• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    超高效液相色譜法同時(shí)鑒定育發(fā)化妝品中17種植物提取物標(biāo)識(shí)成分

    2015-01-20 10:52:03譚建華李慧勇席紹峰郭長(zhǎng)虹王繼才熊小婷冼燕萍郭新東
    分析化學(xué) 2015年1期
    關(guān)鍵詞:超高效液相色譜

    譚建華+李慧勇+席紹峰+郭長(zhǎng)虹+王繼才+熊小婷+冼燕萍+郭新東

    摘 要 建立了同時(shí)鑒定育發(fā)化妝品中芍藥苷、羥基紅花黃色素A、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、阿魏酸等17種植物提取物標(biāo)識(shí)成分的超高效液相分析方法。不同基質(zhì)的樣品經(jīng)80%甲醇溶液渦旋振蕩、超聲提取及NaCl法破乳后,提取液經(jīng)高速離心處理。選用Waters ACUITY UPLC CSH C18反相色譜柱(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm),以甲醇/0.05% H3PO4為流動(dòng)相,梯度洗脫,然后采用二極陣列管檢測(cè)器(PDA)進(jìn)行測(cè)定??疾炝朔椒ǖ撵`敏度、線性范圍、回收率、日內(nèi)和日間精密度。在本方法條件下,17種標(biāo)識(shí)功效成分在0.2~25 mg/L的濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均大于0.999;方法檢出限為0.3~1.5 mg/kg,方法定量限為1.0~4.0 mg/kg。樣品的回收率為93.5%~105.0%,日內(nèi)精密度(n=6)為0.4%~4.5%,日間精密度(n=6)為0.8%~4.6%。本方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確,已成功用于實(shí)際樣品中17種標(biāo)識(shí)功效成分的鑒定檢測(cè)。

    關(guān)鍵詞 超高效液相色譜;植物提取物標(biāo)識(shí)成分;育發(fā)化妝品

    1 引 言

    中草藥類植物提取液治療脫發(fā)是我國(guó)中醫(yī)傳統(tǒng)文化遺留的寶貴財(cái)富之一。許多研究證明,中草藥植物提取液外用對(duì)于治療脫發(fā),特別是脂溢性脫發(fā),療效顯著[1~4]。Seo等[3]在C57BL/6雄性小鼠背上進(jìn)行生毛試驗(yàn),證實(shí)側(cè)柏、首烏、浙貝和墨西哥辣椒4種植物提取液具有生發(fā)作用。然而,隨著各類新品牌的中草藥育發(fā)化妝品不斷出現(xiàn),植物提取物概念正在不斷被許多企業(yè)濫用,虛假添加植物提取物或采用低廉、易得的植物提取物為原料,欺騙消費(fèi)者,甚至危害了消費(fèi)者的健康。因此,亟需建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法,對(duì)植物提取物類育發(fā)化妝品進(jìn)行鑒定。

    本研究以市場(chǎng)上育發(fā)化妝品最常使用以及可能使用的17種植物提取物為鑒定目標(biāo),并依據(jù)中華人民共和國(guó)藥典第一部(2010版)[5]選擇1~2種與各植物藥材及提取物相對(duì)應(yīng)的功效化合物為標(biāo)識(shí)成分,進(jìn)行鑒定研究。目前,關(guān)于植物提取物類功效化合物的檢測(cè)研究主要針對(duì)藥液[6,7]、植物提取物[8,9]和化妝品等[10~12],然而對(duì)于育發(fā)化妝品中植物提取物標(biāo)識(shí)成分的鑒定方法研究尚未見報(bào)道。由于育發(fā)化妝品, 特別是育發(fā)洗發(fā)液的產(chǎn)品中, 含有大量的各類表面活性劑,給樣品前處理和儀器分析方法造成困難。本研究針對(duì)常見的育發(fā)洗發(fā)乳(膏)和精華液兩種基質(zhì),通過(guò)優(yōu)化前處理?xiàng)l件,比較不同的檢測(cè)方法(包括二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)法),建立一種簡(jiǎn)單、快速、高通量定性和定量鑒定育發(fā)化妝品中17種植物提取物標(biāo)識(shí)成分的方法。

    2 實(shí)驗(yàn)部分

    2.1 儀器、試劑與材料

    ACQUITYTM超高效液相色譜儀配二極陣列管檢測(cè)器和Waters XevoTM TQ MS 三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國(guó)Waters公司);Allegra 64R高速冷凍離心機(jī)(Beckman公司);MS3 basic漩渦混合器(德國(guó)IKA公司);超純水系統(tǒng)(Milli-Q,美國(guó)Millipore公司)。

    甲醇、乙腈(HPLC級(jí),Spectrum公司);甲酸、磷酸(分析純,上海安譜公司)。

    17種標(biāo)準(zhǔn)品:芍藥苷(PF)、羥基紅花黃色素A(HYA)、毛蕊異黃酮葡萄糖苷(CG)、阿魏酸(FA)、甘草苷(LT)、何首烏苷(THS-GLU)、柚皮苷(NG)、蘆?。≧T)、補(bǔ)骨脂素(PL)、異補(bǔ)骨脂素(IPL)、槲皮苷(QR)、6-姜辣素(GR)、異歐前胡素(IIPR)、歐前胡素(IPR)、天然辣椒素(CSC)、芝麻素(SM)、丹參酮ⅡA(TSN) ,純度大于99.0%,均購(gòu)自上海詩(shī)丹德生物技術(shù)有限公司。

    2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

    分別稱取17種標(biāo)準(zhǔn)品10.0 mg于10 mL棕色容量瓶中,用甲醇溶解并定容,配成1 g/L的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再用80%甲醇溶液將單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制成所需系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,4 ℃避光保存。

    2.3 樣品的制備與提取

    準(zhǔn)確稱取0.5 g (精確至0.001 g)試樣,于10 mL具塞比色管中,用80%甲醇溶解并定容,加入1.0 g NaCl,置于漩渦振蕩器上混合,使樣品分散2 min,超聲提取5 min,取上清液10000 r/min離心5 min, 過(guò)濾后待測(cè)。

    2.4 儀器分析條件

    色譜柱:CSH C18( 50 mm×2.1 mm, 1.7 μm, Waters公司);柱溫:25 ℃;進(jìn)樣體積:5 μL;流速:0.3 mL/min; 流動(dòng)相A為0.05% H3PO4溶液,流動(dòng)B為甲醇。梯度洗脫:0~1 min,10% B,1~12 min,10%~100% B; 12~13 min,100% B; 13~16 min,100%~10% B。檢測(cè)波長(zhǎng):210~400 nm,多波長(zhǎng)定量:PF (231 nm), RT, QR(255 nm), CG, PL, IPL,IPR, IIPR (247 nm), HYA (399 nm), LT, NG, GR, CSC, SM (281 nm), FA, THS-GLU (321 nm), TSN (268 nm)。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 提取溶劑的選擇

    本研究選用不同濃度(V/V)的甲醇溶液(20%,30%,50%,80%,100%)為提取溶劑,以洗發(fā)膏為樣品基質(zhì),進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,在提取油脂或增稠劑含量較高的洗發(fā)膏時(shí),均會(huì)產(chǎn)生十分明顯的乳化現(xiàn)象,且提取液不均勻,導(dǎo)致大多數(shù)化合物的樣品加標(biāo)回收率小于50%,重現(xiàn)性差。因此,本研究考慮采用NaCl破乳法和亞鐵氰化鉀-醋酸鋅溶液沉淀法,對(duì)樣品溶液進(jìn)行預(yù)處理。結(jié)果表明,采用亞鐵氰化鉀-醋酸鋅溶液沉淀法,可能引起部分化合物吸附沉淀,導(dǎo)致回收率降低。采用NaCl破乳法,能得到較為澄清的提取液,在甲醇濃度高于80%時(shí),所有化合物都能得到完全提取。但是,隨著甲醇濃度增高,NaCl破乳所析出的油脂類物質(zhì)減少,即樣品進(jìn)樣液中的雜質(zhì)過(guò)高,會(huì)在柱頭累積,進(jìn)而所造成進(jìn)樣溶劑效應(yīng)增強(qiáng)。因此,本實(shí)驗(yàn)選取80%甲醇溶液為提取溶劑。endprint

    3.2 超高效液相色譜條件的優(yōu)化

    3.2.1 色譜柱的選擇

    比較了4種不同填料色譜柱CSH C18(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm), BEH C18(50 mm × 2.1 mm, 1.7 μm), HSS T3(100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm), Shield RP18(100 mm × 2.1 mm, 1.7 μm) 的分離效果。結(jié)果表明,反相保留能力強(qiáng)的CSH C18和BEH C18色譜柱對(duì)于17種化合物的分離效果優(yōu)于親水色譜柱Shield RP18和HSS T3。由于CSH顆粒是在亞乙基橋雜化顆粒(BEH)基礎(chǔ)上,在其表面控制少量電荷,因此CSH C18對(duì)于可能帶電荷化合物的保留與BEH C18表現(xiàn)出不同的選擇性,可將17種化合物進(jìn)行有效分離(圖1)。因此,本實(shí)驗(yàn)選用CSH C18為色譜柱。

    3.2.2 柱溫條件的選擇 比較了柱溫(22 ℃,25 ℃,30 ℃,40 ℃)對(duì)17種目標(biāo)化合物色譜分離的影響。結(jié)果表明,柱溫的變化對(duì)HYA/CG, THS-GLU/LT的色譜分離影響十分明顯。隨著柱溫升高,THS-GLU和LT的分離度下降,但HYH和CG色譜峰的分離度增加。比較4種柱溫條件下的分離效果,在柱溫為25 ℃時(shí),17種目標(biāo)化合物的色譜峰均能達(dá)到基本分離。因此,本實(shí)驗(yàn)選用25 ℃為柱溫條件。

    3.2.3 檢測(cè)條件的選擇 比較了三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀(UPLC-MS/MS)和二極管陣列檢測(cè)器(UPLC-PDA)兩種檢測(cè)方法對(duì)育發(fā)化妝品中17種中草藥標(biāo)識(shí)成分的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果表明,UPLC-MS/MS雖然具有更高的靈敏度,但是由于17種化合物離子化方式不同,需采用不同的方法進(jìn)行采集分析。另外,由于育發(fā)化妝品特別是育發(fā)洗發(fā)乳類產(chǎn)品中常添加有高含量的表面活性劑(如十二烷基硫酸銨、月桂醇聚醚硫酸酯鈉等),造成目標(biāo)化合物嚴(yán)重的基質(zhì)抑制或基質(zhì)增強(qiáng)作用, 且可能造成質(zhì)譜的持續(xù)污染。因此,考慮到育發(fā)化妝品基質(zhì)的特殊性,為了保證方法的簡(jiǎn)單、快速且高通量性,本研究采用UPLC-PDA檢測(cè)器, 根據(jù)各個(gè)化合物的紫外吸收特性,選用多波長(zhǎng)監(jiān)測(cè)模式對(duì)17種中草藥標(biāo)識(shí)成分進(jìn)行定量分析。

    3.3 線性與方法檢出限

    分別配制質(zhì)量濃度為0.20~25 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,在本方法實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)17種中草藥標(biāo)識(shí)成分進(jìn)行測(cè)定,根據(jù)其色譜峰面積積分值(Y)和相應(yīng)的質(zhì)量濃度(X, mg/L)響應(yīng)關(guān)系,得線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)。結(jié)果表明,在0.20~25 mg/L范圍內(nèi),17種化合物的線性關(guān)系良好,R2>0.999。本研究采用基質(zhì)樣品加標(biāo)方法,通過(guò)計(jì)算其標(biāo)樣的響應(yīng)與背景噪音的比值(S/N=3)確定方法檢出限,得到PF, LT, NG, RT, QR, GR, CSC和SM和TSN的方法檢出限為4.0 mg/kg,HYA, CG, FA和THS-GLU的方法檢出限為2.0 mg/kg,PL, IPL, IIPR和IPR的方法檢出限為1.0 mg/kg。

    3.4 方法回收率和精密度

    選用洗發(fā)膏和精華液兩種空白育發(fā)化妝品為加標(biāo)基質(zhì),按本實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行低、中、高(4.0, 8.0, 20 mg/kg)添加水平的回收率與精密度實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,精華液樣品的回收率為93.5%~103.9%,日內(nèi)精密度(n=6)和日間精密度(n=6)分別為0.4%~3.4%和0.8%~3.6%;洗發(fā)膏樣品的回收率為94.0%~105.0%,日內(nèi)精密度(n=6)和日間精密度(n=6)分別為0.7%~4.5%和1.2%~4.6%。表明方法具有較高的回收率,準(zhǔn)確度和精密度良好。

    3.5 實(shí)際樣品的測(cè)定

    采集廣東地區(qū)市售的28份植物提取物類育發(fā)化妝品,涉及17個(gè)品牌,包括標(biāo)稱有育發(fā)、防脫、濃發(fā)、固發(fā)等功效的產(chǎn)品,典型色譜圖及實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別見圖2和表1。結(jié)果表明,標(biāo)識(shí)成分的檢出濃度范圍在小于方法檢出限(LOD)至211 mg/kg之間,大部分產(chǎn)品,特別是洗發(fā)產(chǎn)品中,植物提取物實(shí)際添加的含量較低,其標(biāo)識(shí)成分濃度甚至低于方法檢出限。目前市場(chǎng)上產(chǎn)品中添加植物提取物更偏重廣告效應(yīng),而實(shí)際上植物提取物在育發(fā)化妝品中的功能效果有待值得進(jìn)一步研究和探討。

    References

    1 REN Fang, WEI Yue-Gang. Journal of Zhejiang Chinese Medical, 2012, 36(3): 350-352

    任 芳, 魏躍鋼. ?浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2012, ?36(3): 350-352

    2 WANG Jian-Da, YANG En-Pin. Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica, ?2009, ?30(7): 69-70

    王劍達(dá), 楊恩品. 云南中醫(yī)中藥雜志, 2009, ?30(7): 69-70

    3 Seo S R, Kang G, Ha J W, Kim J C. Journal of Industrial and Engineering Chemistry, ?2013, ?19: 1331-1339

    4 Park H J, Zhang N N, Park D K. Journal of Ethnopharmacology, ?2011, ?135: 369-375

    5 Pharmacopoeia Commission of People′s Republic of China. Pharmacopoeia of People′s Republic of China (Part1). Beijing: ?Chemical Industry Press, ?2010: 3-347endprint

    國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典(一部). 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, ?2010: 3-347

    6 GUO Dan, CHEN Na-Na, YANG Xi-Xiao, HOU Lian-Bing. Chinese Traditional Patent Medicine, ?2005, ?27(4): 402-404

    郭 丹, 陳娜娜, 楊西曉, 侯連兵. 中成藥, 2005, ?27(4): 402-404

    7 XUAN Tie-Feng. China Pharmaceuticals, ?2012, ?21(18): 37-38

    宣鐵鋒. 中國(guó)藥業(yè), 2012, ?21(18): 37-38

    8 HAN Chao, YE Li-Ru, CAI Xiao-Jun, ZHU Zhen-Ou, LIU Cui-Ping, SHEN Yan. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, ?2012,

    32(8): 1365-1369

    韓 超, 葉麗如, 蔡小軍, 朱振甌, 劉翠平, 沈 燕. 藥物分析雜志, 2012, ?32(8): 1365-1369

    9 FENG Ying, HE Jun, LIU Hong, WANG Tao. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, ?2013, ?24(3): 572-574

    馮 穎, 何 俊, 劉 虹, 王 濤. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2013, ?24(3): 572-574

    10 CHEN Wei, WANG Chao, CHENG Yan, XUE Yi-Mei, ZHANG Qing. Chinese Journal of Chromatography, ?2007, ?25(5): 768-769

    陳 偉, 王 超, 程 艷, 薛一梅, 張 青. 色譜, 2007, ?25(5): 768-769

    11 CHEN Jie, XU Juan, XIONG Li-Hua. Chinese Journal of Chromatography, ?2011, ?29(5): 454-457

    陳 捷, 徐 娟, 熊莉華. 色譜, 2011, ?29(5): 454-457

    12 XIAN Yan-Ping, GUO Xin-Dong, MU Tong-Na, TAN Jian-Hua, ZHANG Yan, LUO Hai-Ying, WU Yu-Luan. Chinese Journal of Analysis Laboratory, ?2014, ?33(2): ?171-174

    冼燕萍, 郭新東, 穆同娜, 譚建華, 張 巖, 羅海英, 吳玉鑾. 分析試驗(yàn)室, 2014, 33(2): 171-174

    Determination of 17 Characteristic Ingredients of Plant

    Extracts in Hair Growth Cosmetics by Ultra High

    Performance Liquid Chromatography

    TAN Jian-Hua1,2, LI Hui-Yong1, XI Shao-Feng1,2, GUO Chang-Hong1,

    WANG Ji-Cai1, XIONG Xiao-Ting1, XIAN Yan-Ping1, GUO Xin-Dong1

    1(Guangzhou Products Quality Supervision and Testing Institute,

    National Center for Quality Supervision and Testing of Cosmetics, Guangzhou 510110, China)

    2(The College of Natural Resources and Environment of South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China)

    Abstract A method was developed for the simultaneous determination of 17 characteristic ingredients of plant extracts, including paeoniflorin, hydroxysafflor yellow A, calycosin-7-glucoside ferulic acid, etc., in hair growth cosmetics using ultra high performance liquid chromatography (UPLC). Different cosmetic samples were extracted by ultrasonic-assisted extraction with the solvent of methanol/water (4∶1, V/V) solution. After demulsified by the addition of appropriate amount of NaCl and high speed centrifugation, the supernatant was transferred and analyzed with UPLC. The separation was conducted on a Waters reversed phase column of ACQUITY UPLC CSH C18 (50 mm×2.1 mm, 1.7 μm), and the mobile phases were methanol and the solution of 0.05% phosphate in water. The detection was performed with a photodiode-array (PDA) detector. The linear range was 0.2-25 mg/L with correlation coefficients higher than 0.999. The limits of detection were within 0.3-1.5 mg/kg, and the limits of quantification were from 1.0 to 4.0 mg/kg. The average recoveries of 17 characteristic ingredients were within 93.5%-105.0%, with the intra-and inter-day precision (n=6) less than 4.6%. This method was simple, rapid, with good-repeatability, and had been applied to the analysis of real samples.

    Keywords Ultra-high performance liquid chromatography; Characteristic ingredients of plant extracts; Hair growth cosmetics

    (Received 16 June 2014; accepted 12 September 2014)endprint

    猜你喜歡
    超高效液相色譜
    雞骨草中生物堿的提取與測(cè)定
    超高效液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)烏頭湯中8種主要成分
    白術(shù)中內(nèi)酯類成分的TLC鑒別與UPLC含量測(cè)定
    超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定豬尿液中30種不同種類“瘦肉精”藥物殘留
    固相萃取—超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定解郁安神顆粒中8種非法添加化學(xué)藥物的實(shí)驗(yàn)研究
    醋酸艾司利卡西平片在比格犬體內(nèi)的相對(duì)生物利用度
    UPLC—MS/MS法同時(shí)測(cè)定葡萄中4種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑研究
    超高效液相色譜 光電二極管陣列檢測(cè) 串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜法測(cè)定紅洋蔥中黃酮醇及其糖苷類化合物
    超高效液相色譜 串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定雞皮及脂肪組織中抗球蟲類藥物殘留
    食品罐內(nèi)壁涂料中雙酚 二縮水甘油醚的快速檢測(cè)和遷移規(guī)律
    亚洲av熟女| 99热精品在线国产| 有码 亚洲区| 99视频精品全部免费 在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产淫片久久久久久久久| 久久久久九九精品影院| 欧美又色又爽又黄视频| 久久久久久久久久久丰满| 欧美在线一区亚洲| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 综合色丁香网| 国产男人的电影天堂91| 国产高清激情床上av| av中文乱码字幕在线| 日韩中字成人| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 精品久久国产蜜桃| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲av第一区精品v没综合| 又黄又爽又免费观看的视频| 免费在线观看影片大全网站| 国产成人精品久久久久久| 特级一级黄色大片| .国产精品久久| 身体一侧抽搐| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产亚洲精品久久久久久毛片| 少妇熟女aⅴ在线视频| 看十八女毛片水多多多| av天堂中文字幕网| 日本黄色视频三级网站网址| 午夜福利高清视频| 少妇的逼水好多| 久久久欧美国产精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 日韩欧美国产在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 欧美国产日韩亚洲一区| 日韩欧美在线乱码| 亚洲,欧美,日韩| 久久精品国产亚洲av天美| 99热只有精品国产| 婷婷色综合大香蕉| 九色成人免费人妻av| www日本黄色视频网| 亚州av有码| 免费看美女性在线毛片视频| 69av精品久久久久久| 欧美成人一区二区免费高清观看| 男插女下体视频免费在线播放| 国产人妻一区二区三区在| 精品久久久久久成人av| 欧美潮喷喷水| 欧美+日韩+精品| 欧美一区二区精品小视频在线| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 我的女老师完整版在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 深爱激情五月婷婷| 国产精品久久视频播放| 亚洲国产色片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日韩欧美在线乱码| 亚洲专区国产一区二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 成人毛片a级毛片在线播放| 欧美+亚洲+日韩+国产| 午夜福利18| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 99热网站在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 国产黄色小视频在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 精品一区二区三区视频在线| 欧美3d第一页| 直男gayav资源| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 伦理电影大哥的女人| 成人av一区二区三区在线看| 美女大奶头视频| 国产成人福利小说| 国产真实乱freesex| 国产色婷婷99| 人人妻,人人澡人人爽秒播| or卡值多少钱| 亚洲成a人片在线一区二区| 丝袜喷水一区| 99久久精品热视频| 一进一出好大好爽视频| 日日撸夜夜添| a级毛片免费高清观看在线播放| 欧美激情在线99| 在线免费十八禁| 中文字幕免费在线视频6| 国产久久久一区二区三区| 级片在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久久久精品国产欧美久久久| 十八禁国产超污无遮挡网站| 99精品在免费线老司机午夜| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 色5月婷婷丁香| 中文在线观看免费www的网站| 九九在线视频观看精品| 久久久久久久久久久久大奶| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧美性感艳星| 亚洲国产色片| 免费黄网站久久成人精品| 赤兔流量卡办理| 欧美区成人在线视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 七月丁香在线播放| 丰满乱子伦码专区| av天堂久久9| 毛片一级片免费看久久久久| 国产美女午夜福利| 亚洲人成网站在线播| 国产午夜精品一二区理论片| 中文字幕免费在线视频6| 男女无遮挡免费网站观看| 不卡视频在线观看欧美| 两个人的视频大全免费| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产亚洲精品久久久com| 免费少妇av软件| 久久热精品热| 丰满迷人的少妇在线观看| 一本一本综合久久| 人妻少妇偷人精品九色| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲精品国产av成人精品| 成年av动漫网址| 亚洲无线观看免费| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美日韩视频精品一区| av又黄又爽大尺度在线免费看| 美女福利国产在线| 日本黄色片子视频| 日本欧美视频一区| 国产精品一区二区在线观看99| 精品国产乱码久久久久久小说| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲av成人精品一区久久| 22中文网久久字幕| 久久久精品94久久精品| 高清毛片免费看| 九九在线视频观看精品| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产精品一区二区性色av| 伦理电影免费视频| 自线自在国产av| 国产成人精品久久久久久| 伦理电影免费视频| 91成人精品电影| 男女啪啪激烈高潮av片| 美女国产视频在线观看| 大片免费播放器 马上看| 丝袜在线中文字幕| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 美女国产视频在线观看| 99热6这里只有精品| 亚洲久久久国产精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产一区有黄有色的免费视频| 在线观看av片永久免费下载| 国产精品久久久久久av不卡| 两个人免费观看高清视频 | 美女内射精品一级片tv| 日韩在线高清观看一区二区三区| 街头女战士在线观看网站| 欧美精品国产亚洲| 大香蕉97超碰在线| 国产在线一区二区三区精| 欧美激情国产日韩精品一区| 午夜av观看不卡| 少妇的逼好多水| 18禁在线无遮挡免费观看视频| a级毛色黄片| 国产日韩欧美在线精品| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 免费大片18禁| 国产精品99久久99久久久不卡 | 免费观看的影片在线观看| 极品教师在线视频| 精品酒店卫生间| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 嫩草影院入口| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 黑丝袜美女国产一区| 精品人妻熟女av久视频| videos熟女内射| 精品人妻偷拍中文字幕| av国产久精品久网站免费入址| 高清在线视频一区二区三区| 久久99精品国语久久久| 精品久久久精品久久久| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲综合色惰| 国产精品久久久久久久久免| 久久久久久久久久久久大奶| 卡戴珊不雅视频在线播放| 老女人水多毛片| 国产黄色免费在线视频| 日本欧美国产在线视频| 一个人看视频在线观看www免费| 桃花免费在线播放| 欧美3d第一页| 精品人妻偷拍中文字幕| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 午夜视频国产福利| av免费在线看不卡| 中文字幕制服av| 国产免费一级a男人的天堂| 色视频在线一区二区三区| 乱码一卡2卡4卡精品| 免费高清在线观看视频在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 高清视频免费观看一区二区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 青春草国产在线视频| 久久国产精品大桥未久av | 国产精品一区二区三区四区免费观看| 少妇的逼好多水| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品久久久久久久电影| 日韩三级伦理在线观看| 久久久久精品性色| 91精品一卡2卡3卡4卡| 久久99蜜桃精品久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 乱人伦中国视频| 精品熟女少妇av免费看| 精品一区二区免费观看| 亚洲av免费高清在线观看| 少妇精品久久久久久久| 永久免费av网站大全| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲精品日本国产第一区| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美激情国产日韩精品一区| 日韩伦理黄色片| 大片免费播放器 马上看| 免费黄频网站在线观看国产| 高清黄色对白视频在线免费看 | 美女中出高潮动态图| 久久久亚洲精品成人影院| 国产亚洲最大av| 国产视频内射| 黄色日韩在线| 日韩大片免费观看网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 精品人妻偷拍中文字幕| av一本久久久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲av欧美aⅴ国产| 日韩av免费高清视频| 午夜激情福利司机影院| 尾随美女入室| 街头女战士在线观看网站| 黄色毛片三级朝国网站 | 日产精品乱码卡一卡2卡三| 黑丝袜美女国产一区| 我的女老师完整版在线观看| 在现免费观看毛片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 波野结衣二区三区在线| 亚洲国产av新网站| 大香蕉97超碰在线| 美女中出高潮动态图| 亚洲av中文av极速乱| 一级二级三级毛片免费看| 极品教师在线视频| av天堂中文字幕网| 国产一区亚洲一区在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| a级片在线免费高清观看视频| 国产极品天堂在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲成人av在线免费| 五月玫瑰六月丁香| 国产中年淑女户外野战色| 日韩成人伦理影院| 久久久久精品久久久久真实原创| 99久国产av精品国产电影| 久久这里有精品视频免费| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 91午夜精品亚洲一区二区三区| av一本久久久久| 成人二区视频| 看十八女毛片水多多多| 有码 亚洲区| 人妻系列 视频| 国产在线免费精品| 七月丁香在线播放| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久久国产欧美日韩av| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产av精品麻豆| 一级毛片电影观看| 亚洲国产精品999| 视频区图区小说| 国产中年淑女户外野战色| 国产成人freesex在线| 精品久久久久久电影网| 韩国高清视频一区二区三区| 精品国产露脸久久av麻豆| 成人影院久久| 国产91av在线免费观看| 欧美日韩综合久久久久久| 黑人猛操日本美女一级片| 久久久久久人妻| 国产成人精品久久久久久| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲第一av免费看| 91aial.com中文字幕在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 激情五月婷婷亚洲| 如何舔出高潮| 欧美精品一区二区大全| 亚洲国产精品国产精品| av网站免费在线观看视频| 久久 成人 亚洲| 成人午夜精彩视频在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 最近的中文字幕免费完整| av天堂中文字幕网| 我要看日韩黄色一级片| 99久久人妻综合| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 成人无遮挡网站| av专区在线播放| av免费观看日本| 成人无遮挡网站| 亚洲第一av免费看| 在线观看免费日韩欧美大片 | 在线观看免费高清a一片| 精品亚洲成国产av| 美女大奶头黄色视频| av国产精品久久久久影院| 少妇精品久久久久久久| 在线观看免费日韩欧美大片 | 久久97久久精品| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 我的老师免费观看完整版| 人人澡人人妻人| 老女人水多毛片| 这个男人来自地球电影免费观看 | 街头女战士在线观看网站| 久久99热这里只频精品6学生| 晚上一个人看的免费电影| 男女免费视频国产| 免费观看性生交大片5| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲欧美精品专区久久| 一本久久精品| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o| av福利片在线观看| 18禁在线播放成人免费| av在线app专区| 日日啪夜夜撸| 久久国产亚洲av麻豆专区| 日韩欧美一区视频在线观看 | 亚洲人成网站在线播| 日韩av在线免费看完整版不卡| 六月丁香七月| 人妻 亚洲 视频| 美女国产视频在线观看| 国产视频内射| 日本-黄色视频高清免费观看| 国国产精品蜜臀av免费| 成年av动漫网址| 日韩人妻高清精品专区| 大片免费播放器 马上看| 午夜视频国产福利| 亚洲伊人久久精品综合| 秋霞在线观看毛片| 亚洲成色77777| 久久久精品94久久精品| 高清毛片免费看| 久久热精品热| 视频中文字幕在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 少妇人妻一区二区三区视频| 下体分泌物呈黄色| 欧美+日韩+精品| 少妇人妻久久综合中文| 精品人妻熟女av久视频| 最近中文字幕2019免费版| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲一区二区三区欧美精品| 好男人视频免费观看在线| 国产成人午夜福利电影在线观看| 中国三级夫妇交换| 另类精品久久| 久久人妻熟女aⅴ| 青青草视频在线视频观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 热99国产精品久久久久久7| 少妇的逼水好多| 日韩三级伦理在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| av国产久精品久网站免费入址| www.av在线官网国产| 在线观看美女被高潮喷水网站| 成年女人在线观看亚洲视频| 七月丁香在线播放| 亚洲国产成人一精品久久久| 欧美精品一区二区免费开放| a级毛色黄片| 中文天堂在线官网| 日韩免费高清中文字幕av| 99国产精品免费福利视频| 我的女老师完整版在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 午夜福利网站1000一区二区三区| 一级毛片我不卡| 久久久国产精品麻豆| 日日爽夜夜爽网站| 国产毛片在线视频| 国产亚洲最大av| 人妻 亚洲 视频| 国产成人精品婷婷| 中文字幕免费在线视频6| 最黄视频免费看| 免费观看的影片在线观看| 午夜福利,免费看| 亚洲综合色惰| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲av二区三区四区| 少妇的逼好多水| 超碰97精品在线观看| .国产精品久久| 黑人高潮一二区| 三级国产精品片| 亚洲av二区三区四区| 国产视频首页在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 午夜日本视频在线| 春色校园在线视频观看| a级片在线免费高清观看视频| 99久久精品热视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 人人妻人人看人人澡| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美人与善性xxx| 天美传媒精品一区二区| 赤兔流量卡办理| 色吧在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产美女午夜福利| 久久久久国产网址| av一本久久久久| 99热这里只有精品一区| 亚洲自偷自拍三级| 人妻系列 视频| 国产黄频视频在线观看| 久热久热在线精品观看| 日本wwww免费看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 久久久久久伊人网av| 久久久a久久爽久久v久久| 在线观看三级黄色| 午夜免费观看性视频| 成人特级av手机在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲国产日韩一区二区| 嫩草影院入口| 男女免费视频国产| 最近的中文字幕免费完整| 国产精品国产三级专区第一集| 国产精品久久久久久精品古装| 日本午夜av视频| 丝袜喷水一区| 在线观看国产h片| 看十八女毛片水多多多| 男人爽女人下面视频在线观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲不卡免费看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 蜜桃在线观看..| 男男h啪啪无遮挡| 久久99一区二区三区| 天堂俺去俺来也www色官网| 成人国产麻豆网| 一个人免费看片子| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 蜜桃在线观看..| 在线观看免费高清a一片| 亚洲av日韩在线播放| a级毛色黄片| 精品久久久久久电影网| av视频免费观看在线观看| 久久青草综合色| 天堂中文最新版在线下载| 三级国产精品片| 亚洲伊人久久精品综合| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品久久久久久av不卡| 国产永久视频网站| 亚洲av不卡在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 色5月婷婷丁香| 精品卡一卡二卡四卡免费| 交换朋友夫妻互换小说| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产男人的电影天堂91| 亚洲久久久国产精品| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 国产免费福利视频在线观看| 国产亚洲一区二区精品| av免费在线看不卡| 91精品一卡2卡3卡4卡| 精品国产国语对白av| 中文天堂在线官网| 国产91av在线免费观看| 夫妻午夜视频| 国产在线免费精品| 乱系列少妇在线播放| 日韩伦理黄色片| 免费人成在线观看视频色| 综合色丁香网| 男女免费视频国产| 欧美成人精品欧美一级黄| 五月玫瑰六月丁香| 国产伦在线观看视频一区| 久久青草综合色| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久久久精品性色| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久久精品免费免费高清| 国产成人a∨麻豆精品| 男女边摸边吃奶| 丝瓜视频免费看黄片| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲人与动物交配视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 午夜免费男女啪啪视频观看| 性色avwww在线观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久久a久久爽久久v久久| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产免费福利视频在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲内射少妇av| 色94色欧美一区二区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 色婷婷av一区二区三区视频| 色5月婷婷丁香| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 午夜福利视频精品| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产在线一区二区三区精| 在线观看国产h片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 嘟嘟电影网在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲av不卡在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 国产一区二区三区综合在线观看 | 好男人视频免费观看在线| 2022亚洲国产成人精品| 免费黄频网站在线观看国产| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产免费福利视频在线观看| 99热这里只有精品一区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品久久久久久久久免| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 99久国产av精品国产电影| 最黄视频免费看| 国产在线男女| 国模一区二区三区四区视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| av在线老鸭窝| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲精品视频女| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| av网站免费在线观看视频| 久久久久久久久久久丰满| 人人澡人人妻人| 伊人亚洲综合成人网| 日日啪夜夜爽| 观看美女的网站| 久久免费观看电影| 丝袜喷水一区| 免费观看无遮挡的男女| 国产极品天堂在线| 国产91av在线免费观看| 大码成人一级视频| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 99热网站在线观看| av在线老鸭窝|