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    骨髓增生異常綜合征患者播散性阿薩希毛孢子菌感染1例

    2015-02-05 05:56:37侯佳惠曹俊敏楊雪靜王原曹毅
    浙江醫(yī)學 2015年13期

    侯佳惠 曹俊敏 楊雪靜 王原 曹毅

    ●病例報告

    骨髓增生異常綜合征患者播散性阿薩希毛孢子菌感染1例

    侯佳惠 曹俊敏 楊雪靜 王原 曹毅

    患者男,28歲。2014年6月23日因“血三系低下6年,反復發(fā)熱4月余”就診,擬“骨髓增生異常綜合征”收入我院。體檢:體溫 39.9℃,脈搏140次/min,呼吸20次/min,血壓109/65mmHg;血白細胞 0.2×109/L,中性粒細胞百分數(shù)11.4%,淋巴細胞百分數(shù) 86.9%,血紅蛋白66g/L,血小板12×109/L,C反應蛋白 81.70mg/L,血糖7.24mmol/L,尿蛋白(++)。神志欠清,精神軟,重度貧血貌。全身皮膚廣泛瘀斑,右眼角膜色白,雙側(cè)頸部、腋下、腹股溝淋巴結(jié)未觸及腫大。胸骨區(qū)明顯壓痛。雙肺聽診呼吸音急促,雙下肺可聞及彌漫性濕啰音。心率140次/min,律齊。腹部平軟,無明顯壓痛及反跳痛,肝、脾肋下未及。2014年8月5日患者血液無菌采集后放入 Bact/Alert 3D血培養(yǎng)儀培養(yǎng),需氧瓶60h報警,直接涂片見真菌孢子,轉(zhuǎn)種血平板、沙保弱培養(yǎng)基,觀察菌落形態(tài);同時采用Vitek-2 Compact自動微生物分析儀的YST卡對該菌進行鑒定,使用Bruker質(zhì)譜儀對純培養(yǎng)物進行質(zhì)譜分析;提取該菌DNA采用PCR技術(shù)擴增核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(IST)區(qū)確定菌種,PCR反應的特異性引物參照 Rodriguez等[1]文獻設計,引物序列為:5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG。結(jié)果發(fā)現(xiàn),血平板上呈白色干燥的菌落(見圖1);沙保弱培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后呈白色、粉塵狀菌落,培養(yǎng)48h后菌落圓形、干燥、中心隆起,有細皺褶的酵母樣菌落,以后菌落逐漸變灰,干燥,呈膜樣,上有細絨毛(見圖2);挑取菌落鏡檢,鏡下見菌絲、關(guān)節(jié)孢子和多種形狀的小分生孢子,細胞質(zhì)內(nèi)可見多量具有折光性的小泡。菌絲分支分隔,粗細不等,1~3μm。關(guān)節(jié)孢子數(shù)目不等,長短不一,每一關(guān)節(jié)孢子多呈矩形,(2.4~4.8) μm×(4.8~9.6)μm,兩端圓滑。小分生孢子多呈卵形(2.4~6.0)μm×(2.9~9.6)μm,出芽或不出芽,可見預生、間生或游離圓形厚壁孢子,直徑3~6μm(見圖3、4)。Vitek-2 YST卡鑒定和Bruker質(zhì)譜儀分析結(jié)果均為阿薩希毛孢子菌。經(jīng)PCR擴增,瓊脂糖電泳檢測,可得540bp的IST區(qū)目的片段(見圖5),測序后再經(jīng)Blast比對分析,其與阿薩希毛孢子菌(序列號gb|JX174411.1|)的符合率為99%,確定該菌為阿薩希毛孢子菌。根據(jù)以上結(jié)果,診斷為阿薩希毛孢子菌血癥——播散性阿薩希毛孢子病。立即靜脈滴注伊曲康唑0.4mg/d,后根據(jù)體外藥敏結(jié)果改用伏立康唑0.4mg/d和兩性霉素B聯(lián)合治療,后者首日1mg,以后每日增量5~60mg。最終患者出現(xiàn)多種并發(fā)癥及多器官衰竭,播散性阿薩希毛孢子菌病抗真菌治療效果不佳放棄治療出院。

    圖1 阿薩希毛孢子菌在血平板上的菌落形態(tài)

    圖2 阿薩希毛孢子菌在沙保弱培養(yǎng)基上的形態(tài)

    圖3 阿薩希毛孢子菌血培養(yǎng)革蘭染色

    圖4 阿薩希毛孢子菌乳棉蘭染色

    圖5 阿薩希毛孢子菌DNA擴增電泳圖[M代表標準分子量;1為擴增產(chǎn)物(約540bp);2為陰性對照]

    討論阿薩希毛孢子菌是一種重要的酵母樣真菌[2],作為一種條件致病性真菌,可通過吸入、破損皮膚、污染食物或水源等途徑進入人體內(nèi)或在人體內(nèi)易位而使人類致病,既可引起淺表感染,也可引起侵襲性感染。播散性阿薩希毛孢子菌感染是一種罕見但致命的真菌感染,通常見于免疫缺陷的患者,病死率極高,治療困難[3]。目前有關(guān)阿薩希毛孢子菌感染的患者大多累及皮膚,臨床上常見的感染部位為皮膚損傷、肺部、淋巴結(jié)、指(趾)甲等,其臨床表現(xiàn)及預后取決于受累器官的種類。國內(nèi)首次報道該菌在2001年分離自1例20歲女性患者[4],其皮膚、肝、腎、腸道、口腔、陰道黏膜等廣泛受累,目前國內(nèi)報道的阿薩希毛孢子菌感染有膀胱造瘺患者尿液、急性心肌梗死患者肺部、骨折患者肺部等,大多為非播散性感染,系統(tǒng)播散性的感染不多。尚未見到阿薩希毛孢子菌在骨髓增生異常綜合征患者中出現(xiàn)真菌敗血癥的報道。本例為骨髓增生異常綜合征患者,病程較長(血三系低下6年),長期服用環(huán)孢霉素、卡泊芬凈、糖皮質(zhì)激素類藥物,且中性粒細胞低下,繼而出現(xiàn)阿薩希毛孢子菌的血流感染。Bayramoglu等[5]報道,惡性血液病患者使用米卡芬凈、卡泊芬凈等經(jīng)驗性治療時易發(fā)生阿薩希毛孢子菌的突破性感染。

    播散性阿薩希毛孢子菌感染在臨床上較罕見且預后較差,通常見于免疫缺陷的患者,目前國內(nèi)外常用的針對該菌較敏感的藥物應首選伏立康唑,其次依次為伊曲康唑、氟康唑、脂質(zhì)兩性霉素B,兩性霉素有毒副反應,一旦出現(xiàn),應立即改用伊曲康唑靜脈滴注,后改口服,并及時處理毒副反應。鄭曉麗等[6]報道治療成功的病例,多采用聯(lián)合用藥,如伏立康唑聯(lián)合兩性霉素B等。

    綜上所述,阿薩希毛孢子菌既可引起淺表感染,也可引起侵襲性感染。侵襲性感染的致死率極高,常見于免疫功能低下的患者,尤其是腫瘤患者及惡性血液病患者,臨床上針對這類患者應加強監(jiān)測,早發(fā)現(xiàn)早治療。同時微生物檢驗人員應具備扎實的專業(yè)知識和高度的責任心,該菌初期在常規(guī)真菌顯色培養(yǎng)基上的菌落特點與白色假絲酵母菌相似,可被誤鑒定為白色假絲酵母菌。遇到這類真菌時要特別注意其菌落形態(tài)、培養(yǎng)時間、鏡下特點等,必要時須利用質(zhì)譜技術(shù)和分子生物學技術(shù)進行鑒定,以防誤檢、漏檢。同時環(huán)境監(jiān)測也不容忽視,一旦發(fā)現(xiàn)感染,應配合院感部門做好應對工作,防止交叉感染。

    [1]Rod riguez-Tudela JL,Diza-Guerra TM, Mellado E,et al.Suscep tibility patterns and mo lecular identification of Trichosporon species[J].Antim icrob A-gents Chemother,2005,49(10):4026-4034.

    [2]叢林,李海濤,王文嶺,等.侵襲性毛孢子菌感染的診斷和治療[J].中國真菌學雜志,2010, 5(3):184-187.

    [3]Chagas-Neto TC,Chaves G M,Colombo A L,et a l.Update on the genus Trichosporon[J].Mycopatho logia,2008,166 (3):121-132.

    [4]楊蓉婭,敖俊紅,王文嶺,等.阿薩希絲酵母引起播散性毛孢子菌病國內(nèi)首例報告[J].中華皮膚科雜志,2001,34(5):329-332.

    [5]Bayramog lu G,Sonmez M,Tosun I,etal.Breakthrough Trichosporon asahii fungem ia in neutropenic patientw ith acute leukem ia while receiving caspo fung in[J].Infection,2008,36(1):68-70.

    [6]鄭曉麗,王志東,閆洪敏,等.異基因造血干細胞移植過程中并發(fā)播散性阿薩希毛孢子菌感染1例并文獻復習[J].臨床血液學雜志, 2013,26(5):312-314.

    2014-11-20)

    (本文編輯:嚴瑋雯)

    310006 杭州,浙江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院檢驗科(侯佳惠、曹俊敏、楊雪靜、王原),皮膚科(曹毅)

    曹毅,E-mail:caoyi1965@ 163.com

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