支原體肺炎患兒細(xì)胞免疫和體液免疫相關(guān)指標(biāo)檢測和分析

摘要：目的 觀察支原體肺炎患兒細(xì)胞免疫和體液免疫功能的變化。方法 將141 例肺炎患兒分為支原體肺炎組80 例、細(xì)菌性肺炎組61 例，并選取同期門診體檢正常小兒90例作為正常對照組，分別檢測三組兒童的T細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）、免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、補(bǔ)體(C3、C4)和循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）。結(jié)果 支原體肺炎組患兒細(xì)胞免疫功能處于低下狀態(tài)，表現(xiàn)為CD8+細(xì)胞比例相對較高(P<0.01)，CD3+、CD4+細(xì)胞比例及CD4+/CD8+比值明顯降低(P<0.01)，支原體肺炎組體液免疫功能明顯異常，表現(xiàn)為IgG，IgA，IgM及血清免疫復(fù)合物水平升高（P<0.01或<0.05），自身免疫功能亢進(jìn)，激活了補(bǔ)體系統(tǒng)，使C3，C4水平明顯增高（P<0.01）。結(jié)論 肺炎支原體感染后比較容易引起患兒多種免疫功能的紊亂。

關(guān)鍵詞：支原體肺炎； 細(xì)胞免疫；體液免疫；兒童

肺炎支原體肺炎是兒童年常見呼吸道感染性疾病，約占小兒肺炎的10%～40%[1]，在流行期間比例會更高。多見于5~9歲的兒童，其癥狀從無到致命的肺炎或肺外疾病，病程遷延且其發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重危脅小兒的身心健康，在臨床已受到越來越多的重視，其發(fā)病機(jī)制除與肺炎支原體感染有直接關(guān)系外，還與患兒本身免疫功紊亂有關(guān)[2]，為了解肺炎支原體肺炎患兒免疫功能變化，我們對95例患兒的液體免疫和T細(xì)胞亞群進(jìn)行了檢測和分析，現(xiàn)報告如下：

1 資料與方法

1.1一般資料選取 2010年10月~2013年10月在我院住院的肺炎患兒和兒科門診體檢正常小兒。分肺炎支原體肺炎組、細(xì)菌性肺炎組和正常對照組。肺炎支原體肺炎組95例，其中男45例，女50例，年齡11個月~14歲，平均年齡5.8歲，實(shí)驗(yàn)室檢查血清MP-IgM 陽性；細(xì)菌性肺炎組61例，其中男37例，女24例，年齡10個月~11歲，平均年齡5.0歲，實(shí)驗(yàn)室檢查血清MP-IgM 陰性，痰細(xì)菌培養(yǎng)陽性。支原體肺炎和細(xì)菌性肺炎符合《實(shí)用兒科學(xué)》（第7版）中診斷標(biāo)準(zhǔn)[3] ，且均未經(jīng)療。正常對照組90例，其中男48例，女42 例；年齡1~12歲，平均為6歲，無近期急性感染性疾病史。

1.2 方法T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）采用雙色熒光素標(biāo)記流式技術(shù)測定，試劑美國B D公司提供，檢測儀器為美國FASCCalibur流式細(xì)胞儀；IgG、IgA、IgM、C3、C4采用免疫透射比濁法測，試劑上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，檢測儀器為日立7180全自動生化分析儀；免疫復(fù)合物(Cycle immune complex，CIC)采用CIC-Clq ELISA檢測，試劑上海研晶生物科技有限公司提供，檢測儀器為美國BIO-RAD伯樂酶標(biāo)儀。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料均以x±s表示，配對資料進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 T淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果見表1，與正常對照組比較， 肺炎支原體肺炎組CD8+細(xì)胞比例明顯增高（（t值為：7.420 P值為：＜0.01）， CD3+、CD4+細(xì)胞比例及CD4+/ CD8+比值明顯降低（t值分別為：-14.715、-10.234、-6.828 ，P值均為：＜0.01）；與細(xì)菌性肺炎組比較，肺炎支原體肺炎組CD8+細(xì)胞比例也明顯增高（t值為：5.465 ， P值為：＜0.01），CD3+、CD4+細(xì)胞比例及CD4+/ CD8+比值也明顯降低（t值分別為：-9.605、-7.763、-5.380，P值均為：＜0.01）；細(xì)菌性肺炎組與正常對照比較，CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/ CD8+無明顯差異（t值分別為：-1.971、-1.959、1.309、-1.969，P值均為：＞0.05）。

注：A表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.01；B表示肺炎支原體肺炎組與細(xì)菌性肺炎組比較：P＜0.01。

2.2 免疫球蛋白及循環(huán)免疫復(fù)合物檢測結(jié)果見表2，與正常對照組比較，肺炎支原體肺炎組IgA相對較高（t值分別為：2.507， P值為：＜0.05），IgG、IgM、CIC均明顯增高（t值分別為：4.142、5.493、14.211， P值均為：＜0.01）；與細(xì)菌性肺炎組比較，肺炎支原體肺炎組IgG、IgA、IgM、CIC均明顯增高（t值分別為：2.684、3.034、4.093、10.715， P值均為：＜0.01）；細(xì)菌性肺炎組與正常對照比較， 其中IgA相對較低（t值為：-2.458、P值為：＜0.05），而IgG、IgM、CIC無明顯差異（t值分別為：1.209、1.920、1.463，P值均為：＞0.05）。

注：C表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.01；D表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.05；E表示肺炎支原體肺炎組與細(xì)菌性肺炎組比較：P＜0.01；F細(xì)菌性肺炎組與正常對照比較：P＜0.05。

2.3C3、C4檢測結(jié)果見表3，肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較，C3、C4均明顯增高（t值分別為：11.576、 14.465， P值均為：＜0.01）；肺炎支原體肺炎組與細(xì)菌性肺炎組比較，C3、C4均明顯增高（t值分別為：7.406、 13.830， P值均為：＜0.01）；細(xì)菌性肺炎組與正常對照比較，C3、C4無明顯差異（t值分別為：-0.582、1.934，P值均為：＞0.05）。

注：G表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.01；H表示肺炎支原體肺炎組與細(xì)菌性肺炎組比較：P＜0.01。

3 討論

肺炎支原體（MP)是一種介于細(xì)菌與病毒之間的微小非活性生長的微生物，是目前兒童肺炎、支氣管炎的主要病原之一，肺炎支原體感染后，其發(fā)病機(jī)制除與病原體粘付、侵入和直接造成細(xì)胞損傷等[4]有關(guān)外，更與宿主感染肺炎支原體后產(chǎn)生異常的免疫反應(yīng)有關(guān)[5]，因此，有必要觀察肺炎支原體患者的細(xì)胞免疫和體液免疫功能的變化。

T淋巴細(xì)胞亦可簡稱T細(xì)胞，源于骨髓的多能干細(xì)胞（胚胎期則來源于卵黃囊和肝），發(fā)揮細(xì)胞免疫及免疫調(diào)節(jié)等功能。CD3+細(xì)胞是成熟T淋巴細(xì)胞的特征性標(biāo)志，反映了T淋巴細(xì)胞活化的比例；CD4+細(xì)胞是輔助性T淋巴細(xì)胞；CD8+細(xì)胞大多數(shù)是抑制性T淋巴細(xì)胞；CD4／CD8的比值做為免疫調(diào)節(jié)的一項(xiàng)指標(biāo)，正常情況下相對穩(wěn)定。本研究結(jié)果表明，支原體肺炎患兒CD8+細(xì)胞比例明顯增高（P<0.01），CD3+，CD4+淋巴細(xì)胞比例及CD4+/CD8+比值明顯下降(P<0.01)，說明機(jī)體的T淋巴細(xì)胞活化功能、免疫應(yīng)答等受到抑制，打破了免疫功能平衡，使宿主抵抗力下降。

B淋巴細(xì)胞來源于骨髓的多能干細(xì)胞，受抗原刺激后，會增殖分化出大量漿細(xì)胞。漿細(xì)胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán)，發(fā)揮體液免疫功能作用。肺炎支原體感染后，可刺激B細(xì)胞產(chǎn)生針對肺炎支原體特異性的IgM與IgG抗體，以及能阻止肺炎支原體吸附和侵入的分泌型IgA抗體[6]， IgM是人體液免疫中出現(xiàn)最早的抗體，MP感染1～2w內(nèi)，體內(nèi)一般可產(chǎn)生IgM及IgA，而IgG一般在2w后才開始升高。本研究結(jié)果表明，支原體肺炎組IgM、IgA、IgG及CIC水平均明顯升高 (P＜0.01或<0.05) ，說明B淋巴細(xì)胞被過度激活、然后過度增殖，導(dǎo)致合成和分泌IgM、IgG及IgA抗體增多，同時，血液中CIC的明顯增加，提示發(fā)生了過度的抗原抗體反應(yīng)，過度的免疫反應(yīng)往往引起更加嚴(yán)重的臨床癥狀及肺損傷[7]。

肺炎支原體與人體心、肺、肝、腦、腎和平滑肌組織有部分具有共同的抗原，肺炎支原體感染后，可產(chǎn)生抗淋巴細(xì)胞、肺、心、肝、腎、平滑肌和腦細(xì)胞的自身抗體[8]，與相應(yīng)組織發(fā)生免疫反應(yīng)，形成抗原抗體免疫復(fù)合物，然后激活補(bǔ)體系統(tǒng)，發(fā)揮強(qiáng)大的免疫效應(yīng)，導(dǎo)致多系統(tǒng)免疫損傷[9]。本研究顯示，支原體肺炎組的補(bǔ)體C3、C4含量明顯高于正常對照和細(xì)菌性肺炎組(P<0.01)，提示肺炎支原體感染者產(chǎn)生的自身抗體與相應(yīng)組織發(fā)生免疫反應(yīng)所形成抗原抗體免疫復(fù)合物激活了補(bǔ)體，并依次發(fā)生連鎖反應(yīng)，最終形成攻膜復(fù)合物（MAC），產(chǎn)生強(qiáng)大的溶細(xì)胞作用，對機(jī)體組織細(xì)胞造成損傷。同時免疫復(fù)合物激活補(bǔ)體系統(tǒng)后，產(chǎn)生中性粒細(xì)胞趨化因子，吸引大量白細(xì)胞，侵入病變部位，釋放溶酶體中的水解酶，引起增生和破壞性病變，這可能是肺炎支原體感染易并發(fā)肺外多器官損傷的主要原因。

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