兒童幽門螺桿菌感染常見(jiàn)檢測(cè)方法的比較

黃潔，黃瑛

復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院，上海 201102

?

兒童幽門螺桿菌感染常見(jiàn)檢測(cè)方法的比較

黃潔，黃瑛

復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院，上海 201102

摘要：幽門螺桿菌是具有高感染率的慢性感染性致病菌，與兒童慢性胃炎、消化不良、不明原因缺鐵性貧血及兒童生長(zhǎng)發(fā)育遲緩等疾病相關(guān)，給患兒的健康帶來(lái)極大危害，且大部分成人幽門螺桿菌感染也是在兒童期獲得。因此，尋求一種適合兒童的、便捷的幽門螺桿菌檢測(cè)方法十分必要。目前常用的檢測(cè)方法包括快速尿素酶試驗(yàn)、組織切片染色、胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)、尿素呼氣試驗(yàn)、血清抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)、幽門螺桿菌糞便抗原檢測(cè)等。臨床上應(yīng)根據(jù)不同的檢測(cè)目的，選擇不同的檢測(cè)方法。本文就目前兒童幽門螺桿菌檢測(cè)方法作一綜述，比較分析多種檢測(cè)方法的效果。

關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌；診斷；兒童

幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，H.pylori)是全球最常見(jiàn)的病原體之一，感染率>50%。它是定植于人類胃黏膜上的一種生長(zhǎng)緩慢的革蘭陰性微需氧菌，是引起胃炎、胃潰瘍及胃黏膜相關(guān)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。2007年“世界胃腸病學(xué)組織(World Gastroenterology Organization，WGO)臨床指南——發(fā)展中國(guó)家幽門螺桿菌感染”指出[1]，不同人群中兒童幽門螺桿菌感染率為10%~80%，10歲前超過(guò)50%的兒童被感染。成年人的幽門螺桿菌感染往往始于兒童期，且呈持續(xù)感染。有數(shù)據(jù)顯示，在中國(guó)，20歲時(shí)幽門螺桿菌感染率已達(dá)50%以上[2]。

幽門螺桿菌感染是一個(gè)公共健康問(wèn)題[3]，主要通過(guò)糞-口、口-口途徑傳播，與社會(huì)經(jīng)濟(jì)差、飲用水不安全、基本衛(wèi)生差、不良飲食習(xí)慣和過(guò)度擁擠有關(guān)。特別是在兒童時(shí)期，幽門螺桿菌感染主要來(lái)自年長(zhǎng)的家庭成員，且存在家庭聚集性。幽門螺桿菌感染后如不治療可終生攜帶病菌，導(dǎo)致成年后出現(xiàn)慢性胃炎、消化道潰瘍及胃癌等疾病的概率升高。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明，幽門螺桿菌的危害不僅局限于胃內(nèi)，已超越了消化系統(tǒng)，如兒童生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、營(yíng)養(yǎng)性缺鐵性貧血等，以及成年后的神經(jīng)系統(tǒng)疾病如老年癡呆、帕金森綜合征、偏頭痛等[4]。因此，人們迫切需要有計(jì)劃地開(kāi)展兒童幽門螺桿菌感染的篩查工作，從兒童抓起，早發(fā)現(xiàn)，早干預(yù)。

兒童感染幽門螺桿菌后，發(fā)生消化性潰瘍的可能性并不大，但部分患兒會(huì)出現(xiàn)消化不良、慢性腹瀉、反復(fù)腹痛[5]，不易被醫(yī)務(wù)人員及家長(zhǎng)重視，從而錯(cuò)過(guò)診斷和治療的最佳時(shí)機(jī)。因此，尋求一種適合兒童的便捷檢測(cè)方法十分必要。本文對(duì)目前兒童幽門螺桿菌感染常用檢測(cè)方法的利弊作一綜述。

檢測(cè)幽門螺桿菌感染的方法一般分為侵入性和非侵入性兩類。侵入性檢測(cè)方法是通過(guò)胃鏡檢查，取胃黏膜進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)(rapid urease test，RUT)、組織切片染色、聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)及胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)等；非侵入性檢測(cè)方法包括尿素呼氣試驗(yàn)(urea breath test，UBT)、血清抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)、唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)和糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)等。每項(xiàng)檢查均有其優(yōu)點(diǎn)和局限性。

1 侵入性檢查

1.1　RUT

RUT為成人及兒童幽門螺桿菌侵入性檢測(cè)方法的首選。產(chǎn)生大量尿素酶是幽門螺桿菌的一個(gè)重要特征，且其產(chǎn)生的尿素酶有很高的活性，能水解尿素，生成氨和二氧化碳，形成“氨云”，對(duì)幽門螺桿菌自身起保護(hù)作用。依據(jù)這一原理設(shè)計(jì)了RUT，試劑包括尿素、幽門螺桿菌指示劑、緩釋劑，可制成紙片、試劑和瓊脂等?；顧z取樣一般在胃竇，取下標(biāo)本放入試劑中，觀察至少30 min，若試劑顏色變?yōu)榧t色或絳紫色，則為陽(yáng)性。該方法檢測(cè)快速、方便、準(zhǔn)確率高，其靈敏度達(dá)75%~98%，特異度達(dá)70%~98%[6]。董玲等對(duì)幽門螺桿菌的不同檢測(cè)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，得到RUT的靈敏度為74.07%，特異度為73.91%，低于13C呼氣試驗(yàn)及W-S銀染色[7]。RUT檢測(cè)結(jié)果受人為因素影響，存在假陰性，如取材部位、組織大小、所取標(biāo)本中菌群數(shù)量、環(huán)境溫度、觀察時(shí)間等均會(huì)使結(jié)果出現(xiàn)誤差。值得注意的是，標(biāo)本中的菌量>104時(shí)，RUT才能顯示陽(yáng)性。其次，幽門螺桿菌在胃內(nèi)的分布并不均勻，呈局灶性分布。一般未經(jīng)藥物治療的患者，幽門螺桿菌多分布在距幽門2~5 cm處的胃竇部；使用過(guò)抗幽門螺桿菌藥物的患者，幽門螺桿菌會(huì)轉(zhuǎn)移至胃體、胃底部。建議同時(shí)取2份標(biāo)本(胃竇和胃體)進(jìn)行檢測(cè)，可提高檢測(cè)的靈敏度[8]。對(duì)每份標(biāo)本的觀察時(shí)間最好能達(dá)到1 h，這樣可明顯減少假陰性的發(fā)生率。對(duì)于兒童，RUT的靈敏度和特異度也較高，是臨床最常用的侵入性檢查方法；不足之處是患兒需鎮(zhèn)靜或麻醉后行胃鏡檢查。兒童鏡下取胃黏膜操作比成人更易發(fā)生出血、穿孔、窒息等風(fēng)險(xiǎn)，因此不能被所有人接受，不適用于幽門螺桿菌感染的篩查及根治后的隨訪。

1.2　胃黏膜組織切片染色

胃黏膜組織切片染色包括蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin，HE)染色、亞甲藍(lán)特殊染色、W-S銀染色、抗幽門螺桿菌抗體的免疫組化染色等。采用不同方法獲得的幽門螺桿菌感染率差異很大，陽(yáng)性檢出率為45%~85%。亞甲藍(lán)染色后，幽門螺桿菌被染成紫藍(lán)色，細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰，但其他革蘭陰性細(xì)菌亦可著色，因此特異性較差，假陽(yáng)性率為34.7%。用抗幽門螺桿菌特異抗體行免疫組化檢測(cè)時(shí)，幽門螺桿菌呈黃褐色而周圍胃黏膜組織細(xì)胞核呈藍(lán)色，對(duì)比清晰，易于判讀，陽(yáng)性率為54.2%[9]。該方法優(yōu)點(diǎn)是切片可長(zhǎng)期保存，有利于進(jìn)行回顧性研究；但費(fèi)用較高，且整個(gè)操作過(guò)程受操作者的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)影響，各實(shí)驗(yàn)室所獲結(jié)果顯示靈敏度差別較大。當(dāng)幽門螺桿菌感染數(shù)量較多時(shí)易確診；幽門螺桿菌數(shù)量少時(shí)，診斷較為費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，且常判為陰性。

1.3　胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)

胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)是診斷幽門螺桿菌現(xiàn)癥感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。2003年Russmann等研究表明，該方法是唯一特異度為100%的方法[10]。劉平等[11]對(duì)我國(guó)兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度為96.7%，特異度為100%。該方法不僅可判斷病變嚴(yán)重程度，還可發(fā)現(xiàn)癥狀原因，行藥敏試驗(yàn)后指導(dǎo)臨床用藥。同時(shí)，它也是進(jìn)行后續(xù)研究的先決條件，可進(jìn)一步研究致病性、藥敏、毒力等級(jí)、分型等。幽門螺桿菌是一種挑剔的微需氧菌，需營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基和特殊的CO2氣體環(huán)境，對(duì)黏膜標(biāo)本的要求也很高，最好同時(shí)采集胃底、胃體的黏膜標(biāo)本。因此，普通實(shí)驗(yàn)室從胃活檢組織中分離出幽門螺桿菌較困難，且費(fèi)用較高，耗時(shí)較長(zhǎng)(3~6 d)，故往往用于科研。

1.4　PCR及熒光原位雜交

PCR是檢測(cè)幽門螺桿菌感染的又一方法，其特點(diǎn)是能快速診斷出新鮮胃黏膜標(biāo)本中的幽門螺桿菌，靈敏度和特異度均較高。另一優(yōu)點(diǎn)是可從石蠟包埋的組織標(biāo)本中擴(kuò)增幽門螺桿菌，檢測(cè)因菌量過(guò)少而無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本。PCR不受臨床用藥的干擾，如抗生素、質(zhì)子泵抑制劑等，常有研究者用其檢測(cè)幽門螺桿菌的耐藥性[12,13]。故目前該技術(shù)主要用于幽門螺桿菌感染的臨床診斷以及分子生物學(xué)和流行病學(xué)研究。熒光原位雜交(fluorescenceinsituhybridization，F(xiàn)ISH)目前常用于檢測(cè)幽門螺桿菌耐藥基因，如對(duì)克拉霉素耐藥性的檢測(cè)靈敏度較高，且具有高效、快速的特點(diǎn)[14]。

在幽門螺桿菌感染檢測(cè)中，侵入性方法眾多，但無(wú)論哪種方法，均需鎮(zhèn)靜或麻醉后行胃鏡檢查，鏡下取胃黏膜標(biāo)本。2010年有研究報(bào)道，RUT檢測(cè)兒童幽門螺桿菌感染的靈敏度低于成人，這可能與兒童胃黏膜標(biāo)本中所含幽門螺桿菌量少有關(guān)，建議兒童胃黏膜標(biāo)本的取材需與成人一樣完整。因此，臨床上確定一個(gè)兒童是否需接受侵入性檢測(cè)要慎重，且要有強(qiáng)有力的依據(jù)。對(duì)象一般是在有明顯消化道癥狀(反復(fù)腹痛、惡心、嘔吐、反酸等癥狀)、家庭成員中有幽門螺桿菌感染者，或非侵入性檢測(cè)陽(yáng)性要進(jìn)一步明確診斷而需治療的兒童。侵入性檢測(cè)不適用于幽門螺桿菌感染的篩查及根治后隨訪。目前RUT仍是首選，胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)是“金標(biāo)準(zhǔn)”，其他方法可依據(jù)科研需求及醫(yī)院設(shè)備選擇。

2非侵入性檢查

2.1　UBT

13C-和14C-UBT是診斷幽門螺桿菌感染的無(wú)創(chuàng)性檢測(cè)方法?；颊呖诜?3C或14C標(biāo)記的尿素，如果胃中存在幽門螺桿菌，被標(biāo)記的尿素將被幽門螺桿菌產(chǎn)生的尿素酶分解，產(chǎn)生13CO2或14CO2，并經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)肺部后呼出體外。只需檢測(cè)患者呼出的CO2中13CO2或14CO2的比值，就可確定是否有幽門螺桿菌感染。其采用氣袋收集呼氣樣本，簡(jiǎn)便、快速、安全性高，易被家長(zhǎng)和患兒接受，有利于擴(kuò)大檢測(cè)區(qū)域，是兒童非侵入性檢測(cè)的首選方法。在侵入性檢測(cè)中，胃鏡下取胃黏膜組織，會(huì)因菌群在胃中分布不均勻及操作者因素出現(xiàn)假陽(yáng)性。而呼氣試驗(yàn)則可反映全胃的狀態(tài)，避免了這一缺憾。同時(shí)，有研究者在210例兒童中進(jìn)行幽門螺桿菌感染診斷方法評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示UBT的靈敏度、特異度、陰性預(yù)測(cè)值和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為93.8%、99.1%、97.8%和98.0%[15]，均不低于侵入性檢測(cè)。我國(guó)學(xué)者黃敬等[16]對(duì)142例有消化道癥狀需行胃鏡檢查的兒童同時(shí)行13C呼氣試驗(yàn)，其靈敏度為94.7%，特異度為98.5%，符合率為96.5%。呼氣試驗(yàn)的缺點(diǎn)是，年齡較小的兒童(6歲以下)由于吹氣不配合，收集到的呼氣標(biāo)本不合格，導(dǎo)致陽(yáng)性率偏低。其次是費(fèi)用高，儀器昂貴，測(cè)定較為復(fù)雜，限制了其在基層醫(yī)院的應(yīng)用。另外，14C-UBT 由于14C有微量放射性，故兒童不宜使用；而13C 為穩(wěn)定性同位素，無(wú)放射性，故13C-UBT 適合所有人群?？股亍⒅扑釀┑人幬锟赡苡绊懞魵庠囼?yàn)結(jié)果，需停用一段時(shí)間后再檢查。

2.2　血清抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)

目前常用方法是用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)定性檢測(cè)血清中抗幽門螺桿菌抗體，其操作簡(jiǎn)便，速度快，費(fèi)用低，且具有高靈敏度及特異度，國(guó)外報(bào)道分別為80.0%和85.2%[17]。但與同地區(qū)成人比較，對(duì)大多數(shù)兒童的檢測(cè)靈敏度大大降低[18]。目前還有幽門螺桿菌IgG檢測(cè)試劑盒，利用膠體金法快速檢測(cè)抗幽門螺桿菌IgG抗體，其靈敏度和特異度均較高，且具有耗時(shí)少(15 min)、標(biāo)本易采集等優(yōu)點(diǎn)，尤其適用于兒童，可用于篩查、大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查和根除后的定期隨訪。其不足是人體在感染幽門螺桿菌數(shù)月后才會(huì)產(chǎn)生抗體，因此部分患兒雖然檢測(cè)結(jié)果為陰性，但不能排除體內(nèi)抗體還未產(chǎn)生而導(dǎo)致假陰性的情況。在行根除治療后，血清抗幽門螺桿菌抗體持續(xù)存在，故半年乃至1年后隨訪仍顯示陽(yáng)性結(jié)果，使假陽(yáng)性率升高。因此，該方法是非現(xiàn)癥感染檢測(cè)方法，可反映一段時(shí)間內(nèi)幽門螺桿菌的感染情況，不能完全反映現(xiàn)癥感染情況，也不適用于根除治療后的療效判定。

2.3　蛋白免疫印跡和蛋白芯片技術(shù)

幽門螺桿菌的全基因序列已測(cè)出。尿素酶基因有4個(gè)開(kāi)放讀碼框架，分別是CagA、VacA、UreA、UreB。UreA與UreB編碼的多肽與尿素酶結(jié)構(gòu)的2個(gè)亞單位結(jié)構(gòu)相當(dāng)，致病性弱。CagA與VacA基因分別編碼空泡毒素和細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白，致病能力強(qiáng)。幽門螺桿菌是一個(gè)復(fù)合抗原，致病因子分為Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型為高毒力型，含CagA和VacA基因；Ⅱ型不含細(xì)胞毒素相關(guān)基因，毒性小?？褂拈T螺桿菌抗體的成分決定其致病特點(diǎn)，且與其耐藥性及預(yù)后密切相關(guān)[19]。蛋白免疫印跡技術(shù)利用抗原與抗體特異性結(jié)合的性質(zhì)，進(jìn)行血清學(xué)抗幽門螺桿菌抗體譜檢查，測(cè)出CagA、VacA、UreA、UreB 4種抗體，確定幽門螺桿菌的分型，從而判斷是否為高毒株感染，是否需進(jìn)行根除治療。蛋白芯片技術(shù)也可快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出血清中的多種抗幽門螺桿菌抗體，還可檢測(cè)菌株毒力、耐藥性，為臨床診斷、治療及預(yù)后評(píng)估提供幫助。其缺點(diǎn)是除菌治療后陽(yáng)性結(jié)果會(huì)持續(xù)一段時(shí)間，復(fù)查時(shí)需結(jié)合其他手段。利用蛋白免疫印跡技術(shù)檢測(cè)幽門螺桿菌已有相應(yīng)的試劑盒，操作簡(jiǎn)便、快速，適合兒童，但目前還沒(méi)有大范圍推廣。孫艷艷等[20]研究蛋白芯片技術(shù)在檢測(cè)幽門螺桿菌感染中的臨床意義，發(fā)現(xiàn)其診斷幽門螺桿菌感染的靈敏度為92.5%，特異度為41.3%，總符合率為73.5%。蛋白芯片技術(shù)具有較高的靈敏度，但要求較高，不易普及，多用于科研。

2.4　唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)

目前唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)方法有PCR、套式PCR、ELISA和幽門螺桿菌唾液測(cè)試板(H.pylorisaliva test cassette，HPS)。自從胃炎患者牙菌斑中分離培養(yǎng)出幽門螺桿菌后，國(guó)際醫(yī)學(xué)界的主流觀點(diǎn)是胃幽門螺桿菌感染的源頭在口腔，幽門螺桿菌隨唾液吞咽至胃內(nèi)，在胃內(nèi)定植后引起胃幽門螺桿菌感染[21]，故唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)受到關(guān)注。2009年葉國(guó)欽等[22]用13C-UBT、HPS與PCR同步檢測(cè)口腔幽門螺桿菌感染69例，結(jié)果顯示HPS與PCR具有很高的符合率，且具有高靈敏度和特異度。丁智慧等[23]在240例上消化道疾病患者中，用ELISA檢測(cè)唾液中幽門螺桿菌抗原，靈敏度為89.74%，與血清標(biāo)本檢測(cè)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。唾液幽門螺桿菌尿素酶抗原檢測(cè)技術(shù)，是采用膠體金層析式雙抗體免疫夾心法定性檢測(cè)口腔中幽門螺桿菌產(chǎn)生的尿素酶來(lái)診斷幽門螺桿菌感染的方法。幽門螺桿菌唾液膠體金法具有很高的靈敏度(10 ng/ml)，且操作簡(jiǎn)便，標(biāo)本易采集，取被檢者唾液15 min 即可出結(jié)果[24]。唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)方法雖然便捷，但有爭(zhēng)議的是僅憑口腔幽門螺桿菌感染檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果是否需進(jìn)行根除治療？口腔幽門螺桿菌感染能否等同于胃幽門螺桿菌感染？目前仍沒(méi)有定論。因此，唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性未能納入幽門螺桿菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)。在兒童中，年齡越小，其特異度和靈敏度越低。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，由于小年齡兒童檢查欠配合，以及留取的有效標(biāo)本量不足而使口腔中未檢測(cè)出幽門螺桿菌抗原等因素，其靈敏度在5歲以下兒童中僅為33%，在學(xué)齡期兒童中可上升至81%[25]。該方法不能單獨(dú)用于兒童幽門螺桿菌感染的診斷，但其安全、便捷，可嘗試用于胃幽門螺桿菌感染的篩查和流行病學(xué)調(diào)查[26]。

2.5　尿液抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)

Kato等發(fā)現(xiàn)，幽門螺桿菌感染者尿液中也存在特異性抗幽門螺桿菌抗體[27]。檢測(cè)方法有ELISA、乳膠凝聚試驗(yàn)、蛋白免疫印跡法等。2001年，Kato等應(yīng)用ELISA檢測(cè)尿液抗幽門螺桿菌抗體，以血清抗幽門螺桿菌抗體陽(yáng)性為診斷標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)尿液抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確率，分別為85.4%、95.5%和94.9%[28]。該研究顯示，尿液抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)與血清抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)具有同樣意義。尿液抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)最大的優(yōu)勢(shì)是取樣方便，尤其是兒童更容易接受，可用于診斷及治療后評(píng)估、隨訪，同時(shí)可用于大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查。但目前在兒童中應(yīng)用的經(jīng)驗(yàn)尚不多。

2.6　幽門螺桿菌糞便抗原檢測(cè)

幽門螺桿菌糞便抗原(H.pyloristool antigen，HpSA)檢測(cè)是一種方便、快捷的非侵入性檢測(cè)幽門螺桿菌感染的方法。其原理是用ELISA檢測(cè)HpSA。它能在人體感染幽門螺桿菌后1～3 d內(nèi)檢測(cè)到，可用于診斷幽門螺桿菌現(xiàn)癥感染。我國(guó)閆偉等于2010年對(duì)353例有消化道癥狀的患者行HpSA檢查，靈敏度、特異度分別為92.66%、97.20%，與“金標(biāo)準(zhǔn)”比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[29]。該方法的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)創(chuàng)，標(biāo)本極易獲得，嬰幼兒、精神病患者、臥床不起者、拒不檢查者均適用，不受年齡、性別和疾病的影響，且操作方便、簡(jiǎn)單，無(wú)需設(shè)備支持，適合大規(guī)模人群篩查。其缺點(diǎn)一是需取新鮮糞便檢測(cè)，冷凍的大便必須在解凍后1 d內(nèi)檢測(cè)，否則靈敏度大大降低；二是糞便中雜菌較多，幽門螺桿菌含量低，給檢測(cè)帶來(lái)一定的難度。目前，經(jīng)臨床驗(yàn)證，HpSA檢測(cè)的準(zhǔn)確率與呼氣試驗(yàn)相當(dāng)[30]。

3各種檢測(cè)方法在兒童中的應(yīng)用

兒童是一個(gè)特殊群體，需在眾多檢測(cè)方法中選出一種適合方法。有研究表明[31]，組織學(xué)病理檢查有較高的靈敏度，且兒童優(yōu)于成人；血清學(xué)抗體檢測(cè)在兒童中的靈敏度低于成人；糞便抗原檢測(cè)在成人中的靈敏度和特異度均高，但在兒童中較低。2012年有一項(xiàng)前瞻性隊(duì)列研究[32]，對(duì)50例有消化道癥狀的2~18歲兒童采用侵入性(RUT、組織病理學(xué)檢查、細(xì)菌培養(yǎng))及非侵入性方法(血清抗幽門螺桿菌IgG抗體檢測(cè))進(jìn)行幽門螺桿菌感染檢測(cè)。結(jié)果顯示，RUT與血清抗幽門螺桿菌IgG抗體檢查結(jié)果的符合率為88%。因此，建議對(duì)有消化道癥狀的兒童同時(shí)進(jìn)行RUT和血清抗幽門螺桿菌IgG抗體檢測(cè)；血清抗幽門螺桿菌IgG抗體檢查不單獨(dú)用于兒童；細(xì)菌培養(yǎng)因靈敏度低，不單獨(dú)用于兒童幽門螺桿菌感染的診斷。國(guó)內(nèi)也有學(xué)者對(duì)兒童幽門螺桿菌檢測(cè)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，金宗平等[33]對(duì)937例患兒行13C-UBT，其中96例行胃黏膜活檢標(biāo)本檢測(cè)，557例行HpSA檢測(cè)，陽(yáng)性檢出率三者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

在臨床工作中，需結(jié)合實(shí)際情況，選擇合適的方法。一般家長(zhǎng)不能直接接受侵入性檢測(cè)，對(duì)因有消化道癥狀前來(lái)就診的兒童，可先選用非侵入性檢測(cè)。>3歲、配合吹氣的兒童，首選呼氣試驗(yàn)，其靈敏度和特異度均較高。年齡較小的兒童，可選擇血清抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)及HpSA檢測(cè)。對(duì)于非侵入檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性的兒童，需進(jìn)一步行侵入性檢測(cè)，因?yàn)楦雇?、惡心等消化道癥狀均是非特異性的，可能由其他胃腸疾病或胃腸外器質(zhì)性疾病引起，如果非侵入性檢測(cè)幽門螺桿菌結(jié)果陽(yáng)性就進(jìn)行治療，可能會(huì)延誤其他器質(zhì)性疾病的診斷和治療。RUT是侵入性檢測(cè)的首選方法，簡(jiǎn)單、費(fèi)用低，還可行病理組織學(xué)檢查，2項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果(病理檢查+RUT)一致則診斷為幽門螺桿菌感染。另外，胃黏膜細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性足以診斷幽門螺桿菌感染；在消化道潰瘍出血情況下，病理組織學(xué)檢查或RUT只要1個(gè)陽(yáng)性就可診斷為幽門螺桿菌感染。當(dāng)幽門螺桿菌感染診斷明確，可行藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)臨床用藥。正規(guī)抗幽門螺桿菌治療后，在評(píng)估療效及隨訪方面，可選擇非侵入性檢測(cè)方法，應(yīng)在根除治療結(jié)束至少4周后進(jìn)行，首選呼氣試驗(yàn)，其次是HpSA檢測(cè)，兩者均較易被患者接受。另外，選擇侵入性檢測(cè)，需胃竇、胃體2個(gè)部位標(biāo)本RUT均陰性方可判定幽門螺桿菌根除治療有效。

4結(jié)語(yǔ)

兒童幽門螺桿菌感染須引起醫(yī)務(wù)人員及家長(zhǎng)的重視，其防治工作非常艱巨。在臨床工作中，要根據(jù)兒童的實(shí)際情況，選擇合適的方法進(jìn)行檢測(cè)。隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和科技水平的提高，將來(lái)會(huì)有更多具有更高診斷價(jià)值的檢測(cè)方法可供選擇，從而對(duì)兒童幽門螺桿菌感染做到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)，逐步減少其對(duì)兒童的危害。

參考文獻(xiàn)

[1]Hunt RH, Xiao SD, Megraud F, Leon-Barua R, Bazzoli F, Van der Merwe S, vaz Coelho LG, Fock KM, Fedail S, Cohen H, Malfertheiner P, Vakil N, Hamid S, Goh KL, Wong BC, Krabshuis JH, (杜穎, 叢衍群, 戴寧[譯]).世界胃腸病學(xué)組織(WGO-OMGE)臨床指南——發(fā)展中國(guó)家幽門螺桿菌感染[J].胃腸病學(xué)，2007，12(1)：40-52.

[2]王凱娟，王潤(rùn)田.中國(guó)幽門螺桿菌感染流行病學(xué)Meta分析[J].中華流行病學(xué)雜志，2003，24(6)：443-446.

[3]Hunt RH, Xiao SD, Megraud F, Leon-Barua R, Bazzoli F, van der Merwe S, Vaz Coelho LG, Fock M, Fedail S, Cohen H, Malfertheiner P, Vakil N, Hamid S, Goh KL, Wong BC, Krabshuis J, Le Mair A; World Gastroenterology Organization. Helicobacter pylori in developing countries.World Gastroenterology Organisation Global Guideline [J]. J Gastrointest Liver Dis, 2011, 20(3): 299-304.

[4]葉國(guó)欽.幽門螺桿菌感染與神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究進(jìn)展[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2013，93(38)：3082-3085.

[5]查健忠，戴星，李冰冰.兒童幽門螺桿菌感染與胃黏膜病理變化的關(guān)系[J].臨床兒科雜志，2010，28(1)：54-57.

[6]黃瑛.兒童幽門螺桿菌的診斷與治療[C].第十屆全國(guó)兒童消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編. 泉州：中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)消化學(xué)組、《中華兒科雜志》編輯委員會(huì), 2014：40-43.

[7]董玲，孫劍勇，王吉耀.幽門螺桿菌感染不同檢測(cè)方法的評(píng)價(jià)[J].中華消化雜志，2004，24(4)：235-236.

[8]Hsu WH, Wang SS, Kuo CH, Chen CY, Chang CW, Hu HM, Wang JY, Yang YC, Lin YC, Wang WM, Wu DC, Wu MT, Kuo FC. Dual specimens increase the diagnostic accuracy and reduce the reaction duration of rapid urease test [J]. World J Gastroenterol, 2010, 16(23): 2926-2930.

[9]徐東娟，李國(guó)富，張紅梅，呂懷盛，張寧妹，馬莉瓊，江海峰，張建中.不同方法檢測(cè)胃黏膜活檢標(biāo)本中幽門螺桿菌感染狀況的價(jià)值[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2014，30(6)：622-624, 628.

[10]Russmann H, Feydt-Schmidt A, Adler K, Aust D, Fischer A, Koletzko S. Detection of Helicobacter pylori in paraffin-embedded and in shock-frozen gastric biopsy samples by fluorescent in situ hybridization [J]. J Clin Microbiol, 2003, 41(2): 813-815.

[11]劉平，余秀顏，陳望，劉和錄，於艷霞，梁巧玲，黃江浩.兒童幽門螺桿菌感染多種檢測(cè)方法比較[J].中外醫(yī)療，2012，31(3)：12-13.

[12]Agudo S, Alarcón T, Urruzuno P, Martínez MJ, López-Brea M. Detection of Helicobacter pylori and clarithromycin resistance in gastric biopsies of pediatric patients by using a commercially available real-time polymerase chain reaction after NucliSens semiautomated DNA extraction [J]. Diagn Microbiol Infect Dis, 2010, 67(3): 213-219.

[13]Datta S, Chattopadhyay S, Chowdhury A, Santra A, Saha DR, Ramamurthy T, Bhattacharya SK, Berg DE, Nair GB, Mukhopadhyay AK. Diagnosis and genotyping of Helicobacter pylori by polymerase chain reaction of bacterial DNA from gastric juice[J]. J Gastroenterol Hepatol, 2005, 20(8): 1253-1259.

[14]Caristo E, Parola A, Rapa A, Vivenza D, Raselli B, Dondi E, Boldorini R, Oderda G. Clarithromycin resistance of Helicobacter pylori strains isolated from children’ gastric antrum and fundus as assessed by fluorescent in-situ hybridization and culture on four-sector agar plates [J]. Helicobacter, 2008, 13(6): 557-563.

[15]de Carvalho Costa Cardinali L, Rocha GA, Rocha AM, de Moura SB, de Figueiredo Soares T, Esteves AM, Nogueira AM, Cabral MM, de Carvalho AS, Bitencourt P, Ferreira A, Queiroz DM. Evaluation of [13C]urea breath test and Helicobacter pylori stool antigen test for diagnosis of H.pylori infection in children from a developing country [J]. J Clin Microbiol, 2003, 41(7): 3334-3335.

[16]黃敬，鄧秋蓮，周珍文，王鳳華，謝永強(qiáng)，黃勇，耿嵐嵐，龔四堂.兒童幽門螺桿菌感染4種診斷方法的對(duì)比[J].廣東醫(yī)學(xué)，2010，31(16)：2087-2089.

[17]Mendoza-Ibarra SI, Perez-Perez GI, Bosques-Padilla FJ, Urquidi-Rivera M, Rodríguez-Esquivel Z, Garza-González E. Utility of diagnostic tests for detection of Helicobacter pylori in children in northeastern Mexico [J]. Pediatr Int, 2007, 49(6): 869-874.

[18]Koletzko S. Noninvasive diagnostic tests for Helicobacter pylori infection in children [J]. Can J Gastroenterol, 2005, 19(7): 433-439.

[19]Go MF, Graham DY. How does Helicobacter pylori cause duodenal ulcer disease: the bug, the host, or both [J]? J Gastroenterol Hepatol, 1994, 9 (Suppl 1): S8-S10.

[20]孫艷艷，王雅杰，康熙雄.蛋白芯片技術(shù)檢測(cè)幽門螺桿菌感染的臨床價(jià)值[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，16(12)：1347-1349.

[21]陳駿，何祥一，吳凌莉，車團(tuán)結(jié).幽門螺桿菌口腔定植和胃腸疾病的關(guān)聯(lián)性研究[J].華西口腔醫(yī)學(xué)雜志，2011，29(4)：351-354.

[22]葉國(guó)欽，葉小欽，葉小培.唾液幽門螺桿菌抗原檢測(cè)法(HPS)的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].中國(guó)醫(yī)療前沿，2009，4(20)：18-19.

[23]丁智慧，陳萍.唾液抗幽門螺桿菌抗體檢測(cè)的價(jià)值[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2010，23(3)：307-309.

[24]Yee KC, Wei MH, Yee HC, Everett KD, Yee HP, Hazeki-Talor N. A screening trial of Helicobacter pylori-specific antigen tests in saliva to identify an oral infection [J]. Digestion, 2013, 87(3): 163-169.

[25]Gilger MA, Tolia V, Johnson A, Rabinowitz S, Jibaly R, Elitsur Y, Chong S, Rosenberg A, Gold B, Rosenthal P, Elkayam O, Marchildon P, Peacock J. The use of an oral fluid immunoglobulin G ELISA for the detection of Helicobacter pylori infection in children [J]. Helicobacter, 2002, 7(2): 105-110.

[26]葉國(guó)欽.口腔幽門螺桿菌感染臨床檢測(cè):當(dāng)前診斷領(lǐng)域的熱點(diǎn)[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2012，92(16)：1084-1086.

[27]Kato M, Asaka M, Saito M, Sekine H, Ohara S, Toyota T, Akamatsu T, Kaneko T, Kiyosawa K, Nishizawa OA, Katsuyama T, Abe M, Kosaka M, Hariya SA, Sanai Y, Sawamura M, Tachikawa T. Clinical usefulness of urine-based enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibody to Helicobacter pylori: A collaborative study in nine medical institutions in Japan [J]. Helicobacter, 2000, 5(2): 109-119.

[28]Kato S, Tachikawa T, Ozawa K, Konno M, Okuda M, Fujisawa T, Nakazato Y, Tajiri H, Iinuma K. Urine-based enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of Helicobacter pylori infection in children [J]. Pediatrics, 2001, 107(6): E87.

[29]閆偉，曹建彪，王繼恒，王志紅，韓英.受試者工作特征曲線法分析糞便幽門螺桿菌特異性抗原試驗(yàn)的診斷效率[J].中華消化雜志，2010，30(3)：154-157.

[30]Malfertheiner P, Megraud F, O’Morain CA, Atherton J, Axon AT, Bazzoli F, Gensini GF, Gisbert JP, Graham DY, Rokkas T, El-Omar EM, Kuipers EJ; European Helicobacter Study Group. Management of Helicobacter pylori infection—the Maastricht IV/Florence Consensus Report [J]. Gut, 2012, 61(5): 646-664.

[31]Pourakbari B, Ghazi M, Mahmoudi S, Mamishi S, Azhdarkosh H, Najafi M, Kazemi B, Salavati A, Mirsalehian A. Diagnosis of Helicobacter pylori infection by invasive and noninvasive tests [J]. Braz J Microbiol, 2013, 44(3): 795-798.

[32]Abdulqawi K, El-Mahalaway AM, Abdelhameed AA. Correlation of serum antibody titres with invasive methods for rapid detection of Helicobacter pylori infections in symptomatic children [J]. Int J Exp Pathol, 2012, 93(4): 295-304.

[33]金宗平，劉玉華，李黎，楊愛(ài)君.兒童幽門螺桿菌感染臨床檢測(cè)方法評(píng)價(jià)[J].實(shí)用兒科臨床雜志，2007，22(19)：1449-1450.

Corresponding author. HUANG Ying, E-mail: Yhuang815@163.com

Comparison of commonly used detection methods forHelicobacterpyloriinfection in children

HUANG Jie, HUANG Ying

Children’s Hospital of Fudan University, Shanghai 200032, China

Abstract:Helicobacter pylori (H. pylori) is a chronic infectious pathogen with high prevalence. H. pylori infection is closely related to chronic gastritis, dyspepsia, iron deficiency, anemia and growth retardation in children. It is a lifetime health issue for children. Therefore, finding a safe, efficient and convenient detection method suitable for children is very important. Currently, the commonly used detection methods in children include rapid urease test (RUT), histological examination, bacterial culture, urea breath test (UBT), serum H. pylori-IgG antibodies, H. pylori stool antigen, etc. In general, a non-invasive, efficient, operation friendly and economic H. pylori detection method is needed. Therefore suitable method should be chosen according to the diagnosis purpose. This review summarizes various detection methods and their clinical value for H. pylori infection in children.

Key words:Helicobacter pylori; Diagnosis; Child

收稿日期：(2014-12-01)

通信作者：黃瑛