【摘要】以東農(nóng)42大豆為研究對象,以大豆中抗營養(yǎng)因子之一的植酸含量為評價指標,設計兩因素三水平正交試驗,采用高效液相色譜法測定發(fā)不同發(fā)酵條件大豆中的植酸含量,最終確定最佳試驗條件為30℃,3d,植酸含量為2.68g/L,降低率達62.78%。
【關鍵詞】大豆;發(fā)芽法;植酸;降低
1.引 言
大豆營養(yǎng)價值高,產(chǎn)量豐富。素有“植物肉”、“綠色牛乳”之美譽。大豆雖然有諸多優(yōu)點,但同時也存在著如植酸、脹氣因子、脂肪氧化酶和胰蛋白酶抑制劑等抗營養(yǎng)因子,這些抗營養(yǎng)因子會阻礙營養(yǎng)素的吸收,導致身體的不適和豆制食品感官上的缺陷[1]。為此,本試驗對不同條件下發(fā)芽的大豆中植酸含量進行測定,從而確定最佳的發(fā)芽條件,為生產(chǎn)提供了理論依據(jù),對大豆資源的開發(fā)利用具有重要的指導意義。
2.材料與方法
2.1材料與試劑
2.1.1大豆(東農(nóng)42);植酸;醋酸纖維膜;三氯乙酸;硫酸鈉;磷酸二氫鉀。
2.2儀器與設備
高效液相色譜儀(Waters公司);DH5000A電熱恒溫培養(yǎng)箱(哈爾濱東聯(lián)電子技術有限公司);FSM-120型分離式磨漿機(四川義典包裝食品機械有限公司);JJ-1型電動攪拌器(上海司樂儀器有限公司);
2.3方法
2.3.1標準曲線的繪制
依次抽取0.2mg/mL植酸標準溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0μL注入液相色譜儀內(nèi),測出各指標對應的峰面積,以峰面積為橫坐標,植酸量為縱坐標繪制標準曲線。
2.3.2實驗條件的優(yōu)化
采用四因素三水平(L34)正交實驗,考慮2個條件參數(shù)(溫度﹑時間),確定最佳的發(fā)芽條件。表1為因素水平編碼表,發(fā)芽溫度分別控制在20℃、25℃、30℃,發(fā)芽時間分別為1d、2d、3d,以植酸含量為評價指標進行發(fā)芽條件優(yōu)化分析。
表1.正交試驗因素水平
水平因素
A溫度(℃)B時間(d)
1201
2252
3303
2.3.3試驗樣品的處理
取磨好的豆?jié){10mL,加入5%三氯乙酸和10%硫酸鈉各100mL,振蕩均勻,靜置過夜,超聲震蕩30min,離心10min,過濾,上機。
2.3.4色譜條件
色譜柱:Waters nova-PakC18 3.9*150mm顆粒度4μm;流動相: KH2PO4溶液0.025mol/L;流速:0.5mL/min;柱室溫度:室溫;紫外檢測波長:254nm;定量方法:外標法。
3.結(jié)果與分析
3.1發(fā)芽條件的優(yōu)化
以植酸含量為評價指標,正交試驗結(jié)果見下表。
從表1極差分析結(jié)果表明,溫度的R值大于時間,因此溫度為主要影響因素,因素主次順序為溫度>時間,較好的參數(shù)組合是A3B3,即溫度30℃、時間3d。由表2方差分析表明,溫度的F值>F0.1,時間的 F值 4.結(jié)論 查閱文獻了解,發(fā)芽中的植酸分解酶主要有兩種,一種是植酸酶,將植酸分解為肌醇單磷酸酯,一種為磷酸酶,將肌醇單磷酸酯分解為肌醇和磷酸,使植酸含量下降[2]。本實驗通過兩因素三水平正交試驗確定了大豆發(fā)芽的最佳條件:30℃,3d。未發(fā)芽大豆植酸含量為7.20g/L,30℃條件下發(fā)芽3d后大豆中植酸含量為2.68g/L,植酸的降低率達62.8%。原因可能是釋放的磷一部分溶于水損失掉了,另一部分被胚芽利用進一步合成了有機磷。 參考文獻 [1]苗穎,馬鶯.以發(fā)芽大豆為原料制備高鈣豆乳[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2005(6):120-122 [2]張繼浪,駱承癢.大豆在發(fā)芽過程中的化學成分和營養(yǎng)價值變化[J].中國乳品工業(yè),1994(2):68-74 作者簡介 劉潔(1983-)女,漢族,黑龍江省人,工程師,碩士研究生,研究方向:產(chǎn)品檢驗。