血清人附睪蛋白4和糖類抗原125對(duì)診斷上皮性卵巢癌的比較研究

摘要：目的 比較人附睪蛋白4（HE4）與糖類抗原125（CA-125）對(duì)診斷上皮性卵巢癌的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 分別采用酶聯(lián)免疫法和電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)32例上皮性卵巢癌和62例良性卵巢腫瘤患者（良性組）血清HE4及CA-125水平，ROC曲線比較分析二者對(duì)上皮性卵巢癌診斷的準(zhǔn)確性。結(jié)果 卵巢癌患者血清HE4及CA-125水平中位數(shù)顯著高于良性組（P<0.05）；良性組中卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者的CA-125水平中位數(shù)顯著高于其他良性腫瘤患者（P=0.03），但HE4無(wú)明顯變化（P=0.49）。ROC曲線分析顯示，HE4和CA-125對(duì)卵巢癌的最佳診斷切點(diǎn)分別為76.0pmol/L、37.45 U/mL；血清HE4、CA-125用于卵巢癌診斷時(shí)ROC曲線下面積分別為0.93、0.85，兩者比較有顯著性差異。結(jié)論 與CA-125相比，HE4對(duì)診斷上皮性卵巢癌具有更好的準(zhǔn)確性和可信度。

關(guān)鍵詞：附睪蛋白4；糖類抗原125；上皮性卵巢癌；比較研究

卵巢癌是婦科最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，起病隱匿，早期臨床癥狀不明顯。據(jù)2003～2007年我國(guó)腫瘤登記地區(qū)資料表明，城鄉(xiāng)卵巢癌發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢(shì)[1]。但卵巢癌若能被早診斷和早治療，則患者的5年生存率可升高至94%[2]。因此，尋找有效的早期診斷卵巢癌的血清腫瘤標(biāo)志物有極其重要的意義。目前，卵巢癌術(shù)前診斷和病情監(jiān)測(cè)的首選血清標(biāo)志物是糖類抗原125（CA-125），但特異性低，限制了其臨床應(yīng)用。人附睪蛋白4（HE4）是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外卵巢癌研究的熱點(diǎn)，但有報(bào)道[3，4]，HE4不僅在卵巢癌組織表達(dá)，在其他腫瘤如肺腺癌、腎癌、胰腺癌等也有表達(dá)。為了明確血清HE4對(duì)卵巢癌的診斷意義，本研究擬通過(guò)比較患者血清HE4和CA-125水平變化及二者的診斷敏感度和特異性，進(jìn)而闡述HE4在卵巢癌早期診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2010年12月～2013年8月本院婦產(chǎn)科收治的卵巢疾病患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者經(jīng)細(xì)胞和病理學(xué)確診，并按國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（ FIGO，2000年）修訂的手術(shù)-病理標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期；除卵巢腫塊無(wú)其他婦科疾??；在6個(gè)月內(nèi)未接受過(guò)任何激素類或免疫抑制劑類藥物的治療；心、肝、肺、腎等重要臟器無(wú)異常；本人和家屬知情、同意，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2病例資料 納入病例為94例，分卵巢癌組和良性卵巢腫瘤組（ 良性組）。其中上皮性卵巢癌患者32例，年齡29～71歲，平均40.5歲，包括漿液性囊腺癌16例、透明細(xì)胞癌5例、黏液性囊腺癌5例、混合型上皮癌4例、子宮內(nèi)膜樣癌2例，Ⅰ-Ⅳ期分別為6、4、20、2例；良性卵巢腫瘤患者62例，年齡26～71歲，平均年齡39.1歲，包括卵巢子宮內(nèi)膜異位癥23例、成熟畸胎瘤16例、黏液性囊腺瘤8例、漿液性囊腺瘤8例、非特異性腫瘤7例。兩組在年齡上比較差異無(wú)顯著性（P>0.05）。

1.3方法 所有標(biāo)本在患者未經(jīng)任何檢查治療前采集，常規(guī)分離血清，儲(chǔ)存-20℃冰箱待測(cè)。血清HE4采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定，試劑購(gòu)自美國(guó)富吉瑞必歐診斷公司。血清CA-125采用羅氏E170電化學(xué)化光免疫分析儀及其配套試劑測(cè)定。上述操作均嚴(yán)格按照試劑盒和儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0完成所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，本組數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布，計(jì)量資料采用中位數(shù)（間距）表示，組間計(jì)量資料中位數(shù)的比較采用符號(hào)秩和檢驗(yàn)，認(rèn)為P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。繪制ROC曲線，確定HE4和CA-125的診斷臨界點(diǎn)，并比較兩者的ROC下面積（AUC）。

2 結(jié)果

2.1血清HE4和CA-125水平比較 卵巢癌患者的HE4和CA-125水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者（CA-125： 394.1 U/mL vs. 22.7 U/mL； HE4： 56.7pmol/L vs. 18.5pmol/L； P<0.05）；良性組內(nèi)卵巢子宮內(nèi)膜異位癥（內(nèi)異癥）患者的CA-125水平明顯高于其他良性腫瘤患者（31.95 U/mL vs. 17.9 U/ mL， P=0.03），而HE4水平無(wú)明顯變化（19.0pmol/L vs. 18.2pmol/L， P=0.49）；但卵巢癌患者的HE4和CA-125水平均明顯高于卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者（CA-125， P=0.004； HE4， P=0.001）。見(jiàn)表1。

2.2血清CA-125和HE4的ROC分析比較 本研究以良性卵巢腫瘤組CA-125和HE4的ROC下面積（AUC）為參照，則卵巢癌組CA-125和HE4的相對(duì)ROC下AUC分別為0.85、0.93，兩者比較差異有顯著性（P<0.001）；計(jì)算Youden指數(shù)，以Youden指數(shù)最大的切點(diǎn)為臨界點(diǎn)，此時(shí)，HE4和CA-125對(duì)卵巢癌的最佳診斷切點(diǎn)分別為76.0pmol/L、37.45 U/mL，及其對(duì)應(yīng)的靈敏度和特異度分別為78.1%、86.5%和84.4%、67.4%。見(jiàn)表2、圖1。

圖1 HE4和CA-125診斷卵巢癌的ROC曲線

3 討論

由于卵巢的胚胎發(fā)育、組織解剖及內(nèi)分泌功能較復(fù)雜，早期癥狀、體征不典型，并且各項(xiàng)輔助檢查亦難以發(fā)現(xiàn)小的病灶，錯(cuò)過(guò)了最佳治療時(shí)間，所以發(fā)現(xiàn)的時(shí)候大多數(shù)患者已處于晚期、死亡率高而被稱為\"安靜的\"殺手[5]。提高早期診斷率是決定卵巢癌患者生存率最重要的因素，研究資料表明[6]，卵巢癌局限于子宮時(shí)5年生存率為70%～82%，然而，大多數(shù)卵巢癌患者診斷時(shí)已處在疾病的進(jìn)展期，5年生存率僅為15%。

在卵巢癌的診斷中，血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)具有簡(jiǎn)便、創(chuàng)傷小且客觀的優(yōu)點(diǎn)，在腫瘤篩查、診斷、復(fù)發(fā)檢測(cè)及療效判斷等方面應(yīng)用廣泛。目前卵巢癌早期診斷的腫瘤標(biāo)志物主要是CA-125，盡管CA-125在卵巢癌的的診斷中已得到肯定，但是易受其他婦科良性疾病，如子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢良性腫瘤、盆腔炎、早孕、剖腹探查等影響。另外，有資料表明[7，8]，約40%～50%早期卵巢癌的CA125水平不增高，所以CA-125面臨的一個(gè)首要的問(wèn)題就是對(duì)于早期卵巢癌的敏感性過(guò)低和假陽(yáng)性高。本研究結(jié)果顯示，卵巢癌患者的CA-125水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者（394.1 U/mL vs. 22.7 U/mL P<0.05），但是良性組內(nèi)卵巢子宮內(nèi)膜異位癥（內(nèi)異癥）患者的CA-125水平明顯高于其他良性腫瘤患者（31.95 U/mL vs. 17.9 U/ mL， P=0.03），誤診率高達(dá)32.6%，，給良性疾病患者甚至是健康人帶來(lái)不必要的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)以及不必要的侵入性檢查引起的創(chuàng)傷。因此，尋求靈敏度和特異度均高的卵巢癌血清腫瘤標(biāo)志物是臨床的迫切需要。

HE4是由Kirchhoff在人附睪上皮內(nèi)發(fā)現(xiàn)，該基因表達(dá)的是一種酸性蛋白質(zhì)。研究表明，HE4在卵巢癌組織中高表達(dá)，而在癌旁組織、正常組織及良性腫瘤中低表達(dá)[9，10]。 Montagnana等[9]將HE4用于鑒別良、惡性盆腔包塊，對(duì)40例患有良性盆腔包塊的患者和99例患有婦科腫瘤的患者及12例健康對(duì)照者進(jìn)行CA125 和HE4血清分析， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：CA125 和HE4血清水平的中位數(shù)值在卵巢癌中遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于健康對(duì)照者和良性疾病患者，HE4的敏感性和特異性均高于CA125。羅兆芹等[10]應(yīng)用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，結(jié)果顯示HE4診斷卵巢癌的敏感性為75%，95%可信區(qū)間為0.68～0.81；特異性為0.95，95%可信區(qū)間為0.93～0.97；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為0.89，95%可信區(qū)間為0.84～0.95；陰性預(yù)測(cè)值為0.86，95%可信區(qū)間為0.81～0.90。說(shuō)明HE4作為卵巢癌標(biāo)志物應(yīng)用于臨床是有前途的。本組數(shù)據(jù)表明，卵巢癌患者的HE4明顯高于良性卵巢腫瘤患者（HE4： 56.7pmol/L vs. 18.5pmol/L； P<0.05）；良性組內(nèi)卵巢子宮內(nèi)膜異位癥（內(nèi)異癥）患者的HE4水平與其他良性腫瘤患者無(wú)明顯變化（19.0pmol/L vs. 18.2pmol/L， P=0.49）。通過(guò)繪制ROC曲線，發(fā)現(xiàn)以良性卵巢腫瘤組CA-125和HE4的ROC下面積（AUC）為參照，則卵巢癌組CA-125和HE4的相對(duì)ROC下AUC分別為0.85、0.93，兩者比較差異有顯著性（P<0.001）；HE4比CA-125對(duì)卵巢癌的具有更高的診斷價(jià)值，同時(shí)，計(jì)算Youden指數(shù)，以Youden指數(shù)最大的切點(diǎn)為臨界點(diǎn)，此時(shí)，HE4和CA-125對(duì)卵巢癌的最佳診斷切點(diǎn)分別為76.0pmol/L、37.45 U/mL，及其對(duì)應(yīng)的靈敏度和特異度分別為78.1%、86.5%和84.4%、67.4%。兩者相比，雖然HE4靈敏度略低于CA-125，但其特異度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于CA-125，診斷效能得到大大提高，對(duì)臨床應(yīng)用也具有更具體的指導(dǎo)意義。因而，HE4相對(duì)于CA-125而言，在卵巢癌的早期診斷上具有更為廣泛的前景。

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編輯/哈濤