石河子部分地區(qū)規(guī)?；膛?chǎng)奶牛球蟲(chóng)感染調(diào)查

蔣業(yè)慧，王正榮，張艷艷，薄新文

（新疆農(nóng)墾科學(xué)院新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)綿羊繁育生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 石河子832000）

奶牛球蟲(chóng)病是艾美耳屬（Eimeria）的多種球蟲(chóng)寄生于奶牛腸道上皮細(xì)胞內(nèi)引起的以出血性腸炎為特征的寄生蟲(chóng)病。艾美耳屬的球蟲(chóng)種類(lèi)豐富，Levies報(bào)道有22種[1]，Pallerdy報(bào)道有25種[2]。邱氏艾美耳球蟲(chóng)和牛艾美耳球蟲(chóng)的致病性最為嚴(yán)重。該病主要危害21～180日齡以內(nèi)的犢牛，輕微感染影響犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育，但病情嚴(yán)重時(shí)，可導(dǎo)致嚴(yán)重腹瀉，甚至死亡。石河子墾區(qū)奶牛養(yǎng)殖業(yè)蓬勃發(fā)展，但奶牛球蟲(chóng)病的防治卻沒(méi)有相應(yīng)的調(diào)查數(shù)據(jù)作為理論依據(jù)。為了解石河子地區(qū)奶牛球蟲(chóng)感染與流行現(xiàn)狀，于2013年10-11月對(duì)石河子地區(qū)的6個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)奶牛球蟲(chóng)病的流行現(xiàn)狀進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源 采自石河子6個(gè)規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖場(chǎng)，采樣奶牛的年齡為：0～3月齡、5～6月齡、1～2歲、2～3歲、3～5歲。直腸采集糞便50 g，置于一次性塑料手套中，并標(biāo)記地區(qū)、場(chǎng)名、奶牛標(biāo)號(hào)、年齡、體況，置于4℃冰箱中待檢。

1.2 樣品的處理 每份樣品取5 g，加入適量的飽和蔗糖水，以3 000 r/min離心5min，用4mm的吊環(huán)蘸取表面液膜并抖落于載玻片中央，覆蓋蓋玻片，顯微鏡下觀察，記錄結(jié)果。

1.3 球蟲(chóng)卵囊的孢子化培養(yǎng)及蟲(chóng)種鑒定 取5 g陽(yáng)性糞便于適量的飽和蔗糖水中，以3 000 r/min離心10min，用直徑為1 cm的漏網(wǎng)，蘸取表面水膜，抖于另一個(gè)裝有適量自來(lái)水的離心管中，重復(fù)5次，以3 500 r/min離心10min，去上清。在沉淀物中加入適量2.5%重鉻酸鉀溶液，溶液高度不超過(guò)2mm，放置于28℃下培養(yǎng)，培養(yǎng)24 h之后，每6 h觀察鏡檢1次。根據(jù)孢子化所用的時(shí)間，卵囊的大小、形態(tài)、顏色等，參照?qǐng)D譜進(jìn)行蟲(chóng)種鑒定[3]。

1.4 感染強(qiáng)度的確定 采用麥克馬斯特法進(jìn)行感染強(qiáng)度的檢測(cè)[4]，取1 g糞便于離心管中，加入29 mL的飽和食鹽水，混勻，在計(jì)數(shù)室內(nèi)加滿液體，靜置2～3min，顯微鏡下觀察，記10×10方格內(nèi)的卵囊數(shù)，記兩次，取平均值乘以200，即為每克糞便中的卵囊數(shù)（OPG值）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同奶牛場(chǎng)的球蟲(chóng)感染率與平均感染強(qiáng)度

被調(diào)查的6個(gè)規(guī)模化奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)均存在球蟲(chóng)感染（見(jiàn)表1），由此可見(jiàn)石河子地區(qū)存在奶牛球蟲(chóng)感染，廣大養(yǎng)殖戶應(yīng)給予足夠的重視。

表1 不同奶牛場(chǎng)的球蟲(chóng)感染率與感染強(qiáng)度

2.2 不同年齡奶牛球蟲(chóng)感染率與感染強(qiáng)度 被調(diào)查的5個(gè)年齡段的奶牛均存在球蟲(chóng)感染，但差異不顯著（P＞0.05）（見(jiàn)表2）。且5～6月齡、1～2歲的犢牛球蟲(chóng)感染率最高。

表2 不同年齡奶牛球蟲(chóng)感染率與感染強(qiáng)度

2.3 奶牛感染球蟲(chóng)的疑似種類(lèi)及形態(tài)描述

2.3.1 奧博艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria auburnensis） 卵囊為卵形，大小為（32～46）μm×（20～25）μm，平均大小為38.4μm×23.1μm。4個(gè)孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，無(wú)外殘?bào)w，斯氏體不明顯。卵囊壁光滑、均勻、透明，淺灰棕色。孢子化時(shí)間，48～72 h（見(jiàn)圖1：a、b）。

2.3.2 牛艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria bovis） 卵囊為卵形，大小為（23～34）μm×（17～23）μm，平均大小為27.7μm×20.3μm。4個(gè)孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，有內(nèi)殘?bào)w，斯氏體明顯，無(wú)外殘?bào)w和極粒，每個(gè)孢子囊內(nèi)含有兩個(gè)子孢子。卵囊壁光滑、均勻、透明，呈褐綠色。有卵膜孔。孢子化時(shí)間：48～72 h（見(jiàn)圖1：c、d）。

2.3.3 亞球艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria subspherica） 卵囊為亞球形，大小為（9～11）μm×（8～11）μm，平均大小為8.5μm×11μm。4個(gè)孢子囊呈橢圓形，無(wú)外殘?bào)w，斯氏體明顯。卵囊壁光滑、透明，無(wú)卵膜孔。孢子化時(shí)間，4～5 d（見(jiàn)圖1：e、f）。

2.3.4 邱氏艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria zuernii） 卵囊為橢圓形，大小為（15～22）μm×（13～18）μm，平均大小為17.8μm×15.6μm。4個(gè)孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，無(wú)內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體，無(wú)外殘?bào)w和極粒。卵囊壁薄、均勻、無(wú)色、無(wú)卵膜孔。孢子化時(shí)間24 h～48 h（見(jiàn)圖1：g、h）。

2.3.5 橢圓艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria ellipsoidalli） 卵囊為橢圓形，大小為（12～27）μm×（11～21）μm，平均大小16.9μm×13μm。4個(gè)孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，有內(nèi)殘?bào)w和明顯的斯氏體，無(wú)外殘?bào)w和極粒。卵囊壁薄、均勻、透明，無(wú)卵膜孔。孢子化時(shí)間：48～72 h（見(jiàn)圖1：i、j）。

2.3.6 柱狀艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria cylindrce） 卵囊為狹窄的柱狀。大小為（16～27）μm×（12～15）μm,平均大小為23.3μm×13.3μm。4個(gè)孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，有內(nèi)殘?bào)w，斯氏體明顯，無(wú)外殘?bào)w和極粒。卵囊壁薄、無(wú)色，無(wú)卵膜孔。孢子化時(shí)間為48～72 h（見(jiàn)圖1：k、l）。

圖1 各種疑似艾美耳球蟲(chóng)卵囊形態(tài)

2.4 不同種類(lèi)的球蟲(chóng)在各個(gè)年齡段奶牛中的感染率 各個(gè)年齡段奶牛的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種略有差異：0～3月齡奶牛的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為牛艾美耳球蟲(chóng)和邱氏艾美耳球蟲(chóng)；5～6月齡奶牛的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為橢圓艾美耳球蟲(chóng)和柱狀艾美耳球蟲(chóng)；1～2歲奶牛的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為牛艾美耳球蟲(chóng)和橢圓艾美耳球蟲(chóng)；2～3歲奶牛所感染的球蟲(chóng)種類(lèi)僅為2種，為亞球艾美耳球蟲(chóng)和邱氏艾美耳球蟲(chóng)；3～5歲奶牛的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為亞球艾美耳球蟲(chóng)、橢圓艾美耳球蟲(chóng)和奧博艾美耳球蟲(chóng)（見(jiàn)表3）。

表3 不同種類(lèi)的球蟲(chóng)在各個(gè)年齡段奶牛中的感染率

3 討論

奶牛球蟲(chóng)感染在世界范圍內(nèi)十分普遍，且牛球蟲(chóng)種類(lèi)豐富。早在1992年，黃兵等報(bào)道我國(guó)存在16種可以感染牛的艾美耳球蟲(chóng)[5]。在國(guó)外，Chibunda R T等早在1997年報(bào)道，在坦桑尼亞奶牛球蟲(chóng)的感染率為35%，發(fā)現(xiàn)7個(gè)蟲(chóng)種[6]。koutny H.報(bào)告，在澳大利亞被調(diào)查的牛場(chǎng)當(dāng)中有97.97%的牛場(chǎng)中存在球蟲(chóng)的感染，樣品的陽(yáng)性率高達(dá)83.67%，共檢出11種球蟲(chóng)[7]。Hatice Cicek報(bào)道，在土耳其所調(diào)查的504個(gè)牛糞便排泄物當(dāng)中有20.04%的樣品中檢出11種牛球蟲(chóng)卵囊[8]。本次調(diào)查共涉及石河子6個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)，各個(gè)奶牛場(chǎng)均存在奶牛球蟲(chóng)感染，且共檢出6種艾美耳球蟲(chóng)，這與劉繼榮[9]等報(bào)道石河子某奶牛場(chǎng)曾暴發(fā)過(guò)奶牛球蟲(chóng)病，共同證明新疆北部存在奶牛球蟲(chóng)的感染，但各個(gè)地區(qū)、各個(gè)牛場(chǎng)、各個(gè)年齡段奶牛所流行的奶牛球蟲(chóng)種類(lèi)及感染率有所差異。這可能與不同牛場(chǎng)的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件差異有很大的關(guān)系。金蘭梅等[10]對(duì)江蘇部分地區(qū)的9個(gè)奶牛場(chǎng)進(jìn)行了球蟲(chóng)感染調(diào)查，結(jié)果表明，9個(gè)奶牛場(chǎng)均有球蟲(chóng)感染，感染率最高的為1～6月齡和6～12月齡的奶牛，大部分牛場(chǎng)的OPG值低于1 000個(gè)。石冬梅等報(bào)道河南奶牛球蟲(chóng)的感染率為37.57%，共檢出11種奶牛球蟲(chóng)[11]。對(duì)比各地區(qū)調(diào)查結(jié)果顯示，雖然新疆氣候干燥，晝夜溫差大，但依然存在較為嚴(yán)重的奶牛球蟲(chóng)感染。為了降低奶牛球蟲(chóng)對(duì)奶牛業(yè)的危害，各個(gè)奶牛場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)奶牛球蟲(chóng)病的防控，做好疾病監(jiān)測(cè)，采用藥物預(yù)防，提高整體畜群的抵抗力。當(dāng)然本次調(diào)查只是對(duì)新疆石河子地區(qū)10-11月份奶牛球蟲(chóng)的感染情況進(jìn)行調(diào)查，并未對(duì)奶牛球蟲(chóng)全年的感染情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，同時(shí)調(diào)查的數(shù)量不是很多，故這一結(jié)果并不能反應(yīng)整個(gè)石河子地區(qū)全年奶牛球蟲(chóng)感染情況。鑒于此，本課題組將進(jìn)一步擴(kuò)大樣品數(shù)量，并做全年的感染情況調(diào)查，全面掌握石河子地區(qū)奶牛球蟲(chóng)流行規(guī)律，為制定合理的驅(qū)蟲(chóng)方案提供理論依據(jù)。

[1] Levine N D.Protozoan Parasites of domestic auimals and ofman[J].1973（2）：164-233.

[2] Pallerdy L.Coccidia and coccidiosis[M].2nd，1974.

[3] 曹希亮，董輝，黃兵，等.奶牛球蟲(chóng)流行病學(xué)調(diào)查研究[J].中國(guó)奶牛，2012，3：29-31.

[4]張曉東，石泉，蘇日那，等.呼和浩特市周邊地區(qū)奶牛球蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2008，35（4）：65-67.

[5] 黃兵.中國(guó)牛球蟲(chóng)種類(lèi)、分布及其危害[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，1992，1：16-17.

[6]Chibunda R T，Muhairwa A P，Kambarage D M，et al.Eimeriosis indairy cattle farms in Morogoro municipality of Tanzania[J].Prev VetMed，1997 Aug，31（4）：191-197.

[7]H Koutny，A Joachim.Bovine eimeria species in Austria[J].Parasitology research，2012，110（5）：1893-1901.

[8] HaHatice Cicek，F(xiàn)eride Sevim li，Esma Kozan.Prevalence of coccidia in beef cattle in western Turkey[J].parasitology research，2007，101：1239-1243.

[9]王開(kāi)勝，劉繼榮，劉勇，等.石河子地區(qū)某奶牛場(chǎng)球蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查與防治[J].獸醫(yī)科技，2010（12）：114-116.

[10]金蘭梅，伍清林，馬高民，等.江蘇部分地區(qū)奶牛球蟲(chóng)病流行情況調(diào)查[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2010，31（3）：69-74.

[11]石冬梅，陳益，王軍.河南省奶牛球蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)奶牛，2010（10）：51-53.