山竹提取物有效成分測(cè)定及其多糖組成分析

楊 青 趙麗君 周大江 高瑞希 楊光忠 李 竣

1.湖北省棗陽(yáng)市第一人民醫(yī)院藥劑科，湖北棗陽(yáng) 441200；2.中南民族大學(xué)藥學(xué)院，湖北武漢 430074

山竹（Garcinia mangostana L.）為藤黃科（Guttirae）山竹子屬藥食兩用水果，廣泛分布于馬來(lái)西亞、緬甸、泰國(guó)等東南亞國(guó)家，現(xiàn)已有大量栽培。山竹果中富含黃酮、多糖、蛋白質(zhì)和脂類(lèi)等化合物，是我國(guó)傣族及東南亞國(guó)家常用的傳統(tǒng)藥用植物。山竹果實(shí)主要化學(xué)成分為呫噸酮化合物[1]，現(xiàn)代藥理學(xué)表明山竹果實(shí)具有抗炎、抗菌、抗氧化等多種生物活性[2]，山竹果皮中存在的氧雜蒽酮類(lèi)化合物具有對(duì)脂肪酸合酶 （FAS）全反應(yīng)的抑制作用[3]。楊連珍[4]發(fā)現(xiàn)山竹果（7周成熟期）中3種含異戊二烯基均含有一種對(duì)人類(lèi)癌細(xì)胞具有一定抗性的成分。有研究發(fā)現(xiàn)山竹能夠加速豚鼠的皮膚創(chuàng)面愈合，重造創(chuàng)面上皮化[5]。山竹對(duì)燒傷的創(chuàng)面有一定的抑菌作用，同時(shí)減輕表面液體滲出，促進(jìn)傷口愈合的作用[6-8]。研究表明山竹子根乙醇提取物對(duì)細(xì)胞分泌HBsAg、HBeAg有抑制作用[9]。通過(guò)對(duì)嶺南山竹子藥用的研究發(fā)現(xiàn)，嶺南山竹子對(duì)小鼠熱板致痛、輻射熱甩尾反應(yīng)和化學(xué)致痛有明顯的抑制作用，可明顯減少小鼠自主活動(dòng)；對(duì)二甲苯所致小鼠耳部腫脹以及對(duì)大鼠蛋清性足腫脹和棉球肉芽腫有明顯的抑制作用[10]。對(duì)山竹子根皮進(jìn)行抗寄生蟲(chóng)活性成分研究表明，發(fā)現(xiàn)其具有中等抗惡性瘧原蟲(chóng)與布氏錐蟲(chóng)的活性，顯示較強(qiáng)的選擇性抗寄生蟲(chóng)活性和細(xì)胞毒性[11]。山竹果皮提取的總黃酮對(duì)羥自由基、超氧陰離子自由基具有清除作用，并能有效地清除亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺的合成，清除體內(nèi)亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺的合成是防治癌癥的有效途徑[12]。戴聰杰等[13]采用化學(xué)分析方法對(duì)山竹的水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪、水解氨基酸和碳水化合物等成分的含量進(jìn)行測(cè)定，研究顯示山竹的營(yíng)養(yǎng)非常豐富，是很有發(fā)展前途的營(yíng)養(yǎng)食品資源。同時(shí)研究顯示山竹提取物具有很好的美白、保濕、抗衰老的功效[14]。為了更好地使用和開(kāi)發(fā)山竹藥用價(jià)值，本研究測(cè)定了山竹新鮮果肉提取物中的多糖、蛋白質(zhì)含量及果品提取物中總黃酮的含量，分析了果肉中多糖的組成成分，為山竹的產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)提供一定的理論依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 試劑

牛血清蛋白及考馬斯亮藍(lán)G-250（超級(jí)純，廣州微佳科技有限公司），D-葡萄糖 （98.0%，Aladdin industrial Corporation），蘆丁（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào) 10080-200707），標(biāo)準(zhǔn)單糖（Sigma 公司），三甲基氯硅烷，六甲基二硅醚烷，吡啶，三氟乙酸，硼氫化鈉，氫氧化鈉，95%乙醇（工業(yè)），濃硫酸、苯酚、亞硝酸鈉、硝酸鋁等所用試劑均為分析純。

1.2 材料

山竹于2010年9月購(gòu)于武漢沙湖水果批發(fā)市場(chǎng)，經(jīng)中南民族大學(xué)藥學(xué)院李竣副教授鑒定為Garcinia mangostana L.的果實(shí)，提取物供試品由中南民族大學(xué)藥學(xué)院制備。

1.3 儀器

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（UV-1800UV美譜達(dá)），氣相色譜儀（6890N Network GC System ，美國(guó) Agilent），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52（上海亞榮生化儀器），真空干燥箱（XMTD-8222型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備），恒溫干燥箱（上海索譜儀器），超低溫冷凍儲(chǔ)存箱（中科美菱），低速離心機(jī)（TD25型，長(zhǎng)沙平凡儀器儀表），冷凍干燥機(jī)（FD-1B-50型，北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R-1001M型（鄭州長(zhǎng)城），循環(huán)水式多用真空泵SHB-Ⅲ（鄭州長(zhǎng)城），恒溫水浴鍋（鄭州長(zhǎng)城），超聲波清洗器KQ-500E（昆山市超聲儀器），硅膠板試劑（青島海洋化工廠），電子天平AB265-S型，電子天平AR2140型（上海奧豪斯儀器）。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取工藝流程

取新鮮山竹果皮干燥粉碎后的6.4 kg，用95%乙醇各回流提取3次，每次2 h，合并提取液減壓濃縮得到山竹果皮提取物。取新鮮的山竹果肉854 g分別依次用95%乙醇提取1次，蒸餾水回流提取3次，每次2 h，合并蒸餾水提取液，減壓濃縮得到山竹果肉提取物。

2.2 山竹果肉提取物多糖含量的測(cè)定[15]

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取干燥至恒重的葡萄糖50 mg，加蒸餾水溶解定容至0.1 mg/mL，即得對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密稱(chēng)取干燥的山竹果肉提取物適量，至100 mL容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻即得供試品溶液。

2.2.3 苯酚溶液的制備 稱(chēng)取苯酚6 g至100 mL容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻即得苯酚試劑。

2.2.4 最大檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液1 mL至10 mL具塞玻璃試管中，加苯酚溶液0.5 mL，振搖，迅速加入濃硫酸5 mL，振搖后放置15 min。待冷卻后，紫外分光光度計(jì)上做全波長(zhǎng)掃描，得到最大吸收波長(zhǎng)λmax為480 nm，確定480 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密量取對(duì)照品溶液1、2、3、4、5 mL，分別加蒸餾水定容至10 mL容量瓶中。搖勻各取1 mL，以下操作按“2.2.4”項(xiàng)下方法顯色。在480 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，求得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)性方程為y=17.0888x+0.0108，r=0.9980，提示該溶液在 0.01～0.05 mg/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.2.6 精密度試驗(yàn) 取0.05 mg/mL的對(duì)照品溶液按“2.2.4”項(xiàng)下方法顯色，結(jié)果顯示RSD為0.226%（n=6）。

2.2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批次供試品溶液，按“2.2.4”項(xiàng)下方法顯色，結(jié)果顯示RSD為2.85%（n=6）。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批次供試品溶液，按“2.2.4”項(xiàng)下方法顯色，分別在顯色 0、5、10、20、30、40 min 后測(cè)定吸光度值，RSD為2.87%，結(jié)果表明顯色后40 min內(nèi)測(cè)定測(cè)定無(wú)顯著性差異，為保證準(zhǔn)確性測(cè)定的時(shí)間選擇在30 min內(nèi)完成。

2.2.9 回收率試驗(yàn) 精密吸取葡萄糖對(duì)照品溶液6份，分別加入不同量的已知多糖含量的供試品液，以下操作按“2.2.4”項(xiàng)下方法進(jìn)行。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 山竹果肉多糖加樣回收率（n=6）

2.2.10 供試品含量測(cè)定 取果肉提取物供試品溶液，按“2.2.4”項(xiàng)下方法進(jìn)行，山竹果肉提取物中多糖含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 山竹果肉提取物多糖含量（n=3）

2.3 山竹果肉提取物蛋白質(zhì)含量的測(cè)定[16]

2.3.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取250 mg牛血清蛋白（BSA），加生理鹽水制成濃度為0.1 mg/mL的溶液，即得對(duì)照品溶液；精密稱(chēng)取50 mg考馬斯亮藍(lán)G-250至500 mL容量瓶中，加入25 mL 95%乙醇﹑50 mL 85%磷酸，振搖溶解，生理鹽水定容得考馬斯亮藍(lán)溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備 精密稱(chēng)取干燥的山竹果肉提取物適量，至250 mL容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻即得供試品溶液。

2.3.3 最大檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液1 mL，加考馬斯亮藍(lán)溶液5 mL，搖勻，靜置2 min。紫外分光光度計(jì)上做全波長(zhǎng)掃描，得到最大吸收波長(zhǎng)λmax為590 nm，確定590 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密量取對(duì)照品溶液0、0.8、1.4、2.0、2.6、3.2 mL，分別加蒸餾水定容至 10 mL 容量瓶中。搖勻各取1 mL，以下操作按“2.3.3”項(xiàng)下方法顯色。在590 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，求得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)性方程為y=25.0039x+0.0496，r=0.9997，提示該溶液在0.008～0.032 mg/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.3.5 精密度試驗(yàn) 取0.01 mg/mL的對(duì)照品溶液按“2.3.3”項(xiàng)下方法顯色，結(jié)果顯示RSD為0.29%（n=6）。

2.3.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批次供試品溶液，按“2.3.3”項(xiàng)下方法顯色，結(jié)果顯示RSD為2.79%（n=6）。

2.3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批次供試品溶液，按“2.3.3”項(xiàng)下方法顯色，分別在顯色 0﹑5﹑10﹑15﹑20﹑25﹑30 min后測(cè)定吸光度值，RSD為3.21%，結(jié)果表明顯色后30 min內(nèi)測(cè)定測(cè)定無(wú)顯著性差異，為保證準(zhǔn)確性測(cè)定的時(shí)間選擇在20 min內(nèi)完成。

2.3.8 回收率試驗(yàn) 精密吸取BSA對(duì)照品6份，分別加入不同量的已知含量的供試品液，以下操作按“2.3.3”項(xiàng)下方法進(jìn)行，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 山竹果肉提取物蛋白質(zhì)加樣回收率（n=6）

2.3.9 供試品含量測(cè)定 取山竹果肉提取物供試品溶液，按“2.2.4”項(xiàng)下方法進(jìn)行，山竹果肉提取物中蛋白質(zhì)含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 山竹果肉提取物中蛋白質(zhì)含量（n=3）

2.4 山竹果皮提取物總黃酮含量的測(cè)定[17]

2.4.1 對(duì)照品、供試品溶液的制備 取蘆丁對(duì)照品10 mg，用95%乙醇溶解，并定容至100 mL，即得0.1 mg/mL對(duì)照品溶液，精密稱(chēng)取山竹果皮提取物于100 mL容量瓶中加95%乙醇溶解定容即得供試品溶液。配制5%NaNO3溶液，10%Al（NO3）3溶液，20%NaOH 溶液。

2.4.2 最大檢測(cè)波長(zhǎng)的測(cè)定 分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液4 mL，置于25 mL容量瓶中，加5%NaNO3溶液 1 mL，搖勻放置 6 min，加 10%Al（NO3）3溶液 1 mL，搖勻放置6 min，加20%NaOH試液10 mL，再加蒸餾水定容，搖勻放置15 min，以95%乙醇為空白參比。紫外分光光度計(jì)上做全波長(zhǎng)掃描，得到最大吸收波長(zhǎng)λmax為500 nm，確定500 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.4.3 校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密量取對(duì)照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，分別加蒸餾水定容至 10 mL容量瓶中。搖勻各取1 mL，以下操作按“2.4.2”項(xiàng)下方法顯色。在500 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，求得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)性方程為y=9.3890x+0.0307，r=0.9971，提示該溶液在0.02～0.06 mg/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.4.4 精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液按“2.4.2”項(xiàng)下方法顯色，測(cè)定吸收度值連續(xù)測(cè)定6次，RSD=0.328%（n=6）。

2.4.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)的供試品（批號(hào)100105）制備6份供試品溶液，按“2.4.2”項(xiàng)下方法操作顯色，測(cè)定吸收度值RSD=3.14%（n=6）。

2.4.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取對(duì)照品試液按“2.4.2”項(xiàng)下方法操作顯色，在顯色10、20、30 min后測(cè)定吸收度值，結(jié)果表明顯色后30 min內(nèi)測(cè)定測(cè)定無(wú)顯著性差異，為保證準(zhǔn)確性測(cè)定的時(shí)間選擇在20 min內(nèi)完成。

2.4.7 回收率試驗(yàn) 精密吸取蘆丁對(duì)照品6份，分別加入不同量的已知含量的供試品液，以下操作按“2.4.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 山竹果皮提取物總黃酮加樣回收率（n=6）

2.4.8 供試品含量的測(cè)定 取山竹果皮提取物供試品溶液，按“2.4.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行，山竹果皮提取物中總黃酮含量，結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 山竹果皮提取物總黃酮含量（n=3）

2.5 山竹果肉提取物多糖成分分析

2.5.1 多糖提取 稱(chēng)取15 g山竹果肉提取物，加蒸餾水150 mL，于90℃水浴加熱2.5 h，離心過(guò)濾。濾液用Sevage 試液（氯仿∶正丁醇=4∶1，體積比）按 1∶5 充分混勻，振蕩25 min，4000 r/min離心15 min，收集上清液，重復(fù)處理至氯仿與水層間無(wú)膠狀物產(chǎn)生。加入無(wú)水乙醇至醇濃度為70%，4℃靜置12 h，過(guò)濾，冷凍干燥得較純多糖[18-19]。

2.5.2 多糖水解，單糖還原 取0.5～1.0 mg多糖溶解在1 mL 4 mol/L的三氟乙酸（TFA）中，充氮?dú)饧由w密封，100℃水解4 h，用氮?dú)獬?。水解糖樣溶?.5 mL 0.05 mol/L氫氧化鈉溶液，加5～10 mg硼氫化鈉，在60℃還原1 h，加乙酸至無(wú)氣泡逸出。將產(chǎn)物冷凍干燥，加1 mL甲醇并振蕩溶解，用氮?dú)獬状迹磸?fù)5次除去硼酸根。產(chǎn)物在含有五氧化二磷的真空干燥箱中干燥5 h。

2.5.3 單糖甲基化，氣相色譜分析 干燥產(chǎn)物加1 mL 4A分子篩干燥的吡啶，振蕩溶解，再依次加入0.5 mL六甲基二硅醚烷，0.2 mL三甲基氯硅烷，振蕩，混合均勻，置4℃冰箱反應(yīng)12 h，產(chǎn)物用離心機(jī)離心8 min（4000 r/min），取上清液進(jìn)行氣相分析。氣相色譜條件為：HP-5 石英毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），程序升溫范圍130～290℃，每分鐘升高10℃，進(jìn)樣口溫度 295℃，載氣氮?dú)饬魉?1.0 mL/min，分流比 50∶1，檢測(cè)器溫度300℃。在此方法下對(duì)各單糖（圖1）和提取物多糖（圖2）進(jìn)行檢測(cè)并得到相關(guān)氣相色譜圖。各單糖、提取物多糖氣相色譜圖分別見(jiàn)圖1、2。

圖1 單糖混合液氣相色譜測(cè)定結(jié)果

圖2 山竹多糖氣相色譜測(cè)定結(jié)果

2.5.4 標(biāo)準(zhǔn)單糖和提取物多糖氣相色譜 將標(biāo)準(zhǔn)單糖和多糖分別進(jìn)樣進(jìn)行氣相分析，結(jié)果見(jiàn)表7、8。其中氣相色譜的保留時(shí)間可以確定單糖種類(lèi)，色譜峰面積可以估算單糖含量。從表7顯示的結(jié)果說(shuō)明，7種單糖保留時(shí)間主要集中在8～11 min，部分色譜峰還未達(dá)到基線(xiàn)的分離，果糖因其結(jié)構(gòu)的變化產(chǎn)生兩個(gè)信號(hào)，其他單糖均為一個(gè)信號(hào)。

表7 各單糖氣相色譜分析結(jié)果

表8 山竹果肉提取物多糖氣相色譜結(jié)果

從圖1、2可明確看出山竹果肉提取物多糖結(jié)果中的D-木糖、D-阿拉伯糖、D-果糖、D-葡萄糖與各單糖相對(duì)應(yīng)，結(jié)合表7和表8保留時(shí)間表明山竹果肉提取物多糖由D-木糖、D-阿拉伯糖、D-果糖、D-葡萄糖組分，摩爾比為 1.34∶1.66∶1.00∶40.06。

3 討論

通過(guò)文獻(xiàn)的調(diào)研發(fā)現(xiàn)，對(duì)山竹提取物質(zhì)量的研究，總黃酮含量的測(cè)定主要集中在果皮，多糖和蛋白質(zhì)等的含量測(cè)定集中在果肉，筆者前期分別對(duì)山竹果皮提取物中多糖和蛋白質(zhì)含量以及果肉中總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果表明山竹果皮提取物中多糖含量為27.12%，蛋白質(zhì)含量為4.84%，山竹果肉提取物中總黃酮含量為0.39%。與本研究中含量測(cè)定結(jié)果相比較，果肉提取物中多糖含量遠(yuǎn)大于果皮提取物，而果皮中富含有黃酮類(lèi)成分。

本實(shí)驗(yàn)用苯酚-硫酸法測(cè)定山竹果肉提取物的含糖量，該法反應(yīng)迅速完全，產(chǎn)生的有色物質(zhì)穩(wěn)定準(zhǔn)確率較高，并且顯色反應(yīng)與多糖濃度存在定量關(guān)系，簡(jiǎn)便快速，靈敏易行，可以用于多糖的含量測(cè)定。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，854 g新鮮的山竹果肉可以得到多糖提取物131 g，測(cè)定多糖含量為84.99%，換算新鮮山竹果肉中含糖量為13%。用NaNO3-Al（NO3）3的方法測(cè)定總黃酮的含量，并且精密度良好在30 min內(nèi)穩(wěn)定，在20 min內(nèi)完成測(cè)定，此法方便可行可以用于山竹總黃酮含量的測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜法將山竹果肉提取物多糖進(jìn)行了分析，山竹果肉提取物多糖由D-葡萄糖、D-木糖、D-阿拉伯糖和D-果糖組組成，摩爾比為1.34∶1.66∶1.00∶40.06。有一種單糖因單糖對(duì)照品有限未有確定，從各種單糖摩爾比例可以看出山竹果肉提取物多糖是由葡萄糖為主的葡聚糖組成的雜多糖，具體的鏈接方式還需要更多的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)予以證實(shí)。

[1]趙驍宇，徐增，藍(lán)文健，等.山竹的化學(xué)成分及其呫噸酮類(lèi)化合物的藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥，2013，44（8）：1052-1061.

[2]吳海強(qiáng).山竹果皮化學(xué)成分及其生物活性的研究[D].廈門(mén)：廈門(mén)大學(xué)，2013.

[3]權(quán)小芳，馬曉豐.氧雜蒽酮對(duì)脂肪酸合酶的抑制作用及構(gòu)效分析[J].中國(guó)科學(xué)院研究生院學(xué)報(bào)，2012，29（6）：841-846.

[4]楊連珍.從山竹子幼果中提取含異戊二烯基原料[J].世界熱帶農(nóng)業(yè)信息，2006，（12）：47.

[5]廖紅，陳紆，黃雙紅，等.山竹子對(duì)表皮作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志，1997，10（5）：415-416.

[6]林源，黃安林，廖紅，等.山竹子粉治療燒傷36例臨床觀察[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，13（3）：71-72.

[7]廖紅，楊永瑾，陳紆，等.山竹子燒傷散抑菌作用分析[J].廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1992，9（2）：39-40.

[8]羅建設(shè).山竹子粉治療燒傷及表淺創(chuàng)面56例報(bào)告[J].右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，（6）：845-846.

[9]余宙耀，陳文吟，鄭業(yè)華.山竹子根乙醇提取物的體外抗HBV 作用[J].中藥材，1999，22（3）：142-143.

[10]鄭作文，林啟云，方虹.嶺南山竹子的鎮(zhèn)痛消炎作用[J].廣西中醫(yī)藥，1994，17（5）：45-47.

[11]王瀛惠摘，孫鐵民校.李氏山竹子根皮中的噸酮及雙黃酮類(lèi)化合物的抗寄生蟲(chóng)活性[J].國(guó)外醫(yī)藥：植物藥分冊(cè)，2007，22（3）：117.

[12]王曉波，李金芳，王梅，等.山竹殼總黃酮抗氧化及抑制亞硝化作用研究[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2013，34（6）：9-13.

[13]戴聰杰，黃雅瓊.榴蓮和山竹果肉的營(yíng)養(yǎng)分析[J].食品與機(jī)械，2012，28（1）：65-67.

[14]金家宏，陳明華，夏增華.一種含有水果提取物混合物的皮膚外用劑組合物[P].中國(guó)，CN103393577A.

[15]辛敏，劉軒，詹欣，等.硫酸一紫外法與苯酚一硫酸法測(cè)定千兩茶中總多糖的比較[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2014，20（3）：62-65.

[16]張波，劉紅燕，李佳，等.基于植株性別差異的天花粉多糖、蛋白質(zhì)含量比較[J].中國(guó)藥師，2014，17（4）：617-619.

[17]張明，陳華國(guó)，趙超，等.杠板歸中總黃酮的含量測(cè)定研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（18）：70-73.

[18]高瑞希，李竣，柴萬(wàn)鵬，等.松茸多糖成分分析[J].華中師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2013，47（5）：658-660.

[19]熊慧薇，戴書(shū)浩，閔華，等.GC分析大豆和麥麩膳食纖維中的單糖成分[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2014，35（2）：84-86.