復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療對(duì)惡性胸腔積液患者胸水中VEGF、MMP含量的影響

張振安，安 靜，張風(fēng)林，袁亞軍

(唐山市人民醫(yī)院唐山市腫瘤醫(yī)院呼吸科，河北 唐山 063000)

復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療對(duì)惡性胸腔積液患者胸水中VEGF、MMP含量的影響

張振安，安 靜，張風(fēng)林，袁亞軍

(唐山市人民醫(yī)院唐山市腫瘤醫(yī)院呼吸科，河北 唐山 063000)

目的 探討復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療對(duì)惡性胸腔積液患者胸水中VEGF、MMP含量的影響。方法選擇在本院接受住院治療的惡性胸腔積液患者作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為接受常規(guī)胸腔內(nèi)化療的對(duì)照組及接受復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療的觀察組，比較兩組患者的治療后胸水VEGF、MMP含量及T細(xì)胞亞群分布差異。結(jié)果(1)觀察組患者接受治療后的VEGFA、VEGFB、VEGFC水平均顯著低于對(duì)照組患者(P＜0.05)；(2)觀察組患者接受治療后的胸水MMP-2及MMP-9含量均顯著低于對(duì)照組患者(P＜0.05)；(3)觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯高于對(duì)照組患者(P＜0.05)。結(jié)論復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療可以明顯降低患者胸水VEGF、MMP含量，優(yōu)化機(jī)體免疫功能。

惡性胸腔積液；復(fù)方苦參；VEGF；MMP

惡性腫瘤晚期多可出現(xiàn)惡性胸腔積液，患者可在短期內(nèi)出現(xiàn)呼吸困難、血液循環(huán)障礙燈胸腔大量積液表現(xiàn)，嚴(yán)重影響正常生活。胸腔穿刺抽吸積液是減少惡性胸水患者胸腔積液量、緩解呼吸癥狀的有效方式，在胸水明顯減少后胸腔內(nèi)注入化療藥物可以抑制病情、減緩胸水產(chǎn)生速度，改善患者的生存質(zhì)量[1]。復(fù)方苦參為一類具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的中成藥物，其毒副作用小，且可增強(qiáng)患者免疫功能，是與化療藥物聯(lián)用于胸腔注射的理想藥物[2]。本文旨在探討復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療對(duì)惡性胸腔積液患者胸水中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)含量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇于2013年6月至2014年6月間在本院住院治療的惡性胸腔積液患者76例作為研究對(duì)象，原發(fā)腫瘤均經(jīng)病理組織學(xué)及細(xì)胞學(xué)檢查證實(shí)，B超現(xiàn)實(shí)胸腔中大量積液且于其中找到癌細(xì)胞，排除低蛋白血癥、心力衰竭等其他引發(fā)胸腔積液因素。所有患者及其家屬在了解研究過程后均簽署知情同意書。按照隨機(jī)數(shù)表法將所有入組患者分為接受常規(guī)化療的對(duì)照組和在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加入復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療的觀察組，每組各38例。觀察組患者中男性21例，女性17例，年齡48～83歲，平均(67.12±8.04)歲，全身狀況卡氏評(píng)分61～83分，平均(70.72±5.83)分，原發(fā)腫瘤中肺癌23例，乳腺癌6例，卵巢癌5例，其他4例；對(duì)照組患者中男性20例，女性18例，年齡47～82歲，平均(66.53±7.12)歲，全身狀況卡氏評(píng)分62～82分，平均(70.41±5.65)分，原發(fā)腫瘤中肺癌21例，乳腺癌7例，卵巢癌5例，其他5例。兩組患者的基線資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，具有可比性。

1.2 治療方法 經(jīng)B超定位后進(jìn)行胸腔穿刺置入中心靜脈導(dǎo)管，間斷負(fù)壓引流抽吸積液，至B超復(fù)查證實(shí)為少量積液后，對(duì)照組給予胸腔注射卡鉑400 mg+地塞米松5 mg+生理鹽水30 ml，囑患者緩慢變換體位，以利于藥物分布。觀察組患者額外胸腔注射復(fù)方苦參注射液30 ml。以上治療每周進(jìn)行一次，以4次為一個(gè)療程，連續(xù)治療兩個(gè)療程以上。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 VEGF水平 接受不同治療方案前1 d及治療后1 d抽取患者胸水5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)胸水中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGFB)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC)水平，測(cè)定時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.3.2 MMP水平 接受不同治療方案前后抽取患者胸水5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)及基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)含量，測(cè)定時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.3.3 淋巴細(xì)胞亞群 接受不同治療方案前后抽取患者外周靜脈血5 ml，采用ELISA法測(cè)定T細(xì)胞亞群分布情況，具體包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0軟件對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)、計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，經(jīng)P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 VEGF水平比較 治療前兩組患者的外周血VEGF水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的VEGFA、VEGFB、VEGFC水平均顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者接受不同治療方案前后的VEGF水平比較(±s，pg/ml)

表1 兩組患者接受不同治療方案前后的VEGF水平比較(±s，pg/ml)

組別治療前治療后觀察組對(duì)照組t值P值VEGFA 291.09±46.32 287.13±45.09 0.573＞0.05 VEGFB 351.67±61.09 353.21±63.35 0.438＞0.05 VEGFC 221.57±38.32 213.44±37.65 0.653＞0.05 VEGFA 86.76±11.12 223.43±31.17 6.482＜0.05 VEGFB 123.23±18.44 314.68±51.33 5.375＜0.05 VEGFC 74.65±9.23 187.78±23.36 7.523＜0.05

2.2 MMP水平比較 治療前兩組患者的胸水MMP水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的胸水MMP-2及MMP-9含量均顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

2.3 T細(xì)胞亞群分布比較 治療前兩組患者的T細(xì)胞亞群分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表2 兩組患者接受不同治療前后的MMP水平比較(±s，mg/L)

表2 兩組患者接受不同治療前后的MMP水平比較(±s，mg/L)

觀察組對(duì)照組t值P值281.27±31.82 279.14±30.26 0.374＞0.05 198.23±23.19 201.37±29.38 0.734＞0.05 116.27±11.04 218.63±19.37 6.492＜0.05 102.72±12.45 163.11±28.43 5.291＜0.05

表3 兩組患者接受不同治療前后的T細(xì)胞亞群分布情況比較(±s)

表3 兩組患者接受不同治療前后的T細(xì)胞亞群分布情況比較(±s)

組別治療前治療后觀察組對(duì)照組t值P值CD3+(%) 50.04±2.17 49.45±2.65 0.342＞0.05 CD4+(%) 41.18±3.66 41.54±4.43 0.264＞0.05 CD4+/CD8+1.73±0.23 1.68±0.15 0.546＞0.05 CD3+(%) 54.54±4.47 48.13±2.56 4.243＜0.05 CD4+(%) 43.43±4.23 38.09±3.76 5.135＜0.05 CD4+/CD8+2.24±0.33 1.71±0.19 4.535＜0.05

3 討論

惡性胸腔積液是惡性腫瘤晚期常見并發(fā)癥，原發(fā)病灶以肺癌、乳腺癌及惡性淋巴瘤多見。惡性胸腔積液產(chǎn)生迅速，患者可伴有呼吸困難及低蛋白血癥，嚴(yán)重者出現(xiàn)肺不張及感染，對(duì)患者的生活質(zhì)量亦造成巨大沖擊。中大量惡性胸腔積液患者最為明顯的臨床癥狀是呼吸困難，穿刺抽吸胸腔積液是改善患者呼吸癥狀最為直接與有效的方式。目前臨床多推薦在抽取胸腔積液后，腔內(nèi)關(guān)注化療藥物以控制積液產(chǎn)生速度、緩解臨床癥狀，盡可能延長(zhǎng)患者有質(zhì)量的生存時(shí)間[3-4]。

胸腔反復(fù)注射化療藥物雖然可以取得確切療效，但是單純重復(fù)局部應(yīng)用化療藥物，對(duì)于一般狀況較好的患者治療強(qiáng)度偏弱，不利于療效的鞏固。復(fù)方苦參注射液是一種主要成分為苦參堿、氧化苦參堿的純中藥制劑，其可抑制腫瘤細(xì)胞的DNA合成、抑制相關(guān)酶活性、阻斷腫瘤細(xì)胞的正常周期、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)苦參堿具有止血止痛、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力的作用，且目前臨床尚未報(bào)道其具有明顯毒副作用[5-6]。故復(fù)方苦參注射液有望配伍化療藥進(jìn)行胸腔內(nèi)注射，鞏固甚至擴(kuò)大治療效果，改善患者的全身狀態(tài)。

VEGF是目前已知的促血管新生能力最明確的細(xì)胞因子，包括VEGFA、VEGFB、VEGFC等多種亞型，通過結(jié)合相應(yīng)受體激活信號(hào)通路，進(jìn)而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖遷移以生成新血管[7]。新生血管是惡性腫瘤生存及增殖的基礎(chǔ)，惡性腫瘤患者血清及體液中的VEGF含量大幅上升，且其水平與腫瘤分期密切相關(guān)[8]。本次研究中我們檢測(cè)了治療前后患者胸水中的VEGF含量，結(jié)果顯示治療前患者胸水中的VEGF含量大幅高于正常水平，但兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，治療后兩組患者的VEGF各亞型水平均有所降低，其中觀察組患者的VEGF亞型水平顯著低于對(duì)照組患者(P＜0.05)。由此可見復(fù)方苦參胸腔灌注可以顯著降低患者的VEGF含量，減弱腫瘤血管新生。

在腫瘤細(xì)胞向血管遷移及侵入的過程中，基底膜及細(xì)胞外基質(zhì)降解是關(guān)鍵步驟，在該過程中腫瘤細(xì)胞分泌的基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9起到重要作用[9]。MMP-2和MMP-9可降解粘連蛋白，并在此基礎(chǔ)上催化具有活性的可溶性片段，參與到腫瘤細(xì)胞的增殖遷移中去。目前有研究[10]顯示，MMP-2及MMP-9陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存期及5年生存率均顯著低于陰性患者。在上述研究中，我們同樣檢測(cè)了治療前后患者胸水中的MMP水平，結(jié)果顯示治療前兩組患者的胸水MMP-2、MMP-9含量高于正常人，但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，接受治療后兩組患者的MMP-2、MMP-9含量均降低，但是觀察組患者降幅更大，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。由此可見，復(fù)方苦參胸腔灌注可以顯著降低患者的胸水MMP含量，降低腫瘤細(xì)胞遷移能力，對(duì)于抑制患者病情進(jìn)展具有積極作用。

在制約腫瘤細(xì)胞活性的同時(shí)，增強(qiáng)患者自身免疫功能是緩解患者病情的重要途徑[11]。本研究中，我們觀察了兩組患者治療前后T淋巴細(xì)胞分布情況，結(jié)果顯示治療前兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，治療后觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯高于對(duì)照組患者(P＜0.05)。CD3+淋巴細(xì)胞代表全T淋巴細(xì)胞、CD4+淋巴細(xì)胞代表輔助性T淋巴細(xì)胞，CD8+代表抑制性T淋巴細(xì)胞[12]，CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+水平的上升標(biāo)志著患者細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，說明胸腔內(nèi)注射復(fù)方苦參有助于患者免疫功能的提升，對(duì)于其整體病情的控制具有積極的意義。

綜上所述，復(fù)方苦參腔內(nèi)灌注治療可以明顯降低患者胸水VEGF、MMP含量，優(yōu)化機(jī)體免疫功能，值得臨床上推廣應(yīng)用。

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Effect of compound matrine intracavity perfusion on VEGF,MMP levels in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion.

ZHANG Zhen-an,AN Jing,ZHANG Feng-lin,YUAN Ya-jun.
Department of Respiratory Medicine,Tangshan People's Hospital,Tangshan Cancer Hospital,Tangshan 063000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo analyze the effect of compound matrine intracavity perfusion on vascular endothelial growth factor(VEGF),matrix metalloproteinase(MMP)levels in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion.MethodsPatients with malignant pleural effusion in our hospital were selected as research objects,which were randomly divided into control group with conventional intrathoracic chemotherapy and observation group with compound matrine intracavity perfusion.VEGF,MMP levels and T cell subgroup distribution were compared between the two groups after treatment.Results(1)VEGFA,VEGFB,VEGFC levels after treatment in observation group were significantly lower than those in the control group(P＜0.05).(2)The levels of MMP-2 and MMP-9 after treatment in observation group were significantly lower than those in control group(P＜0.05).(3)The levels of CD3+,CD4+,CD4+/CD8+after treatment in observation group were significantly higher than those in control group(P＜0.05).ConclusionCompound matrine intracavity perfusion could significantly decrease VEGF,MMP content in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion,and optimize body's immune function.

Malignant pleural effusion;Compound matrine;Vascular endothelial growth factor(VEGF);Matrix metalloproteinase(MMP)

R655

A

1003—6350（2015）02—0166—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.02.0059

2014-07-21)

河北省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)資助項(xiàng)目(編號(hào)：20132106)

張振安。E-mail：dr_zhangjian@163.com