“瘦肉精”沙丁胺醇及其常用檢測方法

孫書剛 李建偉 張富剛 孫書濤 陳國信 河北省滄州市青縣農(nóng)業(yè)局 062650

“瘦肉精”主要包括鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和塞布特羅等，是屬于β 類興奮劑的苯乙胺類藥物。其中的沙丁胺醇屬于β2 類興奮劑。養(yǎng)殖戶喂飼沙丁胺醇后，可達到豬群生長速度提高、瘦肉率增加、屠宰后肉色鮮紅和脂肪層薄的目的，往往是皮貼著瘦肉，瘦肉豐滿，十分迎合大眾消費市場。近年來消費者由于誤食含有瘦肉精的豬肉而產(chǎn)生不良癥狀的事件屢有發(fā)生，甚至導(dǎo)致集體中毒。

1 沙丁胺醇的危害

沙丁胺醇具有很好的熱穩(wěn)定性及生化穩(wěn)定性，日常的烹飪很難致其穩(wěn)定性改變從而失去活性。同時由于人體對沙丁胺醇吸收快、排泄慢，極易在體內(nèi)產(chǎn)生蓄積。研究發(fā)現(xiàn)，沙丁胺醇最易蓄積于眼角膜中，經(jīng)檢測，在毛發(fā)、肺、肝等部位也有沙丁胺醇的殘留[3]。食用含有沙丁胺醇的豬肉，對心臟和肝腎的毒性較大，同時會引發(fā)人體各種不良反應(yīng)，例如肌肉震顫、心悸、頭痛、惡心和失眠等。有報道顯示，沙丁胺醇會誘發(fā)和加重糖尿病、心血管和腦血管病人的病情，嚴重威脅著人們的身體健康和生命安全。

2 沙丁胺醇常用檢測方法

（1）感官檢測。長期飼喂沙丁胺醇的生豬皮膚白里透紅、光潔、毛少，臀部結(jié)實上翹、勻稱呈紅亮狀。背部被驅(qū)打后易見傷痕且長久不消退。行走不靈活，易發(fā)生跛行，蹄部易受傷并發(fā)生感染[4]。一般健康豬肉呈淡紅色，肉質(zhì)彈性好，不會有“滲血”現(xiàn)象。而飼喂沙丁胺醇比較嚴重的豬屠宰后，肉色異常鮮紅透亮，后臀肌肉飽滿，脂肪薄，肉皮緊貼著瘦肉，瘦肉纖維疏松。對屠宰后豬的感官識別，可以快速簡便地作出初步判定。

（2）法膠體金免疫層析法。法膠體金免疫層析法具有方便快捷、操作簡單、用時少且操作人員不需特殊培訓(xùn)的特點，一般10～15 分鐘便可完成初步篩查得出結(jié)論。相對與其他檢測方法而言，其生產(chǎn)成本和檢測成本均較低[5]。但是，法膠體金免疫層析法只能作為樣品的初步篩查方法，僅用來判斷樣品是否可疑，不能準確定性是否含有沙丁胺醇。

（3）酶聯(lián)免疫吸附法。目前，在我國這種技術(shù)已經(jīng)非常成熟，市場上有很多商品化的檢測試劑盒，只要按照試劑盒中的說明書即可完成檢測，操作簡單快捷，準確率較高。但是需要注意的是，在分子結(jié)構(gòu)方面，沙丁胺醇和克倫特羅較為相似，因此克倫特羅抗體和沙丁胺醇反應(yīng)具有一定的交叉性，這就會導(dǎo)致同一個樣品用沙丁胺醇試劑盒和克倫特羅試劑盒檢測，如果是陽性樣品就會顯示兩項都是陽性，不易區(qū)分此樣品含有哪一種瘦肉精。因此，酶聯(lián)免疫吸附法也常常用于大批量樣品的篩選工作，不能作為最后科學(xué)準確定性的依據(jù)，必須使用其他方法來進行確證。

（4）氣相色譜法。使用氣相色譜法（如高效氣相色譜法、氣相質(zhì)譜聯(lián)用法等）來檢測動物組織和尿液中的沙丁胺醇含量，目前已經(jīng)比較成熟，相應(yīng)的國家標準也已經(jīng)建立。在使用氣相質(zhì)譜聯(lián)用法來檢測樣品中沙丁胺醇含量時，樣品通常要經(jīng)過前處理、凈化、衍生化三步后才能置于氣相質(zhì)譜聯(lián)用分析儀進行分析。樣品在進行前處理時，常常使用的是酶解法。不用水解的方法是由于水解法反應(yīng)非常強烈，并且需要使用濃鹽酸或高氯酸，危險性比較大。與水解法相比較，酶解法的優(yōu)點為較為溫和，但是反應(yīng)的時間較長，常常為十幾個小時。凈化這一步使用的是固相萃取法，多數(shù)實驗人員選擇使用MCX 或SCX 固相萃取小柱。凈化過柱后，使用BSTFA 試劑來進行衍生化。需要注意的是，衍生化一定要防水，尤其值得注意的是空氣中的水分對衍生化的干擾較大，衍生完畢后，要置于氣相質(zhì)譜聯(lián)用分析儀上進行測定[6]。氣質(zhì)聯(lián)用檢測法檢測動物組織、尿液中沙丁胺醇時，具有低檢出限、高穩(wěn)定性、高準確性、高靈敏度等優(yōu)點，通過前處理和凈化兩步，很大程度上降低了樣品中雜質(zhì)的干擾。但是該方法也有不足之處，例如氣相質(zhì)譜聯(lián)用分析儀儀器設(shè)備昂貴，很難在基層普遍使用。另外，檢測操作方法比較復(fù)雜，對實驗室的要求較高，且檢測需要的時間較長，不適用于一線快速檢測。

（5）液相色譜法。使用液相色譜法（高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相質(zhì)譜聯(lián)用法），不需要對樣品進行衍生化，并且樣品的處理方法較為簡單。秦永平等學(xué)者第一個建立了反相高效液相色譜-紫外法，用來檢測血漿中沙丁胺醇殘留的含量，該方法的最低檢測限為0.3ng／g，回收率一般為98%～109%，RSD＜8%。金雁等研究者通過高效液相色譜-二極管陣列檢測器來檢測動物組織中沙丁胺醇的含量。尚紅霞等學(xué)者改進此方法，利用大孔吸附樹脂進行固相萃取，很好地解決了萃取過程中的乳化難題。二級陣列管檢測器的使用，不僅提升檢測的準確性，還在很大程度上降低了成本，操作過程簡單，易于推廣。也有學(xué)者利用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法來檢測豬肝高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相質(zhì)譜聯(lián)用法中沙丁胺醇的殘留量，其結(jié)果為最低檢出限0.1ng／g，平均回收率為76.8%～82.8%，RSD 小于5.8%[7]。此方法具有高靈敏度和高準確性等優(yōu)點。但是液相質(zhì)譜儀儀器操作較為復(fù)雜，購買及維護價格非常昂貴，也不適用于基層一線檢測。超高效液相色譜優(yōu)點很多，首先其能獲得更高的柱效，同時在更寬的線性范圍內(nèi)也可以保持柱效恒定，檢測時間明顯縮短，試劑耗費顯著減少，在分析效率和靈敏度等方面也有很大提高。

3 展望

雖然沙丁胺醇殘留檢測的方法非常多，但是目前我國行業(yè)標準和國家標準中使用的方法為液相質(zhì)譜聯(lián)用法和氣相質(zhì)譜法，此兩種方法都能夠較準確地檢測沙丁胺醇的含量，但是樣品預(yù)處理過程都非常復(fù)雜且耗時較長。酶聯(lián)免疫法處理樣品預(yù)處理過程操作簡便，可同時檢測多個樣品，很大程度上縮短了分析時間，但是僅可以作為快速篩選手段，不能作為定性確證依據(jù)。因此，對液相質(zhì)譜聯(lián)用法和氣相質(zhì)譜法的進行簡化，對現(xiàn)有復(fù)雜、繁瑣、耗時長的樣品預(yù)處理方法的進行改進是非常必要的。這就需要我們監(jiān)察工作者不斷探索新的方法，使得沙丁胺醇的檢測工作更加方便、快捷、準確，為老百姓食用放心肉提供可靠保障。

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［3］姚文生，萬建青，王利永，等.關(guān)于我國動物源性食品安全監(jiān)管問題的思考[J].中國動物檢疫，2009，26（5）：15.

［4］畢玉香.瘦肉精的殘留危害及監(jiān)控對策[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2009，4（6）：136.

［5］管健，王立媛，吳平谷，等．同位素作內(nèi)標氣質(zhì)聯(lián)機測定動物源食品中4 種β2-興奮劑的含量［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007，17（12）：2194-2196．

［6］王建平，史為民，沈建忠．免疫親和色譜-氣相色譜／質(zhì)譜法（I-AC-GC／MS）檢測豬肝中的沙丁胺醇與克倫特羅［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2007，38（3）：271-275．

［7］谷麗麗，李飛，牛英豪，等．沙丁胺醇的病理作用研究及其液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法的檢測［J］.食品科學(xué)，2010，31（3）：224-229．