糖尿病腎病患者維生素D結(jié)合蛋白水平及影響因素研究

王媛，史慧婷，姜書寧，趙久陽

?

糖尿病腎病患者維生素D結(jié)合蛋白水平及影響因素研究

王媛，史慧婷，姜書寧，趙久陽

【摘要】目的探討糖尿病腎病(DN)患者維生素D結(jié)合蛋白(VDBP)水平及其影響因素，以明確VDBP與DN的關(guān)系，為DN的診斷及治療提供新的依據(jù)。方法選取2013年8月—2014年2月在大連醫(yī)科大學(xué)附屬二院住院的2型糖尿病(T2DM)患者66例。根據(jù)尿微量清蛋白與尿肌酐比值(UACR)將患者分為3個(gè)亞組:正常清蛋白尿組(UACR＜30 mg/g)、微量清蛋白尿組(UACR 30～300 mg/g)和臨床清蛋白尿組(UACR＞300 mg/g)，各22例。同時(shí)選取該院門診的健康體檢者20例為健康對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)4組受試者血、尿VDBP水平，同時(shí)檢測(cè)其相關(guān)生化指標(biāo):空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血尿素(UREA)、血肌酐(SCr)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)、血清蛋白(ALB)及尿微量清蛋白、尿肌酐。結(jié)果健康對(duì)照組及正常、微量、臨床清蛋白尿組血VDBP水平分別為:(44.83±15.65)、(312.25±29.57)、(330.92±49.28)、(338.30±50.05)mg/L，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F =409.42，P＜0.01);其中正常、微量、臨床清蛋白尿組均高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);而正常、微量及臨床清蛋白尿3組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。健康對(duì)照組及正常、微量、臨床清蛋白尿組尿VDBP水平分別為:(5.26±1.34)、(8.93±3.17)、(15.19±3.38)、(21.48±7.00)mg/L，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F =58.66，P＜0.01);其中兩兩組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。因尿VDBP檢測(cè)采用晨尿點(diǎn)標(biāo)本，無24 h尿標(biāo)本檢測(cè)準(zhǔn)確，故依據(jù)UACR法，用尿肌酐對(duì)尿VDBP值進(jìn)行校正(尿VDBP/Cr)。健康對(duì)照組與正常、微量、臨床清蛋白尿組尿VDBP/Cr水平分別為:(4.25±1.89)、(10.76±7.02)、(23.01±11.39)、(41.58±17.10)mg/g，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F =47.38，P＜0.01);其中兩兩組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。T2DM患者尿VDBP水平與估算腎小球?yàn)V過率(eGFR)呈負(fù)相關(guān)(r =－0.413，P = 0.015)。另外，T2DM患者尿VDBP水平與UREA、SCr呈正相關(guān)(r值分別為0.505、0.454，P＜0.05);而與ALB呈負(fù)相關(guān)(r =－0.454，P＜0.05)。結(jié)論

T2DM患者血、尿VDBP水平均有明顯升高，且伴隨DN的進(jìn)展，尿VDBP水平逐漸升高，尿VDBP水平與eGFR、UREA、SCr、ALB有關(guān)，故尿VDBP水平對(duì)評(píng)估DN的病情有一定價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】糖尿病腎病;維生素D結(jié)合蛋白質(zhì);影響因素分析

王媛，史慧婷，姜書寧，等.糖尿病腎病患者維生素D結(jié)合蛋白水平及其影響因素研究［J］．中國全科醫(yī)學(xué)，2015，18(31):3812－3817.［www.chinagp.net］

Wang Y，Shi HT，Jiang SN，et al.Vitamin D binding protein levels in patients with diabetic nephropathy and its influencing factors［J］．Chinese General Practice，2015，18(31):3812－3817.

維生素D結(jié)合蛋白(vitamin D binding protein，VDBP)屬結(jié)合蛋白清蛋白家族，主要由肝臟合成，由腎小球?yàn)V過，可被近端腎小管上皮細(xì)胞重吸收，有文獻(xiàn)報(bào)道腎臟也分泌少量的VDBP［1］。近年研究者們發(fā)現(xiàn)VDBP可轉(zhuǎn)化為一種強(qiáng)效的巨噬細(xì)胞活化因子(MAF)，從而直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞［2］。應(yīng)用免疫熒光法檢測(cè)可見，許多細(xì)胞表面都有VDBP結(jié)合［3］。Mirkovic＇等［4］的研究第一次證實(shí)了尿VDBP是獨(dú)立于蛋白尿的一種腎小管間質(zhì)損害生物標(biāo)志物，并且出現(xiàn)于炎性反應(yīng)及腎小管間質(zhì)纖維化的早期。糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)作為2型糖尿病(T2DM)的重要并發(fā)癥之一，一直是研究的熱點(diǎn)。除常見致病機(jī)制外，有研究表明慢性炎性反應(yīng)在DN的發(fā)生發(fā)展中也起到重要作用［5］，而巨噬細(xì)胞是介導(dǎo)腎臟炎性反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞。Chow等［6］研究表明，巨噬細(xì)胞參與了DN的發(fā)病及腎間質(zhì)纖維化的過程。目前已知VDBP參與T2DM的發(fā)生及進(jìn)展［7－11］，且有文獻(xiàn)報(bào)道尿VDBP水平與DN程度成正比［12］。但尚罕見相關(guān)研究探討VDBP在DN各期患者中的表達(dá)水平及影響因素。故本研究采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)T2DM患者血、尿VDBP水平并分析其相關(guān)影響因素，以明確VDBP與DN的關(guān)系，為DN的診斷及治療提供新的依據(jù)。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象選取2013年8月—2014年2月在大連醫(yī)科大學(xué)附屬二院住院的T2DM患者66例。納入標(biāo)準(zhǔn):均符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)［13］，空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L，或糖負(fù)荷后2 h血糖≥11.1 mmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并尿路感染及其他部位感染者;(2)伴有腫瘤、心功能衰竭、T2DM急性并發(fā)癥(如糖尿病酮癥酸中毒)者;(3)近期應(yīng)用腎毒性藥物或攝入高蛋白食物者;(4)妊娠、哺乳期及服用避孕藥物的女性。根據(jù)美國糖尿病協(xié)會(huì)(American Diabetes Association，ADA)2007年指南推薦的尿微量清蛋白與尿肌酐比值(UACR)，將患者分為3個(gè)亞組:正常清蛋白尿組(UACR＜30 mg/g)、微量清蛋白尿組(UACR 30～300 mg/g)和臨床清蛋白尿組(UACR＞300 mg/g)［14］。同時(shí)選取該院門診的健康體檢者20例為健康對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn):均接受口服75 g葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)證實(shí)為糖耐量正常。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)心臟病、高血壓、高脂血癥、肝腎疾病者;(2)有內(nèi)分泌及代謝性疾病病史者;(3)近期無高蛋白食物攝入史;(4)妊娠、哺乳期及服用避孕藥物的女性。本研究通過該院倫理委員會(huì)的審查，受試者均簽署知情同意書。

1.2方法(1)生化指標(biāo):受試者清晨空腹(禁食12 h、禁飲8 h)抽取靜脈血5 ml，1 h內(nèi)離心分離上清液送至該院檢驗(yàn)中心測(cè)定FPG、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血肌酐(SCr)、血尿素(UREA)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)、血清蛋白(ALB);留取晨清潔中段尿20 ml測(cè)定尿微量清蛋白以及尿肌酐。其余血樣及尿樣1 h內(nèi)離心，取上清液凍存－40.0℃冰箱，3個(gè)月內(nèi)測(cè)定VDBP(ELISA法，中國優(yōu)爾生公司)。(2)體質(zhì)指數(shù)(body mass index，BMI):固定專人采用同一測(cè)量工具測(cè)量身高、體質(zhì)量，并計(jì)算BMI。(3)估算腎小球?yàn)V過率(eGFR):根據(jù)簡化MDRD公式計(jì)算，eGFR〔ml·min－1·(1.73 m2)－1〕= 186.3×〔SCr(g/L)〕－1.154×〔年齡(歲)〕－0.203×0.742(女性)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以(±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析，其中兩兩比較采用q檢驗(yàn);相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1 4組一般資料比較健康對(duì)照組男10例，女10 例;正常清蛋白尿組男12例，女10例;微量清蛋白尿組男11例，女11例;臨床清蛋白尿組男10例，女12例，4組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 0.36，P = 0.94)。4組年齡、TC、BMI間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);FPG、HbA1c、SCr、UREA、TG、HDL－C、LDL－C、ALB間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，見表1)。

2.2 4組血VDBP水平比較健康對(duì)照組及正常、微量、臨床清蛋白尿組血VDBP水平分別為:(44.83 ±15.65)、(312.25±29.57)、(330.92±49.28)、(338.30±50.05)mg/L，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F =409.42，P＜0.01);其中正常、微量、臨床清蛋白尿組與健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);而正常、微量及臨床清蛋白尿3組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，見圖1)。

2.3 4組尿VDBP水平比較健康對(duì)照組及正常、微量、臨床清蛋白尿組尿VDBP水平分別為:(5.26 ±1.34)、(8.93±3.17)、(15.19±3.38)、(21.48 ±7.00)mg/L，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F = 58.66，P＜0.01);其中兩兩組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，見圖2)。

因尿VDBP檢測(cè)采用晨尿點(diǎn)標(biāo)本，無24 h尿標(biāo)本檢測(cè)準(zhǔn)確，故依據(jù)UACR法，用尿肌酐對(duì)尿VDBP值進(jìn)行校正(尿VDBP/Cr)。健康對(duì)照組與正常、微量、臨床清蛋白尿組尿VDBP/Cr水平分別為:(4.25±1.89)、(10.76±7.02)、(23.01±11.39)、(41.58±17.10)mg/g，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F = 47.38，P ＜0.01);其中兩兩組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05，見圖3)。

2.4 T2DM患者尿VDBP水平與eGFR的相關(guān)性分析Pearson相關(guān)分析顯示，患者尿VDBP水平與eGFR呈負(fù)相關(guān)(r =－0.413，P =0.015，見圖4)。

2.5 T2DM患者血、尿VDBP水平與其他一般指標(biāo)的相關(guān)性分析患者血VDBP水平為(301.52±20.26)mg/L，與FBG、HbA1c、UREA、SCr、TC、TG、HDL－C、LDL－C、ALB均無相關(guān)性(P＞0.05)?；颊吣騐DBP水平為(16.81±3.64)mg/L，與FBG、HbA1c、TG、TC、HDL－C、LDL－C均無相關(guān)性(P＞0.05);而與SCr、UREA呈正相關(guān)，與ALB呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05，見表2)。

表1　4組一般資料比較(±s)Table 1　Comparison of general data among the 4 groups

表1　4組一般資料比較(±s)Table 1　Comparison of general data among the 4 groups

注:與健康對(duì)照組比較，aP＜0.05，與正常清蛋白尿組比較，bP＜0.05，與微量清蛋白尿組比較，cP＜0.05;FPG =空腹血糖，HbA1c=糖化血紅蛋白，UREA =血尿素，SCr =血肌酐，TC =總膽固醇，TG =三酰甘油，HDL－C =高密度脂蛋白膽固醇，LDL－C =低密度脂蛋白膽固醇，ALB=血清蛋白，BMI =體質(zhì)指數(shù)

組別　例數(shù)　年齡(歲)　FPG(mmol/L)　HbA1c(%)　SCr(μmol/L)　UREA(mmol/L)健康對(duì)照組　20　60.1±7.6　5.1±0.6　4.5±0.6　56.36±11.37　4.47±1.19正常清蛋白尿組　22　63.2±9.6　10.0±4.8a　9.1±2.6a　61.50±21.32　5.67±1.53微量清蛋白尿組　22　64.0±10.1　9.6±3.7a　8.9±2.1a　71.50±25.12　6.45±2.53臨床清蛋白尿組　22　63.8±8.8　10.8±5.3a　8.4±2.9a　119.00±41.75abc　9.38±5.46abcF 值0.83　8.10　18.93　25.53　9.15 P值　0.48　＜0.01?。?.01?。?.01?。?.01組別　TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL－C(mmol/L)LDL－C(mmol/L)ALB(g/L)　BMI(kg/m2)健康對(duì)照組　4.24±0.53　1.63±0.36　1.25±0.30　2.43±0.50　46.14±4.97　24.0±2.9正常清蛋白尿組　4.72±0.95　1.41±0.69　1.07±0.44　3.01±0.81　40.42±3.62a　26.2±2.6微量清蛋白尿組　4.69±0.94　1.92±0.95　1.04±0.22　2.68±0.61　39.37±4.16a　27.2±5.3臨床清蛋白尿組　5.01±1.14　2.31±1.19ab　0.96±0.29a　3.14±1.05a　35.10±6.51abc　25.7±4.0 F 值2.46　4.43　2.97　3.60　17.70　2.37 P值0.07　0.01　0.04　0.02?。?.01　0.08

表2　T2DM患者血、尿VDBP水平與其他一般指標(biāo)的相關(guān)性分析Table 2　Correlation between the serum and urine VDBP level and other general indexes in T2DM patients

圖1　4組血VDBP水平比較Figure 1 Comparison of serum VDBP level among the 4 groups

圖2　4組尿VDBP水平比較Figure 2 Comparison of urine VDBP level among the 4 groups

圖3　4組尿VDBP/Cr水平比較Figure 3 Comparison of urine VDBP/Cr level among the 4 groups

圖4　T2DM患者尿VDBP水平與eGFR的相關(guān)散點(diǎn)圖Figure 4 Scatterplot of correlation between urine VDBP level and eGFR in T2DM patients

3　討論

DN是T2DM的主要并發(fā)癥之一，因其起病隱匿，早期就診率低，后期迅速進(jìn)展為終末期腎臟病(ESRD)，而嚴(yán)重危害人類健康。因此，DN的早期發(fā)現(xiàn)、早期干預(yù)至關(guān)重要。DN的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，其中炎性反應(yīng)在DN發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用［15－18］。在DN的病理改變中，巨噬細(xì)胞是介導(dǎo)腎臟炎性反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞。Chow等［6］的研究表明，巨噬細(xì)胞參與了DN的發(fā)病及腎間質(zhì)纖維化的過程。持續(xù)的高血糖狀態(tài)、細(xì)胞趨化因子的生成、腎小球免疫復(fù)合物的沉積、肌成纖維細(xì)胞的數(shù)量以及IV型膠原沉積的程度與巨噬細(xì)胞的聚集和活化具有明顯的正相關(guān)性。腎間質(zhì)纖維化是各種慢性腎臟病的共同轉(zhuǎn)歸，而巨噬細(xì)胞是其發(fā)生和發(fā)展過程中的重要細(xì)胞基礎(chǔ)。通過對(duì)人類T2DM患者的腎臟病理表現(xiàn)進(jìn)行對(duì)比可見，腎小球硬化的程度與巨噬細(xì)胞的聚集程度密切相關(guān)，目前已證實(shí)，巨噬細(xì)胞參與DN發(fā)生與發(fā)展的機(jī)制是通過氧化應(yīng)激實(shí)現(xiàn)的［19］。

VDBP是一種組特異性成分、一種糖基化的α－球蛋白，屬結(jié)合蛋白清蛋白家族，分子量為58 kDa，主要由肝臟合成，由腎小球?yàn)V過，并可經(jīng)受體介導(dǎo)被近端腎小管上皮細(xì)胞重吸收，有文獻(xiàn)報(bào)道腎臟也分泌少量的VDBP［1］。VDBP的主要生物學(xué)功能是結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)維生素D(VitD)及其代謝產(chǎn)物，但除了結(jié)合VitD及其衍生物外，VDBP還有其他生物學(xué)功能。近年研究發(fā)現(xiàn)，在一些酶(包括T淋巴細(xì)胞的唾液酸酶和B淋巴細(xì)胞的β－半乳糖苷酶)的脫糖基化作用下，VDBP可轉(zhuǎn)化為一種強(qiáng)效的巨噬細(xì)胞活化因子(MAF)，直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，抑制血管生成，同時(shí)刺激巨噬細(xì)胞促使其攻擊異常生長的內(nèi)皮細(xì)胞［2］。VDBP不僅可以通過使補(bǔ)體C5a這種趨化因子免于被蛋白酶水解，延長其壽命，還可結(jié)合于粒細(xì)胞表面，明顯增強(qiáng)其對(duì)巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞的趨化作用［20］。應(yīng)用免疫熒光法檢測(cè)可見，許多細(xì)胞(如中性粒細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞等)表面都有VDBP結(jié)合。Mirkovic＇等［4］研究第一次證實(shí)了尿VDBP是獨(dú)立于蛋白尿的一種腎小管間質(zhì)損害生物標(biāo)志物，尿VDBP與腎小管炎性損傷標(biāo)志物腎損傷分子－1(KIM－1)、β2微球蛋白(β2－MG)、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cys－C)、1－甲基環(huán)丙烯(MCP－1)、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)相關(guān)聯(lián)，并伴隨腎小管間質(zhì)損傷程度的加重而升高，出現(xiàn)于炎性反應(yīng)及腎小管間質(zhì)纖維化的早期，甚至早于腎間質(zhì)纖維化的已知標(biāo)志物α－平滑肌肌動(dòng)蛋白(α－SMA)。近年來研究發(fā)現(xiàn)，VDBP可通過介導(dǎo)炎性反應(yīng)調(diào)節(jié)與糖尿病有關(guān)的細(xì)胞因子［7－11］。有文獻(xiàn)報(bào)道尿VDBP水平與DN程度成正比［12］。

目前國內(nèi)外尚罕見關(guān)于VDBP在DN各期患者中表達(dá)水平及影響因素的研究。本研究通過檢測(cè)T2DM患者血、尿VDBP水平，發(fā)現(xiàn):(1)T2DM各亞組患者血VDBP水平均明顯高于健康對(duì)照組，而這3個(gè)亞組間血VDBP水平并無差異?；颊哐猇DBP水平與FPG、UREA、SCr、ALB等一般指標(biāo)均無相關(guān)性。T2DM患者血VDBP水平的特異性升高，不除外炎性反應(yīng)等因素參與，具體機(jī)制需進(jìn)一步研究證實(shí)，但這種升高的水平與DN的進(jìn)展無相關(guān)性，不能通過血VDBP水平對(duì)DN進(jìn)行分期，故本研究亦未進(jìn)行血VDBP水平與eGFR的相關(guān)性分析。(2)T2DM各亞組患者尿VDBP(或尿VDBP/Cr)水平均明顯高于較健康對(duì)照組，且伴隨DN的進(jìn)程，3個(gè)亞組間尿VDBP(或尿VDBP/Cr)水平亦逐漸升高，說明尿VDBP水平可應(yīng)用于DN的診斷及分期。(3)通過尿VDBP與其他一般指標(biāo)的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)患者尿VDBP水平與UREA、SCr呈正相關(guān)，而與eGFR呈負(fù)相關(guān)，這與既往文獻(xiàn)報(bào)道一致［4］。尿VDBP可經(jīng)腎小球排出、腎小管重吸收，根據(jù)Mirkovic＇等［4］的研究得知，由于腎間質(zhì)纖維化程度加重使得尿VDBP重吸收減少，故尿VDBP水平伴隨腎功能損害的加重而增加，本研究結(jié)果證實(shí)尿VDBP水平亦同樣反映DN腎功能損害的進(jìn)展。(4)通過尿VDBP與其他一般指標(biāo)的相關(guān)性分析，還發(fā)現(xiàn)患者尿VDBP水平與ALB呈負(fù)相關(guān)，有文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)用免疫組化研究發(fā)現(xiàn)腎臟存在VDBP的基因表達(dá)［1］，故患者尿VDBP的增多，除腎小管重吸收減少的因素之外，是否還存在腎臟分泌一部分VDBP的可能，可以通過進(jìn)一步動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)。(5)伴隨DN的進(jìn)展，尿清蛋白排泄的增多導(dǎo)致ALB的逐漸減少。結(jié)合本研究血、尿VDBP水平的綜合分析，發(fā)現(xiàn)伴隨DN的進(jìn)展，尿VDBP排出明顯增多，但血VDBP水平在DN各期中無明顯差異，并明顯高于健康對(duì)照組。這說明VDBP在T2DM及DN患者可能存在特異性升高，結(jié)合前文已知VDBP的免疫介導(dǎo)功能及趨化作用，可以推測(cè)VDBP可能通過巨噬細(xì)胞浸潤途徑參與T2DM及DN的發(fā)病及病情進(jìn)展，可以進(jìn)一步通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

健康對(duì)照組及正常、微量、臨床清蛋白尿組一般指標(biāo)比較結(jié)果顯示:(1)臨床清蛋白尿組UREA、SCr水平明顯高于其他3組。這與臨床清蛋白尿期(即DN IV 期)會(huì)出現(xiàn)GFR下降的理論一致。(2)臨床清蛋白尿組TG水平高于健康對(duì)照組及正常清蛋白尿組，HDL－C低于健康對(duì)照組，LDL－C高于健康對(duì)照組;正常、微量、臨床清蛋白尿組ALB水平均明顯低于健康對(duì)照組，且臨床清蛋白尿組ALB水平也低于微量、正常清蛋白尿組。以上結(jié)果符合DN后期會(huì)出現(xiàn)大量蛋白尿、低蛋白血癥，導(dǎo)致肝臟代償性合成蛋白增多從而出現(xiàn)脂代謝紊亂的理論。

本研究由于樣本量較少，且ELISA法本身存在一定化驗(yàn)誤差，關(guān)于VDBP與DN致病機(jī)制方面的關(guān)系還需進(jìn)一步研究證實(shí)。T2DM患者血、尿VDBP水平均有明顯升高。但本研究通過檢測(cè)T2DM患者血及尿VDBP水平并分析其相關(guān)影響因素，發(fā)現(xiàn)伴隨DN進(jìn)展，尿VDBP水平逐漸增高，對(duì)評(píng)估DN的病情有一定的價(jià)值，其有可能成為DN新的早期診斷標(biāo)志物，VDBP可能參與DN的病理生理過程，為DN的研究及治療開拓了新的方向。

參考文獻(xiàn)

［1］Cooke NE，Murgia A，McLeod JF.Vitamin D－binding protein.Structure and pattern of expression［J］．Ann N Y AcadSci，1988，538:49－59.

［2］Kisker O，Onizuka S，Becker CM，et al.Vitamin D binding protein －macrophage activating factor(DBP－maf)inhibits angiogenesis and tumor growth in mice［J］．Neoplasia，2003，5(1):32－40.

［3］Kaneki M，Inoue S，Hosoi T，et al.Effects of 1 alpha，25－dihydroxyvitamin D3on macrophage colony－stimulating factor production and proliferation of human monocytic cells［J］．Blood，1994，83(8):2285－2293.

［4］Mirkovic＇K，Doorenbos CR，Dam WA，et al.Urinary vitamin D binding protein:a potential novel marker of renal interstitial inflammation and fibrosis［J］．PLoS One，2013，8(2):e55887.

［5］Uesugi N，Sakata N，Horiuchi S，et al.Glycoxidation－modified macrophages and lipid peroxidation products are associated with the progression of human diabetic nephropathy［J］．Am J Kidney Dis，2001，38(5):1016－1025.

［6］Chow FY，Nikolic－Paterson DJ，Atkins RC，et al.Macrophages in streptozotocin－induced diabetic nephropathy:potential role in renal fibrosis［J］．Nephrol Dial Transplant，2004，19(12 ):2987 －2996.

［7］Pratley RE，Thompson DB，Prochazka M，et al.An autosomal genomic scan for loci linked to prediabetic phenotypes in Pima Indians［J］．J Clin Invest，1998，101(8):1757－1764.

［8］Wilson PW，Cupples LA，Meigs JB，et al.Genome scan for impaired glycemic status:results from the Framingham Heart Study［J］．Diabetes，1997，46(1):76.

［9］Baier LJ，Dobberfuhl AM，Pratley RE，et al.Variations in the vitamin D－binding protein(Gc locus)are associated with oral glucose tolerance in nondiabetic Pima Indians［J］．J Clin Endocrinol Metab，1998，83(8):2993－2996.

［10］Szathmary EJ.The effect of Gc genotype on fasting insulin level in Dogrib Indians［J］．Hum Genet，1987，75(4):368－372.

［11］Iyengar S，Hamman RF，Marshall JA，et al.On the role of vitamin D binding globulin in glucose homeostasis:results from the San Luis Valley Diabetes Study［J］．Genet Epidemiol，1989，6(6):691 －698.

［12］Thrailkill KM，Jo CH，Cockrell GE，et al.Enhanced excretion of vitamin D binding protein in type 1 diabetes:a role in vitamin D deficiency?［J］．J Clin Endocrinol Metab，2011，96(1):142－149.

［13］陸霞芳.全科綜合管理對(duì)2型糖尿病患者心理行為調(diào)查分析［J］．實(shí)用心腦肺血管病雜志，2012，20(2):288.

［14］Fu MH，Chen J，Chen Q.Research progress of cystatin C and diabetic nephropathy［J］．Chinese General Practice，2013，16(2):229－231.(in Chinese)

傅美華，陳軍，陳秋.胱抑素C與糖尿病腎病的相關(guān)研究進(jìn)展［J］．中國全科醫(yī)學(xué)，2013，16(2):229－231.

［15］Haneda M，Koya D，Isono M，et al.Overview of glucose signaling in mesangial cells in diabetic nephropathy［J］．J Am Soc Nephrol，2003，14(5):1374－1382.

［16］林善琰.糖尿病腎病研究的幾個(gè)關(guān)鍵［J］．中華腎臟病雜志，2000，16(2):69－70.

［17］林善琰.糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展［J］．中華內(nèi)科雜志，2001，40(11):782－783.

［18］林善琰.糖尿病腎病研究中的幾個(gè)值得重視的問題［J］．中華腎臟病雜志，2004，20(3):151－153.

［19］Nishikawa T，Edelstein D，Brownlee M.The missing link:a single unifying mechanism for diabetic complications［J］．Kidney Int Suppl，2000，58(77):S26－S30.

［20］Song YH，Naumova AK，Liebhaber SA，et al.Physical and meiotic mapping of the region of human chromosome 4q11－q13 encompassing the vitamin D binding protein DBP/Gc－globulin and albumin multigene cluster［J］．Genome Res，1999，9(6):581－587.

(本文編輯:崔沙沙)

·論著·

作者單位:116023遼寧省大連市，大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院腎內(nèi)科

Vitamin D Binding Protein Levels in Patients With Diabetic Nephropathy and Its Influencing Factors

WANG Yuan，SHI Hui－ting，JIANG Shu－ning，et al.Department of Nephrology，the Second Affiliated Hospital of Dalian Medical University，Dalian 116023，China

【Abstract】Objective To investigate vitamin D binding protein(VDBP)levels in patients with diabetic nephropathy(DN)，and to determine the relation between VDBP and DN，in order to provide new references for the diagnosis and treatment of DN.MethodsWe enrolled 66 T2DM patients who were admitted into the Second Affiliated Hospital of Dalian Medical University from August 2013 to February 2014.According to the ratio of UALB to UCR(UACR)，the patients were divided into three groups:normal albuminuria group(UACR＜30 mg/g)，slight albuminuria group(UACR 30～300 mg/g)and clinical albuminuria group(UACR＞300 mg/g)，with 22 patients in each group.We also enrolled 20 healthy people who received outpatient service as control group.ELISA method was employed to detect the serum and urine VDBP level of the subjects，andbook=3813,ebook=50biochemical indexes were measured，including FPG，HbA1c，UREA，SCr，TC，TG，HDL－C，LDL－C，ALB，UALB，UCR.Results The serum VDBP levels of control group，normal albuminuria group，slight albuminuria group and clinical albuminuria group were(44.83±15.65)，(312.25±29.57)，(330.92±49.28)and(338.30±50.05)mg/L respectively，with significant differences among the four groups(F = 409.42，P＜0.01);normal albuminuria group，slight albuminuria group and clinical albuminuria group were higher than control group(P＜0.05)，while normal albuminuria group，slight albuminuria group and clinical albuminuria group were not significantly different(P＞0.05).The urine VDBP levels of control group，normal albuminuria group，slight albuminuria group and clinical albuminuria group were(5.26±1.34)，(8.93 ±3.17)，(15.19±3.38)and(21.48±7.00)mg/L，with significant differences among the four groups(F =58.66，P＜0.01);the pairwise comparison among the four groups showed significant differences(P＜0.05).Since urine VDBP test was made on urine samples taken in the morning，which leaded to poorer accuracy compared with 24 h urine samples，so UCR was used to adjust urine VDBP level by UACR method(urine VDBP/Cr).The urine VDBP/Cr levels of control group，normal albuminuria group，slight albuminuria group and clinical albuminuria group were(4.25±1.89)，(10.76±7.02)，(23.01 ±11.39)and(41.58±17.10)mg/g，with significant differences among the four groups(F = 47.38，P＜0.01);the pairwise comparison among the four groups showed significant differences(P＜0.05).The urine VDBP level of T2DM patients had negative correlation with eGFR in T2DM patients(r =－0.413，P = 0.015).The urine VDBP level was positively correlated with UREA and SCr in T2DM patients(r values were 0.505 and 0.454;P＜0.05)and were negatively correlated with ALB(r =－0.454，P＜0.05).ConclusionT2DM patients have higher VDBP levels of serum and urine and see urine VDBP level increase as DN progresses，and urine VDBP level is related to eGFR，UREA，SCr and ALB，thus urine VDBP level has value in the assessment of DN to some extent.

【Key words】Diabetic nephropathies;Vitamin D－binding protein;Root cause analysis

(收稿日期:2015－07－06;修回日期:2015－09－10)

通信作者:趙久陽，116023遼寧省大連市，大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院腎內(nèi)科;E－mail:zhaojiuy9@163.com

基金項(xiàng)目:“十二五”國家科技支撐計(jì)劃課題(2011BAI10B08)——血液凈化質(zhì)量改進(jìn)和國產(chǎn)血液凈化產(chǎn)品臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)研究

【中圖分類號(hào)】R 587.24

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi:10.3969/j.issn.1007－9572.2015.31.010