聯(lián)合檢測尿中IL-18與Cys C在危重患者急性腎損傷中的早期診斷價值*

陸金帥，李 楠，李 思，黃佳星(.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)一科，烏魯木齊 8000；.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣州 50080；.廣東省東莞市清溪醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科 5660)

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·論 著·

聯(lián)合檢測尿中IL-18與Cys C在危重患者急性腎損傷中的早期診斷價值*

陸金帥1，李 楠1，李 思2，黃佳星3(1.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)一科，烏魯木齊 830001；2.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣州 510080；3.廣東省東莞市清溪醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科 523660)

目的 探討尿中白細(xì)胞介素-18(IL-18)和尿中胱抑素C(Cys C)對危重患者急性腎損傷(AKI)臨床上早期診斷的價值。方法 選取中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科2012年1月至2013年12月收治的危重患者為研究對象，每天收集尿標(biāo)本，持續(xù)7 d，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測尿液標(biāo)本中的IL-18和顆粒增強(qiáng)免疫比濁法測定尿液標(biāo)本中的Cys C。根據(jù)測量結(jié)果分為3組：A組(IL-18>95 pg/mL)、B組(Cys C>1.3 g/mL)，C組(IL-18>95 pg/mL和Cys C>1.3 g/mL)。另選同期健康體檢者作為D組(IL-18≤95 pg/mL和Cys C≤1.3 g/mL)。結(jié)果 按α′=0.006 8檢驗標(biāo)準(zhǔn)，A、B、C 3組與D組AKI患病率不同，A、B、C 3組的AKI患病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于D組，但A、B、C 3組之間AKI患病率幾乎沒有差別，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。進(jìn)一步兩兩比較采用χ2分割法，α′=0.006 8。結(jié)論 IL-18和Cys C在危重患者急性腎損傷的臨床研究有早期診斷價值。

急性腎損傷； 白細(xì)胞介素-18； 胱抑素C； 危重患者

急性腎損傷(AKI)是指48 h內(nèi)血清肌酐(Scr)絕對值增加不低于0.3 mg/dL(26.5 mmol/L)或較原先水平增高不低于50%的一組臨床綜合征，是一種常見的急、危重病，病死率較高。傳統(tǒng)通常以檢測血清肌酐來診斷AKI，然而，在腎功能急性變化期間血清肌酐的變化并不是一個可靠的指標(biāo)[1]。血清肌酐的特異性和敏感性都比較低，而且易受多種因素影響[2]。危重患者的肌肉組織少，不易接受外源性腎小球濾過率(GFR)標(biāo)志物，而肌酐清除率測定受肌肉量、體表面積等多種因素影響[3]。血肌酐與肌肉量呈正比，對于危重癥患者來說，肌酐很難準(zhǔn)確地檢測到GFR輕微的變化[4-6]。為降低AKI發(fā)病率，尋找能更有效地早期診斷AKI的方法成為目前熱門的研究方向。有研究發(fā)現(xiàn)，AKI時尿白細(xì)胞介素18(IL-18)和尿胱抑素C(Cys C)可以作為AKI的新型早期診斷標(biāo)志物[7-8]。本研究旨在觀察重癥監(jiān)護(hù)室收治的危重患者中AKI患者的IL-18和Cys C水平的變化，探討二者在診斷危重患者AKI的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2013年12月中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科收治的危重患者，根據(jù)首次尿中IL-18和Cys C測量的結(jié)果，將研究對象分為3組：A組55例(IL-18>95 pg/mL)，B組57例(Cys C>1.3 g/mL)，C組52例(IL-18>95 pg/mL和Cys C>1.3 g/mL)。D組為同期健康體檢者60例(IL-18≤95 pg/mL和Cys C≤1.3 g/mL)。各組人群一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。AKI診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照2005年9月AKI專家組修訂的RIFLE分級標(biāo)準(zhǔn)，AKI定義為在48 h內(nèi)由腎功能或結(jié)構(gòu)方面異常引起的腎功能突然下降，表現(xiàn)為Scr上升不低于0.3 mg/dL(26.5 μmol/L)，或者不低于危重患者入院后最低值的1.5倍。標(biāo)本檢測：應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測尿IL-18，試劑由美國Rapid Biolab公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。應(yīng)用顆粒增強(qiáng)免疫透射比濁法測定Cys C濃度，試劑盒由利德曼公司提供。

1.2 方法 對入選的研究對象每天收集尿標(biāo)本，持續(xù)7 d，應(yīng)用ELISA法檢測尿液標(biāo)本中的IL-18，應(yīng)用顆粒增強(qiáng)免疫比濁法測定Cys C。

2 結(jié) 果

2.1 4組人群一般資料比較 入選人群的基礎(chǔ)肌酐等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。以首次測得的尿中IL-18和Cys C濃度為標(biāo)準(zhǔn)分為A、B、C、D 4組，見表1。

表1 4組人群一般資料比較±s)

2.2 4組人群發(fā)生AKI情況比較 從入組開始觀察7 d內(nèi)各組發(fā)生AKI患者數(shù)，用R×C表整體χ2檢驗(χ2=68.259，v=3，P<0.05)，統(tǒng)計學(xué)分析表明，4組人群的AKI患病率不全相同。見表2。

表2 4組發(fā)生AKI患者數(shù)(n)

從表2可以看出，按α′=0.006 8檢驗標(biāo)準(zhǔn)，A、B、C 3組與D組AKI患病率不同，A、B、C 3組的AKI患病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于D組，但A、B、C 3組之間AKI患病率幾乎沒有差別，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。進(jìn)一步采用χ2分割法進(jìn)行兩兩比較，α′=0.006 8。見表3。

表3 χ2 分割法檢驗結(jié)果

3 討 論

危重患者病程中存在著各種足以影響腎臟功能的危險因素，如心臟疾病、肺栓塞、肺動脈高壓等導(dǎo)致心排出量降低，全身性疾病如嚴(yán)重膿毒癥、肝腎綜合征等引起有效血容量減少，以及腎血管病變?nèi)鐢D壓綜合征、創(chuàng)傷、燒傷等引起的腎缺血及產(chǎn)生腎毒素等，這些因素均可導(dǎo)致腎血流量的低灌注狀態(tài)，發(fā)生AKI，其病死率高，若不及時處理，腎血流量進(jìn)行性減少，發(fā)展成為急性腎衰竭，并轉(zhuǎn)變?yōu)槁阅I衰竭，會帶來很大的社會負(fù)擔(dān)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[9]。因此，迫切需要尋找特異性和靈敏性均高的指標(biāo)對急性腎衰竭進(jìn)行早期診斷，及時地進(jìn)行干預(yù)，對改善預(yù)后、降低病死率有很大的意義[10]。目前臨床研究認(rèn)為IL-18和Cys C可作為判斷急性腎損傷患者病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的指標(biāo)。

IL-18是近端小管誘導(dǎo)產(chǎn)生的一個促炎細(xì)胞因子，屬于IL-1家族，以分裂的形式進(jìn)入尿液，在多種炎性反應(yīng)、腫瘤、自身免疫性疾病相關(guān)的免疫事件中均起到了一定作用，其前體廣泛表達(dá)于單核-巨噬細(xì)胞、未成熟樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等表面，它的活化繼發(fā)于細(xì)胞凋亡蛋白酶-1和其他酶的作用[11]。對危重患者而言，尿中IL-18比Scr更能早期發(fā)現(xiàn)AKI。Parikh等[12]發(fā)現(xiàn)確診為AKI的患者尿IL-18明顯升高，而在尿路感染、慢性腎臟疾病、腎病綜合征等患者中升高不明顯，認(rèn)為IL-18可以作為AKI早期診斷的一個生物標(biāo)志物。本研究觀察發(fā)現(xiàn)AKI組與非AKI組相比，其尿IL-18的濃度明顯升高,Scr也有明顯升高,表明檢測尿IL-18的濃度對于AKI有很好的相關(guān)性,與文獻(xiàn)[13]報道一致。

Cys C是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，非糖基化的堿性蛋白，相對分子質(zhì)量為13.3×103，由122個氨基酸殘基組成，可由機(jī)體所有有核細(xì)胞產(chǎn)生，產(chǎn)生率恒定，只能通過腎小球濾過排泄，不受腎外許多因素的干擾，如性別、年齡、飲食、炎性反應(yīng)等的影響，是一個反映GFR較Scr有更高敏感性的指標(biāo)[14]。有研究表明，尿Cys C濃度由GFR決定，循環(huán)中的Cys C僅經(jīng)腎小球濾過而被清除，且與各種放射性核素標(biāo)志物的清除率相關(guān)性良好，是一種反映GFR變化的理想指標(biāo)[15]。

本研究發(fā)現(xiàn)，IL-18和Cys C水平是反映腎小球濾過功能的敏感指標(biāo)，能敏感地及早發(fā)現(xiàn)AKI，結(jié)果優(yōu)于Scr，以IL-18和Cys C濃度作為早期診斷AKI的生物標(biāo)志物，在危重患者AKI中均能及時準(zhǔn)確地檢測。由于IL-18的高特異性，加上Cys C比較穩(wěn)定，因此聯(lián)合IL-18和Cys C作為早期診斷AKI的指標(biāo)，能更好、更準(zhǔn)確靈敏地對AKI進(jìn)行診斷。此外，以IL-18和Cys C作為標(biāo)志物具有價廉易操作等特點(diǎn)，易于臨床推廣。由于本研究樣本量少，還需要更多探索與突破，需要大樣本研究來驗證其實用性。同時，還可以進(jìn)一步研究這些標(biāo)志物在腎損傷過程中的病理生理機(jī)制，找出針對性的治療方法，以便早期干預(yù)治療，早期逆轉(zhuǎn)腎損傷。

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Early dianostic value of combined detection of urine interleukin-18 and urine cystatin C in acute kidney injury in critically ill patients*

LUJin-shuai1,LINan1,LISi2,HUANGJia-xing3

(1.FirstDepartmentofCriticalCareMedicine,People′sHospitalofXinjiangUygurAutonomousRegion,Wulumuqi,Xinjiang830001,China;2.DepartmentofCriticalCareMedicine,FirstAffiliatedHospitalofZhongshanUniversity,Guangzhou,Guangdong510080,China;3.DepartmentofCriticalCareMedicine,QingxiHospital,Dongguan,Guangdong523660,China)

Objective To explore the value of urinary interleukin-18 (IL-18) and urine cystatin C (Cys C) in early clinical diagnosis of acute kidney injury (AKI) in critically ill patients.Methods The critically ill patients in ICU from January 2012 to December 2013 were selected as the research subjects.The daily urine samples were collected for consecutive 7 d.IL-18 was detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and Cys C was detected by the particle-enhanced turbidimetric immunoassay.The measurement results were divided into three groups:A (IL-18>95 pg/mL),B (Cys C>1.3 g/mL),C (IL-18>95 pg/mL and Cys C>1.3 g/mL) and D as the normal group (IL-18≤95 pg/mL and Cys C≤1.3 g/mL).Results According to α′=0.006 8 test standard,the morbidity rate of AKI had difference between the group A,B and C with the group D,the morbidity rate of AKI in the group A,B and C was much higher than that in the group D,but which had no statistically significant difference among the group A,B and C.The further pairwise comparisons adopted χ2segmentation method,α′=0.006 8.Conclusion IL-18 and Cys C has a early diagnostic value for AKI in critically ill patients.

acute kidney injury; interleukin-18; cystatin C; critically ill patient

國家自然科學(xué)基金資助項目(81160015)。

陸金帥，男，主治醫(yī)師，碩士，主要從事急診、危重癥醫(yī)學(xué)方面的研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.16.001

A

1672-9455(2015)16-2299-02

2015-02-22

2015-04-21)