大葉藤黃化學(xué)成分研究

宋敬麗，高 慧，袁 林，王志亮*

(1．棗莊科技職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)系，山東棗莊277599;2．湖北民族學(xué)院風(fēng)濕性疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點實驗室，湖北恩施445000)

大葉藤黃(Garcinia xanthochymus)是我國傳統(tǒng)的傣藥之一，產(chǎn)于云南南部和西南部至西部及廣西西南部［1］，季豐等［2］從中分離到二苯甲酮衍生物、黃酮、三萜、異戊二烯口山酮類化合物。藥理研究發(fā)現(xiàn)大葉藤黃具有較廣的生物活性，如抗菌、抗細(xì)胞毒素、抗HIV病毒等。為了探索大葉藤黃藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，筆者在此對其干燥莖皮進(jìn)行了提取，通過硅膠柱色譜、Sephadex LH-20、ODS以及MCI等多種色譜方法分離及UV、MS及NMR等波譜技術(shù)鑒定化合物結(jié)構(gòu)。

1 材料與方法

1．1 材料

1．1．1 研究對象。大葉藤黃于2013年9月購于云南省蒙自市，經(jīng)湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院主任藥師張國安鑒定為G．xanthochymus。

1．1．2 主要儀器。API QSTAR Pulsari質(zhì)譜儀;Bruker DRX-500核磁共振儀;Büchi中壓液相制備色譜系統(tǒng);Agilent 1200高效液相色譜儀;200～300目正相硅膠，GF254TLC板(青島海洋化工);Sephadex LH-20(Pharmacia公司);ODS柱層析(C18，10 ～ 40 μm，Merk公司);MCI gel CHP 20P(75 ～ 150 μm，三菱化學(xué))。

1．2 方法 大葉藤黃干燥莖皮10．0 kg經(jīng)粉碎后用70%乙醇浸泡3次，每次24 h，合并提取液，減壓濃縮得浸膏980 g。經(jīng)硅膠柱色譜分離，采用石油醚-丙酮梯度洗脫(10∶1→5∶1→3∶1→1∶1→丙酮及純甲醇)，依次得到6個主要流份(Fr．1 ～Fr．6)，F(xiàn)r．1 經(jīng)過硅膠柱層析(石油醚 - 醋酸乙酯 4∶1)等度洗脫再經(jīng)Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1)析出化合物2，剩余部分經(jīng)過MCI大孔樹脂(50%甲醇/水)洗脫后反復(fù)重結(jié)晶得到化合物9、10。Fr．2經(jīng)過硅膠柱層析(氯仿-丙酮10∶1)等度洗脫再經(jīng)Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1)得到化合物3、6，剩余部分經(jīng) Sephadex LH-20(甲醇)得到化合物 1、5、7。Fr．3經(jīng)類似方法純化得到化合物4。Fr．4經(jīng)硅膠柱層析(氯仿-甲醇8∶1)及中壓制備(65%甲醇/水)得到化合物8。

2 結(jié)果與分析

從大葉藤黃提取中分離鑒定了10個化合物，其結(jié)構(gòu)如圖1所示，其中化合物7、9、10為首次從該屬植物中分離得到。

2．1 化合物1 黃色粉末，分離得到615．0 mg，分子式為C23H24O6;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 227、255、281、342、376(sh)nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 419［M+Na］+。1H-NMR(CD3OD，500 MHz)δ分別為 6．49(1H，d，J=8．8 Hz，H-2)、7．07(1H，d，J=8．8Hz，H-3)、5．02(1H，t，J=6．4 Hz，H-2′)、3．38(2H，d，J=6．4 Hz，H-1′)、5．01(1H，t，J=5．6 Hz，H-2″)、3．96(2H，d，J=5．6 Hz，H-1″)、1．76(6H，s)、1．66(6H，s)，13C-NMR(CD3OD，125 MHz)δ分別為 155．1(C-1)、109．8(C-2)、122．6(C-3)、137．2(C-4)、143．8(C-4a)、146．3(C-4b)、131．6(C-5)、151．1(C-6)、135．1(C-7)、127．1(C-8)、112．2(C-8a)、184．5(C-9)、110．1(C-9a)、25．6(C-1′)、124．0(C-2′)、131．2(C-3′)、25．9(C-4′)、18．4(C-5′)、29．5(C-1″)、125．4(C-2″)、132．2(C-3′)、25．8(C-4″)、18．2(C-5″)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3］一致，故鑒定為 1，4，5，6-Tetrahydroxy-7，8-diprenylxanthone。

2．2 化合物2 黃色粉末，分離得到200．0 mg，分子式為C13H8O4;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 235、258、387 nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 251［M+Na］+。1H-NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ分別為 12．63(1H，s，OH-1)、10．14(1H，s，OH-7)、6．76(1H，d，J=8．5 Hz，H-2)、7．69(1H，t，J=8．5 Hz，H-3)、7．03(1H，d，J=8．5 Hz，H-4)、7．54(1H，d，J=9．5 Hz，H-5)、7．35(1H，dd，J=9．5，3．0 Hz，H-6)、7．42(1H，d，J=3．0 Hz，H-8)，氫譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］一致，故鑒定為 1，7-二羥基口山酮(1，7-Dihydroxyxanthone)。

2．3 化合物3 黃色粉末，分離得到525．0 mg，分子式為C28H32O6;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 238(sh)、257、330 nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 487［M+Na］+。1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ分別為 13．52(1H，s，OH-1)、6．21(1H，s，H-2)、5．25(1H，t，J=7．2 Hz，H-2′)、3．50(2H，d，J=7．2 Hz，H-1′)、4．98(1H，t，J=4．8 Hz，H-2?)、3．96(2H，d，J=4．8 Hz，H-1?)、4．98(1H，t，J=5．6 Hz，H-2″)、3．31(2H，d，J=5．6 Hz，H-1″)、1．77(3H，s)、1．70(6H，s)、1．62(3H，s)、1．61(3H，s)、1．59(3H，s)，氫譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］一致，故鑒定為Isogarciniaxanthone E。

2．4 化合物4 黃色粉末，分離得到132．0 mg，分子式為C18H16O6;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 228、254、281、338、358(sh)nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 351［M+Na］+。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ分別為 6．53(1H，d，J=8．8 Hz，H-2)、7．12(1H，d，J=8．8 Hz，H-3)、7．41(1H，s，H-8)、5．34(1H，t，J=7．2 Hz，H-2′)、3．34(2H，d，J=7．2 Hz，H-1′)、1．76(3H，s)、1．73(3H，s)，13C-NMR(CD3OD，100 MHz)δ分別為155．0(C-1)、109．9(C-2)、123．2(C-3)、138．0(C-4)、144．8(C-4a)、145．5(C-4b)、133．2(C-5)、151．7(C-6)、128．1(C-7)、116．5(C-8)、113．9(C-8a)、182．9(C-9)、109．5(C-9a)、29．1(C-1′)、122．9(C-2′)、134．1(C-3′)、26．0(C-4′)、17．9(C-5′)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］一致，故鑒定為 1，4，5，6-Tetrahydroxy-7-prenylxanthone。

2．5 化合物5 黃色粉末，分離得到500．0 mg，分子式為C13H18O5;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 250、262(sh)、310、399 nm;電噴霧電離質(zhì)譜ESI-MS m/z267［M+Na］+。1HNMR(DMSO-d6，400 MHz)δ分別為 11．80(1H，s，OH-1)、10．25(1H，s，OH-4)、9．48(1H，s，OH-5)、6．65(1H，d，J=8．8 Hz，H-2)、7．27(1H，d，J=8．8 Hz，H-3)、7．28(1H，t，J=7．8 Hz，H-7)、7．34(1H，dd，J=7．8，1．5 Hz，H-6)、7．58(1H，dd，J=7．8，1．5 Hz，H-8)，13C-NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ分別為152．4(C-1)、109．1(C-2)、123．3(C-3)、137．4(C-4)、143．0(C-4a)、144．7(C-4b)、146．3(C-5)、120．9(C-6)、124．5(C-7)、114．8(C-8)、120．7(C-8a)、182．1(C-9)、108．4(C-9a)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］一致，故鑒定為Subelliptenone G。

2．6 化合物6 黃色粉末，分離得到53．0 mg，分子式為C19H18O6;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 235、252、283、386 nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 365［M+Na］+。1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ分別為 12．11(1H，s，OH-1)、10．62(1H，s，OH-4)、9．67(1H，s，OH-6)、6．60(1H，d，J=8．4 Hz，H-2)、7．23(1H，d，J=8．4 Hz，H-3)、7．59(1H，s，H-8)、5．31(1H，t，J=7．2 Hz，H-2)、3．96(3H，s，OMe-5)、3．31(2H，d，J=7．2 Hz，H-1)、1．72(3H，s)、1．68(3H，s)，氫譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］一致，故鑒定為 1，4，6-Trihydroxy-5-methoxy-7-prenylxanthone。

2．7 化合物7 黃色粉末，分離得到8．0 mg，分子式為C20H16O5;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 232、306、345 nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 359［M+Na］+。1H-NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ分別為 13．37(1H，s，OH-5)、5．77(1H，d，J=10．0 Hz，H-2?)、6．57(1H，d，J=10．0 Hz，H-3?)、6．56(1H，s，H-8)、6．81(1H，s，H-3)、6．91(2H，d，J=9．0 Hz，H-3″，5″)、7．91(2H，d，J=9．0 Hz，H-2″，6″)、1．42(6H，s，H-4?，5?)，13CNMR(DMSO-d6，125 MHz)δ分別為 182．0(C-4)、164．0(C-7)、161．4(C-5)、158．6(C-2)、156．4(C-4)、155．5(C-9)、128．9(C-2?)、128．5(C-2″，6″)、121．0(C-1)、116．0(C-3″，5″)、114．6(C-1?)、104．8(C-6)、104．6(C-10)、102．9(C-3)、95．0(C-8)、77．9(s，C-3?)、27．8(q，C-4?)、27．8(q，C-5″)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］一致，故鑒定為Carpachromene。

2．8 化合物8 黃色粉末，分離得到545．0 mg，分子式為C20H18O5;紫外光譜 UV(MeOH)λmax分別為 218、273、336 nm;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 361［M+Na］+。1H-NMR(Acetone-d6，500 MHz)δ分別為 13．28(1H，s，OH-5)、6．60(1H，s，H-8)、6．62(1H，s，H-3)、7．00(2H，d，J=9．0 Hz，H-3″，5″)、7．91(2H，d，J=9．0 Hz，H-2″，6″)、5．26(1H，t，J=7．0 Hz，H-2)、3．33(2H，d，J=7．0 Hz，H-1?)、1．77(3H，s，H-5?)、1．63(3H，s，H-4?)，13C-NMR(Acetone-d6，125 MHz)δ分別為184．3(C-4)、165．4(C-2)、164．0(C-7)、161．8(C-4″)、161．1(C-5)、156．3(C-9)、132．0(C-3)、129．1(C-2″，6″)、123．3(C-1)、123．2(C-2?)、116．8(d，C-3″，5″)、110．8(C-6)、104．0(C-3)、103．9(C-10)、94．0(C-8)、25．8(C-4?)、22．0(C-1?)、17．9(C-5?)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］一致，故鑒定為6-Prenylapigenin。

2．9 化合物9 白色粉末，分離得到160．0 mg，分子式為C30H52O2;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 467［M+Na］+。1HNMR(CDCl3，500 MHz)δ分別為 5．11(1H，t，J=7．0 Hz，H-24)、3．20(1H，dd，J=11．0，4．0 Hz，H-3)、1．68(CH3-26)、1．62(CH3-27)、1．13(CH3-21)、0．97(CH3-18)、0．95(CH3-19)、0．87(CH3-28)、0．84(CH3-29)、0．77(CH3-30)，13C-NMR(CDCl3，125 MHz)δ分別為 39．0(C-1)、27．5(C-2)、79．0(C-3)、39．1(C-4)、55．9(C-5)、18．4(C-6)、35．3(C-7)、40．4(C-8)、50．7(C-9)、37．2(C-10)、21．6(C-11)、25．5(C-12)、42．4(C-13)、50．4(C-14)、31．3(C-15)、27．6(C-16)、50．0(C-17)、16．3(C-18)、15．6(C-19)、75．5(C-20)、24．9(C-21)、40．6(C-22)、22．6(C-23)、124．8(C-24)、131．7(C-25)、25．8(C-26)、17．8(C-27)、28．1(C-28)、15．4(C-29)、16．5(C-30)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］一致，故鑒定為達(dá)瑪烯二醇II(Dammarenediol II)。

2．10 化合物10 白色粉末，分離得到276．0 mg，分子式為C30H52O3;電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MS m/z 483［M+Na］+。1HNMR(CDCl3，400 MHz)δ分別為 3．63(1H，dd，J=10．0，5．1 Hz，H-24)、3．18(1H，dd，J=11．2，5．2 Hz，H-3)、1．17(3H，s，CH3-26)、1．13(3H，s，CH3-21)、1．10(3H，s，CH3-27)、0．96(6H，s，CH3-28，CH3-18)、0．86(3H，s，CH3-30)、0．83(3H，s，CH3-19)、0．76(3H，s，CH3-29)，13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ分別為 39．1(C-1)、27．4(C-2)、79．0(C-3)、39．0(C-4)、55．9(C-5)、18．4(C-6)、35．3(C-7)、40．4(C-8)、50．8(C-9)、37．2(C-10)、21．8(C-11)、25．9(C-12)、42．8(C-13)、50．0(C-14)、27．0(C-15)、31．5(C-16)、49．8(C-17)、16．2(C-18)、15．5(C-19)、86．5(C-20)、27．2(C-21)、34．8(C-22)、26．4(C-23)、86．3(C-24)、70．2(C-25)、27．8(C-26)、24．1(C-27)、28．0(C-28)、15．4(C-29)、16．4(C-30)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］一致，故鑒定為3-Epicabraleadiol。

3 結(jié)論

該研究對大葉藤黃的干燥莖皮進(jìn)行提取，采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20、ODS以及MCI等多種色譜方法分離純化，并根據(jù)UV、MS及NMR等波譜技術(shù)鑒定了10個化合物，分別為 1，4，5，6-Tetrahydroxy-7，8-diprenylxanthone(1)、1，7-二羥基口山酮(2)、Isogarciniaxanthone E(3)、1，4，5，6-Tetrahydroxy-7-prenylxanthone(4)、Subelliptenone G(5)、1，4，6-Trihydroxy-5-methoxy-7-prenylxanthone(6)、Carpachromene(7)、6-Prenylapigenin(8)、達(dá)瑪烯二醇 II(9)、3-Epicabraleadiol(10)，其中1～6為口山酮類化合物，7～8為黃酮類化合，9～10為三萜類化合物，化合物7、9、10為首次從該屬植物中分離得到。分離得到的化合物類型較為豐富，為進(jìn)一步研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)，對其藥用資源的開發(fā)也起到了較好的促進(jìn)作用。

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