信陽(yáng)紅茶多糖的提取及其對(duì)葡萄糖激酶活性的影響

趙麗平++喬新榮++殷東林

摘要：采用簡(jiǎn)單熱水浸提法提取信陽(yáng)紅茶多糖，探討料液比、提取時(shí)間、提取溫度等因素對(duì)多糖提取率及葡萄糖激酶活性的影響。結(jié)果表明：提取紅茶多糖的最佳工藝條件為料液比1 g ∶25 mL、提取時(shí)間6 h、提取溫度95 ℃，該工藝條件下多糖的提取率為3.50%，葡萄糖激酶的相對(duì)酶活比值達(dá)到3.12。多糖提取率與葡萄糖激酶的相對(duì)酶活并不呈正相關(guān)關(guān)系。

關(guān)鍵詞：信陽(yáng)紅茶；多糖；葡萄糖激酶；提取工藝

中圖分類號(hào)： TS201.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）10-0263-02

收稿日期：2013-12-08

基金項(xiàng)目：河南省茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究計(jì)劃（編號(hào)：KX13J11）。

作者簡(jiǎn)介：趙麗平（1979—），女，河南許昌人，碩士，講師，主要從事生物化學(xué)方面的教學(xué)與研究。E-mail：zhaoliping19790224@163.com。信陽(yáng)毛尖歷史悠久，而且香氣濃郁，甘醇爽口，是中國(guó)十大名茶之一。近幾年來(lái)，河南省信陽(yáng)市又生產(chǎn)出紅茶新品種，名為“信陽(yáng)紅”[1]。據(jù)報(bào)道，綠茶的抗氧化性主要來(lái)自于茶多酚，而紅茶的抗氧化性主要來(lái)自于茶多糖。一直以來(lái)，人們對(duì)信陽(yáng)綠茶多酚的研究較多，而對(duì)信陽(yáng)紅茶多糖的研究較少。研究表明，茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗氧化、抗血栓及抗凝血等作用[2-5]。茶多糖的提取方法有很多種，本研究采用操作簡(jiǎn)單、投資少的水提法提取紅茶多糖，并應(yīng)用正交設(shè)計(jì)優(yōu)選法對(duì)紅茶多糖的提取工藝進(jìn)行研究。同時(shí)為揭示多糖的高提取效率與其高活性之間的相關(guān)性，以葡萄糖激酶為例，系統(tǒng)考察了提取條件對(duì)多糖活性的影響，以期為紅茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究及將其作為藥用及食品等多方面功能原料的開(kāi)發(fā)提供理論參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

信陽(yáng)紅茶，購(gòu)自河南省信陽(yáng)市茶市；試驗(yàn)動(dòng)物為昆明種小鼠，由信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系飼養(yǎng)。

分析純無(wú)水乙醇、丙酮、氯仿-正丁醇（武漢中天化工責(zé)任有限公司）；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、ATP、NADP（Solarbio公司）。

1.2儀器與設(shè)備

MZ-10粉碎機(jī)（青島邁科隆粉體技術(shù)設(shè)備有限公司）；101A-2型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海賀德實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司）；DK-S24 型電熱數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；FA1004型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠）；LD5-2A型離心機(jī)（湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；721分光光度計(jì)（上海光學(xué)儀器廠）。

1.3試驗(yàn)方法[6-10]

1.3.1單因素試驗(yàn)將一定量的紅茶在烘箱中干燥后用粉碎機(jī)粉碎，得紅茶細(xì)粉末，用熱水浸提，采用不同料液比（g ∶mL）、不同提取時(shí)間和不同提取溫度提取紅茶多糖。（1）料液比試驗(yàn)。2.1單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1料液比對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖1可知，在提取溫度和提取時(shí)間一定時(shí)，提取率隨料液比的增大呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢(shì)。料液比1 g ∶20 mL時(shí)的提取率達(dá)最大值，而隨液料比進(jìn)一步加大，提取率反而下降，原因可能是由于隨著液料比增大，溶液的黏度降低，紅茶多糖的擴(kuò)散阻力降低，從而有利于多糖的溶出，使多糖得率逐漸提高；但液料比過(guò)大會(huì)引起后續(xù)提取過(guò)程中多糖的損失，導(dǎo)致多糖得率減小。因此從全方位考慮，本試驗(yàn)選擇的料液比的3個(gè)水平為1 g ∶15 mL、1 g ∶20 mL、1 g ∶25 mL作為正交試驗(yàn)的料液比因素。

2.1.2提取時(shí)間對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖2可以看出，在提取溫度和料液比一定時(shí)，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，提取率呈現(xiàn)出先增加后減小的趨勢(shì)，以提取6.0 h的提取率最高，在6.0 h以后，隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，提取率有所下降。這是因?yàn)樵谔崛〉某跏茧A段，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，紅茶多糖的溶解越來(lái)越充分，從而使多糖的提取率逐漸升高；當(dāng)提取一定時(shí)間后，溶出的雜質(zhì)也越來(lái)越多，溶液的黏度增加了，從而阻礙了多糖的擴(kuò)散溶出，使多糖提取率反而下降；此外，也可能是提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致紅茶多糖部分降解所致?；谔崛⌒省⑻崛〕杀痉矫娴目紤]，將6.0 h定為紅茶多糖的較佳提取時(shí)間，選取5.5、6.0、6.5 h作為正交試驗(yàn)時(shí)間因素的3個(gè)水平。

2.1.3提取溫度對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖3可以看出，紅茶提取率隨著溫度的升高明顯增加。在 90 ℃ 左右時(shí)，紅茶多糖提取率的上升開(kāi)始不很明顯；當(dāng)溫度超過(guò)95 ℃時(shí)，提取率有下降趨勢(shì)，這可能是因?yàn)闇囟冗^(guò)高時(shí)容易引起多糖的降解，因此提取率下降，而溫度過(guò)低則不利于多糖物質(zhì)的溶出。因此，選擇95 ℃作為紅茶多糖的最佳提取溫度，選擇85、90、95 ℃作為正交試驗(yàn)溫度因素的3個(gè)水平。

2.2正交試驗(yàn)結(jié)果

各因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

3結(jié)論

紅茶多糖提取過(guò)程中會(huì)受到多因素的影響，其中料液比、浸提時(shí)間和浸提溫度均會(huì)對(duì)紅茶多糖得率產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)中，料液比對(duì)多糖提取率的影響最大，其次是浸提溫度，最后為浸提時(shí)間；但從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，提取率與葡萄糖激酶相對(duì)酶活并不呈正相關(guān)關(guān)系。影響紅茶多糖提取率及酶活的因素

很多，除了上述因素外，多糖提取方法、茶葉的采摘時(shí)期、除蛋白試劑的種類和方法等都會(huì)影響紅茶多糖提取率。因此今后還需要對(duì)這些因素進(jìn)行分析，以進(jìn)一步優(yōu)化提取條件，提高提取率，從而在綜合多方面因素的基礎(chǔ)上探討提取率與多糖酶活性的關(guān)系。同時(shí)，對(duì)紅茶多糖其他方面的研究，如分離純化、組分鑒定、分子測(cè)量和生物活性測(cè)定等也有待深入。

參考文獻(xiàn)：

[1]佚名. “信陽(yáng)紅”今年產(chǎn)值25億元[J]. 中國(guó)茶葉，2012（1）：25.

[2]王莉英，俞茂華. 茶多糖的組分及其生物活性[J]. 中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)，2004，11（5）：924-925.

[3]倪德江，陳玉瓊，謝筆鈞，等. 綠茶、烏龍茶、紅茶的茶多糖組成、抗氧化及降血糖作用研究[J]. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2004，26（1）：57-60.

[4]王超，施曉云，祁楊. 茶多糖提取及其穩(wěn)定性研究[J]. 江蘇科技大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，25（2）：187-190.

[5]劉素強(qiáng)，鐘應(yīng)富，吳全，等. 茶多糖的研究及其利用[J]. 南方農(nóng)業(yè)，2009，3（5）：111-113.

[6]趙麗平，肖穎，董翠. 信陽(yáng)綠茶中茶多糖提取工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（10）：245-246.

[7]章銀良，李紅旗，高峻，等. 螺旋藻多糖提取新工藝的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，1999，25（2）：15-18.

[8]林標(biāo)聲，楊生玉，胡曉冰，等. 茯苓液體培養(yǎng)法中羧甲基茯苓多糖（CMP）的提取、純化及鑒定[J]. 河南大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，38（3）：296-300.

[9]王紅慶，趙麗平，朱曉明. 槐花多糖提取工藝的研究[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，50（13）：2733-2735.

[10]周向軍，高義霞，袁毅君，等. 烏龍茶多糖提取工藝及抗氧化作用研究[J]. 中國(guó)釀造，2011（8）：80-84.

摘要：采用簡(jiǎn)單熱水浸提法提取信陽(yáng)紅茶多糖，探討料液比、提取時(shí)間、提取溫度等因素對(duì)多糖提取率及葡萄糖激酶活性的影響。結(jié)果表明：提取紅茶多糖的最佳工藝條件為料液比1 g ∶25 mL、提取時(shí)間6 h、提取溫度95 ℃，該工藝條件下多糖的提取率為3.50%，葡萄糖激酶的相對(duì)酶活比值達(dá)到3.12。多糖提取率與葡萄糖激酶的相對(duì)酶活并不呈正相關(guān)關(guān)系。

關(guān)鍵詞：信陽(yáng)紅茶；多糖；葡萄糖激酶；提取工藝

中圖分類號(hào)： TS201.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）10-0263-02

收稿日期：2013-12-08

基金項(xiàng)目：河南省茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究計(jì)劃（編號(hào)：KX13J11）。

作者簡(jiǎn)介：趙麗平（1979—），女，河南許昌人，碩士，講師，主要從事生物化學(xué)方面的教學(xué)與研究。E-mail：zhaoliping19790224@163.com。信陽(yáng)毛尖歷史悠久，而且香氣濃郁，甘醇爽口，是中國(guó)十大名茶之一。近幾年來(lái)，河南省信陽(yáng)市又生產(chǎn)出紅茶新品種，名為“信陽(yáng)紅”[1]。據(jù)報(bào)道，綠茶的抗氧化性主要來(lái)自于茶多酚，而紅茶的抗氧化性主要來(lái)自于茶多糖。一直以來(lái)，人們對(duì)信陽(yáng)綠茶多酚的研究較多，而對(duì)信陽(yáng)紅茶多糖的研究較少。研究表明，茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗氧化、抗血栓及抗凝血等作用[2-5]。茶多糖的提取方法有很多種，本研究采用操作簡(jiǎn)單、投資少的水提法提取紅茶多糖，并應(yīng)用正交設(shè)計(jì)優(yōu)選法對(duì)紅茶多糖的提取工藝進(jìn)行研究。同時(shí)為揭示多糖的高提取效率與其高活性之間的相關(guān)性，以葡萄糖激酶為例，系統(tǒng)考察了提取條件對(duì)多糖活性的影響，以期為紅茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究及將其作為藥用及食品等多方面功能原料的開(kāi)發(fā)提供理論參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

信陽(yáng)紅茶，購(gòu)自河南省信陽(yáng)市茶市；試驗(yàn)動(dòng)物為昆明種小鼠，由信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系飼養(yǎng)。

分析純無(wú)水乙醇、丙酮、氯仿-正丁醇（武漢中天化工責(zé)任有限公司）；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、ATP、NADP（Solarbio公司）。

1.2儀器與設(shè)備

MZ-10粉碎機(jī)（青島邁科隆粉體技術(shù)設(shè)備有限公司）；101A-2型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海賀德實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司）；DK-S24 型電熱數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；FA1004型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠）；LD5-2A型離心機(jī)（湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；721分光光度計(jì)（上海光學(xué)儀器廠）。

1.3試驗(yàn)方法[6-10]

1.3.1單因素試驗(yàn)將一定量的紅茶在烘箱中干燥后用粉碎機(jī)粉碎，得紅茶細(xì)粉末，用熱水浸提，采用不同料液比（g ∶mL）、不同提取時(shí)間和不同提取溫度提取紅茶多糖。（1）料液比試驗(yàn)。2.1單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1料液比對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖1可知，在提取溫度和提取時(shí)間一定時(shí)，提取率隨料液比的增大呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢(shì)。料液比1 g ∶20 mL時(shí)的提取率達(dá)最大值，而隨液料比進(jìn)一步加大，提取率反而下降，原因可能是由于隨著液料比增大，溶液的黏度降低，紅茶多糖的擴(kuò)散阻力降低，從而有利于多糖的溶出，使多糖得率逐漸提高；但液料比過(guò)大會(huì)引起后續(xù)提取過(guò)程中多糖的損失，導(dǎo)致多糖得率減小。因此從全方位考慮，本試驗(yàn)選擇的料液比的3個(gè)水平為1 g ∶15 mL、1 g ∶20 mL、1 g ∶25 mL作為正交試驗(yàn)的料液比因素。

2.1.2提取時(shí)間對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖2可以看出，在提取溫度和料液比一定時(shí)，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，提取率呈現(xiàn)出先增加后減小的趨勢(shì)，以提取6.0 h的提取率最高，在6.0 h以后，隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，提取率有所下降。這是因?yàn)樵谔崛〉某跏茧A段，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，紅茶多糖的溶解越來(lái)越充分，從而使多糖的提取率逐漸升高；當(dāng)提取一定時(shí)間后，溶出的雜質(zhì)也越來(lái)越多，溶液的黏度增加了，從而阻礙了多糖的擴(kuò)散溶出，使多糖提取率反而下降；此外，也可能是提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致紅茶多糖部分降解所致?；谔崛⌒?、提取成本方面的考慮，將6.0 h定為紅茶多糖的較佳提取時(shí)間，選取5.5、6.0、6.5 h作為正交試驗(yàn)時(shí)間因素的3個(gè)水平。

2.1.3提取溫度對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖3可以看出，紅茶提取率隨著溫度的升高明顯增加。在 90 ℃ 左右時(shí)，紅茶多糖提取率的上升開(kāi)始不很明顯；當(dāng)溫度超過(guò)95 ℃時(shí)，提取率有下降趨勢(shì)，這可能是因?yàn)闇囟冗^(guò)高時(shí)容易引起多糖的降解，因此提取率下降，而溫度過(guò)低則不利于多糖物質(zhì)的溶出。因此，選擇95 ℃作為紅茶多糖的最佳提取溫度，選擇85、90、95 ℃作為正交試驗(yàn)溫度因素的3個(gè)水平。

2.2正交試驗(yàn)結(jié)果

各因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

3結(jié)論

紅茶多糖提取過(guò)程中會(huì)受到多因素的影響，其中料液比、浸提時(shí)間和浸提溫度均會(huì)對(duì)紅茶多糖得率產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)中，料液比對(duì)多糖提取率的影響最大，其次是浸提溫度，最后為浸提時(shí)間；但從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，提取率與葡萄糖激酶相對(duì)酶活并不呈正相關(guān)關(guān)系。影響紅茶多糖提取率及酶活的因素

很多，除了上述因素外，多糖提取方法、茶葉的采摘時(shí)期、除蛋白試劑的種類和方法等都會(huì)影響紅茶多糖提取率。因此今后還需要對(duì)這些因素進(jìn)行分析，以進(jìn)一步優(yōu)化提取條件，提高提取率，從而在綜合多方面因素的基礎(chǔ)上探討提取率與多糖酶活性的關(guān)系。同時(shí)，對(duì)紅茶多糖其他方面的研究，如分離純化、組分鑒定、分子測(cè)量和生物活性測(cè)定等也有待深入。

參考文獻(xiàn)：

[1]佚名. “信陽(yáng)紅”今年產(chǎn)值25億元[J]. 中國(guó)茶葉，2012（1）：25.

[2]王莉英，俞茂華. 茶多糖的組分及其生物活性[J]. 中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)，2004，11（5）：924-925.

[3]倪德江，陳玉瓊，謝筆鈞，等. 綠茶、烏龍茶、紅茶的茶多糖組成、抗氧化及降血糖作用研究[J]. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2004，26（1）：57-60.

[4]王超，施曉云，祁楊. 茶多糖提取及其穩(wěn)定性研究[J]. 江蘇科技大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，25（2）：187-190.

[5]劉素強(qiáng)，鐘應(yīng)富，吳全，等. 茶多糖的研究及其利用[J]. 南方農(nóng)業(yè)，2009，3（5）：111-113.

[6]趙麗平，肖穎，董翠. 信陽(yáng)綠茶中茶多糖提取工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（10）：245-246.

[7]章銀良，李紅旗，高峻，等. 螺旋藻多糖提取新工藝的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，1999，25（2）：15-18.

[8]林標(biāo)聲，楊生玉，胡曉冰，等. 茯苓液體培養(yǎng)法中羧甲基茯苓多糖（CMP）的提取、純化及鑒定[J]. 河南大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，38（3）：296-300.

[9]王紅慶，趙麗平，朱曉明. 槐花多糖提取工藝的研究[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，50（13）：2733-2735.

[10]周向軍，高義霞，袁毅君，等. 烏龍茶多糖提取工藝及抗氧化作用研究[J]. 中國(guó)釀造，2011（8）：80-84.

摘要：采用簡(jiǎn)單熱水浸提法提取信陽(yáng)紅茶多糖，探討料液比、提取時(shí)間、提取溫度等因素對(duì)多糖提取率及葡萄糖激酶活性的影響。結(jié)果表明：提取紅茶多糖的最佳工藝條件為料液比1 g ∶25 mL、提取時(shí)間6 h、提取溫度95 ℃，該工藝條件下多糖的提取率為3.50%，葡萄糖激酶的相對(duì)酶活比值達(dá)到3.12。多糖提取率與葡萄糖激酶的相對(duì)酶活并不呈正相關(guān)關(guān)系。

關(guān)鍵詞：信陽(yáng)紅茶；多糖；葡萄糖激酶；提取工藝

中圖分類號(hào)： TS201.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）10-0263-02

收稿日期：2013-12-08

基金項(xiàng)目：河南省茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究計(jì)劃（編號(hào)：KX13J11）。

作者簡(jiǎn)介：趙麗平（1979—），女，河南許昌人，碩士，講師，主要從事生物化學(xué)方面的教學(xué)與研究。E-mail：zhaoliping19790224@163.com。信陽(yáng)毛尖歷史悠久，而且香氣濃郁，甘醇爽口，是中國(guó)十大名茶之一。近幾年來(lái)，河南省信陽(yáng)市又生產(chǎn)出紅茶新品種，名為“信陽(yáng)紅”[1]。據(jù)報(bào)道，綠茶的抗氧化性主要來(lái)自于茶多酚，而紅茶的抗氧化性主要來(lái)自于茶多糖。一直以來(lái)，人們對(duì)信陽(yáng)綠茶多酚的研究較多，而對(duì)信陽(yáng)紅茶多糖的研究較少。研究表明，茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗氧化、抗血栓及抗凝血等作用[2-5]。茶多糖的提取方法有很多種，本研究采用操作簡(jiǎn)單、投資少的水提法提取紅茶多糖，并應(yīng)用正交設(shè)計(jì)優(yōu)選法對(duì)紅茶多糖的提取工藝進(jìn)行研究。同時(shí)為揭示多糖的高提取效率與其高活性之間的相關(guān)性，以葡萄糖激酶為例，系統(tǒng)考察了提取條件對(duì)多糖活性的影響，以期為紅茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究及將其作為藥用及食品等多方面功能原料的開(kāi)發(fā)提供理論參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

信陽(yáng)紅茶，購(gòu)自河南省信陽(yáng)市茶市；試驗(yàn)動(dòng)物為昆明種小鼠，由信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系飼養(yǎng)。

分析純無(wú)水乙醇、丙酮、氯仿-正丁醇（武漢中天化工責(zé)任有限公司）；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、ATP、NADP（Solarbio公司）。

1.2儀器與設(shè)備

MZ-10粉碎機(jī)（青島邁科隆粉體技術(shù)設(shè)備有限公司）；101A-2型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海賀德實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司）；DK-S24 型電熱數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；FA1004型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠）；LD5-2A型離心機(jī)（湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；721分光光度計(jì)（上海光學(xué)儀器廠）。

1.3試驗(yàn)方法[6-10]

1.3.1單因素試驗(yàn)將一定量的紅茶在烘箱中干燥后用粉碎機(jī)粉碎，得紅茶細(xì)粉末，用熱水浸提，采用不同料液比（g ∶mL）、不同提取時(shí)間和不同提取溫度提取紅茶多糖。（1）料液比試驗(yàn)。2.1單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1料液比對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖1可知，在提取溫度和提取時(shí)間一定時(shí)，提取率隨料液比的增大呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢(shì)。料液比1 g ∶20 mL時(shí)的提取率達(dá)最大值，而隨液料比進(jìn)一步加大，提取率反而下降，原因可能是由于隨著液料比增大，溶液的黏度降低，紅茶多糖的擴(kuò)散阻力降低，從而有利于多糖的溶出，使多糖得率逐漸提高；但液料比過(guò)大會(huì)引起后續(xù)提取過(guò)程中多糖的損失，導(dǎo)致多糖得率減小。因此從全方位考慮，本試驗(yàn)選擇的料液比的3個(gè)水平為1 g ∶15 mL、1 g ∶20 mL、1 g ∶25 mL作為正交試驗(yàn)的料液比因素。

2.1.2提取時(shí)間對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖2可以看出，在提取溫度和料液比一定時(shí)，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，提取率呈現(xiàn)出先增加后減小的趨勢(shì)，以提取6.0 h的提取率最高，在6.0 h以后，隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，提取率有所下降。這是因?yàn)樵谔崛〉某跏茧A段，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，紅茶多糖的溶解越來(lái)越充分，從而使多糖的提取率逐漸升高；當(dāng)提取一定時(shí)間后，溶出的雜質(zhì)也越來(lái)越多，溶液的黏度增加了，從而阻礙了多糖的擴(kuò)散溶出，使多糖提取率反而下降；此外，也可能是提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致紅茶多糖部分降解所致。基于提取效率、提取成本方面的考慮，將6.0 h定為紅茶多糖的較佳提取時(shí)間，選取5.5、6.0、6.5 h作為正交試驗(yàn)時(shí)間因素的3個(gè)水平。

2.1.3提取溫度對(duì)紅茶多糖化合物提取率的影響由圖3可以看出，紅茶提取率隨著溫度的升高明顯增加。在 90 ℃ 左右時(shí)，紅茶多糖提取率的上升開(kāi)始不很明顯；當(dāng)溫度超過(guò)95 ℃時(shí)，提取率有下降趨勢(shì)，這可能是因?yàn)闇囟冗^(guò)高時(shí)容易引起多糖的降解，因此提取率下降，而溫度過(guò)低則不利于多糖物質(zhì)的溶出。因此，選擇95 ℃作為紅茶多糖的最佳提取溫度，選擇85、90、95 ℃作為正交試驗(yàn)溫度因素的3個(gè)水平。

2.2正交試驗(yàn)結(jié)果

各因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

3結(jié)論

紅茶多糖提取過(guò)程中會(huì)受到多因素的影響，其中料液比、浸提時(shí)間和浸提溫度均會(huì)對(duì)紅茶多糖得率產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)中，料液比對(duì)多糖提取率的影響最大，其次是浸提溫度，最后為浸提時(shí)間；但從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，提取率與葡萄糖激酶相對(duì)酶活并不呈正相關(guān)關(guān)系。影響紅茶多糖提取率及酶活的因素

很多，除了上述因素外，多糖提取方法、茶葉的采摘時(shí)期、除蛋白試劑的種類和方法等都會(huì)影響紅茶多糖提取率。因此今后還需要對(duì)這些因素進(jìn)行分析，以進(jìn)一步優(yōu)化提取條件，提高提取率，從而在綜合多方面因素的基礎(chǔ)上探討提取率與多糖酶活性的關(guān)系。同時(shí)，對(duì)紅茶多糖其他方面的研究，如分離純化、組分鑒定、分子測(cè)量和生物活性測(cè)定等也有待深入。

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