扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎的臨床療效和機(jī)制研究

劉春燕，張龍琪

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扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎的臨床療效和機(jī)制研究

劉春燕，張龍琪

目的 了解扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎(乙肝)的臨床療效，并探討其相應(yīng)機(jī)制。方法 選取2011年4月—2013年2月在湖州市中心醫(yī)院住院治療且符合本研究納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的乙肝患者134例，按隨機(jī)分組原則，將其分為對(duì)照組和試驗(yàn)組各67例。對(duì)照組采用阿德福韋酯治療，試驗(yàn)組采用扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療，均連續(xù)治療1年，比較2組患者的各項(xiàng)臨床指標(biāo)。結(jié)果 治療前，2組患者CD40、CD11C、CD86、HBV-DNA、HBV-DNA陰性(DNA-)、γ干擾素(IFN-γ)及樹突狀細(xì)胞(DCs)刺激活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后，2組患者CD40、CD11C、CD86、HBV-DNA、DNA-、IFN-γ及DCs刺激活性與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后，2組患者的CD40、CD11C、CD86、HBV-DNA、DNA-、IFN-γ比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；DCs刺激活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯可以較好地改善乙肝患者的DCs功能，臨床治療效果較好。

乙型肝炎；扶正化瘀膠囊；阿德福韋酯；樹突細(xì)胞

劉春燕，張龍琪.扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎的臨床療效和機(jī)制研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015，18(10)：1219-1221.[www.chinagp.net]

Liu CU,Zhang LQ.Clinical effect and corresponding mechanism of Fuzheng Huayu capsule combined with adefovir dipivoxil in the treatment of chronic hepatitis B[J].Chinese General Practice，2015，18(10)：1219-1221.

慢性乙型肝炎(乙肝)在國(guó)內(nèi)并不罕見，乙肝病毒(HBV)感染發(fā)病率較高，嚴(yán)重危及人們的生命安全。目前，臨床上還未找到最佳的HBV感染治療方案，乙肝治療的最大困難是患者具備一定的免疫耐受，HBV難以清除。國(guó)內(nèi)清除HBV的藥物雖多，但效果都不顯著[1]。而樹突狀細(xì)胞(dendritic cells，DCs)功能下降是導(dǎo)致患者免疫耐受的主要因素之一[2]。研究表明，DCs是一種功能較強(qiáng)的抗原呈遞細(xì)胞，可激活T細(xì)胞，在抗病毒中起決定性作用[3]。近期研究結(jié)果顯示，扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療乙肝的臨床療效較好[4]，但關(guān)于其機(jī)制的研究較少。本研究采用扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯對(duì)乙肝患者進(jìn)行治療，評(píng)價(jià)其臨床療效并探討其相應(yīng)機(jī)制。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 以2011年4月—2013年2月在湖州市中心醫(yī)院住院治療的134例乙肝患者為研究對(duì)象。乙肝的診斷均符合《病毒性肝炎防治方案》中的乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)HBV-DNA滴度≥1×107copies/L；(2)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)在正常值的0.5～10倍。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)脂肪性肝病和丙型病毒性肝炎；(2)藥物性肝炎、肝臟失代償表現(xiàn)和/或失代償性肝硬化。將134例患者隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組各67例，兩組患者的性別、平均年齡及平均病程比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表1)。

表1 2組患者一般情況比較

注：*為χ2值

1.2 治療方法 (1)對(duì)照組采用阿德福韋酯片〔葛蘭素史克(天津)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H20050651〕治療，10 mg/次，1次/d，連續(xù)治療1年。(2)試驗(yàn)組在阿德福韋酯片治療的基礎(chǔ)上，聯(lián)合扶正化瘀膠囊(上海黃海制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20020073)治療，0.3 g/粒，5粒/次，3次/d，連續(xù)治療1年[4]。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)方法 (1)HBV-DNA：由湖州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科采用羅氏熒光定量PCR 法檢測(cè)。HBV-DNA是HBV感染最直接且特異度和靈敏度較高的指標(biāo)，HBV-DNA越高表示病毒復(fù)制越厲害，傳染性強(qiáng)。HBV-DNA陽(yáng)性，提示HBV復(fù)制和有傳染性，HBV-DNA陰性(DNA-，<1×103copies/ml)則相反。(2)DCs的培養(yǎng)和相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)[5]：在培養(yǎng)液中加入熒光標(biāo)記單克隆抗體，即鼠抗人CD40-異硫氰酸熒光素(FITC)、CD11C-FITC、CD86-FITC各10 μl；陰性對(duì)照管中加入鼠IgG-FITC 10 μl?；靹颍覝?0 ℃避光孵育25 min，經(jīng)鞘液洗滌、離心(37 ℃，r=3 cm，1 200 r/min，5 min)后，采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行單色熒光流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。CD40、CD11C及CD86越高，表示DCs功能越好。采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀在570 nm處測(cè)定光密度(OD)值，以表示DCs的刺激活性。OD值越高，DCs的刺激活性越好。(3)細(xì)胞因子的檢測(cè)[5]：取淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)后收集的上清液，采用上海晶美公司制造的試劑盒，嚴(yán)格按說明書操作方法進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，以 測(cè)定γ干擾素(IFN-γ)水平。

2 結(jié)果

(1)治療前，2組患者CD40、CD11C、CD86、HBV-DNA、DNA-、IFN-γ及DCs刺激活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)治療后，2組患者CD40、CD11C、CD86、HBV-DNA、DNA-、IFN-γ及DCs刺激活性與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(3)治療后，2組患者CD40、CD11C、CD86、HBV-DNA、DNA-及IFN-γ比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；DCs刺激活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表2)。

3 討論

乙肝的發(fā)病因素較為復(fù)雜[6]，宿主的免疫應(yīng)答對(duì)其病情發(fā)展具有重要意義。T淋巴細(xì)胞是最常見的免疫細(xì)胞[7]，可作為機(jī)體免疫水平的衡量指標(biāo)。人體免疫功能下降是導(dǎo)致乙肝病情加重的重要因素之一[8]，故強(qiáng)化患者免疫功能對(duì)抑制病毒擴(kuò)散具有重要意義，且能降低肝纖維化和肝細(xì)胞炎癥等的發(fā)生率。導(dǎo)致乙肝患者免疫耐受的主要因素是DCs的功能下降，抗原不能有效地行使提呈功能，導(dǎo)致病毒抗原無法傳達(dá)到免疫系統(tǒng)。有研究表明，使用阿德福韋酯治療乙肝，可使患者循環(huán)

表2 治療前后2組患者各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)比較

注：HBV=乙肝病毒，DNA-= HBV-DNA陰性，IFN-γ=γ干擾素，DCs=樹突狀細(xì)胞；與同組治療前比較，*P<0.05；▲為χ2值

調(diào)節(jié)的T細(xì)胞顯著減少，病毒特異性細(xì)胞增加，DCs增加且功能增強(qiáng)[9]。扶正化瘀膠囊的主要成分為桃仁、五味子及冬蟲夏草等，具備化瘀解毒、舒肝活血的功效。

本研究結(jié)果表明，對(duì)試驗(yàn)組乙肝患者采用扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療后，試驗(yàn)組乙肝患者的HBV-DNA對(duì)數(shù)均數(shù)水平低于對(duì)照組，HBV-DNA陰性率高于對(duì)照組，提示扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯治療乙肝的臨床療效較好。有研究顯示IFN-γ的升高可能是HBV持續(xù)感染的原因之一[10]。本研究中，治療后2組患者的DCs刺激活性均有所提高，且試驗(yàn)組患者的CD40、CD11C及CD86水平高于對(duì)照組，IFN-γ水平低于對(duì)照組。提示扶正化瘀膠囊聯(lián)合阿德福韋酯可較好地改善DCs細(xì)胞功能?？赡茉?yàn)椋?1)扶正化瘀膠囊具有抑制炎性病變和避免肝細(xì)胞受損的功能；(2)DCs可協(xié)助刺激分子和黏附分子促使初始型T細(xì)胞免疫反應(yīng)[11]，分泌白介素-2(IL-2)，促使自然殺傷細(xì)胞(NK)活化。故DCs是一種較好促使毒性T細(xì)胞反應(yīng)的佐劑，在抗感染過程中具有重要作用，與T細(xì)胞聯(lián)合后，可在抗病毒反應(yīng)中發(fā)揮較大作用。

[1]Xie HH,Wu W,Jin HB,et al.Impact of Fuzheng Huayu capsules on liver histology and serum markers in patients with chronic hepatitis B[J].Practical Pharmacy and Clinical Remedies,2014,17(1):60-63.(in Chinese) 謝洪華，吳煒，金煥斌，等.扶正化瘀膠囊對(duì)慢性乙肝患者肝組織病理及血清標(biāo)志物的影響[J].實(shí)用藥物與臨床，2014，17(1)：60-63.

[2]Akbar SM,Furukawa S,Horiike N,et al.Safety and immunogenicity of hepatitis B surface antigen-pulsed dendritic cells in patients with chronic hepatitis B[J].Journal of Viral Hepatitis,2011,18(6):408-414.

[3]Akbar SM,Horiike N,Chen S,et al.Mechanism of restoration of immune responses of patients with chronic hepatitis B during lamivudine therapy:increased antigen processing and presentation by dendritic cells[J].Journal of Viral Hepatitis,2011,18(3):200-205.

[4]Jin J,Fu C,Zhang XY.Meta analysis on effciacy and safety of Adefovir dipivoxil combined with Fuzhenghuayu capsule in chonic hepatitis B[J].Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine,2014,23(6):580-582.(in Chinese) 金劍，傅超，張欣怡.阿德福韋酯聯(lián)合扶正化瘀膠囊治療慢性乙型肝炎有效性與安全性的Meta分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，23(6)：580-582.

[5]Sun XH,Zheng YJ,Li M,et al.Clinical effect and affect on dentritic cells function of bushen recipe combined with interferon on CHB patients[J].Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine,2011,29(6):1270-1273.(in Chinese) 孫學(xué)華，鄭亞江，李曼，等.補(bǔ)腎沖劑聯(lián)合干擾素治療慢性乙型肝炎及其對(duì)樹突狀細(xì)胞的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2011，29(6)：1270-1273.

[6]王澄強(qiáng)，徐春紅.中西醫(yī)結(jié)合治療慢性乙型肝炎的療效觀察[J].實(shí)用心腦肺血管病雜志，2011，19(11)：1962.

[7]Shimizu Y.T cell immunopathogenesis and immunotherapeutic strategies for chronic hepatitis B virus infection[J].World J Gastroenterol,2012,18(20):2443-2451.

[8]Perkins SM,Shinohara ET.Interdigitating and follicular dendritic cell sarcomas:a SEER analysis[J].American Journal of Clinical Oncology,2013,36(4):395-398.

[9]Jiang YZ,Dong NZ,Wu DP,et al.Interdigitating dendritic cell sarcoma presenting simultaneously with acute myelomonocytic leukemia:report of a rare case and literature review[J].International Journal of Hematology,2013,97(5):657-666.

[10]Wang YD,Zhang L,Shen C,et al.Expression of interferon gamma and interferong amma-inducible protein-10 in patients with different stages of chronich epatitis B virus infection[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2014,32(1):43-47.(in Chinese) 王亞東，張莉，申川，等.慢性乙型肝炎病毒感染者不同階段γ干擾素及其誘導(dǎo)蛋白10表達(dá)變化[J].中華傳染病雜志，2014，32(1)：43-47.

[11]Samrat SK,Li W,Singh S,et al.Alternate reading frame protein(F protein) of hepatitis C virus:paradoxical effects of activation and apoptosis on human dendritic cells lead to stimulation of T cells[J].PloS One,2014,9(1):e86567.

(本文編輯：王鳳微)

Clinical Effect and Corresponding Mechanism of Fuzheng Huayu Capsule Combined With Adefovir Dipivoxil in the Treatment of Chronic Hepatitis B

LIUChun-yan,ZHANGLong-qi.

DepartmentofDigestiveDiseases,HuzhouCentralHospital,Huzhou313000,China

Objective To evaluate the clinical effect of Fuzheng Huayu capsule combined with adefovir dipivoxil on patients with chronic hepatitis B(CHB),and to investigate the corresponding mechanism of the regimen.Methods We recruited patients with CHB who were admitted into Huzhou Central Hospital from April,2011 to February,2013 and accorded with inclusion and exclusion criteria of the study.The patients were randomly assigned into control group(n=67) and trial group(n=67).The control group received treatment with adefovir dipivoxil and the trial group received treatment with both Fuzheng Huayu capsule and adefovir dipivoxil;treatment of both groups lasted for one year continuously.Clinical indicators of the two groups were compared.Results Before treatment,the two groups were not significantly different in CD40,CD11C,CD86,HBV-DNA,DNA-,IFN-γ and DCs stimulated activity(P>0.05).After treatment,the two groups were significantly different in CD40,CD11C,CD86,HBV-DNA,DNA-,IFN-γ and DCs stimulated activity(P<0.05).After treatment,the two groups were significantly different in CD40,CD11C,CD86,HBV-DNA,DNA-and IFN-γ(P<0.05) and not significantly different in DCs stimulated activity(P>0.05).Conclusion Fuzheng Huayu capsule combined with adefovir dipivoxil can effectively improve DCs function and has better clinical effect.

Hepatitis B;Fuzheng Huayu capsule;Adefovir dipivoxil;Dendritic cells

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃(2009B152)

313000 浙江省湖州市中心醫(yī)院消化內(nèi)科(劉春燕)，感染內(nèi)科(張龍琪)

劉春燕，313000 浙江省湖州市中心醫(yī)院消化內(nèi)科；

E-mail：liuchunyan@163.com

R 743

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.10.029

2015-01-05；

2015-03-03)