茶樹(shù)根抗痛風(fēng)活性部位的篩選研究*

*基金項(xiàng)目：江西省衛(wèi)生計(jì)生委中醫(yī)藥科研計(jì)劃項(xiàng)目(2015B017)；江西中醫(yī)藥大學(xué)重點(diǎn)學(xué)科教師培養(yǎng)計(jì)劃資助項(xiàng)目(2012jzzdxk018)。

茶樹(shù)根抗痛風(fēng)活性部位的篩選研究*

*基金項(xiàng)目：江西省衛(wèi)生計(jì)生委中醫(yī)藥科研計(jì)劃項(xiàng)目(2015B017)；江西中醫(yī)藥大學(xué)重點(diǎn)學(xué)科教師培養(yǎng)計(jì)劃資助項(xiàng)目(2012jzzdxk018)。

★余雄英1周軍1**曹樹(shù)穩(wěn)2左愛(ài)仁1(1. 江西中醫(yī)藥大學(xué)南昌 330004 ； 2，南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室南昌 330047)

摘要：目的：比較茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷對(duì)高尿酸血癥小鼠尿尿酸、血尿酸、血黃嘌呤氧化酶活性的影響和對(duì)抗急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎作用以及體外對(duì)黃嘌呤氧化酶活性抑制作用，探討茶樹(shù)根防治痛風(fēng)的活性部位。方法：用尿酸和氧嗪酸鉀ip小鼠造成小鼠高尿酸血癥模型，分光光度法檢測(cè)尿酸水平和黃嘌呤氧化酶活力；以尿酸鈉結(jié)晶植入法觀察茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷抗急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)作用;以含酶動(dòng)力學(xué)分析軟件的分光光度計(jì)在波長(zhǎng)290nm處測(cè)定茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷對(duì)黃嘌呤氧化酶活性的抑制作用。結(jié)果：茶樹(shù)根總黃酮在降血尿酸和促尿酸排泄以及抑制黃嘌呤氧化酶活性上起主要作用，茶樹(shù)根總皂苷則對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎起主要抑制作用。結(jié)論：茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷均為茶樹(shù)根抗痛風(fēng)的藥效部位。

關(guān)鍵詞：茶樹(shù)根；總黃酮； 總皂苷；抗痛風(fēng)；活性部位

痛風(fēng)是一種慢性代謝紊亂性疾病，它的主要特點(diǎn)是高尿酸血癥[1]。隨著人們生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變，全球痛風(fēng)發(fā)病率與日俱增，并呈年輕化趨勢(shì)，成為第二大威脅人類生命和健康的代謝性疾病,因此研發(fā)防治痛風(fēng)、高尿酸血癥的藥物成為目前醫(yī)藥界研究的一個(gè)熱點(diǎn)。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論證實(shí)痛風(fēng)病的致病因素之一是黃嘌呤氧化酶，黃嘌呤氧化酶簡(jiǎn)稱XOD。XOD是體內(nèi)尿酸生成的關(guān)鍵酶，它能催化次黃嘌呤和黃嘌呤轉(zhuǎn)化為尿酸?？芍猉OD抑制劑可減少體內(nèi)尿酸生成，防治痛風(fēng)發(fā)生。此外，促進(jìn)尿酸排泄也可治療痛風(fēng)，另外，抗炎鎮(zhèn)痛藥物可減輕痛風(fēng)癥狀，減少病人痛苦。因此尋求安全有效，具有綜合防治痛風(fēng)作用的藥物對(duì)高尿酸血癥、痛風(fēng)患者來(lái)說(shuō)是一種福音。

茶樹(shù)根是山茶科山茶屬植物茶的根，味苦，性平，具有強(qiáng)心利尿、抗菌消炎等功效[2]。在江西民間茶樹(shù)根還常被用來(lái)治療痛風(fēng)。在我們的前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)茶樹(shù)根水煎劑抗痛風(fēng)作用是較全面的。但茶樹(shù)根抗痛風(fēng)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制尚不明確，因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察茶樹(shù)根各藥效部位對(duì)高尿酸血癥模型小鼠的尿酸、XOD水平的影響，對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型小鼠的作用，以及它們體外對(duì)XOD活性的抑制作用，探討茶樹(shù)根抗痛風(fēng)的藥效物質(zhì)和作用機(jī)制。

1材料

1.1實(shí)驗(yàn)藥材藥材茶樹(shù)根采挖于江西井岡山，經(jīng)鑒定為山茶科山茶屬植物茶(原變種)Camelliasinensis(L.) O.Ktze. var. sinensis 的根。

1.2試劑AB-8型大孔樹(shù)脂(南開(kāi)大學(xué)化工廠);蘆丁(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)100080-200707)；熊果酸(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)100080-2010 07)；氧嗪酸鉀鹽，尿酸，黃嘌呤氧化酶，黃嘌呤，別嘌呤醇均購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司;吲哚美辛片(江蘇亞邦藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司制造分公司);尿酸測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號(hào)20110527);XOD測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號(hào)20110628)；其余試劑為分析純。

1.3儀器藥物粉碎機(jī)、恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市順華儀器有限公司)；藥物天平(上海醫(yī)用激光儀器廠)；電子天平( 江蘇常熟長(zhǎng)青儀器儀表廠)；游標(biāo)卡尺(東莞宇誠(chéng)精密儀器有限公司)；紫外分光光度計(jì)(日本島津) 。

1.4動(dòng)物雄性昆明種小鼠，體重(22±2)g，由江西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技中心提供，使用許可證號(hào)：SCXK(贛)2011-0001。實(shí)驗(yàn)小鼠于實(shí)驗(yàn)前在實(shí)驗(yàn)室喂養(yǎng)1周。

2方法

2.1茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷的提取與含量測(cè)定茶樹(shù)根粗粉用10倍量70%乙醇回流2次(1.5h，1h)，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得茶樹(shù)根濃縮液。茶樹(shù)根濃縮液進(jìn)行AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱層析，依次用水，30%乙醇，70%乙醇，95%乙醇洗脫，去除水洗脫部分和95%乙醇洗脫部分， 將30%乙醇洗脫部分和70%乙醇洗脫部分分別濃縮至無(wú)醇味，凍干分別作為茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷樣品。參照文獻(xiàn)[3]，以熊果酸為標(biāo)樣,采用香草醛-冰醋酸顯色法測(cè)定茶樹(shù)根30%乙醇洗脫部分與70%乙醇洗脫部分的總皂苷含量，以蘆丁為標(biāo)樣,采用亞硝酸鈉，硝酸鋁顯色法測(cè)定茶樹(shù)根30%乙醇洗脫部分與70%乙醇洗脫部分的總黃酮含量。

2.2高尿酸模型小鼠體內(nèi)抗痛風(fēng)藥效實(shí)驗(yàn)進(jìn)行藥效部位群的篩選

2.2.1動(dòng)物造模參照文獻(xiàn)方法[4-6]用氧嗪酸鉀和尿酸ip小鼠，增加血清尿酸水平，造成小鼠高尿酸血癥模型。雄性昆明種小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分成生理鹽水組、高尿酸模型組、茶樹(shù)根總黃酮組、茶樹(shù)根總皂苷組、別嘌呤醇組共5組，每組10只。除生理鹽水組外，其他各組均以氧嗪酸鉀和尿酸ip小鼠，連續(xù)2 d進(jìn)行造模以增加血清尿酸水平，造成小鼠高尿酸血癥模型。

2.2.2實(shí)驗(yàn)操作生理鹽水組和高尿酸模型組每天均按20 mL/kg劑量ig生理鹽水,連續(xù)6d,別嘌呤醇組(10 mg/kg)每天ig給藥1次，持續(xù)6 d，茶樹(shù)根總黃酮組、茶樹(shù)根總皂苷組小鼠以0.548g/kg劑量灌喂6d,從給藥第5天開(kāi)始，除生理鹽水組外，其他各組每天ig給藥前1h 均要ip氧嗪酸鉀和尿酸，氧嗪酸鉀和尿酸的劑量分別為0.3g/kg和0.25g/kg，每天1次，連續(xù)2 d進(jìn)行造模。在第5天ig給藥后將小鼠放置代謝籠內(nèi)，每5只一籠，只給自由飲水，不給飼料，收集尿液5h, 新鮮尿樣以3000r/min離心15min，取上清液進(jìn)行尿液尿酸測(cè)定。收集尿液后小鼠繼續(xù)喂養(yǎng)，在第6天ig給藥1h后從小鼠股動(dòng)脈進(jìn)行采血，血樣分別置于1.5mL 離心管中，在4℃冰箱中凝固2h,在3000r/min低溫離心5min。每份血樣血清進(jìn)行血清尿酸水平和血清XOD活力測(cè)定。

2.2.3生化指標(biāo)檢測(cè)分別測(cè)定小鼠尿尿酸、血尿酸水平和血XOD活性。采用磷鎢酸法檢測(cè)各組小鼠尿尿酸和血尿酸，酶比色法檢測(cè)XOD活性。具體操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2.3茶樹(shù)根藥效部位對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型小鼠的影響

2.3.1尿酸鈉溶液的制備參照文獻(xiàn)[7]略作改進(jìn)，取l g尿酸加氫氧化鈉(1mM)200mL，煮沸，用1N鹽酸調(diào)pH至7.2 ，攪拌冷卻后于4℃冰箱中過(guò)夜析晶，抽濾干燥得尿酸鈉結(jié)晶。 取尿酸鈉結(jié)晶，以生理鹽水作溶劑， 以總體積的10%的量加入吐溫80，調(diào)配成25mg/mL尿酸鈉混懸液備用。

2.3.2急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎小鼠模型建立在文獻(xiàn)[8]方法上略改進(jìn)，用6號(hào)注射針在實(shí)驗(yàn)小鼠右足墊部注射尿酸鈉混懸液0.05mL，建立小鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型。

2.3.3實(shí)驗(yàn)操作50只雄性小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。造模前6天開(kāi)始灌胃給藥(茶樹(shù)根總黃酮組、茶樹(shù)根總皂苷組小鼠以0.548 g/kg劑量，吲哚美辛組以0.05mg/kg劑量)，每日1次 。生理鹽水組以同體積生理鹽水灌胃。于末次給藥30min后,除生理鹽水組小鼠在右足墊部注射生理鹽水0.05mL外，其余各組在小鼠右足墊部注射尿酸鈉混懸液0.05mL，誘導(dǎo)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)生。分別用游標(biāo)卡尺測(cè)量各組小鼠在致炎前后1,3,5h后測(cè)定小鼠右足墊部的厚度，以致炎前后的差值作為痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的腫脹度。通過(guò)造模小鼠在治療前后各組關(guān)節(jié)腫脹的變化，進(jìn)行組間差異性比較。

2.4體外XOD活性抑制實(shí)驗(yàn)篩選藥效部位群

2.4.1酶活性測(cè)定參照Cos等[9]描述方法略作修改，用分光光度法在 290 nm 處測(cè)定尿酸光密度值以確定XOD活力。反應(yīng)溫度25℃，總反應(yīng)體系3mL(包括含1 mM/L EDTA 的0.05 mol/L pH 7.5PBS緩沖溶液、0.15mM黃嘌呤底物溶液、0.02 U XOD)，以緩沖液調(diào)零,磷酸鹽緩沖液1 mL和2 mL黃嘌呤溶液作為空白對(duì)照組；以pH7.5的磷酸鹽緩沖液0.9ml和2ml黃嘌呤溶液，加入0.2 U/mL XOD 0.1 mL，混勻,作為正常組。測(cè)定前先在恒溫水浴鍋中25℃孵育10min，加酶開(kāi)始啟動(dòng)反應(yīng)，立即計(jì)時(shí)，測(cè)定290nm處吸光度增加值 ，每隔30s記錄一次，共測(cè)1.8min，得到一條關(guān)于吸光度與時(shí)間的直線，計(jì)算直線斜率 Rate( dmA /min)。

2.4.2樣品抑制XOD測(cè)定各藥效部位凍干粉,分別用DMSO溶解成50ug/uL作為樣品液， 用于XOD活性測(cè)定。參照步驟2.4.1方法，在酶反應(yīng)體系中加入0.05mL 200ug/mL的樣品，測(cè)定290nm處吸光度增加值 ，計(jì)算直線斜率 Rate( dmA /min)。每個(gè)樣品平行操作 3 次，取斜率平均值計(jì)算樣品的抑制率。在酶反應(yīng)體系中加入0.05mL 不同濃度的樣品，測(cè)定不同濃度樣品對(duì)XOD抑制率，以計(jì)算樣品的IC50。

2.4.3茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷對(duì)XOD抑制作用類型的初步判斷分別配制不同樣品濃度的茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷溶液(100,400μg/mL,)，和不同濃度的底物黃嘌呤(濃度分別為0.01,0.02,0.03,0.05,0.1mmol/L)，參照2.4.1方法，將測(cè)定樣液在恒溫水浴鍋中孵育10min后，加酶啟動(dòng)反應(yīng)，計(jì)時(shí)1.8min，測(cè)定在290nm處的吸光度變化的直線斜率，以直線斜率的倒數(shù)對(duì)底物濃度的倒數(shù)作圖，即雙倒數(shù)作圖法判斷茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷的抑制類型。

3結(jié)果

3.1茶樹(shù)根藥效部分總黃酮和總皂苷含量采用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照法，以蘆丁為標(biāo)樣,用亞硝酸鈉硝酸鋁顯色法測(cè)定茶樹(shù)根30%和70%乙醇洗脫部分的總黃酮含量，以熊果酸為標(biāo)樣,采用香草醛-冰醋酸顯色法測(cè)定茶樹(shù)根30%和70%乙醇洗脫部分的總皂苷含量。結(jié)果表明茶樹(shù)根30%洗脫部分為茶樹(shù)根總黃酮部分，茶樹(shù)根70%洗脫部分為茶樹(shù)根總皂苷部分。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1茶樹(shù)根30%和70%乙醇洗脫部分總黃酮和總皂苷含量

樣品總黃酮含量/%總皂苷含量/%30%洗脫部分79.1418.370%洗脫部分4.3862.31

3.2對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸的影響與生理鹽水組比較，模型組中血清尿酸顯著升高(P<0.01)，與模型組比較，茶樹(shù)根總黃酮顯著降低血清尿酸水平(P<0.01)。茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷組之間有顯著差異(P<0.05)，而別嘌呤醇組顯著降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平(P<0.001)，能降至正常值以下，結(jié)果見(jiàn)表2。

3.3對(duì)高尿酸血癥模型小鼠尿尿酸的影響與生理鹽水組比較，模型組中尿尿酸顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，茶樹(shù)根總黃酮顯著增加尿尿酸水平(P<0.01)。茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷組之間有顯著差異(P<0.01)，茶樹(shù)根總皂苷組和別嘌呤醇組幾乎不能增加高尿酸血癥小鼠尿尿酸水平，結(jié)果見(jiàn)表2。

3.4對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血清XOD活性的影響與生理鹽水組比較，模型組中血清XOD活性顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，茶樹(shù)根總黃酮顯著降低血清XOD活性(P<0.05)。茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷組之間有顯著差異(P<0.05)，別嘌呤醇組可極顯著降低高尿酸血癥小鼠血清XOD活性水平，結(jié)果見(jiàn)表3。

組別劑量/g·kg-1 血清尿酸水平/mg·L-1尿尿酸水平/mg·L-1生理鹽水組- 56.09±6.02** 103.87±13.15**模型組-78.69±5.63118.27±25.25茶樹(shù)根總黃酮組0.548 68.07±8.73**△ 126.06±23.14**△△茶樹(shù)根總皂苷組0.54877.93±7..18103.43±31.18別嘌呤醇組0.01 41.56±3.13***116.32±26.13

注：與模型組比較*P<0.05 ，**P<0.01 ，***P<0.001；茶樹(shù)根藥效部位組間比較△P<0.05，△△P<0.01。

3.5茶樹(shù)根對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎小鼠的影響模型組與生理鹽水組比較有顯著差異(P<0.01),與模型組相比，茶樹(shù)根總皂苷在不同時(shí)間點(diǎn)(3、5 h)對(duì)尿酸鹽誘導(dǎo)的小鼠足腫脹有顯著抑制作用(P<0.01)，而茶樹(shù)根總黃酮?jiǎng)t抑制腫脹作用較弱(P<0.05)。說(shuō)明茶樹(shù)根總皂苷對(duì)小鼠痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎有顯著拮抗作用，結(jié)果見(jiàn)表4。

組別劑量/g·kg-1血清XOD活力水平/U·L-1生理鹽水組- 30.08±3.91**模型組-39.46±9.46茶樹(shù)根總黃酮組0.548 38.52±4.26*△茶樹(shù)根總皂苷組0.54840.04±4.31別嘌呤醇組0.01 26.3±3.33**

注：與模型組比較*P<0.05 ，**P<0.01；茶樹(shù)根藥效部位組間比較△P<0.05。

表4　茶樹(shù)根各藥效部位對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的影響±s,n=10)

注：與生理鹽水組比較：△△P<0.01；與模型組比較*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

3.6茶樹(shù)根各藥效部位對(duì)XOD的抑制率和IC50根據(jù)公式: 抑制率=[(Rp一Rs)/Rp]×100% 計(jì)算樣品對(duì) XOD 的抑制率。式中Rs、Rp分別代表樣品、對(duì)照 (無(wú)樣品)的直線斜率。按照抑制率的計(jì)算，底物濃度為0.15mmol/L，樣品濃度均為200μg/mL，別嘌呤醇濃度為5μg/mL，得到抑制XOD能力較強(qiáng)的藥效部位為茶樹(shù)根總黃酮。以樣品濃度為自變量，抑制率為因變量，采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件包計(jì)算回歸方程,根據(jù)回歸方程計(jì)算XOD抑制率為5O%的樣品濃度即IC50，抑制率和IC50實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示。

表5　茶樹(shù)根各藥效部位對(duì)XOD的抑制效果(n=3)

3.7茶樹(shù)根總黃酮對(duì)XOD抑制作用機(jī)制的判斷

由圖1可知，以直線斜率的倒數(shù)對(duì)底物濃度的倒數(shù)作圖，即雙倒數(shù)作圖，不同濃度的茶樹(shù)根總黃酮進(jìn)行雙倒數(shù)作圖所得到的雙倒數(shù)直線，各直線有交點(diǎn)，但各直線的交點(diǎn)均未在坐標(biāo)軸上，最大反應(yīng)速度Vmax 和Km值均隨茶樹(shù)根總黃酮濃度的變化而改變，說(shuō)明茶樹(shù)根總黃酮對(duì)XOD的抑制作用既不是競(jìng)爭(zhēng)性也不是非競(jìng)爭(zhēng)性，由此初步判斷茶樹(shù)根總黃酮對(duì)黃嘌呤氧化酶的抑制作用可能是混合性的。

圖1　茶樹(shù)根總黃酮對(duì)XOD抑制機(jī)制

4討論

茶樹(shù)根中主要含總黃酮和總皂苷類成分，制備茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷進(jìn)行體內(nèi)外抗痛風(fēng)作用實(shí)驗(yàn)篩選，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明茶樹(shù)根總黃酮在降尿酸和抑制黃嘌呤氧化酶活性上均起主要作用，茶樹(shù)根總黃酮能顯著降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平(P<0.01)和顯著增加尿尿酸水平(P<0.01)以及顯著降低血清XOD活性(P<0.05)。在體外抑制XOD作用中，茶樹(shù)根總黃酮呈現(xiàn)一定的抑制XOD作用，這與黃酮類具有黃嘌呤氧化酶抑制作用[9]相符。茶樹(shù)根總黃酮IC50為354.72±0.72μg/mL，抑制XOD類型初步判斷為混合型抑制劑。茶樹(shù)根總皂苷對(duì)尿酸鹽誘導(dǎo)的小鼠足腫脹有顯著抑制作用(P<0.01)。因此茶樹(shù)根總黃酮有促進(jìn)尿酸排泄和抑制黃嘌呤氧化酶活性作用，茶樹(shù)根總皂苷對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎起主要抑制作用；茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷均為茶樹(shù)根抗痛風(fēng)的藥效部位群。

本實(shí)驗(yàn)中，雖然茶樹(shù)根總黃酮抑制XOD 的作用弱于別嘌呤醇，別嘌呤醇可極顯著降低高尿酸血癥小鼠血清XOD水平(P<0.001)。體外抑制XOD IC50為1.17±0.05μg/mL。但茶樹(shù)根總黃酮除了直接抑制XOD活性外，還可以促進(jìn)尿酸排泄，別嘌呤醇則不能增加尿酸排出。同時(shí)總黃酮具有抗氧化作用，可以清除超氧離子等自由基作用[10]。因此茶樹(shù)根總黃酮抗痛風(fēng)作用是較全面的和綜合的。可見(jiàn)茶樹(shù)根抗痛風(fēng)作用是全面而綜合的，茶樹(shù)根總黃酮和總皂苷均為茶樹(shù)根抗痛風(fēng)的藥效部位，不同藥效部位抗痛風(fēng)機(jī)制有所不同，本實(shí)驗(yàn)為茶樹(shù)根抗痛風(fēng)臨床研究奠定了基礎(chǔ)。

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Study on the Active Fractions about Anti-gout of Tee Root

YU Xiong-ying1，ZHOU Jun1，CAO Shu-wen2，ZUO Ai-ren1

1.JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanchang330004 ,China；

2.NanchangUniversity，F(xiàn)oodScienceandTenologyStateKeyLaboury,Nanchang330047,China.

Abstract:Objective：To study the active fractions of tee root about anti-gout by comparative study the effects of total flavonoids and total saponins of tee root on urine uric acid and blood uric acid and serum xanthine oxidase activity in hyperuricemia mice and the effects on acute gouty arthritic mice and the effects on the inhibition on Xanthine oxidase activity of them in vitro.Methods:We injected oxonic acid potassium and uric acid into the abdominal of mice to made the hyperuricemia in mice,and determined serum uric acid and urine uric acid and serum xanthine oxidase activity by spectrometric method.In addition,Monosodium urate crystals were used to establish gouty arthritis model rats,We detected the inhibition of Swelling degree on the right foot pad part of mice.At last ,We determined the Inhibition of the total flavonoids and the total saponin of tee root on xanthine oxidase in vitro by spectrophotometer with enzyme kinetics software in the wavelength of 290nm.Results：The results showed that total flavonoids of tee root could not only reduce the serum uric acid and serum xanthine oxidase activity and increase urine uric acid in hyperuricemia mice,but also inhibit xanthine oxidase in vitro.But total saponin of tea root has few effection on the above bioactivity.On the contrary,total saponin of tea root had much stronger anti acute gout arthritis effect than total flavonoids of tee root.Conclusion：Total flavonoids of tee root and total saponins of tee root are the active fractions about anti-gout of tee root.

Key words:Tee Root；Total Flavonoids；Total Saponins；Anti-gout; Active Fraction

收稿日期：(2015-03-12)編輯：曾文雪

中圖分類號(hào)：R284.0

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

通信作者:**周軍 ，講師。Tel：(0791)87118921,E-mail:jessechoujun@sina.com。