短時受精在體外受精技術中的臨床觀察

楊世俊

[摘要] 目的 探討觀察短時受精在體外受精技術中的臨床效果。方法 整群選取2011年10月1 日—2014年5月31日在該院接受體外受精的245例不孕患者，入組患者夫婦進行體格檢查后，均行超促排卵、取卵，將患者隨機分成實驗組和對照組，其中對照組120例采用傳統(tǒng)常規(guī)受精方法，實驗組125例采用短時受精方法，觀察兩組患者治療的臨床效果。結果 實驗組的卵裂率、正常受精率和優(yōu)質胚胎率與對照組的無明顯差異，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；實驗組患者的妊娠率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 結論 短時受精在體外受精大大的提高了卵子的利用率，臨床上在不影響周期正常受精率的前提下提供了更多的優(yōu)質胚胎，在臨床上可以廣泛運用。

[關鍵詞] 短時受精；體外受精；優(yōu)質胚胎率

[中圖分類號] R725 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2015）11（c）-0032-03

[Abstract] Objective To investigate the clinical effect of short-term fertilization in in vitro fertilization technique. Methods A total of 245 infertility cases underwent in vitro fertilization in our hospital from 2011 October 1st to 2014 May 31st were selected. Superovulation and taking ovum were performed in the selected couples after the physical examination. The patients were randomly divided into the experimental group（125 cases） and the control group（120 cases）. Patients in the control group were treated by the traditional routine fertilization method， while those in the experimental group were treated by the short-term fertilization. And the clinical effects of the two groups were observed. Results The differences in the cleavage rate， normal fertilization rate， and high-quality embryo rate between the experimental group and the control group were not statistically significant（P>0.05）. The rate of pregnancy in the experimental group was significantly higher than that in the control group with statistically significant difference（P<0.05）. Conclusion Short-term fertilization applied to in vitro fertilization greatly improves the utilization rate of the ovum， so that more high-quality embryos can be provided without affecting the normal fertilization rate clinically， so it can be widely used.

[Key words] Short-term fertilization； In vitro fertilization； High-quality embryo rate

近幾年來隨著不健康食物、輻射種類的增多，更多的男女易患上不孕不育[1]。越來越多的醫(yī)生學者致力于研究體外受精技術，為了提高胚胎的優(yōu)質數量和臨床妊娠率，防止受精周期完全失敗，受精周期的長短在其中起到了關鍵的作用[2]。越來越多的醫(yī)院采用了短時受精方法，由于在國內短時受精還在探討階段，該院為進一步探討觀察并分析短時受精在體外受精技術中的臨床效果，特整群選取2011年10月1日—2014年5月31日年間收治的245例不孕患者的臨床資料，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

整群選取在該院接受體外受精治療的245例患有不孕不育的患者，入組患者夫婦進行體格檢查后均確診為為不孕患者，并將其隨機分成兩組。

其中對照組120例采用傳統(tǒng)受精，女方年齡21～42歲，平均年齡（29.2±7.3）歲，男方精液正常的患者75例，精液不正常的患者45例，不孕年限2～9年，平均不孕年限（4.2±1.3）年；實驗組125例，女方年齡21～42歲，平均年齡（28.9±7.2）歲，男方精液正常的患者80例，精液不正常的患者45例，不孕年限2～9年，平均不孕年限（4.8±1.2）年。女方不孕因素包括輸卵管，子宮內膜異位綜合征，排卵障礙等。

1.2 治療方法

245例女患者均需要在最少有一個卵泡直徑在18 mm以上或者2～3個卵泡直徑>16 mm時讓患者停用Gn，對患者實施劑量為5 000～10 000 U的HCG肌肉注射，經過36 h后，女方經陰道B超下取卵。得到的卵子需要醫(yī)護人員進行清洗，最后將其放入濃度為10%的HTF培養(yǎng)液中，保持溫度在37 ℃左右，通入5%的二氧化碳，2～4后進行受精；305例男方患者則采用手淫提取精液的方法獲得精液，將獲得的精液置于一次性無菌杯子中，對采集到的精液嚴格按照相關標準進行分析和巴氏染色法進行形態(tài)學檢查，最后將制備好的精子懸液置于溫室中培養(yǎng)，加入含有卵-冠丘-顆粒細胞復合物的培養(yǎng)液滴，將其濃度調整為（5～10）×105/mL，保持溫度在37 ℃左右，通入5%的二氧化碳，30 min后用于加精。實驗組采用短時受精，將置于溫度37 ℃，通入5%CO2后培養(yǎng)2～4 h以后的卵母細胞受精，受精精子的濃度是2萬條/每卵，5～6 h精卵共孵即去除卵丘細胞；對照組組則采用常規(guī)受精，將置于溫度37 ℃，通入5%CO2后培養(yǎng)2～4 h以后的卵母細胞受精，受精精子的濃度是2萬條/每卵，16～18精卵共孵以后方可去除卵丘細胞，為方便了解確認卵母細胞受精狀況，醫(yī)護人員應觀察原核和極體的數目方能獲知。

1.3 胚胎發(fā)育及妊娠評定標準

觀察并記錄卵裂球數、大小、形態(tài)、均勻與否及是否出現(xiàn)碎片及發(fā)育的速率，根據以上指標來對胚胎質量進行評估。優(yōu)質胚胎判定標準[3]：①以正常速度發(fā)生卵裂，2 d后卵裂球數量大于3個或3 d后最少有6個細胞；②卵裂求的形態(tài)均勻或大小不均，且出現(xiàn)的無核碎片<20%的胚胎。為35歲以下患者移植2～3枚優(yōu)質胚胎，14 d后進行妊娠檢測確定妊娠，在移植后35 d超聲來監(jiān)測心血管波動并觀察妊娠囊，確定為臨床妊娠。

1.4 統(tǒng)計方法

統(tǒng)計分析時采用SPSS 17.0軟件分析，計數資料采用（n，%）表示，進行χ2檢驗。

2 結果

2.1 兩組卵裂和正常受精率比較

實驗組的卵裂率和正常受精率與對照組，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 兩組優(yōu)質胚胎率及妊娠率比較

實驗組的優(yōu)質胚胎率高于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；實驗組妊娠率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

3 討論

不孕不育是在現(xiàn)代生活中比較常見的疾病，多發(fā)于長時間處于高輻射和高污染環(huán)境的男女，該病雖不危及患者生命安全，但嚴重影響患者家庭幸福且降低了患者的生活質量，患者無法正常懷孕[4-5]。因此更多的醫(yī)生學者致力于研究如何提高體外受精技術，深入了解研究兩種受精方式導致的優(yōu)質胚胎率及妊娠率的區(qū)別，提高體外受精的優(yōu)質胚胎率和妊娠率，由此來提高體外受精的質量[6-7]。傳統(tǒng)受精由于傳統(tǒng)受精組卵子和高密度精子長時間的作用，精子在代謝過程中會導致代謝物堆積，在培養(yǎng)過程中，一些已經死亡的精子和加入培養(yǎng)液中的顆粒細胞也會和精子同時吸取培養(yǎng)液中的營養(yǎng)，而使得卵子也受到這些因素的影響，可能導致卵子營養(yǎng)供給不足[8]。此外顆粒細胞、精子在代謝過程中所產生的一些代謝物，使細胞膜的流動性受到影響，由于脂肪酸過氧化會間接導致胚胎的分裂、發(fā)育、孵出與植入不能夠正常進行[9]。因此短期受精在受精過程中不會影響體外受精的卵裂率和和正常受精率，還能增加體外受精的優(yōu)質胚胎數目。

實驗組卵裂率（91.54%）和正常受精率（62.82%）與對照組（92.91%）、（63.19%）無明顯差異，實驗組的優(yōu)質胚胎率（67.63%）稍高于對照組（65.76%），但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。短時受精組精卵孵育的時間短，減少了一些可能的不利胚胎發(fā)育的因素優(yōu)質胚胎數目的增加，從而可能提高周期累積妊娠率[10]。實驗組妊娠率（62.40%）明顯高于對照組（25.83%），李娜等[11]人為探討短時受精與過夜受精對胚胎質量的影響，將短時受精組40個周期的精卵孵育5 h；常規(guī)受精組40個周期精卵孵育16～18 h，結果顯示，兩組的正常受精率、卵裂率差異無統(tǒng)計學意義，但短時受精組的優(yōu)質胚胎率、妊娠率高于常規(guī)受精組，且組間比較差異顯著，該組研究結論與之吻合。

綜上所述，短時受精在體外受精大大的提高了卵子的利用率，臨床上在不影響周期正常受精率的前提下提供了更多的優(yōu)質胚胎，在臨床上可以廣泛運用[15]。

[參考文獻]

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（收稿日期：2015-08-15）