dá)出不同的特性作用。鑒于EGF疫苗治療方案與利用EGF傳導(dǎo)通路作為靶點的腫瘤靶向治療已取得良好成果，并在臨床與研究的基礎(chǔ)上，可以預(yù)測存在于肺癌中表皮生長因子受體（EGFR）突變以及對EGFR酪氨酸激酶抑制性藥物（EGFR-TKI），會發(fā)生相應(yīng)的治療反應(yīng)，具有一定治療作用，因此將其引入肺癌化療的臨床治療當(dāng)中很有必要[1-2]。本研究通過選取本院2013年8月-2014年8月期間在同一醫(yī)療組IA-IIIA期（早期腫瘤較小的側(cè)肺或肺門轉(zhuǎn)移）進(jìn)行根治術(shù)后的肺癌患者80例作為臨床研究資料，利用ARMS檢測方法，進(jìn)行EGRF基因檢測，獲取肺癌患者的EGRF基因總突變率和不同臨床特征基因突變率，對IB-IIIA期（早期腫瘤較大的側(cè)肺或肺門轉(zhuǎn)移）全部根治術(shù)后肺癌患者進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)含鉑兩藥的化療，分成EGRF基因突變陽性組和基因突變陰性組，隨訪16個月，隨訪內(nèi)容包括患者化療后的毒性反應(yīng)、無病生存期等，分析與研究兩組患者的化療后的毒性反應(yīng)和療效作用，進(jìn)而做好臨床觀察與總結(jié)，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2013年8月-2014年8月期間在同一醫(yī)療組IA-IIIA期進(jìn)行根治術(shù)后的肺癌患者80例作為臨床研究資料，其中男48例，女32例，年齡33~79歲，平均（57±12）歲；37例鱗癌患者，43例腺癌患者；吸煙肺癌患者38例，不吸煙患者42例。對新鮮腫瘤組織行EGRF基因檢測，IB-IIIA期間化療患者年齡19~80歲，對其肝腎功能與血液指標(biāo)檢查均合格，PS評分≤2分，在術(shù)后化療之前確認(rèn)全部患者未曾做任何抗腫瘤化療的治療。IB-IIIA期的患者共有48例，將接受化療的肺癌患者隨機劃分為EGFR基因突變陽性組20例和基因突變陰性組28例兩組，并對兩組患者實施隨訪16個月，患者生存時間低于16個月則隨訪工作隨患者死亡而結(jié)束。

1.2 方法

1.2.1 突變檢測 首先，加入1 mL無水乙醇，在室溫12000 rpm下震蕩搖勻10 s，并離心3 min，以便去除上清，為了讓乙醇揮發(fā)，在室溫開蓋放置l0 min左右，將180 μL Buffer DTL和20 μL Proteinase K Solution混合振蕩在56℃下消化4 h，隨后再加入l0 μL BufferDES，放入溫度90 ℃恒溫加熱器中，待液體降至室溫，即可用掌式離心機離心5~10 s。其次，放入20 μL Buffer DTB及200 μL無水乙醇，操作同上，在DNA吸附柱中注入轉(zhuǎn)移液體，離心1 min倒掉，最后將吸附柱移到離心管中，并往DNA吸附膜滴入50 μL BufferDTE，然后放置10 min，離心1 min，收集DNA進(jìn)行-20℃冷凍保存[3-4]。

1.2.2 臨床治療 按照術(shù)后非小細(xì)胞肺癌患者的EGFR基因檢測結(jié)果、病理分期，并結(jié)合實際情況進(jìn)行隨訪，在IA期定期觀察，可每兩月進(jìn)行胸部增強CT與胸部正側(cè)位片復(fù)査，半年全身檢查，IB-IIIA期全部根治術(shù)后肺癌患者進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)含鉑兩藥的化療，根據(jù)體表面積控制化療計量，化療周期為每3~4周1次，共進(jìn)行4次化療，在每次化療前做常規(guī)心電圖、胸部增強CT或胸部正側(cè)位片以及三大常規(guī)化驗，最后1次化療前進(jìn)行全身檢查，以此觀察患者的病情變化，整個化療過程結(jié)束后，開始定期觀察，并每2~3個月進(jìn)行1次胸部增強CT或胸部正側(cè)位片的復(fù)查，每半年做1次全身檢查[5-6]。

1.3 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn) 化療骨髓抑制度分級標(biāo)準(zhǔn)：通過按照骨髓抑制的不同級別來進(jìn)行診治，依據(jù)WHO來判斷骨髓的抑制程度情況，可以劃分0~Ⅳ級，其中0級為：白細(xì)胞≥4.0×109/L，血紅蛋白≥110 g/L，血小板≥100×109/L；Ⅰ級為：白細(xì)胞（3.0~3.9）×109/L，血紅蛋白95~100 g/L，血小板（75~99）×109/L；Ⅱ級為：白細(xì)胞（2.0~2.9）×109/L，血紅蛋白80~94 g/L，血小板（50~74）×109/L，Ⅲ級為：白細(xì)胞（1.0~1.9）×109/L，血紅蛋白65~79 g/L，血小板（25~49）×109/L，Ⅳ級為：白細(xì)胞（0~1.0）×109/L，血紅蛋白<65 g/L，血小板<25×109/L[7-9]。無病生存時間即指患者的疾病進(jìn)展時間，從術(shù)后化療開始第1天至產(chǎn)生病情變化為止的天數(shù)，同時按照世界衛(wèi)生組織（WHO）抗癌藥物毒性反應(yīng)分度進(jìn)行藥物毒性反應(yīng)的分析和判斷。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行處理，計量資料（±s）表示，比較采用t檢驗，對無序資料數(shù)據(jù)用字2檢驗，對單項有序計數(shù)資料采用秩和檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基因突變與臨床特征比較 80例肺癌研究患者中檢測出存在EGFR基因突變31例突變率為38.75%；37例鱗癌患者，EGFR基因突變2例，突變率為5.41%；43例腺癌患者，EGFR基因突變29例，突變率為67.44%，突變率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。男48例，EGFR基因突19例，突變率39.6%；女32例，EGFR基因突變12例，突變率37.5%，男女突變率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。吸煙肺癌患者38例，不吸煙患者42例，前者EGRF基因突變20例，突變率52.6%，后者EGRF基因突變11例，突變率26.2%，突變率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 患者臨床結(jié)果分析 本次臨床研究的80例患者資料均無失訪，隨訪率達(dá)到100%。IB-IIIA期的患者共有48例，EGFR基因突變陽性患者20例，其中包含腺癌14例，鱗癌6例，陰性患者28例，通過比較得出非小細(xì)胞肺癌患者的EGFR基因突變和患者病理種類密切相關(guān)，且腺癌突變率高于鱗癌。見表1。

表1 兩組患者臨床特征比較 例（%）

2.3 術(shù)后標(biāo)準(zhǔn)含鉑兩藥化療比較 全部48例患者術(shù)后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)含鉑兩藥化療，20例EGFR基因突變陽性患者胃腸道反應(yīng)：0度10例（50.0%），Ⅰ度6例（30.0%），Ⅱ度4例（20.0%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGFR基因突變陰性患者胃腸道反應(yīng)：0度15例（53.6%），Ⅰ度8例（28.6%），Ⅱ度5例（17.9%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例。兩組患者胃腸道副作用反應(yīng)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。20例EGFR基因突變陽性患者化療骨髓抑制體現(xiàn)：0度13例（65.0%），Ⅰ度7例（35.0%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGFR基因突變陰性患者化療骨髓抑制體現(xiàn)：0度17例（60.7%），Ⅰ度11例（39.3%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例，兩者化療骨髓抑制表現(xiàn)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。對于其他諸如過敏、心血管功能、肝腎功能損傷等不良副作用反應(yīng)都沒有出現(xiàn)，能夠完成較為完整的當(dāng)次化療過程。其中，20例EGFR基因突變陽性患者DFS 6個月為71.2%，12個月為48.5%，18個月為34.2%；28例EGFR基因突變陰性患者DFS 6個月為68.7%，12個月為36.7%，18個月為21.3%，基因突變陽性患者的DFS優(yōu)于陰性患者，兩組患者12~18個月的DFS比較具差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

肺癌是威脅人類健康最難治愈的疾病之一，該疾病的治療一直困擾著眾多醫(yī)學(xué)專家，成為了難以攻克的醫(yī)學(xué)難題，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的不斷進(jìn)步，人們對肺癌病癥也有了更多的了解，為找出治療肺癌的醫(yī)學(xué)方案提供了保證。對肺癌的治療方法也有了極大的改善和進(jìn)步，可分為外科治療、放射治療、化學(xué)療法和免疫療法，其中非小細(xì)胞肺癌的治療難度較大，化療作用并不明顯，因此針對其進(jìn)行深入研究與探討具有很大價值[10-12]。為減少非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的幾率，實行輔助性化療，并依據(jù)表皮生長因子（EGF）及其受體（EGFR）在不同的細(xì)胞類型的肺癌當(dāng)中表達(dá)的不同特性作用，利用肺癌中表皮生長因子受體（EGFR）突變以及對EGFR酪氨酸激酶抑制性藥物（EGFR-TKI），使其發(fā)生相應(yīng)的治療反應(yīng)，具有一定治療作用，引入肺癌化療的臨床治療當(dāng)中將非常有益[13-14]。

近年來，為了治療各種癌癥疾病，抗癌藥物的研制得到快速發(fā)展，由于EGFR是一種蛋白酷氣酸激酶受體，且存在于組織細(xì)胞中，自身含有胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域、一個跨膜結(jié)構(gòu)域、具有酪氨酸激酶活性的一種胞裝結(jié)構(gòu)域，可以與表皮生長因子有效結(jié)合，經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)致使其酪氨酸激酶的通路連續(xù)被活化，進(jìn)而使得細(xì)胞發(fā)生增殖轉(zhuǎn)化，有效阻止細(xì)胞過度異常生長、讓腫瘤細(xì)胞的發(fā)生遷移，得到抑制，促使腫瘤細(xì)胞調(diào)亡，實現(xiàn)抗癌的目的，所以可推測肺癌化療效果與EGFR突變可能存在密切聯(lián)系[15-17]。

從本次2013年8月-2014年8月在同一醫(yī)療組IA-IIIA期進(jìn)行根治術(shù)后的肺癌患者80例臨床研究資料研究結(jié)果得出，檢測出存在EGFR基因突變31例突變率為38.75%，37例鱗癌患者，EGFR基因突變2例，突變率為5.04%；43例腺癌患者，EGFR基因突變29例，突變率為67.44%，突變率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。男48例，EGRF基因突19例，突變率39.6%，女32例，EGRF基因突變12例，突變率37.5%，男女患者突變率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。吸煙肺癌患者38例，不吸煙患者42例，前者EGRF基因突變20例，突變率52.6%，后者EGFR基因突變11例，突變率26.2%，突變率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在IB-IIIA期的患者共有48例，EGRF基因突變陽性患者20例，包含腺癌14例，鱗癌6例；基因突變陰性患者28例，得出兩組患者臨床特征比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。隨后對全部48例患者術(shù)后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)含鉑兩藥的化療，20例EGFR基因突變陽性患者胃腸道反應(yīng)：0度10例（50.0%），Ⅰ度6例（30.0%），Ⅱ度4例（20.0%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGRF基因突變陰性患者胃腸道反應(yīng)：0度15例（53.6%），Ⅰ度8例（28.6%），Ⅱ度5例（17.9%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例，兩組患者胃腸道副作用反應(yīng)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。20例EGFR基因突變陽性患者化療骨髓抑制體現(xiàn)：0度13例（65.0%），Ⅰ度7例（35.0%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGRF基因突變陰性患者化療骨髓抑制體現(xiàn)：0度17例（60.7%），Ⅰ度11例（39.3%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例，兩者化療骨髓抑制表現(xiàn)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。對于其他諸如過敏、心血管功能、肝腎功能損傷等不良副作用反應(yīng)都沒有出現(xiàn)，能夠完成較為完整的當(dāng)次化療過程。其中，20例EGRF基因突變患者DFS 6個月為71.2%，12個月為48.5%，18個月為34.2%，兩組患者12~18個月比較DFS差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。非小細(xì)胞肺癌患者的EGRF基因突變和患者病理種類密切相關(guān)，對比突變率，腺癌突變率高于鱗癌，吸煙突變率較高于不吸煙，從術(shù)后肺癌患者EGRF基因突變陽性組與陰性組的比較得出，前者在12~18個月的輔助化療DFS高于后者，其毒副作用反應(yīng)不存在統(tǒng)計學(xué)差異。

綜上所述，通過研究發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌患者的EGFR基因突變和患者病理的種類密切相關(guān)，EGFR基因突變陽性組的DFS要優(yōu)于基因突變陰性組，患者的EGFR突變狀態(tài)可以使酪氨酸激酶抑制劑十分有益于預(yù)測治療。因此，針對患者的EGFR基因的檢測顯得尤為重要，對肺癌的化療療效有很大幫助。

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