短時(shí)受精在體外受精技術(shù)中的臨床探討

楊世俊楚雄州人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，云南楚雄 675000

短時(shí)受精在體外受精技術(shù)中的臨床探討

楊世俊
楚雄州人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，云南楚雄 675000

目的探討觀察短時(shí)受精在體外受精技術(shù)中的臨床效果。方法整群選取2011年10月1日—2014年5月31日在該院接受體外受精的245例不孕患者，入組患者夫婦進(jìn)行體格檢查后，均行超促排卵、取卵，將患者隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對照組，其中對照組120例采用傳統(tǒng)常規(guī)受精方法，實(shí)驗(yàn)組125例采用短時(shí)受精方法，觀察兩組患者治療的臨床效果。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組的卵裂率、正常受精率和優(yōu)質(zhì)胚胎率與對照組的無明顯差異，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)組患者的妊娠率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論短時(shí)受精在體外受精大大的提高了卵子的利用率，臨床上在不影響周期正常受精率的前提下提供了更多的優(yōu)質(zhì)胚胎，在臨床上可以廣泛運(yùn)用。

短時(shí)受精；體外受精；優(yōu)質(zhì)胚胎率

近幾年來隨著不健康食物、輻射種類的增多，更多的男女易患上不孕不育[1]。越來越多的醫(yī)生學(xué)者致力于研究體外受精技術(shù)，為了提高胚胎的優(yōu)質(zhì)數(shù)量和臨床妊娠率，防止受精周期完全失敗，受精周期的長短在其中起到了關(guān)鍵的作用[2]。越來越多的醫(yī)院采用了短時(shí)受精方法，由于在國內(nèi)短時(shí)受精還在探討階段，該院為進(jìn)一步探討觀察并分析短時(shí)受精在體外受精技術(shù)中的臨床效果，特整群選取2011年10月1日—2014年5月 31日年間收治的245例不孕患者的臨床資料，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

整群選取在該院接受體外受精治療的245例患有不孕不育的患者，入組患者夫婦進(jìn)行體格檢查后均確診為為不孕患者，并將其隨機(jī)分成兩組。

其中對照組120例采用傳統(tǒng)受精，女方年齡21～42歲，平均年齡(29.2±7.3)歲，男方精液正常的患者75例，精液不正常的患者45例，不孕年限2～9年，平均不孕年限（4.2±1.3）年；實(shí)驗(yàn)組125例，女方年齡21～42歲，平均年齡(28.9±7.2)歲，男方精液正常的患者80例，精液不正常的患者45例，不孕年限2～9年，平均不孕年限（4.8±1.2）年。女方不孕因素包括輸卵管，子宮內(nèi)膜異位綜合征，排卵障礙等。

1.2 治療方法

245例女患者均需要在最少有一個(gè)卵泡直徑在18 mm以上或者2～3個(gè)卵泡直徑＞16 mm時(shí)讓患者停用Gn，對患者實(shí)施劑量為5 000～10 000 U的HCG肌肉注射，經(jīng)過36 h后，女方經(jīng)陰道B超下取卵。得到的卵子需要醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行清洗，最后將其放入濃度為10%的HTF培養(yǎng)液中，保持溫度在37℃左右，通入5%的二氧化碳，2～4后進(jìn)行受精；305例男方患者則采用手淫提取精液的方法獲得精液，將獲得的精液置于一次性無菌杯子中，對采集到的精液嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析和巴氏染色法進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查，最后將制備好的精子懸液置于溫室中培養(yǎng)，加入含有卵-冠丘-顆粒細(xì)胞復(fù)合物的培養(yǎng)液滴，將其濃度調(diào)整為（5～10）×105/mL,保持溫度在37℃左右，通入5%的二氧化碳，30 min后用于加精。實(shí)驗(yàn)組采用短時(shí)受精，將置于溫度37℃，通入5%CO2后培養(yǎng)2～4 h以后的卵母細(xì)胞受精，受精精子的濃度是2萬條/每卵，5～6 h精卵共孵即去除卵丘細(xì)胞；對照組組則采用常規(guī)受精，將置于溫度37℃，通入5%CO2后培養(yǎng)2～4 h以后的卵母細(xì)胞受精，受精精子的濃度是2萬條/每卵，16～18精卵共孵以后方可去除卵丘細(xì)胞，為方便了解確認(rèn)卵母細(xì)胞受精狀況，醫(yī)護(hù)人員應(yīng)觀察原核和極體的數(shù)目方能獲知。

1.3 胚胎發(fā)育及妊娠評定標(biāo)準(zhǔn)

觀察并記錄卵裂球數(shù)、大小、形態(tài)、均勻與否及是否出現(xiàn)碎片及發(fā)育的速率，根據(jù)以上指標(biāo)來對胚胎質(zhì)量進(jìn)行評估。優(yōu)質(zhì)胚胎判定標(biāo)準(zhǔn)[3]：①以正常速度發(fā)生卵裂，2 d后卵裂球數(shù)量大于3個(gè)或3 d后最少有6個(gè)細(xì)胞；②卵裂求的形態(tài)均勻或大小不均，且出現(xiàn)的無核碎片＜20%的胚胎。為35歲以下患者移植2～3枚優(yōu)質(zhì)胚胎，14 d后進(jìn)行妊娠檢測確定妊娠，在移植后35 d超聲來監(jiān)測心血管波動并觀察妊娠囊，確定為臨床妊娠。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

統(tǒng)計(jì)分析時(shí)采用SPSS 17.0軟件分析，計(jì)數(shù)資料采用（n，%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組卵裂和正常受精率比較

實(shí)驗(yàn)組的卵裂率和正常受精率與對照組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 卵裂和正常受精率比較(%)

2.2 兩組優(yōu)質(zhì)胚胎率及妊娠率比較

實(shí)驗(yàn)組的優(yōu)質(zhì)胚胎率高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)組妊娠率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組優(yōu)質(zhì)胚胎率及妊娠率比較(%)

3 討論

不孕不育是在現(xiàn)代生活中比較常見的疾病，多發(fā)于長時(shí)間處于高輻射和高污染環(huán)境的男女，該病雖不危及患者生命安全，但嚴(yán)重影響患者家庭幸福且降低了患者的生活質(zhì)量，患者無法正常懷孕[4-5]。因此更多的醫(yī)生學(xué)者致力于研究如何提高體外受精技術(shù)，深入了解研究兩種受精方式導(dǎo)致的優(yōu)質(zhì)胚胎率及妊娠率的區(qū)別，提高體外受精的優(yōu)質(zhì)胚胎率和妊娠率，由此來提高體外受精的質(zhì)量[6-7]。傳統(tǒng)受精由于傳統(tǒng)受精組卵子和高密度精子長時(shí)間的作用，精子在代謝過程中會導(dǎo)致代謝物堆積，在培養(yǎng)過程中，一些已經(jīng)死亡的精子和加入培養(yǎng)液中的顆粒細(xì)胞也會和精子同時(shí)吸取培養(yǎng)液中的營養(yǎng)，而使得卵子也受到這些因素的影響，可能導(dǎo)致卵子營養(yǎng)供給不足[8]。此外顆粒細(xì)胞、精子在代謝過程中所產(chǎn)生的一些代謝物，使細(xì)胞膜的流動性受到影響，由于脂肪酸過氧化會間接導(dǎo)致胚胎的分裂、發(fā)育、孵出與植入不能夠正常進(jìn)行[9]。因此短期受精在受精過程中不會影響體外受精的卵裂率和和正常受精率，還能增加體外受精的優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)目。

實(shí)驗(yàn)組卵裂率（91.54%）和正常受精率（62.82%）與對照組（92.91%）、（63.19%）無明顯差異，實(shí)驗(yàn)組的優(yōu)質(zhì)胚胎率（67.63%）稍高于對照組（65.76%），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。短時(shí)受精組精卵孵育的時(shí)間短，減少了一些可能的不利胚胎發(fā)育的因素優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)目的增加，從而可能提高周期累積妊娠率[10]。實(shí)驗(yàn)組妊娠率（62.40%）明顯高于對照組（25.83%），李娜等[11]人為探討短時(shí)受精與過夜受精對胚胎質(zhì)量的影響，將短時(shí)受精組40個(gè)周期的精卵孵育5 h；常規(guī)受精組40個(gè)周期精卵孵育16～18 h，結(jié)果顯示，兩組的正常受精率、卵裂率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但短時(shí)受精組的優(yōu)質(zhì)胚胎率、妊娠率高于常規(guī)受精組，且組間比較差異顯著，該組研究結(jié)論與之吻合。

綜上所述，短時(shí)受精在體外受精大大的提高了卵子的利用率，臨床上在不影響周期正常受精率的前提下提供了更多的優(yōu)質(zhì)胚胎，在臨床上可以廣泛運(yùn)用[15]。

[1]刁英,楊智敏,譚兵兵,等.短時(shí)受精在體外受精-胚胎移植治療周期中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國婦幼保健,2010,25(15): 2104-2106.

[2]李海仙，馬文敏，黃建洲,等.短時(shí)受精對體外受精中多精受精率的影響[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2011,20(2)：85-87.

[3]彭兆鋒,孫瑩璞,戴善軍,等.縮短受精前卵母細(xì)胞培養(yǎng)和精卵共孵育時(shí)間對胚胎質(zhì)量的影響[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2010，19(5)：372-373．

[4]紀(jì)冰,馬學(xué)工,黨小紅.短時(shí)受精在體外受精胚胎移植中的應(yīng)用[J].青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),20121,44(4)：281-283..

[5]彭兆鋒,孫瑩璞,戴善軍,等.縮短受精前卵母細(xì)胞培養(yǎng)和精卵共孵育時(shí)間對胚胎質(zhì)量的影響[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展, 2010,19（5）:372-373.

[6]林春麗,洪新如,陳國勇,等.短時(shí)受精在輔助生殖技術(shù)中的應(yīng)用研究[J].福建醫(yī)藥雜志,2012,34（3）:27-29.

[7]方偉芬,牛向麗,孫燕萍,等.短時(shí)受精后補(bǔ)救ICSI的臨床應(yīng)用研究[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志,2010,18(11)：681-682.

[8]屈宗銀,王鳳英,李玉艷,等.短時(shí)受精對體外受精結(jié)果的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,32（16）:1785-1787.

[9]刁英,楊智敏,譚兵兵,等.短時(shí)受精并即刻脫顆粒細(xì)胞對IVF—ET治療周期的影響[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志,2011, 19（2）:106-108,122.

[10]孫瑩璞,金海霞.短時(shí)受精利弊與多精受精的避免[J].生殖醫(yī)學(xué)通訊,2011,7（1）:18-19.

[11]李娜,苗聰秀,向秋,等.短時(shí)受精在體外受精的臨床應(yīng)用[J].華夏醫(yī)學(xué),2011,24（3）:246-248.

Clinical Observation of Short-term Fertilization Applied to in Vitro Fertilization Technique

YANG Shi-jun
Department of Reproductive Medicine,Chuxiong Yi Autonomous Prefecture People's Hospital,Chuxiong,Yunnan Province, 675000 China

ObjectiveTo investigate the clinical effect of short-term fertilization in in vitro fertilization technique.MethodsA total of 245 infertility cases underwent in vitro fertilization in our hospital from 2011 October 1st to 2014 May 31st were selected.Superovulation and taking ovum were performed in the selected couples after the physical examination.The patients were randomly divided into the experimental group(125 cases)and the control group(120 cases).Patients in the control group were treated by the traditional routine fertilization method,while those in the experimental group were treated by the short-term fertilization.And the clinical effects of the two groups were observed.ResultsThe differences in the cleavage rate,normal fertilization rate,and high-quality embryo rate between the experimental group and the control group were not statistically significant(P＞0.05).The rate of pregnancy in the experimental group was significantly higher than that in the control group with statistically significant difference(P＜0.05).ConclusionShort-term fertilization applied to in vitro fertilization greatly improves the utilization rate of the ovum,so that more high-quality embryos can be provided without affecting the normal fertilization rate clinically,so it can be widely used.

Short-term fertilization;In vitro fertilization;High-quality embryo rate

R725

A

1674-0742（2015）11（c）－0032-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2015.33.032

2015-08-15）

楊世俊(1969-)，女，云南云縣人，本科，副主任醫(yī)師，主要從事婦科生殖內(nèi)分泌，輔助生殖技術(shù)及宮腹腔鏡微創(chuàng)手術(shù)方面的工作。