鈣網(wǎng)織蛋白表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系

賈小婷　彭聰　賀智敏　鄭國沛

摘要：目的 應(yīng)用meta分析方法評價(jià)鈣網(wǎng)織蛋白（calreticulin，CRT）表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。方法 檢索2014年6月以前收錄在Pubmed、Cochrane 圖書館、Elsevier數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫、中國學(xué)術(shù)會議論文全文數(shù)據(jù)庫等數(shù)據(jù)庫中的英文和中文文獻(xiàn)，按納入和排除標(biāo)準(zhǔn)對文獻(xiàn)進(jìn)行篩選評價(jià)。并用RevMan 5.0軟件對各項(xiàng)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和評價(jià)分析，同時(shí)用χ2檢驗(yàn)對其分析結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果 納入符合要求的國內(nèi)外3篇文獻(xiàn)共205例數(shù)據(jù)進(jìn)行后續(xù)研究分析。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間3種研究無異質(zhì)性（P=0.56），故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CRT在胃癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間有差異性表達(dá)OR=0.17，95%CI：0.07～0.42），其中P=0.0001。在粘膜浸潤組與肌層浸潤組間三種研究無異質(zhì)性（P=0.19），故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CRT在胃癌不同浸潤程度組間有差異性表達(dá)（OR=0.21，95%CI：0.06～0.77），其中P=0.0008。此外，用χ2檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：CRT表達(dá)量在胃癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及不同浸潤深度組間有顯著性差異，P值分別為0.000和0.002；不同TNM分期組間CRT表達(dá)量無顯著性差異（P=0.155）；CRT的表達(dá)量在胃癌患者不同生存率間無顯著性差異（P=1.000）。結(jié)論 CRT與胃癌的浸潤及轉(zhuǎn)移相關(guān)，可作為判斷胃癌生物學(xué)行為的重要參考指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：鈣網(wǎng)織蛋白；胃癌；表達(dá)；meta分析

鈣網(wǎng)織蛋白（calreticulin，CRT）是一種多功能蛋白質(zhì)，它主要存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)以及細(xì)胞核內(nèi)[1]。在CRT的C端有一個(gè)KDEL的信號肽，從而實(shí)現(xiàn)了CRT作為分子伴侶、結(jié)合整合素、附著到類固醇激素受體以及結(jié)合鈣等生理功能[2-4]。目前已在乳腺癌、胃癌、膀胱癌、肝癌、結(jié)腸癌等多種癌癥中發(fā)現(xiàn)CRT過表達(dá)[5-8]。有研究指出CRT的表達(dá)對胃癌的發(fā)生發(fā)展起到一定的推動(dòng)作用[9]，因此本研究擬采用meta分析及χ2檢驗(yàn)綜合評價(jià)CRT表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)研究文獻(xiàn)，以期深入探討CRT在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為臨床治療提供一定的理論基礎(chǔ)。

1資料與方法

1.1文獻(xiàn)檢索 以"gastric cancer"和"calreticulin or CRT"為關(guān)鍵詞，檢索Pubmed、Elsevier數(shù)據(jù)庫、Cochrane 圖書館、Medline等數(shù)據(jù)庫發(fā)表的英文文獻(xiàn)；同時(shí)以"胃癌"和"鈣網(wǎng)織蛋白或calreticulin或CRT"為關(guān)鍵詞，檢索中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫、中國學(xué)術(shù)會議論文全文數(shù)據(jù)庫收錄的中文文獻(xiàn)。檢索時(shí)間為2014年6月以前收錄的文獻(xiàn)，為避免漏檢，對檢索到的相關(guān)文獻(xiàn)中的參考文獻(xiàn)進(jìn)行二次檢索。

1.2文獻(xiàn)納入或者刪除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①以人為研究對象，不限種族、國籍、年齡及性別，受試者病例資料比較完整；②研究CRT的表達(dá)與腫瘤治療后存活率與復(fù)發(fā)率的關(guān)系；③CRT的表達(dá)均為免疫組化，有明確的判定標(biāo)準(zhǔn)（每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞，以>10%的細(xì)胞染色為陽性結(jié)果）。同時(shí)剔除數(shù)據(jù)不完整的研究，對于重復(fù)發(fā)表重復(fù)收錄或資料雷同的研究只保留其中質(zhì)量最好者。

1.3資料提取 提取的資料主要包括：①一般資料：題目、作者、發(fā)表年代和文獻(xiàn)來源；②研究特征：各組患者的基本資料；③文獻(xiàn)的方法學(xué)信息；④結(jié)果或者結(jié)論。兩位研究者按照預(yù)先設(shè)計(jì)的資料提取表提取資料：一位研究者提取和錄入資料，另一位研究者核對資料，如遇意見不一致，雙方討論解決或由第三研究者判斷。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用RevMan 5.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行Meta分析。根據(jù)可能出現(xiàn)的異質(zhì)性因素進(jìn)行亞組分析，若各組間無異質(zhì)性（P>0.05），采用固定效應(yīng)模型；若存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（P<0.05），采用隨機(jī)效應(yīng)模型。同時(shí)采用χ2檢驗(yàn)對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，雙重分析確保其可靠性。

2研究結(jié)果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果 根據(jù)上述的檢索方法初步檢索到文獻(xiàn)529篇，其中英文文獻(xiàn)421篇，中文文獻(xiàn)108篇。閱讀全文后，依據(jù)文獻(xiàn)刪除標(biāo)準(zhǔn)共剔除526篇文章，最終納入文獻(xiàn)3篇（共計(jì)205例患者），其中英文2篇[10-11]，中文1篇[12]，見表1。

2.2 CRT的表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系 在205例患者中，有40例患者無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、TNM分期3方面信息，因此分析只納入165例患者。在這3篇文獻(xiàn)中，關(guān)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與CRT表達(dá)量的研究無異質(zhì)性（P=0.56），故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間CRT表達(dá)有顯著性差異（OR=0.17，95%CI：0.07～0.42），其中P=0.0001，見圖1；關(guān)于浸潤深度與CRT表達(dá)量的研究無異質(zhì)性（P=0.19），采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同浸潤深度組間CRT的表達(dá)量有顯著性差異（OR=0.21，95%CI：0.06～0.77），其中P=0.0008，見圖2；因參考文獻(xiàn)[12]未涉及病例TNM分期，因此在統(tǒng)計(jì)CRT表達(dá)與TNM相關(guān)性時(shí)只納入2篇文獻(xiàn)，且因其中一項(xiàng)研究所有病例為T3組，因此無法用meta分析進(jìn)行準(zhǔn)確研究，見圖3。將3篇文獻(xiàn)的研究合并，χ2檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：CRT表達(dá)量在胃癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及不同浸潤深度組間有顯著性差異，P值分別為0.000和0.002；不同TNM分期組間CRT表達(dá)量無顯著性差異（P=0.155），見表2。

圖1 CRT表達(dá)量與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的森林圖

圖2 CRT表達(dá)量與胃癌浸潤程度關(guān)系的森林圖

圖3 CRT表達(dá)量與胃癌TNM分期關(guān)系的森林圖

2.3 CRT的表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系 僅參考文獻(xiàn)[11]中涉及胃癌患者預(yù)后數(shù)據(jù)，其中有3例患者隨訪資料未獲得，因此表3中數(shù)據(jù)僅涉及76例患者。χ2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CRT表達(dá)量在胃癌患者不同生存率間的表達(dá)無顯著性差異（P=1.000），見表3。

3討論

生理?xiàng)l件下，CRT蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中最主要的功能是分子伴侶和鈣離子穩(wěn)態(tài)，而細(xì)胞粘附、調(diào)控基因表達(dá)等似乎是其在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外的主要功能[13]。但是在病理?xiàng)l件下，CRT過表達(dá)或者下調(diào)與腫瘤的惡性進(jìn)程有關(guān)：CRT過表達(dá)可增強(qiáng)腫瘤浸潤、加速腫瘤惡化進(jìn)程，且與較差的預(yù)后相關(guān)[14]；同時(shí)在膀胱癌細(xì)胞中敲除CRT，將抑制細(xì)胞增殖、遷移和粘附能力[15]。Chen等發(fā)現(xiàn)在CRT在胃癌中過表達(dá)能夠增強(qiáng)肺癌細(xì)胞增殖和遷徙能力。免疫組化結(jié)果顯示CRT表達(dá)量與微血管密度、陽性肌膜侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及較差的預(yù)后相關(guān)[11]。本研究通過meta分析發(fā)現(xiàn)：不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間CRT表達(dá)有顯著性差異（OR=0.17，95%CI：0.07～0.42），其中P=0.0001；不同浸潤深度組間CRT的表達(dá)量有顯著性差異（OR=0.21，95%CI：0.06～0.77），其中P=0.0008。而用χ2檢驗(yàn)也得到了相似的結(jié)果。但是在分析CRT表達(dá)量與胃癌患者預(yù)后相關(guān)性的時(shí)候，由于本分析僅有一篇涉及此方面的內(nèi)容，無法用meta分析，僅用卡方檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CRT表達(dá)量在胃癌患者不同生存率間的表達(dá)無顯著性差異（P=1.000）。此研究僅涉及76例患者，因此研究結(jié)論不一定是全面。此外，由于本文納入文獻(xiàn)太少，無法用RevMan 5.0統(tǒng)計(jì)軟件制作漏斗圖分析發(fā)表偏倚。在今后的研究中，應(yīng)適當(dāng)擴(kuò)大文獻(xiàn)的納入準(zhǔn)則，以確保相當(dāng)規(guī)模的研究納入分析之中，提供更為詳實(shí)準(zhǔn)確的meta分析結(jié)果，為臨床胃癌的治療及預(yù)后評估提供一定的基礎(chǔ)。

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