銅仁地區(qū)腸道病毒EV71 基因分型與體液免疫水平關(guān)系的研究

譚 斌 王建華 周明軍 楊文才 余麗婭 (貴州省銅仁市人民醫(yī)院，銅仁 554300)

手足口病是一種全球性的常見兒童傳染病，又可被稱為發(fā)疹性水皰性口腔炎，它由多種腸道病毒引起［1］，多發(fā)生于學(xué)齡前期小兒及嬰幼兒，可引起手、足、口腔和臀部等部位的皰疹、丘疹或潰瘍，甚至威脅到患兒的生命安全［2］。大量文獻(xiàn)研究表明，腸道病毒71 型(EV71)和柯薩奇A 組16 型病毒是手足口病主要致病病原體［3］。因EV71 感染所致手足口病患兒病程進(jìn)展快、病情重、預(yù)后差，且近年來EV71 感染患兒并發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀而導(dǎo)致死亡病例較多，引起了廣泛關(guān)注。既往文獻(xiàn)報(bào)道了腸道病毒EV71 能使患兒的體液免疫功能發(fā)生紊亂［4］，但很少有文獻(xiàn)報(bào)道腸道病毒EV71 基因分型與體液免疫功能有何種關(guān)系。本文就選擇2014 年2 月至2014 年8 月銅仁地區(qū)來我院診治的腸道病毒EV71感染的手足口病患兒，探究分析腸道病毒EV71 基因分型與體液免疫功能的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014 年2 月至2014 年8 月銅仁地區(qū)來我院診治的腸道病毒EV71 感染的手足口病患兒，所有患兒符合2006 年原衛(wèi)生部頒布實(shí)施的《手足口病預(yù)防控制指南》相應(yīng)診斷標(biāo)準(zhǔn)。相對(duì)于輕型手足口病患兒的發(fā)熱、口痛、厭食、潰瘍、皮疹等臨床表現(xiàn)，重型患兒還表現(xiàn)為病情進(jìn)展更為迅速、頭痛、嘔吐、嗜睡、意識(shí)障礙、易患腦膜炎、循環(huán)障礙等。根據(jù)感染主要病毒的基因類型分為三組，即A組，主要有A 型腸道病毒EV71 感染，20 例患兒;B組，主要有B 型腸道病毒EV71 感染，20 例患兒;C組，主要有C 型腸道病毒EV71 感染，20 例患兒。A組患兒男性11 例，女性9 例，年齡0.5～7.0 歲;B組患兒男性13 例，女性7 例，年齡0.6～6.8 歲;C組患兒男性12 例，女性8 例，年齡0.7～7.0 歲.三組患兒在性別、年齡、病程以及患者狀況等資料方面無顯著性差異(P ＞0.05)。見表1。

1.2 檢測(cè)方法 三組患兒均在住院的第二天清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血2.5 ml，在3 000 r/min、5 min、離心半徑25 cm 的狀態(tài)下離心;離心后，取上層血清在-30℃下保存24 h 統(tǒng)一檢測(cè)。采用放射性免疫擴(kuò)散法測(cè)定免疫球蛋白IgA、IgG 以及IgM 的水平;采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 的水平。分析比較三組患者的各項(xiàng)指標(biāo)的差異性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)處理軟件包為SPSS16.0，計(jì)量的比較采用t 值檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)的比較采用χ2檢驗(yàn)，P ＜0.05 表示有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 三組患者TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平的比較經(jīng)過檢測(cè)，A 組患者的TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平分別為(285.60±30.50)pg/L、(60.50±5.60)pg/L、(25.50±4.50)pg/L，均較B 組、C 組患者的三項(xiàng)指標(biāo)的水平高，具有顯著性差異(P ＜0.05)，C組患者的TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平均較B 組患者的三項(xiàng)指標(biāo)的水平高，具有明顯差異性(P ＜0.05)。具體見表2。

2.2 三組患者血清免疫球蛋白水平的比較 經(jīng)過檢測(cè)，三組患者的IgA、IgG 水平兩兩比較均存在顯著性差異(P ＜0.05)，A 組患者的IgA、IgG 水平最高，C 組次之，B 組患者水平最低;三組患者的IgM的水平兩兩比較無顯著差異性(P ＞0.05)。見表3。

表1 三組患者的一般臨床資料的比較(±s)Tab.1 Comparison of general information of patients among three groups(±s)

表1 三組患者的一般臨床資料的比較(±s)Tab.1 Comparison of general information of patients among three groups(±s)

表2 三組患者TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平的比較(±s)Tab.2 Comparison of TNF-ɑ，IL-6 and IL-10 in patients among three groups(±s)

表2 三組患者TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平的比較(±s)Tab.2 Comparison of TNF-ɑ，IL-6 and IL-10 in patients among three groups(±s)

表3 三組患者血清免疫球蛋白水平的比較(±s)Tab.3 Comparison of immune globulin in patients among three groups(±s)

表3 三組患者血清免疫球蛋白水平的比較(±s)Tab.3 Comparison of immune globulin in patients among three groups(±s)

3 討論

腸道病毒71 型(EV71)感染常見，表現(xiàn)為常見的手足口病和無菌性腦炎、腦膜腦炎、脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹等多種神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾?。?］。特別是近年來，全國各地相繼報(bào)道EV71 的流行，成為威脅小兒健康和生命的重要原因。腸道病毒71 型(EV71)為小RNA 病毒，由單正鏈RNA 和病毒衣殼組成［6］。其病毒顆粒大致呈球形，直徑約在24～30 nm，外周無包膜和突起，晶格狀排列，衣殼有VP1-VP4 四種蛋白，其中VP1、VP2 和VP3 三個(gè)蛋白多肽暴露在衣殼表面，VP4 包埋在衣殼內(nèi)部與RNA 緊密相連?，F(xiàn)代生物分子研究表明，根據(jù)VP1 的核苷酸序列，EV71 可分為A、B、C 三個(gè)基因亞型［7］。A 型EV71在1970 年在美國首次分離出來，在隨后的研究相繼發(fā)現(xiàn)了B 與C 型EV71 病毒。隨著分子免疫學(xué)研究的深入，EV71 中樞損害與免疫功能異常的關(guān)系逐漸引起重視。

大量文獻(xiàn)研究表明，機(jī)體感染EV71 病毒后可出現(xiàn)體液免疫和細(xì)胞免疫紊亂［8］?；純焊腥静《竞螅渫庵苎蠧D3+T 淋巴細(xì)胞、CD4+T 淋巴細(xì)胞以及CD8+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量較健康對(duì)照兒童升高，CD4+T 細(xì)胞/CD8+T 細(xì)胞比值降低，血清IgM、IgG水平顯著升高，IgA 表達(dá)也增高，提示患兒的體液免疫可能出現(xiàn)亢進(jìn)［9］;隨著EV71 所致手足口病病情的加重，Il-6、IL-10 的血清濃度和TNF-α 水平增加，提示EV71 感染可能對(duì)患兒免疫功能產(chǎn)生抑制［10］。國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道了腸道病毒EV71 能使患兒的體液免疫功能發(fā)生紊亂，但很少有文獻(xiàn)報(bào)道腸道病毒EV71 基因分型與體液免疫功能有何種關(guān)系。本文研究發(fā)現(xiàn)，A 型病毒感染的患者的TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平均分別較B 型、C 型感染的患者的三項(xiàng)指標(biāo)的水平高，具有顯著性差異(P ＜0.05)，C 型感染的患者TNF-ɑ、IL-6 以及IL-10 水平均較B 型感染患者的三項(xiàng)指標(biāo)的水平高，具有明顯差異性(P ＜0.05);三組患者的IgA、IgG 水平兩兩比較均存在顯著性差異(P ＜0.05)，A 型病毒感染的患者的IgA、IgG 水平最高，C 型感染的患者的水平次之，B 型感染的患者水平最低;三組患者的IgM 的水平兩兩比較無顯著差異性。也就是說，病毒類型的不同會(huì)對(duì)患兒的體液免疫產(chǎn)生不同的影響。出現(xiàn)這樣的結(jié)果，具體機(jī)制尚未清楚，需要進(jìn)一步探究分析。

綜上所述，腸道病毒EV71 的不同基因型均能引起嚴(yán)重的手足口病，均能顯著提高血清炎癥因子的水平以及免疫球蛋白的水平，但不同基因型的致病力度不同，存在一定的差異性，但具體機(jī)制需要進(jìn)一步探究。

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