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    蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠膽結(jié)石形成及其生化指標的影響

    2015-01-18 01:06:04張小麗陳瑞明張亞紅姜姍姍陜西省中醫(yī)藥研究院中藥研究所西安7000清華德人西安幸福制藥有限公司西安7004中國藥科大學藥學院南京98
    西北藥學雜志 2015年4期
    關(guān)鍵詞:提物豚鼠膽酸

    張小麗,張 濤,陳瑞明,張亞紅,姜姍姍,李 芳,柴 焱,張 天(.陜西省中醫(yī)藥研究院中藥研究所,西安7000;.清華德人西安幸福制藥有限公司,西安 7004;.中國藥科大學藥學院,南京 98)

    蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠膽結(jié)石形成及其生化指標的影響

    張小麗1,張 濤2,陳瑞明1,張亞紅1,姜姍姍1,李 芳1,柴 焱1,張 天3(1.陜西省中醫(yī)藥研究院中藥研究所,西安710003;2.清華德人西安幸福制藥有限公司,西安 710043;3.中國藥科大學藥學院,南京 211198)

    目的 觀察蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠膽石癥的干預作用。方法 用致石飼料建立豚鼠膽結(jié)石模型,蓽澄茄不同極性提取物灌胃給藥,比較各組豚鼠的成石率,并檢測血脂、膽汁成分等指標。結(jié)果 蓽澄茄醚提物1.2g·kg-1、醇提物1.7g·kg-1、水提物2.8g·kg-1、混合物2.55g·kg-1具有抑制豚鼠膽結(jié)石形成作用,增加膽結(jié)石豚鼠膽囊中的膽汁量。醚提物1.2g·kg-1可降低膽汁中的總膽紅素和膽固醇含量,可降低Ca2+的濃度;水提物2.8g·kg-1和混合物2.55g·kg-1可降低膽汁中膽固醇含量;醇提物1.7g·kg-1可降低血液中膽固醇的含量;混合物2.55g·kg-1可提高血液高密度脂蛋白。其中醚提物作用最強,醇提物其次。結(jié)論 蓽澄茄制劑可以作為膽囊炎、膽管炎和膽石癥的治療制劑。

    蓽澄茄提取物;膽石癥;血脂;膽汁成分

    蓽澄茄(Litseae fructus)又名山雞椒、山蒼子,系樟科木姜子屬植物山雞椒Litseacubeba(Lour.)Pers.的成熟果實。以前的研究發(fā)現(xiàn),蓽澄茄有利膽、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗?jié)兒涂垢篂a作用,有資料顯示有一定的溶石作用[1],我們對蓽澄茄不同極性提取物的抗炎、鎮(zhèn)痛、溶石及利膽作用進行了系統(tǒng)研究。本文報道采用豚鼠膽結(jié)石模型研究蓽澄茄不同極性提取物對膽結(jié)石形成及其生化指標的影響。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器 TBA-40FR全自動生化分析儀,日本東芝公司產(chǎn)品。

    1.2 試藥 蓽澄茄(西安市藥材公司,產(chǎn)地四川省,由陜西省中醫(yī)藥研究院化學研究室李芳副研究員等鑒定并提?。?g醚提取物相當于原藥材13.3g;1g醇提取物相當于原藥材8.2g;1g醚提取物相當于原藥材5.1g;混合物按提取比例混合)。熊去氧膽酸片(成都市湔江制藥廠生產(chǎn),規(guī)格:50mg,用法用量:每日8~10mg·kg-1,豚鼠用量56mg·kg-1.);酪蛋白(鄭州成果食品添加劑有限公司,2 000g/袋);微晶纖維素(國藥集團化學試劑有限公司,批號F20100126);膽酸鈉(北京奧博星生物技術(shù)有限責任公司,批號20100528);膽固醇(西安化學試劑廠,批號940107);總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)試劑盒由北京九強生物技術(shù)有限公司生產(chǎn);其他生化試劑均為寧波美康生物科技有限公司產(chǎn)品。

    1.3 動物 豚鼠,體質(zhì)量220~300g,雌雄各半,由西安交通大學實驗動物中心提供,生產(chǎn)許可證號:SCXK(陜)2008-008。

    2 方法

    2.1 制備造模用致石性飼料 具體配方為(質(zhì)量分數(shù)):正常飼料90%,酪蛋白2%,蔗糖3%,豬油2%,微晶纖維素2%,膽酸鈉0.04%,膽固醇0.12%。

    2.2 造模[2-3]豚鼠70只,豚鼠體質(zhì)量220~300g,雌雄各半,先以基礎飼料喂養(yǎng)1周,取10只作為對照組繼續(xù)給予基礎飼料;其余豚鼠喂以致石飼料造模,共8周。造模后,按體質(zhì)量、性別隨機分成6組:模型組、蓽澄茄水提物2.8g·kg-1、蓽澄茄醇提物1.7g·kg-1、蓽澄茄醚提物1.2g·kg-1、蓽澄茄混合物2.55g·kg-1及陽性對照藥熊去氧膽酸(56mg·kg-1),分別按劑量灌胃給藥或水,每天1次,灌胃4周。

    2.3 結(jié)石的觀察及樣品的采集 實驗最后1d,動物禁食24h,用100g·L-1烏拉坦麻醉后迅速打開腹腔,頸總動脈插管取血,分離血清,分離膽囊,用注射器吸出全部膽汁,計量體積,避光待檢。解剖膽囊,顯微鏡下觀察結(jié)石是否形成,統(tǒng)計成石率。膽汁離心,用于生化測定。膽汁生化測定按試劑盒說明書提供的方法測定膽汁總膽紅素、膽固醇、Ca2+和膽汁酸,血清生化測定按試劑盒說明書提供的方法測血清、膽固醇、三酰甘油及高密度脂蛋白的含量。

    3 結(jié)果

    3.1 蓽澄茄提取物對豚鼠膽汁量及結(jié)石率的影響

    在微鏡下可觀察到有黑綠色的膽結(jié)石形成,計量膽汁體積和膽結(jié)石成石率。見表1。

    表1 蓽澄茄對豚鼠膽汁量及結(jié)石率的影響Tab.1 Effect of Litseae fructus on biliary amount and stone formation rate (±s,n=7)

    表1 蓽澄茄對豚鼠膽汁量及結(jié)石率的影響Tab.1 Effect of Litseae fructus on biliary amount and stone formation rate (±s,n=7)

    注:與水對照組比較:#P<0.05;與模型組比較:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

    組別 劑量/g·kg-1 膽汁量/mL 結(jié)石率/%水對照 0.70±0.27#0模型組 0.33±0.13# 83.3醚提物 1.2 0.69±0.09*** 42.9醇提物 1.7 0.90±0.21*** 42.9水提物 2.8 0.64±0.16** 66.7混合物 2.55 1.07±0.39** 57.0熊去氧膽酸 0.056 0.83±0.14**28.6

    結(jié)果表明,模型組膽汁量與水對照組相比有顯著性差異(P<0.05),造模成功;蓽澄茄醚提組和醇提組與模型組相比有顯著性差異(P<0.001);而蓽澄茄水提組與混合組和模型組比較也有顯著性差異(P<0.01)。蓽澄茄各種極性的提取物均能明顯增加豚鼠的膽汁量,并降低結(jié)石率。

    3.2 蓽澄茄提取物對豚鼠膽汁生化指標的影響 結(jié)果表明,與模型組比較:蓽澄茄醚提組、醇提組及熊去氧膽酸組膽汁中總膽紅素顯著降低(P<0.05,P<0.01);蓽澄茄各組提取物及熊去氧膽酸組膽汁中膽固醇顯著降低(P<0.05,P<0.01);蓽澄茄醚提組的Ca2+顯著降低(P<0.05)。膽汁酸雖然沒有統(tǒng)計學的顯著性,但可以看出有一定的升高趨勢。比較而言,醚提物的作用最強。這些作用均有利于溶解膽結(jié)石。見表2。

    表2 蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠膽汁生化指標的影響Tab.2 Effects of different Litseae fructus extracts on bili-biochemical index in guinea pigs±s,n=7)

    表2 蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠膽汁生化指標的影響Tab.2 Effects of different Litseae fructus extracts on bili-biochemical index in guinea pigs±s,n=7)

    注:與模型組比較:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

    組別 劑量/g·kg-1 總膽紅素/μmol·L-1 膽汁酸/μmol·L-1 膽固醇/mmol·L-1 Ca2+/mg·L-1水對照 29.50±7.37 24 124.3±2 963.4 0.05±0.08 0.89±0.13模型組 35.58±3.63 25 003.3±3 645.3 0.13±0.07 0.98±0.14醚提組 1.2 26.97±0.72** 26 054.0±4 333.5 0.01±0.01** 0.80±0.13*醇提組 1.7 28.67±6.79* 26 930.0±1 870.4 0.03±0.05* 0.82±0.15水提組 2.8 32.73±3.65 25 158.6±9 962.2 0.02±0.01** 0.90±0.36混合組 2.55 34.67±12.55 26 491.4±4 635.9 0.04±0.02** 0.95±0.13熊去氧膽酸 0.056 24.63±4.99** 23 407.9±5 310.4 0.05±0.02*0.85±0.16

    3.3 蓽澄茄提取物對豚鼠血脂的影響 見表3。結(jié)果表明:模型組與水對照組相比,膽固醇顯著升高(P<0.01);醚提物、醇提物、混合組和熊去氧膽酸組與模型組相比,膽固醇含量顯著降低(P<0.05,P<0.01);水提物和混合組與模型組相比,高密度脂蛋白含量有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。

    表3 蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠血脂的影響Tab.3 Effects of different Litseae fructus extracts on lipid in guinea pigs ±s,n=7)

    表3 蓽澄茄不同極性提取物對豚鼠血脂的影響Tab.3 Effects of different Litseae fructus extracts on lipid in guinea pigs ±s,n=7)

    注:與水對照組比較##P<0.01;與模型組比較*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

    組別 劑量/g·kg-1膽固醇/mmol·L-1三酰甘油/mmol·L-1高密度脂蛋白/mmol·L-1水對照1.14±0.22 0.54±0.08 0.25±0.05模型組 2.80±0.84##0.53±0.12 0.24±0.05醚提組 1.2 1.43±0.18**0.57±0.13 0.26±0.03醇提組 1.7 1.83±0.58*0.61±0.05 0.32±0.10水提組 2.8 2.03±0.71 0.57±0.07 0.35±0.11*混合組 2.55 1.06±0.16**0.54±0.18 0.49±0.20**熊去氧膽酸 0.056 1.01±0.23***0.60±0.17 0.21±0.32

    4 討論

    隨著人們生活水平的提高,肝膽疾病發(fā)病率不斷上升?,F(xiàn)代醫(yī)學在治療膽囊炎、膽結(jié)石、消化不良等方面均需要利膽、抗炎、鎮(zhèn)痛和溶石作用,主要用去氧膽酸、消炎利膽片、熊去氧膽酸、環(huán)丙沙星[6]等,但用藥時間長,大量使用有可能損害肝臟,停藥后結(jié)石有可能復發(fā)。中醫(yī)將此類疾病歸于肝郁氣滯、濕熱證,多采用清熱利濕的藥物治療,應用較多的如茵陳、大黃、金錢草、梔子及威靈仙等,中藥復方有茵陳蒿湯、清開靈、舒肝利膽排石口服液。但該類疾病也涉及有些病人是因虛寒而致病,臨床上忽視了這方面的對證治療。蓽澄茄是一味溫里藥,對于它的研究,對因虛寒而致病的患者有積極的臨床意義。豚鼠膽結(jié)石形成模型實驗發(fā)現(xiàn),蓽澄茄不同極性提取物都有抑制豚鼠膽結(jié)石形成作用。不同極性提取物都能夠增加膽結(jié)石豚鼠膽囊中的膽汁量,降低膽汁中的總膽紅素和膽固醇含量。不同極性提取物均具有溶石、利膽、抗炎及鎮(zhèn)痛作用,相比較:醚提物的作用最強,醇提物次之?;寄懩已住⒛懝苎缀湍懯Y的患者有望采用蓽澄茄制劑進行治療,而我們所做鎮(zhèn)痛抗炎及其抗菌作用的研究將有助于消除膽道炎癥,改善其癥狀。

    [1]楊華,易紅.中藥膽結(jié)石直接溶解劑的實驗與臨床研究進展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2006,13(5):90-91,105.

    [2]李健,楊卓欣,張永斌,等.針藥預防膽固醇性膽囊結(jié)石的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2006,13(12):35-36.

    [3]姜志坑,瞿瓊,周文豪,等.金錢對座合劑治療膽石癥的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2007,14(5):339-340.

    [4]周文江,楊幼明,方玉梅,等.豚鼠膽囊膽固醇結(jié)石模型的建立[J].中國實驗動物學雜志,1999,9(4):1999-2001.

    [5]張靜喆,章學林,梁曉強,等.不同中藥對豚鼠膽色素結(jié)石模型的生化學影響[J].中西醫(yī)結(jié)合學報,2008,6(8):856-859.

    [6]李震,常保生,蔣德安.環(huán)丙沙星治療膽道疾病臨床觀察[J].西北藥學雜志,2000,15(4):212.

    Effect of various Litseae fructus extracts on experimental gallstone and biochemical index in guinea pigs

    ZHANG Xiaoli1,ZHANG Tao2,CHEN Ruiming1,ZHANG Yahong1,JIANG Shanshan1,LI Fang1,CHAI Yan1,ZHAGN Tian3
    (1.Institute of Medicine,Shaanxi Provincial Academy of Traditional Chinese Medicine,Xi’an 710003,China;2.Qinghuaderen Xi’an Pharmaceutical Limited Company,Xi’an 710043,China;3.School of Pharmacy,China Pharmaceutical University,Nanjing 211198,China)

    Objective To investigate the effects of various Litseae fructus extracts on experimental gallstone in guinea pigs.Method Gallstone guinea pigs model was established and different extracts were administered by ig..The rate of gallstone formation and the indexes including plasma lipids and biliary component were measured and compared.Results The Litseae fructus extracts with different polarity,such as ether extract 1.2g·kg-1,alcoholic extract 1.7g·kg-1,water extract 2.8g·kg-1,and mixture2.55g·kg-1,can inhibit the formation of gallstone in guinea pigs,increase the amount of bile in the gallbladder.Ether extract 1.2g·kg-1decreased the contents of T-Bil and TC in bile,and the concentration of Ca2+.Water extract 2.8g·kg-1and mixture 2.55g·kg-1decreased the contents of TC in bile.Alcoholic extract 1.7g·kg-1decreased the contents of TC in blood.Mixture 2.55g·kg-1increased the high density protein in blood.The effect of ether extract was the strongest and the next was the alcohol extract.Conclusion The Litseae fructus extracts,especially ether extracts,could be used as therapeutic agents for cholecystitis,cholangitis and cholelithiasis.

    Litseae fructus extracts;cholelithiasis;plasma lipid;biliary component.

    10.3969/j.issn.1004-2407.2015.04.016

    R965

    A

    1004-2407(2015)04-0376-03

    2014-12-18)

    陜西省中醫(yī)藥管理局科研項目(編號:2007-63)

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