不同炮制方法對黃芪化學(xué)成分的影響

李利明

[摘要]目的 探討不同炮制方法對于黃芪制品中黃酮類及糖類成分的影響。 方法 將統(tǒng)一產(chǎn)地及批次的黃芪通過不同的炮制方式轉(zhuǎn)變?yōu)榫泣S芪、米黃芪、炒黃芪、鹽黃芪及蜜黃芪，分析不同方式炮制的黃芪中含有的糖類及黃酮類成分的變化情況。 結(jié)果 黃酮類：酒黃芪中毛蕊異黃酮的含量相對于生黃芪明顯增加；蜜黃芪中黃酮類成分含量明顯下降，而鹽黃芪、米黃芪對黃酮類成分的影響不明顯。糖類：水溶性糖在不同炮制方式中的含量由高到低依次為生黃芪>米黃芪>酒黃芪>鹽黃芪>炒黃芪；還原性糖：生黃芪>米黃芪>酒黃芪>鹽黃芪>炒黃芪；多糖：酒黃芪>鹽黃芪>炒黃芪>米黃芪>生黃芪，以酒炙黃芪最高。 結(jié)論 不同的炮制方式會對黃芪中的有效成分含量產(chǎn)生明顯的影響，黃酮類以酒制增加最為明顯，蜜制則下降明顯；多糖類也亦酒制增加明顯，而水溶性糖及還原性糖則通過炮制后含量下降，以鹽黃芪下降最明顯。

[關(guān)鍵詞] 中藥；炮制；黃芪；化學(xué)成分

[中圖分類號] R283 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）17-85-03

[Abstract] Objective To explore the effects of different processing methods on the components of flavonoid and sugar in astragalus propinquus. Methods Astragalus propinquus （huangqi） of the same place of production and batch was processed via different methods into wine huangqi， rice huangqi， fried huangqi， salt huangqi and honey huangqi. Changes of sugar and flavonoid contained in huangqi processed by different methods were analyzed. Results Flavonoid： The content of calycosin in wine huangqi significantly increased compared to that in raw huangqi； the content of flavonoid in honey huangqi significantly reduced， and no significant changes of flavonoid were shown in salt huangqi and rice huangqi. Sugar： the contents of water-soluble sugars in different processing methods ranked from high to low were raw huangqi > rice huangqi >wine huangqi > salt huangqi > fried huangqi； ranks of reducing sugar： raw huangqi > rice huangqi > wine huangqi > salt huangqi > fried huangqi； ranks of polysaccharide： wine huangqi >salt huangqi > fired huangqi > rice huangqi > raw huangqi， and the highest content of polysaccharide was seen in wine-fried huangqi. Conclusion Different processing methods have significant effects on the content of active components in astragalus propinquus. Flavonoid is seen the most significant increase in wine huangqi， and the most significant decrease in honey huangqi； polysaccharide is seen the most significant increase in wine huangqi as well， and the contents of water-soluble sugars and reducing sugar decrease after the processing， with the most significant decrease in salt huangqi.

[Key words] Traditional Chinese medicine； Drug processing； Astragalus propinquus； Chemical components

黃芪是中醫(yī)臨床常用中藥之一，其主要成分包括黃酮、多糖、皂苷及酚酸等，具有提高機(jī)體免疫力及記憶力，抗炎殺菌、抗氧化、抗癌、抗輻射，保護(hù)心腦血管及腦細(xì)胞的作用。中藥炮制的目的在于提高藥效、降低毒性、節(jié)約資源，保障臨床用藥的安全有效，不同的炮制方法對其有效成分的含量影響不同，因而要必須熟知其各種炮制之品的有效成分。本文通過對黃芪進(jìn)行酒制、蜜制、炒制、米制、鹽制，分析5種炮制方式中黃芪有效成分的變化情況。

1 材料與方法

1.1 材料

黃芪均是同一批次的藥材，通過相應(yīng)的檢驗(yàn)確定其真實(shí)性（豆科植物莢黃芪的干燥根）。紫外線分光光度儀、電子分析天平、高效液相色譜儀、濃硫酸、5%苯酚試劑、葡萄糖對照品、毛蕊異黃酮、芒柄花素、毛蕊異黃酮-7- O-β- D-葡萄糖苷、芒柄花素-7- O-β- D-葡萄糖苷（均來自上海純優(yōu)生物科技有限公司）、甲醛、甲酸、蒸餾水等。

1.2 材料處理

黃芪2000g，祛除雜質(zhì)，洗凈并潤透，切1mm厚薄片并晾干備用。

1.3 黃芪炮制

酒黃芪：在300g黃芪中加米酒60mL并攪拌拌勻，放置1h后炒干，放涼備用；蜜黃芪：適量開水稀釋煉蜜，加入黃芪片300g并拌勻，燜透，文火炒至深黃色且不粘手時(shí)，取出并放涼；鹽黃芪：將黃芪片300g用鹽水（6g鹽）浸泡并攪拌均勻，潤透直至鹽水耗盡，置于鍋內(nèi)并用文火微微炒制，取出放涼；米黃芪：將稻米60g置于鍋內(nèi)翻炒至淡黃，加入凈黃芪300g并拌炒至棕黃色取出，去米并放涼；炒黃芪：將300g黃芪直接置于鍋內(nèi)，用文火翻炒至棕黃色或黃色，取出放涼備用。

1.4 樣品溶液的制備

1.4.1 水溶性糖的提取 將各種炮制后的黃芪及生黃芪各100mg制成粗粉并置于具塞三角瓶內(nèi)，以85%的乙醇30mL混合后置于50℃的溫水中進(jìn)行水浴，約1h，過濾溶液并85%乙醇洗滌殘?jiān)?，將過濾液合并，加熱蒸去乙醇，用水稀釋至100mL。提取2mL溶液置于25mL量瓶內(nèi)，加水至相應(yīng)刻度即可。

1.4.2 還原性糖的提取 將各種炮制后的黃芪及生黃芪各100mg制成粗粉并置于圓底燒瓶內(nèi)，以20mL的蒸餾水回流并提取2mL，過濾，并用適量的熱水清洗殘?jiān)?次，合并溶液，加入5%的ZnSO4及飽和的Ba（OH）2液至無沉淀產(chǎn)生，過濾并置于100mL的容量瓶內(nèi)，加水至適量刻度，吸取該溶液1mL并置于25mL的量瓶內(nèi)，加水至相應(yīng)刻度即可。

1.4.3 黃酮類對照品的配置 取4種黃酮類對照品適量并精密承重，加入甲醇溶解，導(dǎo)入50mL量瓶內(nèi)，定容并搖勻，獲取質(zhì)量濃度為毛蕊異黃酮21.2mg/L、芒柄花素7200mg/L、芒柄花素-7- O-β- D-葡萄糖苷27.2mg/L、毛蕊異黃酮-7- O-β- D-葡萄糖苷42.40mg/L的對照樣品液。

1.4.4 檢測品的配置[1] 黃芪制成粗粉，各取1000mg，精密稱定，加入20mL甲醇加熱回流提取2h，放冷，濾過，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，甲醇定容，搖勻，0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

1.4.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 將黃芪的供試品及檢測品溶液分別于0、3、6、9、12、24h進(jìn)行分析，記錄其色譜圖像及吸光度A。結(jié)果顯示，4種黃酮類（毛蕊異黃酮、芒柄花素、芒柄花素-7- O-β- D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮-7- O-β- D-葡萄糖苷）及3種糖類成分（水溶性糖、還原性糖及多糖）在24h內(nèi)的RSD分別為1.3%、1.75%、2.1%、2.7%、2.9%、3.1%及3.3%，穩(wěn)定性良好。

1.4.6 回收率試驗(yàn) 準(zhǔn)確稱重黃芪0.1mg并加入一定質(zhì)量的葡萄糖溶液，按照還原性糖的制備方法制成溶液，并進(jìn)行回收率測定。結(jié)果顯示，平均回收率為98.3%，RSD=1.47%，n=3，說明方法可靠性較高。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS12.0軟件進(jìn)行分析，其中計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，多組間進(jìn)行方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同炮制品中黃酮類成分的分析

不同炮制品中4種黃酮類成分的對比分析，見表1。

2.2 不同炮制品中糖類類成分的對比分析

由表2可見，不同炮制品中糖類成分含量存在差異，其中水溶性糖在不同炮制方式中的含量由高到低依次為生黃芪>米黃芪>酒黃芪>鹽黃芪>炒黃芪；還原性糖：生黃芪>米黃芪>酒黃芪>鹽黃芪>炒黃芪；多糖：酒黃芪>鹽黃芪>炒黃芪>米黃芪>生黃芪，以酒炙黃芪最高。

3 討論

中藥含有的化學(xué)成分是其發(fā)揮獨(dú)特藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，但中藥的成分復(fù)雜，不同的炮制方法會使其有效成分發(fā)生變化，因而了解其藥性隨著炮制的不同而出現(xiàn)化學(xué)成分的變化至關(guān)重要[2-3]。在中國歷史上黃芪的炮制方法有切制、蒸制 、蜜炙、蜜蒸、蜜炒、鹽焙制、鹽蒸、酒蒸、酒炒、酒煮、姜汁炙、人乳制、米泔制等，目前主要方法是蜜炙、鹽制和酒制[4]。

黃芪具有益氣補(bǔ)中，升陽固表，托毒生肌，利水消腫的功效，主要用于體虛勞倦、中氣下陷、表虛自汗、脾虛水腫、瘡瘍內(nèi)陷或膿成不潰等，而酒黃芪、蜜黃芪、鹽黃芪的功效存在差異。酒黃芪善散寒，蜜黃芪善益氣升陽，鹽黃芪善利水退腫[5]。研究發(fā)現(xiàn)，黃芪中的主要成分為黃酮類、多糖類、皂苷類、氨基酸及微量元素，其中蜜炙黃芪中皂苷類成分變化最明顯[6]，酒制黃芪則黃酮類及多糖類成分變化明顯[7-8]。本研究中也發(fā)現(xiàn)酒制黃芪對于黃酮類成分及多糖類成分的影響最大，酒制黃芪中黃酮類及多糖成分明顯增加。

黃酮類化合物是黃芪中最主要的有效成分，主要有黃酮、異黃酮、異黃烷、 紫檀烷、二氫異黃酮、紫檀烯等 [9]，具有免疫調(diào)節(jié)、保肝、抗炎、抗氧化及抗心肌缺血的作用。黃芪皂苷大部分是以環(huán)黃芪皂醇為苷元的皂苷、黃芪甲苷為其主要成分[10]，且黃芪甲苷的含量是衡量黃芪質(zhì)量的衡量標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷的主要作用是擴(kuò)張血管、改善心肺功能、保護(hù)肝臟、控制血壓、抗腫瘤及降低藥物毒性等，同時(shí)可明顯的改善腎臟功能。黃芪多糖主要包括葡萄糖及雜多糖，其葡萄糖分為水溶性及水不溶性兩類，而其雜多糖主要為水溶性雜多糖，由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖及半乳糖組成，其中糖醛酸含量較少，主要由葡萄糖醛酸及半乳糖醛酸組成；黃芪多糖是一種免疫促進(jìn)劑及調(diào)節(jié)劑，可有效提高機(jī)體免疫力，同時(shí)具有抗衰老、抗輻射、抗應(yīng)激的作用[11-12]。

黃芪的有效成分變化直接決定了黃芪的功效，本研究顯示，炮制可明顯的改變黃芪中的化學(xué)物質(zhì)而影響黃芪的藥效[13-14]，但由于黃芪中的化學(xué)成分復(fù)雜，目前的研究現(xiàn)狀并不能完全了解其作用機(jī)制，因而對于黃芪中有效成分的提取及炮制后的變化情況需進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

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（收稿日期：2014-04-01）