活血化瘀類中藥對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠各器官的影響

吳愛(ài)軍 王 倩 高海梅 盧澤原 高海成

(吉林省職業(yè)病防治院，吉林 長(zhǎng)春 130061)

糖尿病(DM)可誘發(fā)多種臟器的病變發(fā)生，如腦血管、心血管、下肢血管、眼、腎臟及神經(jīng)病變等〔1〕。其治療主要通過(guò)胰島素、基因治療等。中藥復(fù)方制劑與單純對(duì)抗和補(bǔ)充的藥物干預(yù)不同，以中醫(yī)理論為指導(dǎo)的，針對(duì)患者的證和病達(dá)到整體的調(diào)節(jié)作用〔2〕。本實(shí)驗(yàn)探究巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎等中藥復(fù)方制劑對(duì)鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)糖尿病大鼠各臟器的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要試劑和儀器 Wistar大鼠，雄性，體質(zhì)量180～200 g，購(gòu)自吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(動(dòng)物合格證號(hào)：2007-003)。STZ為Sigma公司產(chǎn)品。血糖試劑盒購(gòu)自北京康化公司。巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎(長(zhǎng)沙博健生物科技有限公司)。

1.2中藥復(fù)方制劑制備 將巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎粉碎成粗粉(20～40目)，用10 倍量、5 倍量的水分別煎煮60、30 min，保持微沸，冷卻后，離心分離，合并上清液，濃縮至1倍量體積。加入選定倍量的不同濃度乙醇，攪拌，靜置，待沉降完全后，離心，取上清液。濃縮液與白醋按4∶1混合和白醋的混合液與水按1∶20配比混合制中藥復(fù)方制劑。

1.3糖尿病模型復(fù)制及實(shí)驗(yàn)分組與給藥 Wistar雄性大鼠15只，隨機(jī)分為正常組、模型組和中藥復(fù)方制劑組(干預(yù))組各5只。模型組和干預(yù)組，高脂飼料喂養(yǎng)4 w后，腹腔注射小劑量STZ(30 mg/kg)1次，3 d后檢測(cè)空腹血糖≥7.8 mmol/L作為判斷模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。干預(yù)組每天灌胃復(fù)方中藥5 ml，正常組和模型組每天給予9%生理鹽水灌胃4 w。每周測(cè)大鼠空腹血糖，測(cè)量體質(zhì)量。

1.4組織取材和HE染色 大鼠乙醚吸入麻醉，頸部脫臼處死，迅速取出心臟、肝臟和腎臟，固定于4%的甲醛中，待HE染色使用。切片烤片1 h，二甲苯脫蠟10 min×3次，100%、95%的乙醇中分別5 min×2次，流水中2 min，蘇木素染色5 min，使用1%的鹽酸乙醇溶液分化5～10 s，自來(lái)水中返藍(lán)25 min，0.5%的伊紅(水溶性)染色2 min，95%、100%的乙醇脫水5 min×2次，自然晾干，二甲苯透明5 min×2次，吸水紙吸干液體，中性樹膠封片，顯微鏡下觀察染色情況。

1.5統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1各組體重變化 注射STZ 1 w后，模型組體重較正常組明顯減輕(P<0.05)，干預(yù)組體重較模型組顯著增高(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組體重比較±s,n=5,g)

2.2各組血糖檢測(cè)結(jié)果 正常組血糖值為4.9～6.1 mmol/L，模型組血糖較正常組升高明顯(P<0.05)；干預(yù)組血糖較模型組有所降低(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 各組血糖比較±s,n=5,mmol/L)

2.3各組心臟組織形態(tài)學(xué)變化 正常組心肌組織橫紋較清晰，細(xì)胞排列較整齊，細(xì)胞核染色明顯且大小均勻；模型組心肌細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞間隙增大，有少量細(xì)胞腫脹；干預(yù)組心肌組織損傷程度較模型組逐漸減輕，見(jiàn)圖1。

2.4各組肝臟組織形態(tài)學(xué)變化 正常組肝臟細(xì)胞形態(tài)正常，細(xì)胞排列較整齊；模型組肝臟組織可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肝臟出現(xiàn)一定程度的損傷；干預(yù)組肝臟較模型組損傷程度逐漸減輕，見(jiàn)圖1。

2.5各組腎臟組織形態(tài)學(xué)變化 正常組腎臟細(xì)胞排列較整齊；模型組腎臟組織，腎小球體積增大，且腎小管有一定程度的擴(kuò)張，腎臟出現(xiàn)損傷；干預(yù)組腎臟的損傷程度較模型組逐漸減輕，見(jiàn)圖1。

圖1 各組心臟、肝臟、腎臟的病理學(xué)改變

3 討 論

中藥治療糖尿病的機(jī)制主要包括：①改善胰島素抵抗；②保護(hù)和修復(fù)胰島β細(xì)胞；③調(diào)劑糖代謝等〔3～5〕。研究表明：巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎等中藥復(fù)方制劑中，巴天酸模的根提取物具有抗氧化和清除自由基的能力，并且隨著濃度和時(shí)間的變化而增加，可一定程度降低2型糖尿病大鼠的血糖和糖化血紅蛋白水平，保護(hù)胰島細(xì)胞〔6〕。藥理研究顯示，三七具有多種藥理活性，對(duì)血液、心血管、神經(jīng)、免疫、物質(zhì)代謝系統(tǒng)均具有較好的調(diào)節(jié)作用〔7〕，三七皂苷能夠提高KK-Ay鼠對(duì)胰島素的敏感性和降低瘦素的抵抗〔8〕。紅花的藥理作用廣泛且毒副作用小，對(duì)心臟、肝臟、免疫系統(tǒng)等均具有保護(hù)作用〔9〕。生姜具有多種藥理活性，對(duì)1和2型糖尿病均具有治療作用，給予糖尿病大鼠生姜汁可以明顯降低空腹血糖和升高胰島素水平從而達(dá)到抗糖尿病的作用〔10〕。同時(shí)生姜還具有其他藥理作用，如抗氧化、降低膽固醇、抗炎、抗腫瘤等〔11〕。冰片是一味常用的佐藥，其主要藥理活性是調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，保護(hù)心腦等器官，抗炎抗病毒等〔12〕。菊花的主要藥理活性是抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、保肝和保護(hù)心血管等〔13〕。而川芎的藥理活性是保護(hù)心血管心痛、抗血栓形成、解痙、鎮(zhèn)痛等，用于治療糖尿病時(shí)，其可一定程度控制糖尿病大鼠的血糖，保護(hù)糖尿病大鼠的腎臟〔14〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎所組成的中藥復(fù)方制劑具有抗炎抗氧化、提高胰腺的功能以及調(diào)節(jié)免疫的作用。

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