仙人掌多糖對(duì)高血脂小鼠血脂的影響

林愛琴，何愛明

（福建師范大學(xué)福清分校　海洋與生化工程學(xué)院，福建　福清　350300）

仙人掌多糖對(duì)高血脂小鼠血脂的影響

林愛琴，何愛明

（福建師范大學(xué)福清分校海洋與生化工程學(xué)院，福建福清350300）

摘要：目的研究仙人掌多糖對(duì)高血脂小鼠體內(nèi)血脂的影響。方法隨機(jī)選用雄性SPF級(jí)小鼠28只，分為4組，建立高血脂小鼠模型，取血清對(duì)TC、TG、MDA含量及全血的SOD活性測(cè)定。結(jié)果給藥15 d后，仙人掌多糖組小鼠的TC、TG與MDA含量均小于模型組，SOD含量大于模型組。結(jié)論仙人掌多糖具有降低小鼠體內(nèi)血脂的作用。

關(guān)鍵詞：仙人掌多糖；高血脂小鼠；總膽固醇；甘油三酯；丙二醛；超氧化物岐化酶

目前，在我國(guó)心血管各類疾病中，高脂血癥已經(jīng)成為主要的死亡原因之一。臨床上能夠有效控制和治療高脂血癥的藥物主要包括他汀類和貝特類藥物。但這兩類藥物在臨床應(yīng)用上經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)胃腸道反應(yīng)如惡心、腹痛、腹瀉，并伴有頭痛或皮疹，少數(shù)患者可出現(xiàn)過敏等各種各樣的副反應(yīng)［1-3］。在中成藥領(lǐng)域，能夠有效治療高脂血癥的成熟藥物并不是很多，而且有些中成藥作用環(huán)節(jié)單一，長(zhǎng)期服用還會(huì)導(dǎo)致藥物的耐藥性，不利于后期進(jìn)一步的治療。因此，在治療高脂血癥疾病方面需要開發(fā)出一種療效顯著、毒性較低的藥物。

仙人掌為仙人掌科仙人掌屬植物，在我國(guó)作為藥用植物已有悠久的歷史?！侗静菥V目拾遺》記載：仙人掌味淡性寒、行氣活血、清熱解毒、消腫止痛、健脾止瀉、安神利尿，可內(nèi)外服用治療多種疾病。隨著進(jìn)一步研究的深入，仙人掌的有效藥物成分已將越來越多地被發(fā)現(xiàn)。其中仙人掌多糖是從仙人掌莖或果實(shí)中提取出來的極性大分子化合物。近年來的研究表明，仙人掌多糖具有抑制癌癥、降低血糖和血脂、抗氧化等作用［4-8］。本試驗(yàn)主要是從仙人掌多糖對(duì)高血脂小鼠血脂的影響方面來進(jìn)行研究。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

仙人掌粉末制備：仙人掌新鮮莖塊采摘自福建省永泰縣，先剔除表面的刺、泥土等雜質(zhì)后切條，于80℃烘干，粉碎密封保存。健康雄性昆明種SPF級(jí)小鼠：購(gòu)自福建醫(yī)科大學(xué)。

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.0 mg/mL）：精密稱取無水葡萄糖（葡萄糖置于烘箱中105℃烘干至恒重后用電子分析天枰稱量）1 g，置于1000 mL容量瓶中，加蒸餾水定容。搖勻備用。

苯酚溶液（5％）的制備：稱取5 g苯酚置于100 mL容量瓶中，加蒸餾水溶解并定容，搖勻后置于棕色瓶中備用。

75％蛋黃乳劑：75％的蛋黃（市售雞蛋）加25％的生理鹽水，混合攪拌，4℃儲(chǔ)藏備用。

0.9％生理鹽水：取0.9 g的NaCl置于100 mL容量瓶中，加蒸餾水溶解并定容，搖勻后置于試劑瓶中備用。

乙酸（冰醋酸）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：T20110106；總膽固醇（TC）測(cè)定試劑盒：浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：2012040037；甘油三酯（TG）測(cè)定試劑盒：浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：2012050048；丙二醛（MDA）試劑盒和超氧化物岐化酶（SOD）試劑盒：南京建成生物工程研究所，產(chǎn)品批號(hào)：20120703；辛伐他汀膠囊：山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：110301。

1.2仙人掌多糖提取與濃度的測(cè)定

仙人掌多糖的提取和含量的測(cè)定步驟參照文獻(xiàn)［9-10］，測(cè)得仙人掌多糖溶液濃度為29.5 mg/mL。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組給藥

1.3.1高脂血癥小鼠模型的建立隨機(jī)選用健康雄性昆明種SPF級(jí)小鼠7只，并進(jìn)行標(biāo)記。每日上午對(duì)模型組小鼠腹腔注射75％蛋黃乳劑0.5 mL /只，下午灌胃給予蒸餾水，連續(xù)14 d。隨后稱體重。末次給藥前小鼠禁食不禁水12 h，末次給藥后1 h小鼠斷尾取血（即實(shí)驗(yàn)第15天），3 000 r /min離心5 min，分離血清，按照試劑盒說明進(jìn)行血清TC、TG、MDA測(cè)定及全血的SOD活性測(cè)定。

1.3.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組與給藥隨機(jī)選用健康雄性昆明種SPF級(jí)小鼠28只，按體重隨機(jī)分為4組，分組及劑量見表1。各組動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥15 d。除空白組每日上午腹腔注射生理鹽水0.5 mL /只，下午灌胃給予蒸餾水外，其余各組上午腹腔注射75％蛋黃乳劑0.5 mL/只，下午灌胃給藥（模型組下午灌胃給予蒸餾水），連續(xù)14 d。隨后稱體重。末次給藥前小鼠禁食不禁水12 h，末次給藥后1 h小鼠斷尾取血（即實(shí)驗(yàn)第15天），3 000 r/min離心5 min，分離血清，按照試劑盒說明進(jìn)行血清TC、TG、MDA測(cè)定及全血的SOD活性測(cè)定。在第15天解剖小鼠，分離出小鼠睪丸處脂肪組織進(jìn)行稱重，脂肪含量指的是脂肪重量占小鼠體重的百分比。以辛伐他汀作為陽(yáng)性組，用以對(duì)比仙人掌多糖與辛伐他汀藥物的使用效果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2　結(jié)果與分析

2.1各組小鼠體重與睪丸處脂肪含量的比較分析

各組小鼠體重與睪丸處脂肪含量的情況見表2。由表2可知，當(dāng)模型組與空白組、陽(yáng)性組比較時(shí)，模型組小鼠的體重與脂肪含量均較空白組和陽(yáng)性組高，并表現(xiàn)出極顯著差異（P < 0.01），顯示了模型組造模成功。而仙人掌多糖組小鼠體重及脂肪含量與模型組比較出現(xiàn)顯著性下降（P < 0.01），表明仙人掌多糖能夠降低小鼠體內(nèi)的脂肪含量。但仙人掌多糖組與陽(yáng)性組比較時(shí)，體重?zé)o顯著性差異，脂肪含量顯著增加，表明仙人掌多糖在降低小鼠體內(nèi)脂肪含量的效果上不如辛伐他汀。

表2　各組小鼠體重與睪丸處脂肪含量的比較Tab.2 Comparison of the weight and testicular fat of each group of mice　?。╪ =7，±s）

表2　各組小鼠體重與睪丸處脂肪含量的比較Tab.2 Comparison of the weight and testicular fat of each group of mice　?。╪ =7，±s）

注：a：P < 0.01，與模型組比較；b：P < 0.01，與空白組比較；c：P < 0.01，與陽(yáng)性組比較。

組別空白組模型組仙人掌多糖組陽(yáng)性組劑量/（mg·g-1）00 0.200 0.125體重/g 26.29±4.13a34.77±5.42bc24.97±3.98a24.55±1.33a脂肪含量/％ 0.397±0.046a0.939±0.036bc0.562±0.114bac0.444±0.072a

2.2仙人掌多糖對(duì)高脂血癥小鼠血清中TC和TG含量的影響分析

動(dòng)物體內(nèi)脂質(zhì)代謝的失調(diào)是由動(dòng)物血清中TC和TG含量的增多而引起的。各組小鼠血清中TC和TG水平情況見表3。由表3可知，造模后，當(dāng)模型組與空白組、陽(yáng)性組比較時(shí)，小鼠體內(nèi)血清中的TC和TG均出現(xiàn)極顯著性差異（P < 0.01），并且模型組的TC和TG均較其他3組明顯增高，進(jìn)一步說明了模型組造模成功。當(dāng)仙人掌多糖組小鼠的TC和TG含量與模型組比較時(shí)，出現(xiàn)極顯著性降低（P < 0.01）。陽(yáng)性組小鼠的TC和TG含量與模型組比較均出現(xiàn)極顯著性差異（P < 0.01），并且小鼠體內(nèi)血清TC和TG含量均小于模型組。結(jié)果表明仙人掌多糖具有和辛伐他汀一樣的效果，均能降低小鼠體內(nèi)血清中的TC 和TG水平。

表3　各組小鼠血清中TC和TG水平Tab.3 Level of TC and TG in mice blood　?。╪ =7，±s）

表3　各組小鼠血清中TC和TG水平Tab.3 Level of TC and TG in mice blood　　（n =7，±s）

注：a：P < 0.01，與模型組比較；b：P < 0.01，與空白組比較；c：P < 0.01，與陽(yáng)性組比較。

組別空白組模型組仙人掌多糖組陽(yáng)性組劑量/（mg·g-1）00 0.200 0.125 TC/（mmol·L-1）2.60±0.19a3.54±0.23bc2.78±0.88ac2.42±0.14aTG/（mmol·L-1）0.62±0.06a1.14±0.07bc0.69±0.97a0.64±0.06a

2.3仙人掌多糖對(duì)高脂血癥小鼠血清中MDA含量和總SOD活性的影響分析

脂質(zhì)過氧化以后的主要產(chǎn)物是MDA，而在動(dòng)物體內(nèi)的主要抗氧化酶之一則是總SOD活性水平。如果動(dòng)物血清的總SOD活性下降，而MDA含量升高，則會(huì)使動(dòng)物體內(nèi)血清中的自由基含量升高，從而對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成一定損傷。由表4可知，模型組小鼠體內(nèi)血清中的總SOD活性和MDA含量相對(duì)空白組和模型組均出現(xiàn)極顯著差異（P < 0.01），并且模型組的總SOD活性均較其他3組低，而MDA的含量均較其他3組高，說明模型組小鼠體內(nèi)血清中的自由基含量比較高。當(dāng)仙人掌多糖組小鼠的MDA含量與模型組和空白組比較時(shí)，均出現(xiàn)極顯著性差異（P < 0.01），并且MDA含量小于模型組大于空白組。但當(dāng)仙人掌多糖組小鼠的SOD活性與模型組比較時(shí)，出現(xiàn)顯著性差異（P < 0.05），并且SOD活性大于模型組。說明仙人掌多糖能夠降低小鼠體內(nèi)血清中MDA含量，并能夠提高小鼠體內(nèi)血清中總SOD活性。

表4　各組小鼠血清中MDA和SOD水平Tab.4 Level of MDA and SOD in mice blood　?。╪ =7，±s）

表4　各組小鼠血清中MDA和SOD水平Tab.4 Level of MDA and SOD in mice blood　?。╪ =7，±s）

注：a：P < 0.01；b：P < 0.05，與模型組比較；c：P < 0.01，與空白組比較；d：P < 0.01，與陽(yáng)性組比較。

組別空白組模型組仙人掌多糖組陽(yáng)性組劑量/（mg·g-1）00 0.200 0.125 MDA /（nmol·mL-1）4.00±1.13a9.70±1.34cd6.38±1.36cad2.76±1.21aSOD /（U·mL-1）108.77±45.65ad55.18±11.43cd84.19±14.68bd527.36±8.00ca

3　討論

血脂是血漿或血清中所含脂類的總稱，包括TC、TG和游離脂肪酸（FFA）等，其中TC和TG是影響高脂血癥的重要因素。近年來，大量的實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)證明血清TC和TG水平增高可以導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。動(dòng)脈粥樣硬化能夠進(jìn)一步誘發(fā)產(chǎn)生冠心病、脂肪肝、膽結(jié)石和高尿酸血癥等一系列危害人類身體健康的疾病。而動(dòng)脈粥樣硬化與脂質(zhì)的過氧化損害有一定的關(guān)系。在生物體細(xì)胞中，SOD是主要的抗氧化酶，能夠維持生物體自由基的產(chǎn)生與過氧化物的清除，并能夠使兩者之間達(dá)到平衡。其主要作用就是延緩生物體的衰老和防止生物大分子的損傷。而血脂升高時(shí)很容易導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng)，進(jìn)一步使MDA含量增多與SOD活性降低。MDA、SOD二者是檢測(cè)機(jī)體氧自由基水平的常用配對(duì)指標(biāo)。SOD活性的高低間接反映機(jī)體清除氧自由基的能力，而MDA含量的高低又間接反映了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度［1］。所以，為了更好地測(cè)量高血脂小鼠體內(nèi)的血脂含量情況，本試驗(yàn)測(cè)量的指標(biāo)采用了測(cè)定血清中的TC、TG、MDA和SOD的水平。

通過實(shí)驗(yàn)得出仙人掌多糖能夠降低小鼠體內(nèi)血清中的總膽固醇、甘油三酯和MDA的含量，并能夠提高小鼠體內(nèi)血清中總SOD活性。

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（責(zé)任編輯：胡燕梅）

Effect of Polysaccharides from Opuntia dillenii Haw.on Hyperlipidemic Mice

LIN Aiqin，HE Aiming
（School of Ocean Science and Biochemistry Engineering，F(xiàn)uqing Branch of Fujian Normal University，F(xiàn)uqing 350300，F(xiàn)ujian，China）

Abstract：Objective To study the effect of polysaccharides from Opuntia dillenii Haw.on hyperlipidemic mice.Methods 28 mice were randomly divided into four groups.The hyperlipidemic mice models were established.Then the content of TC、TG、MDA and the activities of SOD in mice blood were determined.Results After 15 d treatment, the TC，TG and MDA content in Opuntia dillenii Haw.group were lower than those in model group，and SOD content was higher than that in model group.Conclusion Polysaccharides from Opuntia dillenii Haw.has the funtion of reducing the blood lipid in mice.

Keywords：Opuntia dillenii Haw.polysaccharides；hyperlipidemia mice；TC；TG；MDA；SOD

作者簡(jiǎn)介：林愛琴（1975—），女，副教授，碩士，研究方向：生物大分子。

基金項(xiàng)目：福建省教育廳科技項(xiàng)目（JB11259）；福州市包裝工程行業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心項(xiàng)目（2014-PT-92）

收稿日期：2015 - 03 - 06

DOI：10.16389/j.cnki.cn42-1737/n.2015.03.011

中圖分類號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1673-0143（2015）03-0253-04