金鈴子散及單味藥鎮(zhèn)痛抗炎作用的比較*

曹麗娟 ，韓 超，王雙華

(天津市中藥飲片廠有限公司，天津 300110)

金鈴子散方出自金元四大家之一、寒涼派代表劉完素的《素問病機(jī)氣宜保命集》，由延胡索、川楝子(金鈴子)兩味藥組成，以川楝子清熱行氣，泄氣分之熱而止痛;延胡索活血行氣，行血分之滯而止痛。服本方可使肝郁解而熱自清，氣血行而疼痛止，為治療肝郁化火諸痛證的代表方劑。金鈴子散臨床上廣泛用于腸胃疾病的治療，對(duì)慢性胃炎、消化性潰瘍、功能性消化不良、胃癌等病癥均有較好療效，目前主要是取其止痛之用，延胡索與川楝子配伍后可起到協(xié)同增效作用［1］。本研究旨在觀察并比較金鈴子散及其單味藥對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛、抗炎作用的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠150只，體重(20±2)g，雌性100只，雄性50只，由天津市山川紅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào):SCXK(津)2009－0001。根據(jù)實(shí)驗(yàn)和性別分籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水。

1.2 主要儀器 HH－S型水浴鍋(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司);電子天平(天津市天馬公司)。

1.3 試劑與藥材 阿司匹林(廣東百澳藥業(yè)有限公司，批號(hào)20070501);生理鹽水(山東華魯制藥有限公司，批號(hào)0100530);米醋;延胡索(產(chǎn)地浙江，購于中新藥業(yè)集團(tuán)藥材分公司;經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室馬琳教授鑒定)。川楝子(產(chǎn)自四川，購于天津市中藥飲片廠，批號(hào)1001084;經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室馬琳教授鑒定)。

2 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果

2.1 藥物炮制 醋炙延胡索:取凈延胡索適量，加20%米醋拌勻，稍悶，待米醋被吸盡后，置炒制容器內(nèi)文火炒干，取出。炒制川楝子:取凈川楝子適量，置容器內(nèi)炒制，用中火加熱，炒至表面黃色，取出。

2.2 藥液制備

2.2.1 醋延胡索溶液的制備 稱取醋延胡索適量，加10倍量水煎煮兩次，每次1 h，水煎液過濾后濃縮至1 g/ml備用。

2.2.2 炒川楝子溶液的制備 稱取炒川楝子適量，加10倍量水煎煮兩次，每次1 h，水煎液過濾后濃縮至1 g/ml備用。

2.2.3 金鈴子散溶液的制備 稱取醋延胡索及炒川楝子按1∶1混合均勻，加10倍量水煎煮兩次，每次1 h，水煎液過濾后濃縮至1 g/ml備用。

2.3 給藥劑量 根據(jù)金鈴子散的藥效預(yù)試驗(yàn)，確定動(dòng)物給藥劑量為20 g/kg生藥量。醋延胡索和炒川楝子分別按金鈴子散中同等劑量給藥。

2.4 鎮(zhèn)痛作用

2.4.1 熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng) 取昆明種小鼠50只，體重18～22 g，雌性，隨機(jī)分為5組，每組10只，即生理鹽水組、阿司匹林組、醋延胡索組、炒川楝子組和金鈴子散組。生理鹽水給生理鹽水20 ml/kg，阿司匹林組給阿司匹林，給藥量0.1 g/kg，各給藥組分別按20 g/kg灌胃給藥。將恒溫水浴鍋調(diào)節(jié)至55℃，熱板預(yù)熱10 min，熱板法測(cè)定各組小鼠的正常痛反應(yīng)(舔后足，踢后腿或跳躍)時(shí)間，共測(cè)2次，每次間隔5 min，將兩次痛閾的平均值作為該鼠給藥前的痛閾值。不足15 s舔足或超過60 s未舔足者棄之不用。各組最后一次給藥后0.5 h開始測(cè)定小鼠痛閾值，每隔0.5 h測(cè)定一次，共4次，與給藥前和對(duì)照組比較。若小鼠在熱板上60 s仍無痛覺，立即取出，按60 s計(jì)算。結(jié)果表明單味藥組、金鈴子散組與生理鹽水組比較，對(duì)熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng)具有顯著性差異，單味藥組與金鈴子散組也具有顯著性差異，且金鈴子散組中痛閾值比單味藥組呈增高趨勢(shì)。見表1。

表1 金鈴子散及各單味藥對(duì)熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng)影響(±s，n=10)

表1 金鈴子散及各單味藥對(duì)熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng)影響(±s，n=10)

與生理鹽水組比較，*P ﹤0.05，P ﹤0.01;與金鈴子散組比較，△P ﹤0.05，△△P ﹤0.01

給藥后痛閾值(s)2 h生理鹽水組 － 25.02±3.35 22.61±5.59 24.73±4.77 26.71±組別 劑量(g/kg)給藥前痛閾值(s)給藥后0.5 h 給藥后1 h 給藥后1.5 h 給藥后6.36 31.15 ±7.13阿司匹林組 0.1 22.14 ±3.29 48.78 ±7.75＊＊ 48.85 ±8.60＊＊ 45.02 ±11.69＊＊ 55.31 ±4.64＊＊醋延胡索組 20 23.37 ±4.68 38.18 ±10.14＊＊△ 35.75 ±9.77＊＊△△ 43.66 ±12.30＊＊ 43.54 ±9.83＊＊△炒川楝子組 20 26.47 ±5.11 33.01 ±12.14＊△ 32.95 ±11.17＊△ 35.79 ±11.27＊△ 40.68 ±11.06＊△金鈴子散組 20 26.85±7.60 48.26±11.11＊＊ 50.54±8.34＊＊ 49.20±7.98＊＊ 52.78 ±8.63＊＊

2.4.2 化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng) 取昆明種小鼠50只，體重18～22 g，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，即生理鹽水組、阿司匹林組、醋延胡索組、炒川楝子組和金鈴子散組，編號(hào)，稱重，灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥4 d，生理鹽水組給生理鹽水20 ml/kg，阿司匹林組給阿司匹林，給藥量0.1 g/kg，給藥組按20 g/kg灌胃給藥。給藥后1 h，各鼠腹腔注射1%醋酸溶液0.2 ml，觀察注射后5～15 min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)次數(shù)(腹部?jī)蓚?cè)收縮內(nèi)陷、腹壁下貼、臀部抬高或后肢伸展，即扭體反應(yīng))，計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。鎮(zhèn)痛率(%)=(生理鹽水組平均扭體次數(shù)－給藥組平均扭體次數(shù))/生理鹽水組平均扭體次數(shù)×100%。結(jié)果表明單味藥組、金鈴子散組與生理鹽水組比較，對(duì)化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng)具有顯著性差異，單味藥組與金鈴子散組也具有顯著性差異，且金鈴子散組中鎮(zhèn)痛率較單味藥組呈增高趨勢(shì)。見表2。

2.5 抗炎作用 取昆明種小鼠50只，體重18～22 g，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，即生理鹽水組、阿司匹林組、醋延胡索組、炒川楝子組和金鈴子散組，編號(hào)，稱重，灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥4 d，生理鹽水組給生理鹽水20 ml/kg，阿司匹林組給阿司匹林，給藥量0.1 g/kg，給藥組按20 g/kg灌胃給藥。給藥后1.5 h，將二甲苯0.05 m l均勻涂于小鼠右耳，30 min后處死，用7 mm打孔器分別打下左右耳片，以左右耳重量之差作為腫脹度，計(jì)算腫脹抑制率，腫脹抑制率(%)=(對(duì)照組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度)/對(duì)照組平均腫脹度×100%。結(jié)果表明單味藥組、金鈴子散組與生理鹽水組比較，對(duì)二甲苯致小鼠耳腫腫脹抑制具有顯著性差異，單味藥組與金鈴子散組也具有顯著性差異，且金鈴子散組中腫脹抑制率較單味藥組呈增高趨勢(shì)。見表3。

表2 金鈴子散及各單味藥對(duì)化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng)的影響(±s，n=10)

表2 金鈴子散及各單味藥對(duì)化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng)的影響(±s，n=10)

與生理鹽水組比較，*P﹤0.05，＊＊P﹤0.01;與金鈴子散組比較，△P ﹤0.05，△△P ﹤0.01

組別 劑量(g/kg) 10 min內(nèi)扭體次數(shù) 鎮(zhèn)痛率(%)26.20 ±6.34 －阿司匹林組 0.1 2.90±3.25＊＊ 88.93醋延胡索組 20 13.00±6.32＊＊△△ 50.38炒川楝子組 20 16.70±8.14＊＊△△ 36.26金鈴子散組 20 6.10 ±2.60＊＊76.72生理鹽水組 －

表3 金鈴子散及各單味藥對(duì)二甲苯致小鼠耳腫的影響(±s，n=10)

表3 金鈴子散及各單味藥對(duì)二甲苯致小鼠耳腫的影響(±s，n=10)

與生理鹽水組比較，*P﹤0.05，＊＊P﹤0.01;與金鈴子散組比較，△P ﹤0.05，△△P ﹤0.01

組別 劑量(g/kg) 耳腫脹度(mg) 腫脹抑制率(%)61.96 16.7 ±3.25 －阿司匹林組 0.1 3.52±1.80＊＊ 79.01醋延胡索組 20 8.11±2.54＊＊ 51.64△炒川楝子組 20 10.76±5.69＊＊ 35.84△△金鈴子散組 20 6.38 ±3.14＊＊生理鹽水組 －

3 討論

3.1 金鈴子散臨床用于治療胸、脅、脘腹疼痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌打腫痛等。關(guān)于其方藥組成意義，歷來有很多分析與闡述。李時(shí)珍曾高度評(píng)價(jià)該方:“用之中的，妙不可言，方雖小制，配合存神，卻有取效之功，勿以淡而忽之。”川楝子苦寒，有小毒，泄氣分之熱，理氣止痛;延胡索氣味辛溫，無毒，行血?dú)庵疁?。二藥相配，一寒一溫，一氣一血，合用后能氣行血暢，疼痛自止。?shí)驗(yàn)結(jié)果也表明金鈴子散藥效明顯優(yōu)于單味藥的鎮(zhèn)痛抗炎效果。延胡索中主要成分為生物堿，主要為叔胺與季胺類生物堿，具有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、降壓和抗心率失常作用。有研究表明，川楝子中某些化學(xué)成分對(duì)延胡索中生物堿的溶出率可能具有一定的促進(jìn)作用，延胡索與川楝子中的一些化學(xué)成分所發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)對(duì)延胡索中所含生物堿的成分有一定的影響［1］，大量的臨床檢驗(yàn)及觀察發(fā)現(xiàn)，金鈴子散在理氣止痛方面的藥效較單味藥顯著，這可能就是由于上述因素造成的，這在中醫(yī)方劑配伍理論中解釋為協(xié)同增效作用，其原理有待于進(jìn)一步的藥理實(shí)驗(yàn)研究。

3.2 現(xiàn)代金鈴子散臨床應(yīng)用多為炮制品，清代《藥品辨義》中敘述“用醋炒治產(chǎn)后血暈，暴血上沖，胸膈胃氣痛，小腹肝氣痛;酒炒行血，主女人月候不調(diào)，崩中淋瘕，產(chǎn)后惡露;生用破血，炒用調(diào)血，凡血凝滯者，悉可治之”?，F(xiàn)代研究表明，延胡索止痛的有效成分為生物堿，其中延胡索甲素、乙素和丑素均有明顯的止痛作用，尤以乙素的作用最強(qiáng)。醋炙能使延胡索中游離生物堿與醋酸結(jié)合，生成易溶于水的醋酸鹽，在煎劑中易于煎出［2］，與先賢所云“醋制注肝而止痛”之炮制理論吻合。李東垣認(rèn)為川楝子“主下部腹痛，心暴痛”，現(xiàn)代資料報(bào)道，川楝子炒后毒性降低，緩和苦寒之性，以免損傷胃氣，增強(qiáng)行氣止痛功能。川楝子的毒性成分可能為毒性蛋白，加熱后可能使毒性蛋白變性［3］。由此可以推測(cè)，兩者合用可能具有增效減毒的作用，其原理尚需進(jìn)一步的研究。

1 劉生肸，劉喜平，董鈺明.延胡索與川楝子配伍中總生物堿含量的研究.中醫(yī)兒科雜志，2006，2(5):42

2 葉定江.中藥炮制學(xué).上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1996:164

3 成都中醫(yī)學(xué)院主編.中藥炮制學(xué).上海:上海科技出版社，1980:44