缺血性腦血管病急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清超敏C反應(yīng)蛋白和P-選擇素水平的變化研究

李春雷，張 峰，樊書領(lǐng)，賈東佩

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·中醫(yī)·中西醫(yī)結(jié)合研究·

缺血性腦血管病急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清超敏C反應(yīng)蛋白和P-選擇素水平的變化研究

李春雷，張 峰，樊書領(lǐng)，賈東佩

目的 探討缺血性腦血管病(ICVD)急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、P-選擇素(GMP140)水平的變化。方法 選取2013年5—12月，在南陽市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科接受住院治療的ICVD急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者120例，作為病例組；選取同期在該院體檢中心進行體檢的健康成年人30名，作為對照組。根據(jù)中醫(yī)辨證分型，將病例組患者分為痰證組、血瘀證組、痰瘀互結(jié)證組及非痰非瘀證組各30例。檢測并分析病例組與對照組、4個病例亞組間的血清hs-CRP水平和GMP140水平。結(jié)果 病例組和對照組的血清hs-CRP、GMP140水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同中醫(yī)證型的4個病例亞組間血清hs-CRP、GMP140水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；痰證組、血瘀證組及非痰非瘀證組與痰瘀互結(jié)證組的血清hs-CRP、GMP140水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 ICVD急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清hs-CRP、GMP140水平較高，特別是痰瘀互結(jié)證患者。

腦血管障礙；痰、瘀相關(guān)證；超敏C反應(yīng)蛋白；P-選擇素

李春雷，張峰，樊書領(lǐng)，等.缺血性腦血管病急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清超敏C反應(yīng)蛋白和P-選擇素水平的變化研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2015，18(10)：1222-1224.[www.chinagp.net]

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缺血性腦血管病(ischemic cerebral vascular disease，ICVD)是短暫性腦缺血和腦梗死等疾病的總稱，主要臨床表現(xiàn)為猝然昏倒、不省人事、口角歪斜、舌強語謇，甚至?xí)l(fā)生昏迷或猝死等，以中老年男性患者居多[1]。大部分屬中醫(yī)“中風(fēng)”范疇，少部分屬“眩暈”或“頭痛”范疇。ICVD急性發(fā)作期的中醫(yī)病機以標(biāo)實為主，虛實夾雜，病例基礎(chǔ)主要為痰瘀和血瘀，其中痰證、血瘀證、痰瘀互結(jié)證、非痰非瘀證較為多見[2]。據(jù)調(diào)查統(tǒng)計，我國具有ICVD發(fā)病率高、基數(shù)大的特點，且發(fā)病率呈逐年上升趨勢。有關(guān)研究顯示，超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平與病變活動度成正比，對心腦血管病的診斷具有輔助作用[3]；P-選擇素(granular membrane protein 140，GMP140)是血小板上的糖蛋白，是血小板活化的產(chǎn)物，其含量與內(nèi)皮細(xì)胞受損和血小板活化有關(guān)，臨床多將其作為動脈硬化形成初始階段的重要因子[4]。本研究結(jié)合既往文獻進行了臨床實踐，以探討ICVD急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清hs-CRP、GMP140的水平變化。

1 對象與方法

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 急性ICVD的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國急性腦血管病診治指南2010》[5]：(1)急性起?。?2)局灶性神經(jīng)功能缺損，少數(shù)為全面神經(jīng)功能缺損；(3)癥狀和體征持續(xù)數(shù)小時以上(溶栓可參照適應(yīng)證選擇患者)；(4)腦CT或MRI排除腦出血和其他病變；(5)腦CT或MRI有責(zé)任梗死病灶。

1.3 病例組患者納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合中西醫(yī)學(xué)相關(guān)診斷，明確診斷為中風(fēng)；(2)經(jīng)中醫(yī)辨證分型，可明確診斷為痰證、血瘀證、痰瘀互結(jié)證或非痰非瘀證；(3)發(fā)病時間<24 h；(4)3個月內(nèi)未接受過對hs-CRP和GMP140表達造成影響的治療，無藥物使用禁忌證。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)心、肝、腎功能嚴(yán)重異常者；(2)有血液疾病、重度感染、惡性腫瘤或心肌梗死病史者；(3)有對檢測指標(biāo)造成影響的相關(guān)疾病者。本研究在當(dāng)?shù)貍惱硇〗M全程監(jiān)督下進行，研究對象均為自愿參加，研究開始前患者及其家屬簽署知情同意書。

1.4 檢測指標(biāo)及其檢測方法 病例組患者入院時即抽取靜脈血5 ml，對照組患者在采集日清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血5 ml，室溫下放置，待血液自然凝固后，進行離心處理(20 ℃，r=3 cm，3 000 r/min，20 min)，收集上層血清，放置在-20 ℃冰箱中保存待測。

1.4.1 血清hs-CRP水平檢測 采用ELISA試劑盒(上海廣銳生物科技有限公司，sc-45063)，嚴(yán)格按照操作說明采用雙抗體夾心ABC-ELISA法進行檢測。

1.4.2 血清GMP140水平檢測 采用酶標(biāo)法對樣本進行檢測，工具為多功能酶標(biāo)儀(美國Molecular Devices公司)。具體步驟：(1)將濃稀釋液和濃洗滌液均放置在37 ℃水浴中15 min，用蒸餾水按10∶1的比例進行濃稀釋液稀釋，按20∶1的比例進行濃洗滌液稀釋；每支參考品經(jīng)稀釋液準(zhǔn)確復(fù)溶后進行5次倍比稀釋，獲得6個標(biāo)準(zhǔn)點(濃度分別為80 ng/ml、40 ng/ml、20 ng/ml、10 ng/ml、5 ng/ml及2.5 ng/ml)。(2)添加不同濃度參考品、待測血清及稀釋液(空白對照)，37 ℃下孵育90 min。(3)全自動洗板機徹底清洗、拍干。(4)加入酶標(biāo)抗體，孵育60 min。(5)再次清洗拍干。(6)用緩沖液溶解沖洗，加底物溫育15 min。(7)添加終止液終止反應(yīng)。(8)在酶標(biāo)儀492 nm處，空白對照孔為零，測定相對值。(9)在雙對數(shù)坐標(biāo)紙上做濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找標(biāo)本的GMP140含量。

2 結(jié)果

2.1 病例組和對照組的血清hs-CRP、GMP140水平比較 病例組和對照組的血清hs-CRP水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；病例組和對照組的血清GMP140水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

Table 1 Comparison of serum hs-CRP and GMP140 level between case group and control group

組別例數(shù)hs-CRP(mg/L)GMP140(ng/ml)對照組300.7±0.5 8.4±3.3 病例組1205.7±3.922.3±4.7t值3.043.47P值0.010.01

注：hs-CRP=超敏C反應(yīng)蛋白，GMP140=P-選擇素

2.2 4個病例亞組間血清hs-CRP、GMP140水平比較 不同中醫(yī)證型的4個病例亞組血清hs-CRP、GMP140水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；痰證組、血瘀證組及非痰非瘀證組與痰瘀互結(jié)證組的血清hs-CRP、GMP140水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

Table 2 Comparison of serum hs-CRP and GMP140 level among four subgroups of case group

組別例數(shù)hs-CRP(mg/L)GMP140(ng/ml)痰證組304.7±3.0*16.3±5.5*血瘀證組304.9±3.8*17.4±4.2*痰瘀互結(jié)證組308.5±2.923.3±3.3非痰非瘀證組304.4±2.8*15.4±3.5*F值2.323.02P值<0.010.04

注：與痰瘀互結(jié)證組比較，*P<0.05

3 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為痰瘀互結(jié)是中風(fēng)發(fā)生的重要病例基礎(chǔ)，臨床上也以痰、瘀相關(guān)證患者多見。隨著我國人口老齡化進程的加快，ICVD的發(fā)病率逐漸升高[6]。ICVD與冠心病、癌癥一樣，均具有高死亡率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率及多并發(fā)癥的特點，嚴(yán)重威脅著患者的生命安全，其臨床治療一直是研究熱點。

為進一步探究ICVD急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者血清hs-CRP、GMP140的變化，本研究對南陽市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的120例ICVD急性發(fā)作期患者和30名健康成年人的臨床指標(biāo)進行了分析。結(jié)果顯示：(1)病例組的血清hs-CRP、GMP140水平高于對照組。李雁萍[7]對231例ICVD急性發(fā)作期患者進行了血液分析，發(fā)現(xiàn)患者血清hs-CRP、GMP140水平升高，且超出正常值，這與本研究結(jié)果相符。提示ICVD急性發(fā)作可影響患者的血清hs-CRP水平。正常人體中，hs-CRP為微量存在(<0.55 mg/L)，當(dāng)機體發(fā)生炎性病變時，血液中的hs-CRP釋放增多，細(xì)胞黏附和吞噬能力增強，炎性進程加快，血管內(nèi)膜發(fā)生損傷引起血管痙攣和脂代謝紊亂，加速動脈粥樣硬化和繼發(fā)血栓的形成，從而導(dǎo)致ICVD急性發(fā)作[8]。hs-CRP不僅是ICVD急性發(fā)作的獨立危險因素，還是反映ICVD急性發(fā)作期危險性的重要指標(biāo)。hs-CRP水平越高，ICVD急性發(fā)作的危險性就越高[9-10]，醫(yī)護人員可根據(jù)患者血清hs-CRP水平的變化判斷病情發(fā)展程度。(2)病例組血清GMP140水平高于對照組。周義翰等[11]對78例ICVD急性發(fā)作期患者的血清GMP140水平進行檢測，發(fā)現(xiàn)隨著病情的加重，患者血清GMP140水平升高。GMP140水平與動脈粥樣硬化的初始階段有關(guān)，其水平的增高說明患者有動脈粥樣硬化的致病因素存在，提示腦血管缺血的發(fā)生。(3)痰瘀互結(jié)證組患者的血清hs-CRP水平高于痰證組、血瘀證組及非痰非瘀證組患者。張紹剛等[12]和屈靜等[13]對120例中醫(yī)辯證為痰、瘀相關(guān)證的患者進行了血清hs-CRP水平檢測，發(fā)現(xiàn)痰瘀互結(jié)證患者的血清hs-CRP水平高于其他證型，說明痰、瘀2種不同類型的致病因素相結(jié)合，是ICVD急性發(fā)作期的主要致病因素，可增快患者腦血管的缺血進程。建議臨床醫(yī)生采用中西醫(yī)結(jié)合的方法及早防治ICVD。(4)痰瘀互結(jié)證組患者的血清GMP140水平高于痰證組、血瘀證組及非痰非瘀證組患者。高雪亮[14]對120例中醫(yī)辯證為痰瘀互結(jié)證的中風(fēng)患者進行了西醫(yī)血液分析，發(fā)現(xiàn)血清GMP140水平升高。提示血清GMP140是動脈粥樣硬化早期發(fā)生的預(yù)見性因子，其水平的迅速上升，預(yù)示著患者動脈粥樣硬化的發(fā)生，且與患者ICVD的病情發(fā)展速度正相關(guān)。

中醫(yī)認(rèn)為痰瘀同源，以“津血同源”為生理基礎(chǔ)。津液和血均來源于水谷精微物質(zhì)，生理上可以相互轉(zhuǎn)化，病理上也可以相互影響。津液凝滯則為痰，血滯不行則為瘀。血與津液的生成和輸布都靠氣來實現(xiàn)，氣行暢利，津血才得以充澤身體各部，氣行不利，則血行不暢，滯而為瘀。津液不行則聚而為痰、為飲。氣機郁滯不通，則影響氣血流通，津液不行，導(dǎo)致血瘀痰飲。而瘀血痰飲反過來又可加重氣機阻滯，形成惡性循環(huán)。痰與瘀是疑難怪病之根，危急重癥之源。裘濤[15]曾以血栓的形成為例，闡發(fā)痰瘀的內(nèi)在聯(lián)系。血栓形成的基本原因在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的廣泛受損，顆粒物質(zhì)進入血液，組織因子大量入血，血小板、紅細(xì)胞及中性粒細(xì)胞受損。這些基本原因?qū)е铝艘粋€共同表現(xiàn)，即血液中的異常物質(zhì)引起了血栓的“瘀血”癥狀。這種異物按中醫(yī)傳統(tǒng)理論來說，本是津液所化，而變?yōu)檠刑禎?。這種痰濁在形成瘀血上起了主要作用，可以說，瘀血的形成多為血中痰濁所致。

綜上所述，ICVD急性發(fā)作期痰、瘀相關(guān)證患者的血清hs-CRP、GMP140水平較高，嚴(yán)重高出參考范圍，且與疾病的嚴(yán)重程度呈相關(guān)性。因此，臨床醫(yī)生可根據(jù)血清hs-CRP、GMP140水平的變化，對ICVD進行早診、早治。血清hs-CRP、GMP140水平是ICVD急性發(fā)作期與痰、瘀證密切相關(guān)的因子，是診斷ICVD中醫(yī)痰瘀互結(jié)證的重要指標(biāo)，值得臨床廣泛應(yīng)用。

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(本文編輯：王鳳微)

Level of hs-CRP and GMP140 in Patients With Phlegm and Blood Stasis Syndrome During Acute Attack of Ischemic Cerebral Vascular Disease

LIChun-lei,ZHANGFeng,FANShu-ling,etal.

DepartmentofNeurologicalRehabilitation,NanyangCentralHospital,Nanyang473000,China

Objective To investigate change in high sensitivity C-reactive protein(hs-CRP) and granular membrane protein 140(GMP140) in patients with phlegm and blood stasis syndrome during acute attack of ischemic cerebral vascular disease(ICVD).Methods We recruited 120 patients with phlegm and blood stasis syndrome during acute attack of ICVD who were admitted into Department of Neurological Rehabilitation of Nanyang Central Hospital from May to December in 2013 and assigned them into case group.Another 30 healthy adults who received physical examination in the hospital in the same period were enrolled as control group.According to syndrome differentiation of traditional Chinese medicine,patients in case group were further divided into phlegm group,blood stasis group,phlegm-blood stasis group and no syndrome group,with each group 30 patients.Levels of serum hs-CRP and GMP140 were tested and compared between case group and control group,and between the four subgroups of case group.Results Significant differences existed in level of serum hs-CRP and GMP140 between case group and control group(P<0.05).Significant differences existed in level of serum hs-CRP and GMP140 among four subgroups of case group(P<0.05).Phlegm-blood stasis group was significantly different from phlegm group,blood stasis group and no syndrome group in level of serum hs-CRP and GMP140(P<0.05).Conclusion Patients with phlegm and blood stasis syndrome during acute attack of ICVD have high level of serum hs-CRP and GMP140,especially the patients with both phlegm and blood stasis.

Cerebrovascular disorders;Phlegm and blood stasis syndrome;hs-CRP;GMP140

473000 河南省南陽市中心醫(yī)院神經(jīng)康復(fù)科(李春雷，樊書領(lǐng)，賈東佩)；南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校教務(wù)處(張峰)

李春雷，473000河南省南陽市中心醫(yī)院神經(jīng)康復(fù)科；

E-mail：dflichunlei@126.com

R 512.62

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.10.030

2015-01-05；

2015-03-03)