不孵育法微柱凝膠合血的實驗室評價

摘要：目的 探討不孵育法進行微柱凝膠合血對交叉合血結(jié)果的影響，使此法既能保留微柱凝膠合血的操作簡單、結(jié)果易觀察及易保留、靈敏度高等特點，同時又能大大縮短交叉合血的時間。方法 將進行交叉合血的受血者血漿及獻血者0.8%的紅細胞懸液各100ul加入標記有主側(cè)的一次性塑料管中，受血者0.8%的紅細胞懸液及獻血者血漿各100ul加入標記有次側(cè)的一次性塑料管中，輕微振搖混勻（室溫需20℃以上），然后吸入100ul混合后的標本加入微柱凝膠卡的主側(cè)、次側(cè)中，放入TD-3A血型血清學專用離心機離心（離心速度同微柱凝膠法），離心完畢后觀察結(jié)果。結(jié)果 320例交叉配血標本中，有1例配血結(jié)果不相符（主側(cè)或次側(cè)配血結(jié)果不完全一致），其余配血結(jié)果均相符（主側(cè)或次側(cè)配血結(jié)果完全一致）。結(jié)論 不孵育法微柱凝膠合血大大縮短了交叉配血的時間，其結(jié)果與孵育法交叉合血的差異沒有統(tǒng)計學意義。

關(guān)鍵詞：不孵育法；微柱凝膠合血；評價

為探討不孵育法微柱凝膠合血對交叉合血的影響，采用320例臨床交叉合血標本，分別用孵育法和不孵育法兩種方法進行交叉合血，比較其結(jié)果的差異有無統(tǒng)計學意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012～2013年我院臨床輸血治療的患者全血標本，年齡4h～94歲。

1.2實驗材料與設(shè)備 抗人球蛋白交叉配血卡、ABO、RhD血型定型檢測卡（單克隆抗體）、不規(guī)則抗體篩檢卡（均為長春博訊生物技術(shù)有限責任公司產(chǎn)品）及專用器（FYQ免疫微柱孵育器），3D-3A血型血清學專用離心機（長春博研科學儀器有限責任公司生產(chǎn)）。

1.3方法

1.3.1先將320份臨床交叉合血標本用微柱凝膠法進行血型鑒定，然后用微柱凝膠合血法進行同型交叉合血，主側(cè)加入受血者血漿及獻血者0.8%的紅細胞懸液各50ul、次側(cè)加入受血者0.8%的紅細胞懸液及獻血者血漿各50ul，然后放入FYQ免疫微柱孵育器（恒溫37℃）孵育15min，取出放入TD-3A血型血清學專用離心機離心：900rpm，離心2min，1500 rpm，離心3min；離心完畢后觀察結(jié)果，如紅細胞全部沉于配血卡底部，上部清亮則配血相合，如紅細胞漂浮于配血卡上部或者中部或者配血卡中出現(xiàn)溶血均為配血不相合。

1.3.2再將320份上述標本用不孵育法進行微柱凝膠合血，將進行交叉合血的受血者血漿及獻血者0.8%的紅細胞懸液各100ul加入標記有主側(cè)的一次性塑料管中，受血者0.8%的紅細胞懸液及獻血者血漿各100ul加入標記有次側(cè)的一次性塑料管中，輕微振搖混勻（室溫需20℃以上），然后吸入100ul混合后的標本加入微柱凝膠卡的主側(cè)、次側(cè)中，放入TD-3A血型血清學專用離心機離心（離心速度同微柱凝膠法），離心完畢后觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

兩種方法對320例交叉配血標本進行交叉合血，有1例配血結(jié)果不一致，319例配血結(jié)果一致，符合率達99.7%，不符合率為0.3%，通過χ2檢驗[2]，其結(jié)果的差異無統(tǒng)計學意義。（P>0.05 ）兩種方法交叉配血結(jié)果見表1、表2、表3。

兩種方法配血結(jié)果不一致的一例不規(guī)則抗體試驗結(jié)果為陰性、直接抗人球蛋白試驗結(jié)果為+弱陽性。其余不規(guī)則抗體及直接抗人球蛋白陽性結(jié)果均為++以上的陽性。

3 討論

微柱凝膠卡可檢測出標本血清中的IgM和IgG型紅細胞血型完全及不完全抗體[1]，具有標本用量少，靈敏度高，特異性強，操作簡便，結(jié)果可長期保存等優(yōu)點[3]，但由于其比凝聚胺法配血時間長，因此在急診搶救用血進行交叉配血時存在一定的不足.本法通過將受血者及獻血者標本先加入一次性塑料管中混勻，然后加入微柱凝膠卡中直接離心觀察結(jié)果，省去了15min的孵育時間，經(jīng)兩種方法比對，其結(jié)果的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05 ）。由于不孵育微柱凝膠合血法將受血者及獻血者標本加入塑料管中加大了抗原抗體分子的接觸面積，再通過適當?shù)恼駬u，加快了抗原抗體的反應(yīng)[4]，本法雖然縮短了微柱凝膠的合血時間，但操作卻較微柱凝膠法繁瑣（先加入另外的反應(yīng)管中），如果生產(chǎn)廠家改良一下微柱凝膠的反應(yīng)孔，使加入的標本在孔中能快速自動混勻，使抗原抗體的反應(yīng)加快，這樣就可以縮短急診合血的時間。

參考文獻：

[1]吳國光.實用臨床輸血技術(shù)[M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：108.

[2]馬斌榮.醫(yī)學統(tǒng)計學[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：85.

[3]舒象武.應(yīng)用微柱凝膠抗球蛋白技術(shù)進行交叉配血[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2003，13（I）：116-118.

[4]吳健民.免疫學檢驗理論與臨床[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：115.

編輯/哈濤