肝癌干細(xì)胞的細(xì)胞分子標(biāo)志物和信號(hào)通路的研究進(jìn)展

鄭 磊，張學(xué)彥，孔令建

?

綜 述

肝癌干細(xì)胞的細(xì)胞分子標(biāo)志物和信號(hào)通路的研究進(jìn)展

鄭 磊，張學(xué)彥，孔令建

癌,肝細(xì)胞；干細(xì)胞研究；信號(hào)傳導(dǎo)

肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上第7種常見腫瘤，在我國(guó)位列腫瘤的第2位，僅次于肺癌，尤其在亞洲和非洲等受肝炎病毒影響嚴(yán)重的地區(qū)死亡率很高[1]。HCC的常規(guī)治療方法有多種：如外科手術(shù)治療、肝動(dòng)脈插管栓塞化療(TACE)、射頻消融(RFA)和化療藥物治療等，但各種方法都有其治療的局限性[2]。目前，肝癌靶向治療正在不斷地取得進(jìn)展，分離和鑒定特異性肝癌干細(xì)胞(liver cancer stem cells, LCSCs)的表面分子標(biāo)志物，對(duì)探索肝癌的發(fā)病機(jī)制以及開展靶向治療至關(guān)重要。由于LCSCs的特異性標(biāo)記物還未被發(fā)現(xiàn)，只能根據(jù)LCSCs的干細(xì)胞所具有特異性的表面標(biāo)志物來(lái)篩選其非特異性表面標(biāo)志物。近來(lái)發(fā)現(xiàn)肝癌內(nèi)部的一些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常激活或抑制與肝癌的發(fā)生有著密切的聯(lián)系。本文就肝癌相關(guān)的分子標(biāo)志物和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究進(jìn)展作一綜述。

1 肝癌干細(xì)胞分子標(biāo)志物

目前，實(shí)驗(yàn)研究確定為肝癌干細(xì)胞分子標(biāo)志物的有：CD133、乙醛脫氫酶、CD90、CD44、CD13、OV6、K19、c-kit、ABCG2、SALL4等。

1.1 CD133 CD133分子是一種5次跨膜糖蛋白，又被命名為prominin-1和AC133。研究發(fā)現(xiàn)，CD133(+)肝癌細(xì)胞具有明顯的自我更新、分化和增值的能力，包括其分化成非肝細(xì)胞樣譜系的能力和自我更新的能力[3]。采用免疫組化檢測(cè)人肝癌手術(shù)標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)肝癌組織中頻繁出現(xiàn)CD133(+)腫瘤細(xì)胞，高表達(dá)的CD133細(xì)胞占40%。有關(guān)臨床資料分析顯示，CD133的高表達(dá)更能體現(xiàn)出干細(xì)胞的自我更新、增殖的潛能與移植入免疫缺陷的小鼠后形成腫瘤的能力[4]。目前有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞系Huh-7中CD133(+)細(xì)胞高表達(dá)，并且比CD133(-)細(xì)胞表現(xiàn)為體外更強(qiáng)的增殖潛能和更低的分化程度。研究還顯示CD133(+)肝癌細(xì)胞成瘤能力與MAPK/PI3K信號(hào)通路的異常激活相關(guān)[5]。

1.2 乙醛脫氫酶(Aldehyde dehydrogenase,ALDH) ALDH主要存在于人體肝臟和腎臟細(xì)胞中，此類酶主要參與乙醇和乙醛的代謝。ALDH參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖，并在腫瘤干細(xì)胞中高表達(dá)，是一種新型的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物[6]。通過對(duì)ALDH和CD133相關(guān)的實(shí)驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，ALDH的亞型表達(dá)與CD133表達(dá)呈正相關(guān)，不同的亞型表達(dá)與它們的致瘤能力密切相關(guān)，致瘤能力從高到低依次為：CD133(+)ALDH(+)>CD133(+)ALDH(-)>CD133(-)ALDH(-)，因此，聯(lián)合檢測(cè)這兩種表面標(biāo)記物對(duì)HCSCs致瘤性有著重要的意義[7]。最近實(shí)驗(yàn)表明，雖然CD133(+)ALDH(+)在肝癌細(xì)胞中致瘤性最高，但其在肝癌中所占的比率很低[8]。

1.3 CD90 CD90又稱為Thy-1，是卵圓細(xì)胞的表面標(biāo)志物。在裸鼠移植實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，從人類肝癌細(xì)胞系分離出來(lái)的CD90(+)在免疫缺陷的小鼠體內(nèi)可以成瘤，而CD90(-)無(wú)成瘤性[9]。最新研究發(fā)現(xiàn)，在肝癌標(biāo)本中分離到了CD45(-)CD90(+)細(xì)胞，這些細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)顯示出了致瘤特性，因此對(duì)CD45(-)CD90(+)這兩種標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝癌診斷有一定的意義[10]。以上實(shí)驗(yàn)提示，CD90是一個(gè)較理想的LCSCs的候選標(biāo)志物，將來(lái)可能發(fā)展成為新的治療靶點(diǎn)。

1.4 CD44 CD44是由單基因編碼的糖蛋白家族，目前作為實(shí)體腫瘤干細(xì)胞的重要標(biāo)志物，它參與細(xì)胞與基質(zhì)的粘連、組織重塑和細(xì)胞遷移。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CD90(+)CD44(+)細(xì)胞惡性程度比CD90(+)CD44(-)細(xì)胞高，抑制CD44表達(dá)可阻止其種植瘤的形成[9]。實(shí)驗(yàn)證實(shí)CD133(+)CD44(+)細(xì)胞具有干細(xì)胞的特性。進(jìn)一步研究表明CD133(+)CD44(+)肝癌細(xì)胞較CD133(+)、CD44(-)細(xì)胞呈現(xiàn)出更強(qiáng)的體內(nèi)致瘤性[11]。因此對(duì)CD133(+)CD44(+)這兩種標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)鑒定LCSCs有著積極的意義。

1.5 CD13 CD13又稱氨肽酶N，早期被定義為髓樣細(xì)胞表面標(biāo)志物，它參與細(xì)胞的多個(gè)生物學(xué)過程，后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)它是肝癌起源以及半數(shù)靜止期HCSCs的標(biāo)志物。實(shí)驗(yàn)通過對(duì)肝癌細(xì)胞系Huh7的側(cè)群細(xì)胞進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)CD13高表達(dá)，而且CD13(+)主要存在于G1/G0期，治療后，這些幸存的細(xì)胞通常在癌灶內(nèi)形成細(xì)胞群[12]。隨后的實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，CD13(+)細(xì)胞致瘤能力較強(qiáng)，用化療藥物5-FU處理后，仍表現(xiàn)出顯著的耐藥性。實(shí)驗(yàn)通過使用CD13中和抗體下調(diào)CD13發(fā)現(xiàn)，可以成功地誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞的凋亡[13]。以上實(shí)驗(yàn)說(shuō)明，CD13通過其蛋白水解功能，干擾抗原呈遞，逃避免疫識(shí)別，在腫瘤細(xì)胞的形成和發(fā)展中扮演重要的角色。

1.6 OV6 OV6是肝祖細(xì)胞的表面標(biāo)志物。通過對(duì)218位OV6(+)的肝癌患者標(biāo)本時(shí)發(fā)現(xiàn)，肝癌中OV6(+)患者預(yù)后不良，表現(xiàn)出侵襲性和致瘤性的升高，與其臨床病理特征密切相關(guān)。OV6(+)的肝癌患者的總體生存率和無(wú)瘤生存率較低。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)OV6(+)細(xì)胞組會(huì)形成更多的微轉(zhuǎn)移病灶，而OV6(-)組則未發(fā)現(xiàn)有轉(zhuǎn)移，并且觀察到了OV6(+)細(xì)胞存在于肺轉(zhuǎn)移灶中，而且OV6(+)細(xì)胞與OV6(-)細(xì)胞比較表現(xiàn)出更強(qiáng)的體內(nèi)成瘤性[14]。目前，作為HCSCs的表面標(biāo)志物之一，關(guān)于OV6的研究較少，有待進(jìn)一步的研究。

1.7 K19 K19是一種膽管型細(xì)胞角蛋白。研究人員采用微陣列研究方法對(duì)肝癌干細(xì)胞性相關(guān)蛋白表達(dá)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)K19(+)常與CD133、EpCA等干細(xì)胞性相關(guān)蛋白聯(lián)合出現(xiàn)，并表現(xiàn)出更強(qiáng)的致瘤性。K19(+)細(xì)胞與K19(-)細(xì)胞相比，與AFP的水平、腫瘤的惡性程度、血管的侵犯密切相關(guān)。此外，實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，K19(+)表達(dá)的肝癌患者總生存期和無(wú)病生存期較短，而表達(dá)K19(-)的患者則體現(xiàn)不明顯[15]。所以，聯(lián)合檢測(cè)K19(+)、CD133和EpCA對(duì)肝癌的診斷和治療有著積極的意義。

1.8 c-kit c-kit又稱干細(xì)胞因子受體(CD117)、肥大細(xì)胞因子受體，作為III型跨膜受體蛋白酪氨酸激酶受體的蛋白家族成員之一，與各類細(xì)胞的異常增殖有密切關(guān)系。有免疫組化研究已表明，c-kit廣泛表達(dá)于HCC中，數(shù)量約在2.4%～80%[16]。也有報(bào)道稱，c-kit高表達(dá)在腫瘤患者中體現(xiàn)出存活期長(zhǎng)，預(yù)后較好[17]。由于c-kit受體與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密不可分，目前，針對(duì)其的臨床藥物的有效性也表明，它也將成為肝癌治療的潛在靶點(diǎn)。

1.9 ABCG2 ABCG2即三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2，在各種腫瘤細(xì)胞及正常組織干細(xì)胞中高表達(dá)，它也廣泛表達(dá)于側(cè)群細(xì)胞中，被認(rèn)為是干細(xì)胞的通用標(biāo)志物。有實(shí)驗(yàn)采用化療藥物作用和RNA干擾技術(shù)使ABCG2水平下降，表現(xiàn)為癌細(xì)胞增殖能力明顯下降，說(shuō)明ABCG2 可能通過主動(dòng)外排抗腫瘤藥物或其他機(jī)制來(lái)影響腫瘤的增值能力[18]。而ABCG2能否作為肝癌治療的新靶點(diǎn)需要進(jìn)一步的研究。

1.10 SALL4 SALL4是與果蠅基因同源的人類基因，包括SALL4A和SALL4B兩個(gè)亞型，其可以編碼鋅指轉(zhuǎn)錄因子C2H2[19]。它在全能性胚胎干細(xì)胞自我更新維護(hù)中起關(guān)鍵性作用，并且與Nanog基因、Sox2和Oct4起相互作用[20-21]。最新研究顯示，SALL4被認(rèn)為是肝癌的一種亞型的標(biāo)志物，與肝癌的預(yù)后不良有關(guān)[22]。

2 肝癌干細(xì)胞的相關(guān)信號(hào)通路

肝干細(xì)胞的自我更新和表型特征的多樣化需要大量的信號(hào)來(lái)維持，這些信號(hào)包括Wnt /β-catenin信號(hào)通路、Hedgehog(Hh)信號(hào)通路、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、EpCAM和Notch信號(hào)通路，它們?cè)诟杉?xì)胞的調(diào)節(jié)和腫瘤的形成中起著決定性作用。這些通路的異常激活可導(dǎo)致腫瘤的形成[23]。

2.1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路 Wnt/β-catenin信號(hào)通路是Wnt經(jīng)典信號(hào)通路之一，目前研究的比較透徹。它由β-catenin基因、Wnt蛋白、Wnt蛋白配體frizzled蛋白、相關(guān)調(diào)控蛋白構(gòu)成。Wnt/β-catenin信號(hào)通路是細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、再生和自我更新的正常過程，它在進(jìn)化上是保守的[24]。最新研究發(fā)現(xiàn)，在約85%的肝癌中可以檢測(cè)到β-catenin的異常，其與Wnt/β-catenin信號(hào)通路異常活化有關(guān)[25]。

2.2 Hedgehog(Hh)信號(hào)通路 Hedgehog(Hh)信號(hào)通路控制細(xì)胞的增殖、分化和組織形成等過程，在肝癌的形成過程中起著調(diào)控的作用。Hh信號(hào)通路主要由核轉(zhuǎn)錄因子Gli以及下游目的基因、Hedgehog配體、2個(gè)跨膜蛋白受體Ptch和Smo組成。激活Hh信號(hào)通路時(shí)，Hh配體與Ptch受體結(jié)合,以自分泌或旁分泌的方式釋放Smo，隨后Smo進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，激活下游轉(zhuǎn)錄因子Gli，從而調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化。此通路在成熟肝組織中無(wú)表達(dá)，而在肝癌中異常激活[26-27]。研究人員通過小分子抑制劑作用于靶點(diǎn)Gli基因，通過上調(diào)p27和下調(diào)c-myc、Bcl-2的表達(dá)，阻斷Gli蛋白轉(zhuǎn)錄，對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行調(diào)節(jié)，從而抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)[28]。

2.3 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)是一組調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的超家族分子(targeting the TGF-beta signaling pathway in disease)，它由結(jié)構(gòu)相近、功能類似的多肽組成。在人體發(fā)育和生長(zhǎng)過程中，TGF-β參與了原癌基因表達(dá)、傷口愈合、胚胎發(fā)育等階段，它的異常表達(dá)與慢性肝炎、肝纖維化、酒精性肝病及肝癌等疾病有關(guān)[29]。在HCC中，TGF-β表現(xiàn)出抑制癌細(xì)胞增殖和增強(qiáng)癌細(xì)胞遷移黏附能力的雙向調(diào)節(jié)作用，在HCC患者中發(fā)現(xiàn)，Smad3的磷酸化反應(yīng)會(huì)因TβRⅡ的表達(dá)減少而抑制，由此表明了TGF-β信號(hào)通路的信號(hào)強(qiáng)度下調(diào)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，外源性TGF-β1刺激后，HCC細(xì)胞的生長(zhǎng)受到TGF-β/Smads信號(hào)通路的抑制，然而敲除TβRⅡ后，自分泌型TGF-β不但對(duì)HCC細(xì)胞的生長(zhǎng)沒有表現(xiàn)出抑制，反而有利于其存活[30]。

2.4 EpCAM EpCAM又稱為CD326，是一種新的腫瘤干細(xì)胞特征的表面標(biāo)志物，它在正常成人肝臟組織中不表達(dá)，而在肝癌組織和肝干細(xì)胞中高表達(dá)，可通過促進(jìn)細(xì)胞增殖、免疫逃逸等機(jī)制促進(jìn)腫瘤的發(fā)生[31]。有研究發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中的EpCAM(+)細(xì)胞具有自我更新、多向分化能力等干細(xì)胞特征，參與并引導(dǎo)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[32]。EpCAM也可通過Wnt信號(hào)通路活化細(xì)胞，使靶細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯，進(jìn)而增殖，從而參與調(diào)控細(xì)胞周期。近年來(lái)更多研究發(fā)現(xiàn)EpCAM(+)細(xì)胞亞群更容易形成細(xì)胞群落，較EpCAM(-)細(xì)胞亞群具有更為顯著的成瘤能力[33]。目前，EpCAM的作為肝癌的干細(xì)胞治療潛在靶點(diǎn)的研究越來(lái)越多。

2.5 Notch信號(hào)通路 Notch信號(hào)通路雖然在進(jìn)化過程中是高度保守的，但它也參與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移[34]。有研究證明，Notch信號(hào)誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞凋亡可能與蛋白磷酸激酶途徑有關(guān)，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞周期可能會(huì)導(dǎo)致Notch1的停滯和凋亡，進(jìn)而抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)[35]。最新實(shí)驗(yàn)證明，下調(diào)Notch信號(hào)通路可以抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，并且誘導(dǎo)其凋亡[36]。綜上所述，肝癌細(xì)胞中存在Notch信號(hào)通路的失活，腫瘤的發(fā)生與Notch受體表達(dá)的異常有關(guān)，但是其在肝癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的確切機(jī)制尚未明確，尤其是Notch信號(hào)通路在肝癌中起促癌作用還是抑癌作用尚有爭(zhēng)議。因此，Notch信號(hào)通路對(duì)肝癌增殖的影響尚需進(jìn)一步研究。

3 展望

目前，雖然研究人員已發(fā)現(xiàn)幾種表面標(biāo)志物可以用于分離、鑒定HCSCs，但是關(guān)于HCSCs標(biāo)志物的研究還只局限于從正常肝干細(xì)胞的表面標(biāo)志物去推定，因此，需要進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)更多的、更特異的標(biāo)志物來(lái)鑒定和分離HCSCs。HCC的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多因素影響的復(fù)雜病理過程，已知多因子和多種信號(hào)通路共同參與其中，但是關(guān)于HCC發(fā)生的具體機(jī)制仍未明了，因此對(duì)其相關(guān)的多種信號(hào)通路的進(jìn)一步研究顯得尤為重要。今后，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，對(duì)HCC的表面標(biāo)志物和相關(guān)信號(hào)通路的研究越來(lái)越多，必將會(huì)發(fā)掘出更多潛在的HCC靶向治療途徑，為肝癌患者的治療帶來(lái)福音。

[1] Jemal A， Bray F， Center M M，etal. Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin， 2011，61(2):69-90.

[2] Lin S， Hoffmann K， Schemmer P. Treatment of hepatocellular carcinoma: a systematic review[J].Liver Cancer, 2012，1(3-4):144-158.

[3] Ma S， Chan K W， Hu L，etal. Identification and characterization of tumorigenic liver cancer stem/progenitor cells[J].Gastroenterology， 2007，132(7):2542-2556.

[4] Song W， Li H， Tao K，etal. Expression and clinical significance of the stem cell marker CD133 in hepatocellular carcinoma[J].Int J Clin Pract， 2008，62(8):1212-1218.

[5] Huang H， Hu M， Li P，etal. Mir-152 inhibits cell proliferation and colony formation of CD133+ liver cancer stem cells by targeting KIT[J].Tumor Biol， 2014，61(8):181-189.

[6] Huang E H， Hynes M J， Zhang T，etal. Aldehyde dehydrogenase 1 is a marker for normal and malignant human colonic stem cells (SC) and tracks SC overpopulation during colon tumorigenesis[J].Cancer Res， 2009，69(8):3382-3389.

[7] Ma S， Chan K W， Lee T K，etal. Aldehyde dehydrogenase discriminates the CD133 liver cancer stem cell populations[J].Mol Cancer Res， 2008，6(7):1146-1153.

[8] Lingala S， Cui Y Y， Chen X，etal. Immunohistochemical staining of cancer stem cell markers in hepatocellular carcinoma[J].Exp Mol Pathol， 2010，89(1):27-35.

[9] Yang Z F， Ho D W， Ng M N，etal. Significance of CD90+ cancer stem cells in human liver cancer[J].Cancer cell， 2008，13(2):153-166.

[10]Bahnassy A A， Fawzy M， El-Wakil M，etal. Aberrant expression of cancer stem cell markers (CD44, CD90, and CD133) contributes to disease progression and reduced survival in hepatoblastoma patients: 4-year survival data[J].Transl Res， 2014，16(4):540-549.

[11]Zhu Z， Hao X， Yan M，etal. Cancer stem/progenitor cells are highly enriched in CD133+ CD44+ population in hepatocellular carcinoma[J].Int J Cancer， 2010，126(9):2067-2078.

[12]Haraguchi N， Ishii H， Mimori K，etal. CD13 is a therapeutic target in human liver cancer stem cells[J].J Clin Invest， 2010，120(9):3326-3339.

[13]Kim H M， Haraguchi N， Ishii H，etal. Increased CD13 expression reduces reactive oxygen species, promoting survival of liver cancer stem cells via an epithelial-mesenchymal transition-like phenomenon[J].Ann Surg Oncol， 2012，19(3S):539-548.

[14]Yang W， Wang C， Lin Y，etal. OV6(+) tumor-initiating cells contribute to tumor progression and invasion in human hepatocellular carcinoma[J].J Hepatol， 2012，57(3):613-620.

[15]Cogliati B， Aloia T P， Bosch R V，etal. Identification of hepatic stem/progenitor cells in canine hepatocellular and cholangiocellular carcinoma[J].Vet Comp Oncol， 2010，8(2):112-121.

[16]Lee E S， Han E M， Kim Y S，etal. Occurrence of c-kit+ Tumor Cells in Hepatitis B Virus-Associated Hepatocellular Carcinoma[J].Am J Clin Pathol， 2005，124(1):31-36.

[17]Chu H H, Cho B H, Song J S，etal. C-KIT-positive undifferentiated tumor of the liver: A case report[J].Oncol lett, 2014，8(4):1665-1669.

[18]Chen Z， Liu F， Ren Q，etal. Suppression of ABCG2 inhibits cancer cell proliferation[J].Int J Cancer， 2010，126(4):841-851.

[19]Al-Baradie R， Yamada K， St Hilaire C，etal. Duane radial ray syndrome (Okihiro syndrome) maps to 20q13 and results from mutations in SALL4, a new member of the SAL family[J].Am J Hum Genet， 2002，71(5):1195-1199.

[20]Melton C， Judson R L， Blelloch R. Opposing microRNA families regulate self-renewal in mouse embryonic stem cells[J].Nature， 2010，463(7281):621-626.

[21]Yang J， Gao C， Chai L，etal. A novel SALL4/OCT4 transcriptional feedback network for pluripotency of embryonic stem cells[J].PloS one， 2010，5(5):e10766.

[22]Jones B. Liver cancer: SALL4-a cancer marker and target[J].Nat Rev Clin Oncol， 2013，10(8):426.

[23]Cui J， Gong Z， Shen H M. The role of autophagy in liver cancer: molecular mechanisms and potential therapeutic targets[J].Biochim Biophys Acta， 2013，1836(1):15-26.

[24]Branda M， Wands J R. Signal transduction cascades and hepatitis B and C related hepatocellular carcinoma[J].Hepatology， 2006，43(5):891-902.

[25]Xu S， Tong M， Huang J，etal. TRIB2 inhibits Wnt/β-Catenin/TCF4 signaling through its associated ubiquitin E3 ligases, β-TrCP, COP1 and Smurf1, in liver cancer cells[J].FEBS Lett， 2014，588(23): 4334-4341.

[26]Arzumanyan A， Sambandam V， Clayton M M，etal. Hedgehog signaling blockade delays hepatocarcinogenesis induced by hepatitis B virus X protein[J].Cancer Res， 2012，72(22):5912-5920.

[27]Wang Y， Han C， Lu L，etal. Hedgehog signaling pathway regulates autophagy in human hepatocellular carcinoma cells[J].Hepatology， 2013，58(3):995-1010.

[28]Grzelak C A， Sigglekow N D， Watkins D N，etal. Reply to:"The many faces of Hedgehog signalling in the liver: Recent progress reveals striking cellular diversity and the importance of microenvironments"[J].J Hepatol， 2014，61(6):1451-1452.

[29]Dooley S， ten Dijke P. TGF-beta in progression of liver disease[J].Cell Tissue Res， 2012，347(1):245-256.

[30]Mu X， Lin S， Yang J，etal. TGF-beta signaling is often attenuated during hepatotumorigenesis, but is retained for the malignancy of hepatocellular carcinoma cells[J].PLoS One， 2013，8(5):e63436.

[31]Gonzalez L M， Montero E， Harrison L J，etal. Differential diagnosis of Taenia saginata and Taenia solium infection by PCR[J].J Clin Microbiol， 2000，38(2):737-744.

[32]Terris B， Cavard C， Perret C. EpCAM, a new marker for cancer stem cells in hepatocellular carcinoma[J].J Hepatol， 2010，52(2):280-281.

[33]Guo W， Yang X R， Sun Y F，etal. Clinical Significance of EpCAM mRNA-Positive Circulating Tumor Cells in Hepatocellular Carcinoma by an Optimized Negative Enrichment and qRT-PCR-Based Platform[J].Clin Cancer Res， 2014，20(18):4794-4805.

[34]Geissler K， Zach O. Pathways involved in Drosophila and human cancer development: the Notch, Hedgehog, Wingless, Runt, and Trithorax pathway[J].Ann Hematol， 2012，91(5):645-669.

[35]Qi R， An H， Yu Y，etal. Notch1 signaling inhibits growth of human hepatocellular carcinoma through induction of cell cycle arrest and apoptosis[J].Cancer Res， 2003，63(23):8323-8329.

[36]Greenhill C.Liver cancer: Different effects of the Notch receptors in liver cancer revealed[J].Nat Rev Gastroenterol Hepatol， 2014，11(12):703.

國(guó)家自然基金資助項(xiàng)目(81370557)

150086哈爾濱，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院消化內(nèi)科

張學(xué)彥，E-mail:zxycxw@sina.com

R730.261

A

2095-140X(2015)04-0099-04

10.3969/j.issn.2095-140X.2015.04.026

2015-01-06 修回時(shí)間：2015-02-10)