功能性消化不良與胃黏膜肥大細胞、血漿胃動素的關(guān)系

功能性消化不良與胃黏膜肥大細胞、血漿胃動素的關(guān)系

陳海山1龔錦容1黃朝忠1林志輝2*

福建省莆田市莆田學(xué)院附屬醫(yī)院消化科1(351100)福建醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院消化科2

*本文通信作者，Email: chenhaishanpt@163.com

背景：功能性消化不良(FD)是常見的功能性疾病，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量和身心健康，已越來越引起臨床醫(yī)師的關(guān)注。目的：探討肥大細胞(MC)、胃動素(MTL)在FD發(fā)病中的作用。方法：選取2013年9月-2014年1月莆田學(xué)院附屬醫(yī)院的60例FD患者，其中餐后不適綜合征(PDS)32例，上腹痛綜合征(EPS)28例，以28名健康志愿者作為對照組(HS組)。比較胃黏膜MC計數(shù)、血漿MTL水平(空腹和飲溫水后)以及胃排空時間(T1/2)。結(jié)果：與HS組相比，F(xiàn)D組胃黏膜MC計數(shù)顯著增多(P<0.001)，空腹和飲溫水后血漿MTL水平均顯著降低(P<0.001)，T1/2顯著延長(P<0.001)。PDS亞組MC計數(shù)與EPS亞組無明顯差異(P=0.094)，空腹和飲溫水后血漿MTL水平顯著低于EPS亞組(P<0.001)，T1/2顯著延長(P<0.001)。結(jié)論：FD患者胃黏膜MC計數(shù)較HS組顯著增多，提示MC可能在FD的發(fā)病中起一定作用。FD患者血漿MTL水平下降，可能是FD發(fā)病和產(chǎn)生相應(yīng)癥狀的原因之一。

關(guān)鍵詞功能性消化不良；肥大細胞；促胃動素；胃排空

功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)是一種發(fā)生于上腹部的常見功能性胃腸道疾病。根據(jù)2006年的羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)[1]，將其分為餐后不適綜合征(postprandial distress syndrome, PDS)和上腹痛綜合征(epigastric pain syndrome, EPS)兩種亞型。FD的發(fā)病率較高，癥狀反復(fù)發(fā)作，遷延不愈，耗費大量醫(yī)療資源，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量和身心健康，因此越來越引起臨床醫(yī)師的關(guān)注。國內(nèi)統(tǒng)計顯示人群FD的發(fā)病率為18%~45%，占消化?？崎T診的20%~40%；國外發(fā)病率為19%~41%，平均32%[2]。目前FD的病因和發(fā)病機制尚不清楚，大量研究認為可能與胃腸動力障礙、內(nèi)臟高敏感、胃腸激素的變化、社會心理障礙、幽門螺桿菌感染、飲食生活方式等密切相關(guān)。

近年研究發(fā)現(xiàn)胃腸道組織中肥大細胞(MC)可通過釋放內(nèi)含的活性物質(zhì)與胃腸神經(jīng)相互作用而影響FD的發(fā)病。胃動素(MTL)是一種新發(fā)現(xiàn)的胃腸激素，對胃腸道移行性收縮起有重要作用，促進胃腸運動，從而產(chǎn)生胃腸排空作用。本研究通過檢測FD患者胃竇黏膜組織中MC計數(shù)和血漿MTL含量，并聯(lián)合超聲檢測胃排空，旨在探討MC、MTL在FD發(fā)病中的潛在作用。

對象與方法

一、研究對象

選取2013年9月-2014年1月福建省莆田學(xué)院附屬醫(yī)院消化科門診和消化內(nèi)鏡中心的FD患者，以上腹部消化不良癥狀為主訴就診，診斷符合FD羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)。入選者年齡限定為18~65歲(為排除胃腸道發(fā)育功能未成熟或退化的影響)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無其他可能引起消化不良癥狀的慢性疾病如糖尿病、慢性腎功能不全、慢性肝炎等；②無腹部或盆腔手術(shù)史；③無食物藥物過敏史；④無近期大量飲酒(酒精75 g/d)或大量吸煙(香煙10支/d)史；⑤所有可能影響胃腸道功能的藥物(包括抗抑郁藥)在檢查前至少停藥一周。健康對照組(HS組)來自同期臨床健康的醫(yī)務(wù)人員或體檢中心健康志愿者，無任何消化系統(tǒng)癥狀且體檢結(jié)果正常。對入選的FD患者進行上消化道癥狀評定分組：以上腹胞脹不適和早飽感為主要癥狀者歸入PDS亞組，以上腹痛和上腹燒灼感為主要癥狀者歸入EPS亞組。所有入選者均取得知情同意。

二、主要試劑和器材

福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供的兔抗單克隆CD117/c-kit試劑盒(含DAB)(HRP)；上海西唐生物科技有限公司提供的人胃動素 ELISA試劑盒；HP-5500 B型超聲顯像儀(探頭頻率為3.5 MHz)購自philips公司。

三、研究方法

1. 免疫組化：入選者均行胃鏡檢查，鏡下表現(xiàn)為正常或慢性非萎縮性胃炎，鉗取幽門前2~3 cm組織2塊，4%甲醛溶液固定，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，3 μm厚間斷切片，HE染色觀察胃黏膜炎性細胞浸潤情況和病理類型。以免疫組化染色觀察胃黏膜 MC分布情況并進行計數(shù)，具體步驟參照試劑盒說明書。

2. ELISA法檢測血漿MTL水平：所有入選者空腹和飲用37 ℃溫水后30 min，抽取肘靜脈血4 mL，低溫4 ℃離心，參照試劑盒說明書步驟測定血漿MTL水平。

3. 超聲法檢測胃排空時間：所有入選者禁食8~12 h，檢測時取坐位，超聲探頭置于臍上偏左指向右腹部于賁門平面處確認胃體-底交界處，測定胃體、底之間最大前后徑，飲溫水后(3~4 min內(nèi)飲完500 mL)分別于0、10、20、30、40、50 min進行測量。超聲檢測由同一位高年資超聲主治醫(yī)師操作。

四、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié)果

一、一般情況

在規(guī)定的研究期間，共入選60例FD患者。PDS患者32例，其中男12例，女20例，年齡18~61歲，平均(39.03±10.16)歲；EPS患者28例，其中男11例，女17例，年齡21~62歲，平均(40.11±11.25)歲。HS組28名，其中男13名，女15名，年齡20~60歲，平均(41.04±10.45)歲。EPS亞組、PDS亞組和HS組之間性別構(gòu)成和年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。PDS亞組和EPS亞組的癥狀見表1。

表1　PDS和EPS亞組癥狀n(%)

二、MC分布、形態(tài)觀察和計數(shù)

光學(xué)顯微鏡下見MC細胞形態(tài)多樣，大小不一， 呈卵圓形、橢圓形或不規(guī)則形，胞質(zhì)呈棕褐色，部分MC周圍有棕褐色顆粒環(huán)繞，部分見脫顆?，F(xiàn)象；MC主要分布于黏膜固有層(圖1)。

FD組MC計數(shù)顯著高于HS組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=26.697，P=0.000)，而PDS亞組與EPS亞組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.704，P=0.094)(表2)。

三、血漿MTL 水平

空腹時，F(xiàn)D組血漿MTL水平顯著低于HS組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.579，P=0.001)；PDS亞組、EPS亞組和HS組之間血漿MTL水平差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(F=12.919，P=0.000)，其中PDS亞組顯著低于EPS亞組和HS組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而EPS亞組與HS組之間無明顯差異(P>0.05)(表2)。

飲溫水后，F(xiàn)D組血漿MTL水平顯著低于HS組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.733，P=0.000)；PDS亞組、EPS亞組和HS組之間血漿MTL水平差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(F=19.006，P=0.000)，其中PDS亞組顯著低于EPS亞組和HS組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而EPS亞組與HS組之間無明顯差異(P>0.05)(表2)。

三、胃排空時間

FD患者空腹?fàn)顟B(tài)和飲用溫水后的超聲圖像見圖2。所有研究對象飲溫水后胃體、底交界處前后壁內(nèi)徑在30 min內(nèi)迅速縮小，隨后變化緩慢。胃排空正常和延遲者的曲線圖見圖3。

圖3　B超檢測胃排空曲線圖

A：EPS組；PDS組；C：HS組
圖1各組MC免疫組化染色(紅色箭頭所示為MC，綠色箭頭所示為脫顆粒的MC)(×400)

以胃體、胃底交界處胃前后壁內(nèi)徑減少至50%的時間(T1/2)表示胃排空時間。以HS組T1/2的95% CI上限為界，F(xiàn)D組中胃排空正常者26例(43.3%)，其中EPS亞組20例，PDS亞組6例；胃排空延遲34例(56.7%)，其中EPS亞組8例，PDS亞組26例。FD組T1/2較HS組顯著延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=6.556，P=0.000)；PDS亞組T1/2較EPS亞組顯著延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.273，P=0.000)(表2)。

表2　各組胃黏膜MC計數(shù)、血漿MTL水平和T1/2比較(±s)

表2　各組胃黏膜MC計數(shù)、血漿MTL水平和T1/2比較(±s)

組 別例數(shù)MC計數(shù)血漿MTL(pg/mL)空腹飲溫水T1/2(min)HS組2816.82±2.70416.64±85.14491.57±90.8524.17±4.75FD組6035.07±4.15*347.54±84.02*403.87±87.27*34.85±10.53* PDS亞組3235.91±3.67314.95±75.64*#363.80±75.43*#40.41±9.18# EPS亞組2834.11±4.51384.77±74.49449.66±77.6828.49±8.19

*與HS組比較，P<0.05；#與EPS亞組比較，P<0.05

A：空腹?fàn)顟B(tài)；B：飲溫水后

FD的發(fā)病機制和病因目前尚不清楚，目前多認為內(nèi)臟敏感性增高和胃腸動力障礙在其中起重要機制。近年發(fā)現(xiàn)MC和MTL在FD的發(fā)病中起有重要作用。

MC在胃腸道中含量豐富，胞質(zhì)顆粒內(nèi)含有多種生物活性物質(zhì)，通過釋放這些活性介質(zhì)調(diào)節(jié)胃腸運動和內(nèi)臟感覺。本研究發(fā)現(xiàn)部分MC周圍有棕褐色顆粒環(huán)繞并見脫顆粒現(xiàn)象，MC主要分布于胃黏膜固有層。FD患者胃黏膜MC計數(shù)較HS組明顯增多，可能是FD發(fā)病以及產(chǎn)生上腹部癥狀的分子基礎(chǔ)。本研究還發(fā)現(xiàn)，PDS和EPS兩亞組間MC計數(shù)無明顯差異，說明MC計數(shù)與FD分型無明顯相關(guān)性，提示胃黏膜MC計數(shù)增多在FD中可能普遍存在。FD患者存在內(nèi)臟感覺過敏，可能與MC計數(shù)增多，發(fā)生脫顆粒釋放的活性物質(zhì)也相應(yīng)增多，從而容易產(chǎn)生級聯(lián)放大效應(yīng)有關(guān)。國外文獻報道[3-5]EPS主要由于內(nèi)臟高敏感性增加或(和)胃黏膜化學(xué)刺激增加所致，而與胃腸動力障礙相關(guān)性差。由此可見，MC在FD發(fā)病機制中扮演一定角色，降低黏膜中MC計數(shù)并抑制其脫顆粒可能會改善患者早飽、餐后不適、上腹痛、上腹燒灼感等癥狀。

MTL是腸嗜鉻細胞分泌的胃腸激素，主要生理作用是促進胃腸運動，將胃腸內(nèi)容物向遠端推進并防止其逆流，在消化間期可產(chǎn)生胃腸道移行性復(fù)合運動Ⅲ相進而引起胃腸蠕動和腸道分節(jié)運動。侯曉華等[6]的研究發(fā)現(xiàn)飲水可刺激機體MTL釋放。本實驗中，飲溫水30 min后，HS組和FD組血漿MTL含量均顯著升高，提示飲水可刺激機體釋放MTL，間接支持了人體進食后可引起MTL釋放。國內(nèi)文獻報道[7]顯示，F(xiàn)D胃排空障礙者空腹和餐后血漿MTL均明顯低于對照者和FD胃排空正常者，而FD胃排空正常者與對照者之間無明顯差異。既往國外多項報道[8-11]認為通過相關(guān)藥物提高血漿MTL水平，能促進胃排空并改善FD臨床癥狀，說明血漿MTL水平降低與FD有關(guān)。本研究通過超聲檢測胃排空情況，并分析其與血漿MTL含量的關(guān)系，結(jié)果顯示PDS亞組存在MTL缺乏，血漿MTL水平降低，胃排空時間延長，從而導(dǎo)致早飽、餐后飽脹不適甚至嘔吐等癥狀；EPS亞組不存在MTL缺乏，血漿MTL水平與HS組無明顯差異，大部分表現(xiàn)為胃排空正常，說明其發(fā)病與MTL無明顯相關(guān)性，支持與胃腸動力障礙無明顯相關(guān)的觀點，故EPS患者較少出現(xiàn)早飽、餐后飽脹不適的癥狀。FD患者血漿MTL含量降低引起胃排空障礙，可能因MTL釋放減少，與受體的作用總效應(yīng)減弱，引起胃排空延遲、MMC Ⅲ期持續(xù)時間縮短或缺如，從而出現(xiàn)相關(guān)癥狀。許多研究顯示胃排空延緩可能與餐后飽脹不適、嘔吐癥狀有關(guān)，促動力藥能促進胃排空和改善癥狀，且多發(fā)生于女性患者[12-13]。本研究結(jié)果也間接支持了應(yīng)用MTL受體激動劑有望改善FD癥狀。本研究還發(fā)現(xiàn)FD患者以青壯年居多，且女性患者多于男性，在不同亞型中亦是如此，這與楊霞等[14]的研究結(jié)果一致。

B超具有無創(chuàng)性、簡便、重復(fù)性好的優(yōu)點，能達到實時檢測胃排空變化的要求。飲用溫水后行B超可反映胃排空功能[15-16]。本研究中，F(xiàn)D組中胃排空延遲者占56.7%，與國內(nèi)外多數(shù)研究結(jié)果示大約40%~60%基本一致；EPS亞組以胃排空正常為主；PDS亞組以胃排空延遲為主。在一定程度上支持PDS的病理生理機制與胃腸運動異常相關(guān)性高，故從胃排空方面亦可解釋PDS患者以上腹脹和早飽癥狀為主的現(xiàn)象。PDS和EPS亞組間 MC 計數(shù)無明顯差異，而HS組最少，推測胃排空與胃黏膜MC計數(shù)可能無明顯相關(guān)性，與脫顆粒數(shù)的關(guān)系需進一步證實。

綜上所述，F(xiàn)D組胃黏膜MC計數(shù)較HS組顯著增多，F(xiàn)D患者胃動力障礙和感覺過敏可能與胃黏膜MC計數(shù)增多以及MC脫顆粒釋放的活性物質(zhì)有關(guān)；空腹和進食后FD組血漿MTL水平低于HS組，可能與FD胃動力障礙有關(guān)?？傊?，MC和MTL在FD的發(fā)病中可能起有協(xié)同作用，具體情況尚需進一步研究。

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(2015-03-26收稿；2015-05-09修回)

Relationship of Functional Dyspepsia with Gastric Mucosal Mast Cells and Plasma MotilinCHENHaishan1,GONGJinrong1,HUANGChaozhong1,LINZhihui2.1DepartmentofGastroenterology,theAffiliatedHospitalofPutianUniversity,Putian,FujianProvince(351100);2DepartmentofGastroenterology,FujianProvincialHospital,FujianMedicalSchool,Fuzhou

Correspondence to: LIN Zhihui, Email: chenhaishanpt@163.com

Background: Functional dyspepsia (FD) is a commonly seen functional disease which has great impact on patient’s quality of life and mental health, and has got more and more concern by clinicians. Aims: To explore the role of mast cells (MC) and plasma motilin (MTL) in the pathogenesis of FD. Methods: Sixty FD patients including 32 postprandial distress syndrome (PDS) and 28 epigastric pain syndrome (EPS) patients from September 2013 to January 2014 at the Affiliated Hospital of Putian University were enrolled, and 28 healthy volunteers were served as controls (HS group). The number of gastric mucosal MC, plasma MTL level (fasting and 30 minutes after drinking warm water) and gastric emptying time (T1/2) were compared. Results: Compared with HS group, number of gastric mucosal MC was significantly increased (P<0.001), plasma MTL level before and after drinking warm water in FD group were significantly decreased (P<0.001), T1/2was significantly prolonged (P<0.001). No significant difference in number of MC was found between PDS subgroup and EPS subgroup (P=0.094). Plasma MTL level before and after drinking warm water in PDS subgroup were significantly lower than those in EPS subgroup (P<0.001), and T1/2was significantly prolonged (P<0.001). Conclusions: Number of gastric mucosal MC is significantly increased in FD patients compared with HS group, suggesting MC may play a role in the pathogenesis of FD. Plasma MTL level is decreased in FD patients, which may be one of the factors involved in the pathogenesis and occurrence of corresponding symptoms of FD.

Key wordsFunctional Dyspepsia;Mast Cells;Motilin;Gastric Emptying

DOI:10.3969/j.issn.1008-7125.2015.09.005