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    免疫滲濾法檢測(cè)血液及尿液HIV抗體的應(yīng)用評(píng)價(jià)

    2014-10-26 03:50:02楊志東
    微生物學(xué)雜志 2014年3期
    關(guān)鍵詞:符合率尿液試劑

    王 倩,楊志東,崔 晨,尚 紅

    (中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,遼寧 沈陽 110001)

    人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)是獲得性免疫缺陷綜合癥(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)的病原體。自美國1981年診斷出首例AIDS以來,HIV在全球范圍內(nèi)迅速播散,我國AIDS疫情處于總體低流行,特定人群和局部地區(qū)高流行的態(tài)勢(shì)[1-3]。目前,HIV抗體檢測(cè)是臨床診斷HIV感染的主要依據(jù),但靜脈采血篩查HIV抗體為有創(chuàng)操作,而且容易造成醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露感染,應(yīng)用無創(chuàng)采集的尿液、唾液等樣本檢測(cè)HIV抗體容易被受試者接受,且能夠降低職業(yè)暴露的風(fēng)險(xiǎn)。北京萬泰生物藥業(yè)公司HIV1+2型抗體診斷試劑盒(免疫滲濾法)可以快速檢測(cè)尿液及血漿標(biāo)本中HIV抗體,本研究采用對(duì)照試驗(yàn)方法,評(píng)價(jià)該試劑盒的臨床檢測(cè)性能,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 研究對(duì)象 沈陽地區(qū)背景清晰的受試人員200例:中國醫(yī)科大學(xué)艾滋病研究所確診的HIV陽性感染者80例(蛋白免疫印跡法確證HIV抗體陽性),AIDS高危人群40例,健康體檢人群80例。

    1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 考核試劑HIV1+2型血液、尿液抗體診斷試劑盒(免疫滲濾法)由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供,參考試劑HIV抗體診斷試劑盒(ELISA法)購自法國生物梅里埃公司,免疫印跡法HIV抗體檢測(cè)試劑盒購自新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 標(biāo)本采集 采集研究對(duì)象的血液及尿液標(biāo)本,血液標(biāo)本按臨床采血技術(shù)規(guī)范要求抽取靜脈血3~5 mL,離心留取血漿備用;尿液標(biāo)本采集隨機(jī)尿3~5 mL,及時(shí)送檢。

    1.2.2 檢測(cè)方法 嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,應(yīng)用參考試劑檢測(cè)研究對(duì)象的血漿樣本,應(yīng)用考核試劑分別檢測(cè)同一研究對(duì)象的血漿及尿液標(biāo)本,確??己嗽噭┟看卧囼?yàn)均為有效試驗(yàn),考核試劑與參考試劑檢測(cè)結(jié)果不一致時(shí)應(yīng)對(duì)考核試劑的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行復(fù)檢,并經(jīng)蛋白免疫印跡法確認(rèn)。

    1.2.3 結(jié)果判讀 根據(jù)考核試劑說明書要求,對(duì)照點(diǎn)不顯色,檢測(cè)點(diǎn)無論顯色與否,結(jié)果均判定為無效(圖1);對(duì)照點(diǎn)顯色,檢測(cè)點(diǎn)不顯色,結(jié)果判定為陰性(圖2);對(duì)照點(diǎn)顯色,檢測(cè)點(diǎn)顯色,結(jié)果判定為陽性(圖3)。

    圖1 無效結(jié)果Fig.1 The invalid result

    圖2 陰性結(jié)果Fig.2 The negative result

    圖3 陽性結(jié)果Fig.3 The positive result

    1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)算考核試劑與參考試劑檢測(cè)的陽性符合率、陰性符合率、總符合率與Kappa值,Kappa值與一致性強(qiáng)度關(guān)系見表1。

    表1 Kappa值與一致性強(qiáng)度關(guān)系Table 1 Kappa value and consistency intensity

    2 結(jié)果與分析

    2.1 血漿樣本HIV抗體檢測(cè)情況

    考核試劑與參考試劑結(jié)果均顯示80例臨床確診的HIV陽性感染者及2例艾滋病高危人群HIV抗體陽性??己嗽噭┡c參考試劑檢測(cè)結(jié)果相比較,陽性符合率 100.00%,陰性符合率100.00%,總符合率 100.00%,Kappa 值 1.00,一致性強(qiáng)度為最強(qiáng)(表2)。

    2.2 尿液樣本HIV抗體檢測(cè)情況

    考核試劑檢測(cè)結(jié)果顯示,55例臨床確診的HIV陽性感染者及1例艾滋病高危人群尿液HIV抗體陽性??己嗽噭┡c參考試劑檢測(cè)結(jié)果相比較,陽性符合率68.29%、陰性符合率100.0%、總符合率87.00%,Kappa值 0.72,一致性強(qiáng)度為高度(表3)。

    表2 血漿樣本HIV抗體檢測(cè)結(jié)果Table 2 HIV antibody results of plasma samples

    表3 尿液樣本HIV抗體檢測(cè)結(jié)果Table 3 HIV antibody results of urine samples

    3 討論

    研究顯示,HIV感染者不僅血液含有HIV抗體,其尿液、唾液、淚液、精液及陰道分泌物中均含有HIV抗體[4-6]。尿液標(biāo)本最易獲得且采集具有無損傷性,其HIV抗體與血液抗體平行,主要為IgG。國外上世紀(jì)末已有尿液HIV抗體的檢測(cè)報(bào)道,國內(nèi)近年開始有尿液HIV抗體的檢測(cè)技術(shù)研究[7-8]。萬泰藥業(yè)公司生產(chǎn)的免疫滲濾法HIV抗體診斷試劑盒可用于檢測(cè)血液及尿液標(biāo)本中HIV-1及HIV-2抗體,本研究以法國生物梅里埃公司HIV抗體診斷試劑盒(ELISA法)為參照,評(píng)估考核試劑萬泰藥業(yè)公司HIV1+2型抗體診斷試劑盒的臨床檢測(cè)性能。

    對(duì)平行采集的200例背景清晰的受試者血漿及尿液標(biāo)本應(yīng)用考核試劑檢測(cè),并與參考試劑檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果顯示,考核試劑檢測(cè)血漿HIV抗體與參考試劑相比較,陽性符合率、陰性符合率和總符合率均達(dá)到100%,Kappa值1.00,檢測(cè)結(jié)果一致性強(qiáng)度為最強(qiáng);考核試劑檢測(cè)尿液HIV抗體與參考試劑相比較,陽性符合率68.29%,陰性符合率100%,總符合率87.00%,Kappa值0.72,檢測(cè)結(jié)果一致性強(qiáng)度為高度。

    本研究顯示,尿液HIV抗體檢測(cè)敏感性較血液標(biāo)本略低,200例受試者中,25例臨床確診的HIV陽性感染者和1例血液HIV抗體陽性(經(jīng)蛋白免疫印跡法確認(rèn))的AIDS高危人群,尿液標(biāo)本經(jīng)考核試劑檢測(cè)并復(fù)檢后HIV抗體均陰性,分析原因:①受試者尿液HIV抗體濃度低于血液標(biāo)本,與血漿相比,尿液的黏度很低,流過檢測(cè)卡的速度顯著增加,從而使抗原抗體結(jié)合的反應(yīng)時(shí)間縮短;②尿液中的化學(xué)物質(zhì)如無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、酸堿度等可以影響免疫反應(yīng)中抗原抗體的反應(yīng)活性,降低反應(yīng)的敏感度;③大量攝入液體或服用利尿劑等化學(xué)藥物影響尿液HIV抗體的陽性檢出率[8]。此外,有研究報(bào)道[9],尿液存貯時(shí)間延長可導(dǎo)致假陰性結(jié)果的產(chǎn)生。因此,尿液采集后應(yīng)盡快檢測(cè)。

    綜上所述,免疫滲濾法HIV抗體診斷試劑盒對(duì)血漿樣本檢測(cè)性能優(yōu)越,并適合尿液標(biāo)本的HIV抗體檢測(cè),由于尿液標(biāo)本采集具有無創(chuàng)傷性且容易獲得,大大降低了醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露的風(fēng)險(xiǎn)。免疫滲濾法較傳統(tǒng)ELISA法操作簡便、快速,尤其適合基層醫(yī)院及大規(guī)模樣本HIV抗體篩查。

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