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    RECK及MMP-2在皮膚血管瘤組織中的表達(dá)及意義

    2014-12-19 07:10:48
    關(guān)鍵詞:棕黃色光密度期組

    劉 涓

    (武漢大學(xué)人民醫(yī)院老年病科 武漢430060)

    皮膚血管瘤是嬰幼兒最常見的良性血管腫瘤, 是由血管形成異常而引起的疾病,血管瘤的自然病程經(jīng)歷增生期、退化期和退化完成期三個(gè)階段。血管瘤屬良性腫瘤,通過未成熟的內(nèi)皮細(xì)胞彌散增殖而快速生長(zhǎng),之后自發(fā)消退。一般認(rèn)為毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生與消退是血管瘤生長(zhǎng)和消退的關(guān)鍵原因[l,2]。雖然大多數(shù)血管瘤能自發(fā)消退,但是一些血管瘤病變可嚴(yán)重?fù)p壞正常組織,并產(chǎn)生并發(fā)癥。往往給患者及其家人帶來極大痛苦,但關(guān)于血管瘤的發(fā)病機(jī)制,目前還未明了,因此對(duì)于皮膚血管瘤的臨床治療也是目前急待解決的關(guān)鍵問題。

    逆轉(zhuǎn)誘導(dǎo)蛋白(reversion-inducing-cystein-rich protein with kazalmotifs,RECK)基因是近年來新發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄抑制基因,可以通過抑制多種MMPs的表達(dá),抑制腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移[3]。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetallo proteinases,MMPs)可以降解細(xì)胞外基質(zhì),有研究表明,MMP2的表達(dá)水平同腫瘤的侵襲和惡性程度密切相關(guān),TIMP-2作為 MMP-2的抑制劑,通過多種方式抑制 MMP-2的活性[4]。但RECK及MMP-2在皮膚血管瘤組織中的表達(dá)尚未見報(bào)道。

    本文應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法和圖像分析技術(shù)檢測(cè)了血管瘤增生期、退化期以及正常皮膚組織中RECK及 MMP-2的表達(dá)水平,探討 RECK 及MMP-2在血管瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機(jī)制,為臨床上治療血管瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    材料和方法

    1.材料

    1.1材料來源

    收集武漢大學(xué)人民醫(yī)院病理科2008年-2011年皮膚毛細(xì)血管瘤存檔蠟塊40例,其中男性15例,女性25例。這些血管瘤所在的部位有頭皮、前額、眼瞼、耳背、頸部、背部、上臂、大腿、手和足的皮膚等?;颊咝g(shù)前均未做任何輔助性治療。

    1.2 材料分組

    將所有標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),按Mulliken分類標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合PCNA的表達(dá)進(jìn)行分組:石蠟標(biāo)本中增生期血管瘤22例,退化期血管瘤18例。另取距癌組織5cm外的周圍正常皮膚組織5例作對(duì)照。

    1.3 主要試劑

    即用型鼠抗人PCNA單克隆抗體、鼠抗人RECK及MMP-2單克隆抗體(購(gòu)于北京中杉生物技術(shù)有限公司);超敏即用型SP通用型免疫組織化學(xué)試劑盒(購(gòu)于福州邁新公司);DAB顯色試劑盒及多聚賴氨酸(購(gòu)于北京中杉生物技術(shù)有限公司)。

    2.方法

    2.1 免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)RECK及MMP-2和PCNA相關(guān)抗原

    具體步驟:(1)4μm組織切片常規(guī)脫蠟入水;(2)抗原修復(fù)(檸檬酸緩沖液微波抗原修復(fù)法);(3)滴加3%過氧化氫,37℃濕盒孵育10min以抑制內(nèi)源性過氧化物酶活性;(4)正常羊血清37℃濕盒孵育10min以減少非特異性背景;(5)分別滴加一抗;(6)滴加鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物復(fù)合物37℃濕盒孵育;(7)滴加新鮮配置的DAB顯色液顯色;(8)蘇木素復(fù)染;(9)梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片并鏡檢;(10)用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照組,購(gòu)買的陽性片作為RECK及MMP-2的陽性對(duì)照組,人正常皮膚表皮作為PCNA的陽性對(duì)照組。

    2.2 免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷

    (1)RECK及 MMP-2都是以細(xì)胞核或胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng),PCNA以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)。陰性對(duì)照組除細(xì)胞核染成藍(lán)色外,應(yīng)無棕黃色反應(yīng)物。

    (2)采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理圖文報(bào)告管理系統(tǒng)(同濟(jì)千屏影像公司)對(duì)RECK及MMP-2的表達(dá)進(jìn)行定量分析,每張切片隨機(jī)選取5個(gè)完整而不重疊的高倍鏡視野(×400),測(cè)定每個(gè)視野下陽性反應(yīng)的平均光密度、陽性反應(yīng)面積和所有細(xì)胞總面積,計(jì)算陽性面積率。以每例5個(gè)視野的平均光密度、陽性面積率的平均值作為該例的測(cè)量值。(陽性面積率=單位面積中陽性反應(yīng)的總面積/單位面積中細(xì)胞的總面積×100%)

    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用SPSS11.5軟件對(duì)各組免疫組織化學(xué)反應(yīng)陽性顆粒的平均光密度、陽性面積率做單因素方差分析和SNK(q)檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α為0.05。

    結(jié) 果

    1.PCNA的表達(dá)

    增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核肥大,核內(nèi)彌漫分布棕黃色顆粒,PCNA表達(dá)強(qiáng)(圖1);退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核扁平,胞核內(nèi)有少量棕黃色顆粒,PCNA表達(dá)弱(圖2)。

    2.RECK的表達(dá)

    增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核或胞漿內(nèi)有少量的棕黃色顆粒,RECK呈低表達(dá)(圖3);退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞核或胞漿內(nèi)有較多棕黃色顆粒,RECK呈高表達(dá)(圖4);正常皮膚組織內(nèi)皮細(xì)胞核或胞漿內(nèi)有較多棕黃色顆粒,RECK呈高表達(dá)(圖5)。圖像分析結(jié)果見表1。增生期組RECK的表達(dá)明顯低于退化期組和正常皮膚組織組(P<0.05),而后兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(表1)

    表1 血管瘤不同時(shí)期RECK表達(dá)的平均光密度和陽性面積率()Table 1 The average optical density and the rate of RECK positive area of in differ period of human dermal hemangiomas()

    表1 血管瘤不同時(shí)期RECK表達(dá)的平均光密度和陽性面積率()Table 1 The average optical density and the rate of RECK positive area of in differ period of human dermal hemangiomas()

    * 增生期組與退化期組比較,P<0.05;(Comparison between proliferating hemangiomas and involuting hemangiomas)*P<0.05;△ 退化期組與正常皮膚組比較,P>0.05;(Comparison between involuting hemangiomas and normal skin tissue)△P>0.05;▲ 正常皮膚組與增生期組比較,P<0.05(Comparison between proliferating hemangiomas and normal skin tissue)▲P<0.05

    陽性面積率Rate of Positive Area增生期組Proliferating Group 22 0.0814±0.0088* 0.0901±0.0102組別Group例數(shù)n平均光密度Average Optical Density*退化期組Involuting Group 18 0.2219±0.0116△ 0.2357±0.0117△正常皮膚組Normal Skin Group 5 0.2107±0.0113▲ 0.2231±0.0113▲

    3.MMP-2的表達(dá)

    增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核或胞質(zhì)內(nèi)有較多棕黃色顆粒,MMP-2表達(dá)強(qiáng)(圖6);退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞核或胞質(zhì)內(nèi)有較少的棕黃色顆粒,MMP-2表達(dá)弱(圖7);正常皮膚組織內(nèi)皮細(xì)胞核或胞漿內(nèi)有少量的棕黃色顆粒,MMP-2表達(dá)弱(圖8)。圖像分析結(jié)果見表2。增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞MMP-2的表達(dá)顯著高于退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞和正常組織(P<0.05),而后兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2)。

    表2 血管瘤不同時(shí)期MMP-2表達(dá)的平均光密度和陽性面積率()Table 2 The average optical density and the rate of MMP-2positive area of in differ period of human dermal hemangiomas()

    表2 血管瘤不同時(shí)期MMP-2表達(dá)的平均光密度和陽性面積率()Table 2 The average optical density and the rate of MMP-2positive area of in differ period of human dermal hemangiomas()

    *增生期組與退化期組比較,P<0.05;(Comparison between proliferating hemangiomas and involuting hemangiomas)*P <0.05;△ 退化期組與正常皮膚組比較,P>0.05;(Comparison between involuting hemangiomas and normal skin tissue)△P>0.05;▲ 正常皮膚組與增生期組比較,P<0.05;(Comparison between proliferating hemangiomas and normal skin tissue)▲P<0.05

    陽性面積率Rate of Positive Area增生期組Proliferating Group 22 0.3128±0.0128* 0.3367±0.0133組別Group例數(shù)n平均光密度Average Optical Density*退化期組Involuting Group 18 0.0969±0.0097△ 0.0983±0.0101△正常皮膚組Normal Skin Group 5 0.0929±0.0087▲ 0.933±0.0090▲

    3.血管瘤組織中RECK和MMP-2表達(dá)的相關(guān)性

    血管瘤組織中RECK與MMP-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.01,r=-0.625)。

    討 論

    皮膚血管瘤是一種常見的良性腫瘤,在嬰幼兒中發(fā)病率較高,新生兒的患病率為1.1%-3.8%,至1歲時(shí)可高達(dá)10%。血管瘤的自然病程包括增生期、退化期和退化完成期三個(gè)階段。目前血管瘤的發(fā)病機(jī)制還不完全清楚[5-7],血管瘤可發(fā)生于身體各處,尤以頭頸部多見,但也見于內(nèi)臟。一些血管瘤可致嚴(yán)重毀容并破壞正常組織,甚至危及生命[8]。目前關(guān)于治療血管瘤方法的成效并不十分顯著,一些治療模式的副作用也限制了其應(yīng)用。因此探討皮膚血管瘤的發(fā)病機(jī)制對(duì)臨床上治療血管瘤有著重要的意義。

    金屬基質(zhì)蛋白酶(martixmeatllporoteinases,MMPs)是一組具有酶活性的蛋白質(zhì),廣泛存在于細(xì)胞外基質(zhì)中,它在維持細(xì)胞外基質(zhì)(extracelluarma-trix,ECM)包括膠原纖維(纖維狀的非纖維狀的)、纖維連接蛋白、層粘連素、基膜以及基質(zhì)糖蛋白的代謝中起到了關(guān)鍵的作用,一種 MMPs通常可以直接降解某一種或幾種ECM,也可通過激活其它類型的MMPs而發(fā)揮作用。細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分的降解是腫瘤侵襲和及轉(zhuǎn)移的必要條件,MMPs幾乎能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的所有成分[9-12]。因此,MMPs是一組非常重要的蛋白質(zhì)。MMP-2屬Ⅳ型膠原酶類,主要降解明膠、纖維蛋白、基底膜Ⅳ、Ⅴ和Ⅳ型膠原,在腫瘤細(xì)胞突破基底膜屏障和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過程中起著重要作用。

    本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示:增生期血管瘤組織中MMP-2的表達(dá)水平明顯高于退化期和正常組織的表達(dá)水平。結(jié)果提示 MMP-2參與了血管瘤的發(fā)生。并且在腫瘤血管形成過程中,MMP-2均發(fā)揮著重要作用。

    RECK(伴有Kazal域的富含半胱氨酸的逆轉(zhuǎn)誘 導(dǎo) 蛋 白 reversion-inducing-cystein-rich protein with kazalmotifs)基因是近年來新發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄抑制基因,可以通過抑制多種 MMPs的表達(dá),從而抑制腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。RECK基因是編碼971個(gè)氨基酸的膜表面蛋白,定位于人染色體9p12-13,整個(gè)基因的長(zhǎng)度約87kb,其中包含21個(gè)外顯子,20個(gè)內(nèi)含子,共有13個(gè)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP),其中4個(gè)位于基因編碼區(qū)域(外顯子1,9,13,15),而另外9個(gè)位于內(nèi)含子區(qū)域(內(nèi)含子5,8,10,12,15,17),其轉(zhuǎn)錄子大小為4.6kb[l3-15]。研究表明,在無 RECK 基因表達(dá)的情況下,MMP的過表達(dá)可導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularMatrix,ECM)過度降解,血管及周圍組織完整性降低,促進(jìn)新生血管形成;相反,RECK基因的高表達(dá)可抑制新生血管的形成。因此,RECK基因及MMP的相互調(diào)節(jié)對(duì)于腫瘤新生血管形成起著重要作用,在體內(nèi)多種正常組織的細(xì)胞中均有比較高水平的表達(dá)[l6-18]。因此 RECK 能夠抑制 MMP-2誘導(dǎo)的血管生成作用。

    腫瘤的發(fā)生和發(fā)展是以腫瘤細(xì)胞與其周圍細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)之間相互作用的嚴(yán)重紊亂為變化特征的。

    本研究發(fā)現(xiàn),RECK基因主要在增生期血管瘤低表達(dá),提示RECK可抑制至少3個(gè)MMP家族成員的活性,包括:MMP-2,MMP-9 及 MT1-MMP,此外,RECK基因還與血管生成密切相關(guān),其適量表達(dá)能抑制血管的生成。RECK在血管瘤組織中呈低表達(dá)說明RECK通過抑制MMP-2的活性,從而影響了ProMMP-2的活化。RECK 對(duì) MMP-2的抑制作用發(fā)生在翻譯后水平,即抑制MMP-2從細(xì)胞的釋放以及直接抑制其蛋白水解活性最終抑制了MMP-2的總量及活性從而發(fā)揮抗腫瘤作用。RECK基因的低表達(dá)參與了血管瘤的發(fā)生、發(fā)展。

    RECK是MMPs的一種新型抑制劑,關(guān)于RECK與MMP-2相關(guān)性,本研究進(jìn)行了直線相關(guān)分析(P<0.01,r=-0.625),結(jié)果證實(shí)兩者具有直線負(fù)相關(guān)關(guān)系,也就是MMP-2隨著RECK的表達(dá)增多而表達(dá)減少,證實(shí)了RECK具有抑制MMP-2的作用,說明在血管瘤的發(fā)生機(jī)制中確實(shí)存在著RECK與MMP-2的調(diào)節(jié)機(jī)制。

    RECK基因在腫瘤血管生成方面的抑制作用直接關(guān)系到患者的預(yù)后,RECK與MMP-2呈明顯的負(fù)相關(guān),在RECK基因表達(dá)降低的病例中 MMP-2呈現(xiàn)出顯著的升高,而MMP-2具有明顯的促進(jìn)腫瘤血管生成的作用,從而為腫瘤的發(fā)展提供了依據(jù),同時(shí)也證實(shí)了RECK基因和MMP-2具有相關(guān)性,RECK基因能夠通過影響MMP-2信號(hào)傳導(dǎo)通路而達(dá)到抑制血管瘤血管生成的作用。

    [1]Jinnin M,Ishihara T,Boye E,et al.Recent progress in studies of infantile hemangioma.The Journal of Dermatology,2010,37(4):283-298

    [2]Shan G,Tang T,Zhang D.Expression of HLA-G in hemangioma and its clinical significance.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2012,32(5):713-718

    [3]Shan Zhong,Guohua Yang,Cong Xia.Expression of HLA-G in hemangioma and its clinical significance.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2009,29(5):614-619

    [4]Stiles JM,Rowntree RK,Amaya C,et al.Gene expression analysis reveals marked differences in the transcriptome of infantile hemangioma endothelial cells compared to normal dermal microvascular endothelial cells.Vasc Cell,2013,25,5(1):6-11

    [5]Shan S,Shan G,Zhang D.Treatment of hemangioma by transfection of antisense VEGF gene.J Huazhong Univ Sci Technolog,2009,29(3):335-339

    [6]Mai HM,Zheng JW,Wang YA,et al.CD133selected stem cells from proliferating infantile hemangioma and establishment of an in vivo mice model of hemangioma.Chin Med J(Engl),2013,126(1):88-94

    [7]Stiles J,Amaya C,Pham R,et al.Propranolol treat-ment of infantile hemangioma endothelial cells:A molecular analysis.Exp Ther Med,2012,4(4):594-604

    [8]Bourdelat D,Melki E,Mazzola C,et al.Congenital prenatal hemangioma:diagnosis and treatment.Arch Pediatr,2010,17(4):383-638

    [9]Ekbote AV,Danda S,Zankl A,et al.Patient with mutation in the matrix metalloproteinase 2(MMP2)genea case report and review of the literature.J Clin Res Pediatr Endocrinol,2014,6(1):40-46

    [10]Jacob-Ferreira AL,Schulz R.Activation of intracellular matrix metalloproteinase-2by reactive oxygen-nitrogen species:Consequences and therapeutic strategies in the heart.Arch Biochem Biophys,2013,540(1-2):82-93

    [11]Chien MH,Lin CW,Cheng CW,et al.Matrix metalloproteinase-2as a target for head and neck cancer therapy.Expert Opin Ther Targets,2013,17(2):203-216

    [12]Ali MA,F(xiàn)an X,Schulz R.Cardiac sarcomeric proteins:novel intracellular targets of matrix metalloproteinase-2in heart disease.Trends Cardiovasc Med.2011,21(4):112-118

    [13]Zhou X,Huang S,Jiang L,et al.Expression of RECK and MMP-2in salivary adenoid cystic carcinoma:Correlation with tumor progression and patient prognosis.Oncol Lett,2014,7(5):1549-1555

    [14]Guo H,Li Q,Li W,et al.miR-96downregulates RECK to promote growth and motility of non-small cell lung cancer cells.Mol Cell Biochem,2014,390(1-2):155-160

    [15]Zhang J,Kong X,Li J,et al.miR-96promotes tumor proliferation and invasion by targeting RECK in breast cancer.Oncol Rep,2014,31(3):1357-1363

    [16]Benzon Z,Prusac IK,ZekicˊS,et al.Immunohistochemical expression of RECK protein in placental membranes of the preterm delivery with and without chorioamnionitis.Histol Histopathol,2014,29(5):629-633

    [17]Hong KJ,Wu DC,Cheng KH,et al.RECK inhibits stemness gene expression and tumorigenicity of gastric cancer cells by suppressing ADAM-mediated Notch1 activation.J Cell Physiol,2014,229(2):191-201

    [18]Lin HY,Chiang CH,Hung WC.STAT3upregulates miR-92ato inhibit RECK expression and to promote invasiveness of lung cancer cells.Br J Cancer,2013,109(3):731-738

    圖 版 說 明

    圖1 增生期血管瘤PCNA的表達(dá) 增生的內(nèi)皮細(xì)胞核內(nèi)彌漫分布棕黃色顆粒(→),PCNA表達(dá)強(qiáng),S-P×400

    圖2 退化期血管瘤PCNA的表達(dá) 內(nèi)皮細(xì)胞核內(nèi)有少量棕黃色顆粒(→),PCNA表達(dá)弱,S-P×400

    圖3 增生期血管瘤RECK的表達(dá) 內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)有少量棕黃色顆粒(→),RECK表達(dá)弱(→),S-P×400

    圖4 退化期血管瘤RECK的表達(dá) 內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)有較多棕黃色顆粒,RECK表達(dá)強(qiáng),S-P×400

    圖5 正常對(duì)照組RECK的表達(dá) 內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)有較多棕黃色顆粒(→),RECK表達(dá)強(qiáng),S-P×400

    圖6 增生期血管瘤MMP-2的表達(dá) 血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核或胞質(zhì)內(nèi)有較多棕黃色顆粒(→),MMP-2表達(dá)強(qiáng),S-P×400

    圖7 退化期血管瘤MMP-2的表達(dá) 血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞核或胞質(zhì)內(nèi)有較少棕黃色顆粒,MMP-2表達(dá)弱或無表達(dá)(→),S-P×400

    圖8 正常組MMP-2的表達(dá) 血管內(nèi)皮細(xì)胞胞核或胞質(zhì)內(nèi)有較少棕黃色顆粒,MMP-2表達(dá)弱或無表達(dá)(→),SP×400

    EXPLANATION OF FIGURES

    Fig.1PCNA expression in proliferating hemangioma.There were plenty of brown particles in the nucleus of proliferating endothelial cells,which showed PCNA expressed strongly(→).S-P×400

    Fig.2PCNA expression in involuting hemangioma.There were few brown particles in the nucleus of less endothelial cells,which showed PCNA expressed weakly(→).S-P×400

    Fig.3RECK expression in proliferating hemangioma.There were few of brown particles in cytoplasm the of proliferating endothelial cells,RECK expressed weakly(→).S-P×400

    Fig.4RECK expression in involuting hemangioma.There were plenty brown particles in cytoplasm the of involuting endothelial cells,RECK expressed strongly(→).S-P×400

    Fig.5RECK expression in normal skin Group.There were plenty brown particles in cytoplasm the of in normal skin endothelial cells,RECK expressed strongly(→).S-P×400

    Fig.6MMP-2expression in proliferating hemangioma.There were plenty of brown particles in cytoplasm the of involuting endothelial cells,MMP-2expressed strongly(→).SP×400

    Fig.7MMP-2expression in involuting hemangioma.There were few brown particles in cytoplasm the of involuting endothelial cells,MMP-2expressed weakly(→).S-P×400

    Fig.8MMP-2expression in normal skin Group.There were few brown particles in cytoplasm the of in normal skin endothelial cells,MMP-2expressed weakly(→).S-P×400

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