化療聯(lián)合DC-CIK治療中晚期胃癌研究

吳付兵,黃 雯,王康霞,王明元,徐方貴,黃春開,王 星

(南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院，福建 莆田 351100)

化療聯(lián)合DC-CIK治療中晚期胃癌研究

吳付兵,黃 雯,王康霞,王明元,徐方貴,黃春開,王 星

(南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院，福建 莆田 351100)

目的 觀察DC-CIK聯(lián)合化療治療中晚期胃癌的臨床療效以及安全性。方法 將52例中晚期胃癌患者隨機(jī)分為治療組和對照組，對照組采用吉西他濱和奧沙利鉑治療，治療組采用吉西他濱和奧沙利鉑聯(lián)合DC-CIK治療，觀察2組近期療效、生活質(zhì)量、1年生存率以及不良反應(yīng)發(fā)生情況。結(jié)果 治療組客觀緩解率為54%，疾病控制率為81%；對照組客觀緩解率為46%，疾病控制率為58%。2組客觀緩解率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而疾病控制率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后，治療組KPS評分顯著高于對照組(P<0.05)?；颊呙庖吡μ岣?，而對照組免疫力進(jìn)一步降低，2組治療后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。1年生存率2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但是治療組有延長的趨勢。2組不良反應(yīng)均為血液學(xué)毒性和消化道反應(yīng)，但是治療組不良反應(yīng)比對照組明顯減輕(P<0.05)。結(jié)論 DC-CIK聯(lián)合化療治療中晚期胃癌的臨床療效優(yōu)于單純常規(guī)化療，而且可以提高疾病控制率和患者生活質(zhì)量，減輕不良反應(yīng)，值得推廣應(yīng)用。

化療;DC-CIK;中晚期胃癌

近年來，隨著社會、環(huán)境、經(jīng)濟(jì)以及生活方式的變化，惡性腫瘤發(fā)病率逐年提高，已經(jīng)成為威脅生命的頭號殺手。胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)病率占據(jù)消化道惡性腫瘤首位，而且早期不易發(fā)現(xiàn)，確診時多已到晚期，失去手術(shù)的機(jī)會。而對于中晚期腫瘤患者而言，手術(shù)切除后患者生活質(zhì)量、精神狀態(tài)以及生存率并沒有得到明顯改善，所以開發(fā)新的治療手段就顯得尤為重要。隨著分子生物學(xué)以及腫瘤免疫學(xué)的發(fā)展，生物治療已展現(xiàn)出越來越廣闊的前景。腫瘤的生物治療是一種依靠自身免疫系統(tǒng)的激活來抗癌的新型治療方式，其通過生物制劑或者自身的防御機(jī)制來激發(fā)、增強(qiáng)自身的免疫功能，從而達(dá)到抑制腫瘤生長或者根治的目的。治療法包括腫瘤的基因治療和免疫治療。其中免疫治療主要包括細(xì)胞因子療法、疫苗療法、單克隆抗體療法、免疫導(dǎo)向療法以及過繼免疫療法。DC-CIK療法是過繼細(xì)胞免疫療法的一種，具有增殖速度快、殺瘤活性高、殺瘤種類廣以及安全性高的特點[1-2]。目前在治療晚期非小細(xì)胞肺癌[3-4]急性髓細(xì)胞白血病[5]以及結(jié)直腸癌[6-7]中具有良好的臨床療效，成為腫瘤治療的有效手段，是繼手術(shù)、放化療之后的有效輔助治療方法，在改善患者的生活質(zhì)量、增強(qiáng)免疫能力、改善精神狀態(tài)以及延長生存時間方面有著良好的應(yīng)用前景。而采用DC-CIK和手術(shù)、放化療等手段聯(lián)合使用有利于提高腫瘤治療的綜合療效。本研究觀察了DC-CIK治療法聯(lián)合化療治療中晚期胃癌的療效以及安全性，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 選擇2013年5月—2014年3月來南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院腫瘤中心接受化療治療的中晚期胃癌患者52例，均經(jīng)過病理、細(xì)胞學(xué)以及影像學(xué)檢驗確診，預(yù)計生存期>3個月，至少能完成3周期化療， KPS評分≥60分?；熐靶母文I以及尿常規(guī)正常，無低、高血壓病史，血常規(guī)、心電圖等結(jié)果提示無化療禁忌證。排除正在接受放化療或其他抗腫瘤治療者，同時存在其他惡性腫瘤及傳染病的患者、懷孕期及哺乳期婦女、對生物制品過敏者、伴有嚴(yán)重心肺肺腎功能不全及免疫功能降低者。將52例患者隨機(jī)分成2組：治療組26例，男13例，女13例；年齡40～65歲；按國際抗癌聯(lián)盟(UICC) 分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期：Ⅱ期13例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例。對照組26例，男14例，女12例；年齡45～68歲；臨床分期：Ⅱ期14例，Ⅲ期8例，Ⅳ期4例。2組患者性別、年齡、臨床分期等比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05),具有可比性。

1.2治療方法

1.2.1對照組 采用吉西他濱聯(lián)合奧沙利鉑化療。吉西他濱1 000 mg/m2，第1,8天，靜滴30 min；奧沙利鉑85 mg/m2靜滴，第1天。

1.2.2治療組 在常規(guī)化療的基礎(chǔ)上加上DC-CIK治療。采集患者外周血50～100 mL，采血當(dāng)日患者飲食要清淡，采用血液成分分離機(jī)循環(huán)外周血，采集單核細(xì)胞，再將分離出的單核細(xì)胞放在超潔凈實驗室進(jìn)行誘導(dǎo)、激活，定向培養(yǎng)出DC-CIK細(xì)胞，參照文獻(xiàn)[3]方法，待細(xì)胞成熟后，再將DC-CIK分次回輸?shù)交颊唧w內(nèi)。每次回輸前2 d對培養(yǎng)液行涂板及細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)，每次回輸細(xì)胞前1 h以凝膠法測細(xì)菌內(nèi)毒素。每次輸注DC-CIK細(xì)胞不低于1×109個，4周為1個療程，每個療程輸入細(xì)胞總數(shù)>1×1010個，DC-CIK與化療不同時進(jìn)行，一般間隔1～2周。2個療程后評價療效。

1.3觀察指標(biāo) ①觀察2組近期療效按WHO標(biāo)準(zhǔn)判定。完全緩解(CR)：可見的腫瘤病變完全消失，維持4周以上;或所有的癥狀、體征完全消失至少4周。部分緩解(PR)：腫瘤病灶的最大直徑及其最大的垂直橫徑的乘積縮小50%以上，其他病灶無增大，無新病灶出現(xiàn)，維持4周以上；或估計腫瘤大小減少大于等于50%，至少4周。穩(wěn)定(SD)：腫瘤病灶的兩徑乘積縮小不足50%，或增大不超過25%，無新病灶出現(xiàn)，維持4周以上；或病情無明顯變化至少4周，估計腫瘤大小減少不足50%，增大不到25%。進(jìn)展(PD)：腫瘤病灶的兩徑乘積增大25%以上或出現(xiàn)新病灶；或有新病變出現(xiàn)，或原有病變估計增大大于等于25%。以CR+PR計算客觀緩解率(RR)，以CR+PR+SD計算疾病控制率(DCR)。②觀察2組患者生活質(zhì)量、免疫功能、不良反應(yīng)情況以及1年生存率。生活質(zhì)量采用KPS評分判定。治療前及治療結(jié)束后1周抽取2組患者外周血，檢驗輔助性T細(xì)胞(CD3+CD4+)、抑制性T細(xì)胞(CD3+CD8+)、NK細(xì)胞(CD3-CD56+)以及NKT細(xì)胞(CD3+CD56+)百分率。不良反應(yīng)按WHO標(biāo)準(zhǔn)判定但不予分級。1年生存率指接受治療的患者經(jīng)1年隨訪尚存活數(shù)所占的比例。

2 結(jié) 果

2.1近期療效 2組均完成2周期治療。治療組CR 1例，PR 13例，SD 7例，PD 5例，客觀緩解率54% ，疾病控制率81%；對照組CR 0例，PR 12例，SD 3例，PD 11例，客觀緩解率46%，疾病控制率58%。2組客觀緩解率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，疾病控制率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2生活質(zhì)量 治療組和對照組治療前KPS評分均為(70±10)分。對照組化療后KPS評分為(75±10)分，與治療前比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療組治療后KPS評分為(85±17)分，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.3免疫力功能 治療前2組輔助性T細(xì)胞、NK細(xì)胞、抑制性T細(xì)胞及NKT細(xì)胞百分率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。治療后治療組各指標(biāo)均明顯改善(P均<0.05)，而對照組化療后僅輔助T細(xì)胞、NKT細(xì)胞百分率明顯降低(P均<0.05)。治療后2組各指標(biāo)比較均有顯著性差異(P均<0.05)。見表1。

表1 2組治療前后免疫功能情況比較

注：①與治療前比較，P<0.05;②與對照組比較，P<0.05。

2.4不良反應(yīng) 治療組骨髓抑制、惡心嘔吐、白細(xì)胞減少發(fā)生率均明顯低于對照組(P均<0.05)。但治療組在輸入細(xì)胞過程中及輸入后出現(xiàn)寒戰(zhàn)高熱2例，未出現(xiàn)心腎功能異常。見表2。

2.51年生存率 治療組中位生存期為11.5個月，其中12例尚在隨訪，1年生存率為46%；對照組中位生存期10.4個月，其中7例還在隨訪，1年生存率為27%。采用Kaplan-Meier方法繪制疾病無進(jìn)展生存率曲線，經(jīng)Log-rank檢驗，2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見圖1。

表2 2組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 例

注：①與對照組比較，P<0.05。

圖1 2組1年生存率比較

3 討 論

腫瘤的免疫治療可與手術(shù)、放化療等治療手段聯(lián)合使用提高腫瘤治療的綜合療效，而且該治療方式是通過激發(fā)和增強(qiáng)自身的免疫力從而有效清除少量殘留的腫瘤細(xì)胞，防止腫瘤的復(fù)發(fā)。DC-CIK療法采用共培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞(DC)和細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)進(jìn)行治療。DC細(xì)胞來源于CD14+或者CD34+細(xì)胞，是一種抗原提呈細(xì)胞，可以向初始T淋巴細(xì)胞提呈抗原，激活抗原特異性的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)[8]。DC是目前所知的功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，是唯一能顯著刺激未致敏T細(xì)胞增殖的細(xì)胞，與單核巨噬細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞相比其提呈抗原和刺激T細(xì)胞增殖的能力增大了100～1 000倍;而腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移以及預(yù)后都與DC細(xì)胞的減少或者缺失有關(guān)。經(jīng)過DC細(xì)胞治療后腫瘤部位會發(fā)現(xiàn)特異性T細(xì)胞的浸潤[9]。DC細(xì)胞在外周血或者人骨髓中為非成熟狀態(tài)，可由一些細(xì)胞因子如GM-CSF、IL-4和TNF-α刺激轉(zhuǎn)化為成熟狀態(tài)從而發(fā)揮作用。近年來，以DC細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療被認(rèn)為是腫瘤免疫治療新的支撐點。CIK細(xì)胞是一種新型的免疫活性細(xì)胞，是一類對惡性腫瘤細(xì)胞具有高度殺傷能力的T淋巴細(xì)胞，主要效應(yīng)細(xì)胞以同時表達(dá)CD3+(T細(xì)胞表面抗原)和CD56+(NK細(xì)胞表面標(biāo)志)為特征，具有NK細(xì)胞非MHC限制性殺瘤活性和T淋巴細(xì)胞的抗腫瘤優(yōu)點[10]。CIK在體外增殖速度快，細(xì)胞殺傷活力強(qiáng)，能精確地殺傷腫瘤細(xì)胞而不損傷任何正常組織，對多種耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感，特別擅長清除殘留及轉(zhuǎn)移的微小病灶，防止癌細(xì)胞復(fù)發(fā)，同時也能夠提升患者免疫力；DC-CIK聯(lián)合治療比單純的CIK有更強(qiáng)的抗腫瘤效果[11]。單純的CIK細(xì)胞對腫瘤的近期療效明顯，但是遠(yuǎn)期療效及殺傷腫瘤細(xì)胞的特異性不及DC，而DC細(xì)胞的近期療效相對較弱，所以采用DC-CIK共同治療具有較好的理論基礎(chǔ)。DC-CIK共治療細(xì)胞的增殖能力和殺死腫瘤能力均較單DC或者CIK有明顯增強(qiáng)，殺瘤譜更廣，對腫瘤的殺死高達(dá)71%，而且能夠提高自身抵抗力，間接殺死腫瘤細(xì)胞。且DC-CIK治療不良反應(yīng)小，能增強(qiáng)患者自身的抵抗力，改善患者的身體狀況，提高生活質(zhì)量，減輕患者的痛苦。張泉成等[12]研究發(fā)現(xiàn)DC-CIK療法聯(lián)合TACE及RFA治療小肝癌能夠提高患者術(shù)后的肝功能和免疫力，降低肝癌的復(fù)發(fā)率，延長患者生存期。郭偉偉等[13]也發(fā)現(xiàn)DC-CIK聯(lián)合TACE術(shù)治療原發(fā)性肝癌能夠取得良好的臨床療效，增強(qiáng)患者的免疫力，提高患者的生活質(zhì)量。劉濤等[14]發(fā)現(xiàn)自體DC/CIK細(xì)胞治療宮頸癌臨床效果良好。

本研究結(jié)果顯示，治療組疾病控制率和KPS評分均明顯高于對照組。治療組治療后輔助T細(xì)胞及NK細(xì)胞百分率顯著提升，抑制T細(xì)胞的百分率顯著降低；而對照組輔助T細(xì)胞百分率顯著降低，抑制T細(xì)胞的百分率略有上升，NK細(xì)胞百分率幾乎不變。提示DC-CIK療法聯(lián)合化療提高了患者的免疫力，而單純化療患者的免疫力進(jìn)一步降低。治療組1年生存率為58%，其中12例尚在隨訪；而對照組為46%，其中7例還在隨訪。2組的1年生存率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能是病例數(shù)不多的原因。2組不良反應(yīng)均為血液學(xué)毒性和消化道反應(yīng)，但是治療組不良反應(yīng)比對照組明顯減輕。以上結(jié)果和DC-CIK治療其他腫瘤的結(jié)果相似[15-16]，說明DC-CIK療法聯(lián)合化療治療中晚期胃癌具有良好疾病控制率，能夠改善生活質(zhì)量，提高患者免疫力和生存率，減輕不良反應(yīng)，值得臨床應(yīng)用和推廣。

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Study on DC-CIK combined with chemotherapy in the treatment of patients with advanced gastric cancer

WU Fubing, HUANG Wen, WANG Kangxia, WANG Mingyuan, XU Fanggui, HUANG Chunkai, WANG Xing

(The First Hospital Affiliated to PLA Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Putian351100,Fujian,China)

Objective It is to observe the clinical effect and safety of Dendritic cell-Cytokine induced killers (DC-CIK) combined with chemotherapy in the treatment of advanced gastric cancer. Methods 56 patients with advanced gastric cancer were randomly divided into two groups. The patients were treated by chemotherapy in gemcitabine combined with oxaliplatin in the control group, and were treated by routine chemotherapy combining with DC-CIK in the treatment group. After treatment, the therapeutic effect, life quality, 1-year survival and toxicities of the two groups were observed. Results The remission rate (RR) and disease control rate (DCR) were 54% and 81% in treatment and 46% and 58% in control group respectively. There was no significant difference in RR (P>0.05) but was significant difference in DCR between both groups (P>0.05). after treatment, the KPS score was 85±17 of treatment group and 75±10 of control group respectively, there was significant difference between the two groups (P<0.05). The immunity was improved in the treatment group and declined in the control group obviously; there was significant difference in the immunity between the two groups. Compare with control group, the 1-year survival of treatment group was not remarkable but its survival time was more than control group. The main toxicities were hematological toxicities and digestive tract reactions in two group, but the treatment group was lighter than control group (P<0.05). Conclusion DC-CIK combined with chemotherapy has significant clinical effect on advanced gastric cancer and does not have obvious toxic and side effect. Moreover it can improve the RR, survival and quality. So it is worth popularizing and applying on clinic.

chemotherapy; Dendritic cell-Cytokine induced killers; advanced gastric cancer

吳付兵，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤的綜合治療。

王星，E-mail: wxing1972@126.com

莆田市科技計劃項目(莆市科2012S02(1))

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.03.005

R735.2

A

1008-8849(2015)03-0242-04

2014-07-25