微柱凝膠卡交叉配血試驗常見問題及處理

微柱凝膠卡交叉配血試驗的原理：在微柱凝膠介質中，紅細胞抗原與相應抗體結合，利用凝膠的空間位阻，經低速離心，凝集的紅細胞懸浮在凝膠上層，而未和抗體結合的紅細胞則沉于凝膠底部（管底尖部）。

微柱凝膠卡交叉配血試驗的優(yōu)點：微柱凝膠實驗（又名微柱凝膠血型卡法）有結果清楚明確、結果穩(wěn)定可保存、靈敏度高、特異性強、可標準化操作、自動化程度高、可檢出IgG抗體、標本用量少、降低錯誤發(fā)生率的優(yōu)點。微柱凝膠卡交叉配血試驗常見問題：

1主側不凝集，次側凝集

1.1微柱凝膠卡交叉配血試驗如果主側不凝集，而次側凝集，原因有：①患者的紅細胞已經包被了抗體（自身抗體，直接抗人球蛋白試驗即DAT陽性反應）。最常見的原因是患者有免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤以及骨科患者。②供血者血漿中存在針對患者紅細胞的抗體。③患者與供血者的ABO血型不合。

1.2處理

1.2.1患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗：患者05%紅細胞懸液50ul加入合血卡主側或次側，立即離心5min（900rpm2min；1500rpm3min。程序已設置好。），取出肉眼判定結果。如果為陽性結果，則說明患者自身紅細胞問題，即患者紅細胞已被致敏，此袋血可以發(fā)出，但報告寫清楚：主側不凝集，次側凝集，患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗陽性，請緩慢輸注。

1.2.2如果患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗為陰性結果，則查找獻血員血漿中是否存在不完全抗體。用獻血員血漿作不完全抗體篩查試驗：08%標準紅細胞懸液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各50ul(1滴)加入相應凝膠管中，再加獻血員血漿50ul，37℃孵育15min，離心5min（900rpm2min；1500rpm3min。程序已設置好。），取出肉眼判斷結果。如果為陽性結果，則說明獻血員血漿中存在不完全抗體，此袋血不能發(fā)出，必須換一袋血再重新合血

1.2.3如果還查找不出原因，則請臨床重新抽取血液標本，用新標本重新合血。

2主側凝集，次側不凝集

2.1微柱凝膠卡交叉配血試驗如果主側凝集，次側不凝集，原因有：①患者或供血者ABO定型不正確，或二者的ABO血型不配合。②某些亞型的特異性非常強。③患者血清中存在同種抗體，與供血者紅細胞上的相應抗原發(fā)生了反應。④供血者紅細胞上已經包被了抗體。⑤患者血清不正常，患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐。

2.2處理①重新鑒定血型，如屬血型錯誤，則重新用同型血合血。②如屬亞型，則此袋血不可以發(fā)出，必須換一袋血重新合血。③如果患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐，則立即停止輸注大分子藥物，2h后重新抽取血液標本，重新合血。

3主次側均凝集

3.1微柱凝膠卡交叉配血試驗如果主次側均凝集，原因主要是ABO血型的錯誤。

3.2處理重新檢測受血者和獻血者的ABO血型（正反定型），必須用ABO、RHD血型定型試劑卡（單克隆抗體）（微柱凝膠卡）作血型鑒定，如果正反定型不符，要按相應方法處理，直到結果能做出合理解釋為止。

注意事項：①抗人球蛋白凝膠合血卡必須標注患者姓名和獻血員血袋號（后4位），一卡可以合三袋血。②微柱凝膠卡的準備：合血前首先觀察微柱凝膠卡的外觀如有干膠、雜質、氣泡不可使用，然后用專用離心機離心3~4min。③紅細胞懸液濃度不可太濃或太淡，應以0.5%~0.8%為宜。④冬天可將生理鹽水37℃孵育后配紅細胞懸液，遇疑難情況，可用溫鹽水洗滌紅細胞后再作血型鑒定和合血。⑤血清、紅細胞懸液應加至卡反應室中。⑥可疑凝集時，則再離心5min，再觀察結果。⑦血清或血漿標本必須充分去纖維蛋白，否則標本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出，阻礙陰性紅細胞沉降，呈假陽性反應或出現(xiàn)混合凝集。若血漿標本上清液有絮狀物或顆粒，可將上清液再離心使纖維蛋白下沉。配紅細胞懸液時將吸頭申入管底部，避免吸入纖維蛋白。供血者血液標本必須離心，合血管的血漿與紅細胞交界處含有較多纖維蛋白，應把交界處剪掉。⑧某些疾病、藥物等可導致交叉配血不合，應加以區(qū)別。⑨異常血清蛋白及細菌可影響結果。⑩微柱凝膠卡應放在18~25℃儲存，應注意防重物壓、防高溫。

總之，微柱凝膠卡交叉配血試驗中發(fā)現(xiàn)有不配合（一側凝集或兩側均凝集），首先應考慮受血者和供血者的ABO定型是否有錯，必須重新鑒定血型，包括RH血型，必須做不規(guī)則抗體篩查試驗。其次，應注意有無特異性同種抗體、特異性未知的同種抗體存在?；颊叩难迦粼谑覝亍?7℃或抗人球蛋白中凝集所有其他紅細胞，造成交叉配血試驗困難時，應及時請示上級主管或主任。必要時請求上級血液中心指導和解決問題。

編輯/孫杰