毛細(xì)管氣相色譜法測定鹽酸頭孢卡品酯原料藥中殘留溶劑

劉瑞萍，邢 軍，劉文娟，邱麗倩，黃友芬

(1.山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，山東濟(jì)寧272100;2.濟(jì)寧市藥品檢驗(yàn)所，山東 濟(jì)寧272020)

鹽酸頭孢卡品酯屬第4代口服頭孢類抗生素，主要適用于敏感菌所致的呼吸道感染如肺炎、支氣管炎、咽喉炎、扁桃體炎等。本試驗(yàn)根據(jù)《中國藥典》2010年版(二部)對有機(jī)溶劑殘留量測定的指導(dǎo)原則［1］和相關(guān)文獻(xiàn)［2，3］采用毛細(xì)管氣相色譜法，測定了鹽酸頭孢卡品酯原料藥中乙醇、乙腈、乙酸乙酯、四氫呋喃的殘留量，方法簡便靈敏，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 7890A氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測器;十萬分之一電子天平。

1.2 樣品及試劑 乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、甲基異丁酮、異丙醚、苯甲醚和N，N－二甲基甲酰胺均為分析純。鹽酸頭孢卡品酯原料藥3批(批號為20130901、20130902、20130903)，由山東魯抗醫(yī)藥提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:DB－1701(30 m×0.53 mm，1.0 μm);載氣為氮?dú)?載氣流速:1 mL·min－1;分流比:10∶1;柱溫:40℃;進(jìn)樣口溫度:180℃;檢測器溫度:200℃;進(jìn)樣量:1 μL。在此條件下7種有機(jī)溶劑均能有效分離，結(jié)果如圖1。

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品溶液的制備 分別精密稱取乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、甲基異丁酮、異丙醚、苯甲醚各適量，用N，N－二甲基甲酰胺溶解并定容至100 mL容量瓶中，作為對照品儲備液。再各精密量取此溶液5 mL置50 mL容量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺制成含乙醇0.476 8 mg·mL－1、二氯甲烷0.058 7 mg·mL－1、乙酸乙酯0.480 1 mg·mL－1、二氧 六 環(huán) 0.0371 mg· mL－1、甲 基 異 丁 酮0.498 1 mg·mL－1、異丙醚 0.487 4 mg·mL－1、苯甲醚0.501 4 mg·mL－1的混合對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制 取鹽酸頭孢卡品酯樣品約1 g，精密稱取，置10 mL容量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺溶解并定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

圖1 對照品溶液色譜圖

2.3 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.2”項(xiàng)下的對照溶液1 mL，重復(fù)進(jìn)樣6次。以峰面積計(jì)算。結(jié)果乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、甲基異丁酮、異丙醚、苯甲醚的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.8%、1.4%、1.6% 、1.5% 、1.5% 、1.9% 、1.9% 。

2.4 線性關(guān)系與范圍 精密吸取對照儲備液1.7、1.3、0.9、0.5、0.1 mL，置于10 mL 容量瓶中，加N，N－二甲基甲酰胺溶解并定量稀釋至刻度，搖勻，作為供試液，按照上述色譜條件，精密量取供試液1 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以各溶液組分峰面積Y為縱坐標(biāo)，濃度 X(μg·mL－1)為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

表1 線性關(guān)系考察結(jié)果

2.5 回收率試驗(yàn) 取鹽酸頭孢卡品酯原料約1 g，精密稱定，置10 mL容量瓶中，共9份，再分別精密加入對照儲備液0.4、0.5、0.6 mL，每個(gè)濃度平行3份，用N，N－二甲基甲酰胺溶解并稀釋至刻度，搖勻，制得相當(dāng)于檢查限度80%、100%、120%對照品溶液，依法測定并計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 檢測限試驗(yàn) 采用對照品溶液逐步稀釋法，以信噪比約為3∶1測得最低檢測濃度(μg·mL－1)分別為:乙醇1.39、二氯甲烷0.98、乙酸乙酯1.12、甲基異丁酮0.91、二氧六環(huán)0.91、異丙醚0.86、苯甲醚0.83。

2.7 定量限試驗(yàn) 采用對照品溶液逐步稀釋法，以信噪比約為10∶1測得最低定量濃度(μg·mL－1)分別為:乙醇4.21、二氯甲烷3.05、乙酸乙酯3.3、甲基異丁酮 2.64、二氧六環(huán) 2.92、異丙醚 2.4、苯甲醚2.32。

2.8 樣品測定 取本品約1 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，加N，N－二甲基甲酰胺溶解并定量稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，依法測定，結(jié)果見表3。

表3 樣品測定結(jié)果

3 討論

3.1 為保證其中的殘留有機(jī)物完全釋放，必須選擇適合的溶劑完全溶解待測樣品。本試驗(yàn)選用溶解性好、沸點(diǎn)高、出峰晚的N，N－二甲基甲酰胺為溶劑，可提高檢測靈敏度和改善峰型并且有機(jī)溶劑在N、N－二甲基甲酰胺中較穩(wěn)定，有利于檢測。

3.2 本試驗(yàn)采用了程序升溫，首先在起始溫度40℃維持10 min，再以15℃·min－1的速率升至180℃，保持5 min，可較快除去殘留溶劑，避免影響以后樣品的檢測。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄61 －65.

［2］吳羽嵐，王磊，鐘春華.鹽酸頭孢卡品酯中有機(jī)溶劑殘留量檢測方法研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006，17(2):219－220.

［3］秦立，胡昌勤，劉文英.頂空氣相色譜法測定頭孢泊肟酯中有機(jī)溶劑殘留量［J］.藥物分析雜志，2003，23(6):452－454.